魏建敏，楊華連，陳莉*，盧紅梅，石慶疊，張祥瑞，涂青

1(貴州省發(fā)酵工程與生物制藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽，550025)2(貴州大學(xué) 釀酒與食品工程學(xué)院，貴州 貴陽，550025)

糖尿病是一種由胰島素分泌不足、糖脂代謝失衡而導(dǎo)致的以高血糖為特征，且具有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝性疾病[1-2]，其中以2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)居多，占糖尿病病例的90%以上[3-4]，該病還會(huì)引發(fā)多種并發(fā)癥，如心血管疾病、糖尿病、腎病、冠心病等[5]。目前，對(duì)T2DM的治療通常采用口服或注射胰島素等藥物治療的方式，但其存在嚴(yán)重的副作用[6-7]。因此，從天然植物中尋找具有顯著療效和低副作用的活性成分已成為當(dāng)前糖尿病治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

果桑是?？粕僖越Y(jié)果為主、果葉兼用的落葉木本植物桑樹的統(tǒng)稱[8]，是一種“藥食同源”植物。其葉、枝、果、根中均含有多種營(yíng)養(yǎng)成分及黃酮、多糖、生物堿類等已被證實(shí)具有降糖功效的生物活性物質(zhì)[9-11]。研究表明，果桑中存在天然的α-葡萄糖苷酶、α，β淀粉酶抑制劑1-脫氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)和蕎麥堿，桑葉DNJ可通過激活db/db小鼠骨骼肌中的胰島素信號(hào)PI3K/AKT途徑來提高胰島素敏感性，從而達(dá)到降血糖的效果[12]。

腸道菌群是人體最大的微生態(tài)系統(tǒng)，人體腸道內(nèi)居住著超過1014個(gè)的微生物[13]，它們?cè)谡{(diào)節(jié)機(jī)體能量攝取、腸道通透性、維持腸道免疫屏障等方面發(fā)揮著重要作用[14]。近年來，很多研究表明T2DM與腸道菌群失調(diào)有關(guān)[15-17]。LARSEN等[18]研究T2DM和非T2DM人體腸道菌群組成的差異發(fā)現(xiàn)，與非糖尿病人相比，糖尿病人的厚壁菌門(Firmicutes)和梭狀體類的比例明顯降低；SEDIGHI等[19]研究發(fā)現(xiàn)，在T2DM患者中，乳酸菌水平明顯較高，而雙歧桿菌在健康人中明顯較多。何雪冬等[20]通過Meta分析發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比，糖尿病患者乳桿菌、擬桿菌、梭菌數(shù)量有不同程度的增加，雙歧桿菌數(shù)量下降?；谥暗难芯砍晒?，本研究以桑葉、桑枝皮、桑根皮為原料，按62∶19∶19的質(zhì)量比制成袋泡茶，以鏈脲佐菌素(streptozocin, STZ)誘導(dǎo)聯(lián)合高脂飲食飼養(yǎng)建立2型糖尿病模型小鼠為對(duì)象，通過高通量測(cè)序方法，從小鼠腸道菌群方面探究果桑茶對(duì)T2DM模型小鼠腸道菌群的調(diào)整作用，為果桑降糖保健產(chǎn)品的開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

體重(20±2) g清潔級(jí)5周齡雄性C57BL/6J小鼠購(gòu)于貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，使用許可證號(hào)SCXX(京)2014-0004；桑葉、桑枝皮、桑根皮采自貴州開陽某桑葚基地，按62∶19∶19的質(zhì)量比制成袋泡茶；STZ(純度≥98%)，Sigma公司；羧甲基纖維素鈉(carboxymethylcellulose sodium，CMC-Na)(純度≥98%)，阿拉丁化學(xué)試劑有限公司；0.1 mol/L檸檬酸鈉緩沖液(pH 4.5)(分析純)，索萊寶生物試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

FA2004N分析電子天平，上海菁海儀器有限公司；FW-80萬能粉碎機(jī)，上海仕元科學(xué)器材有限公司；VaCo 5-Ⅱ-D真空冷凍干燥機(jī)，Zirbus technology GmbH Hilfe Gottes；SW-CJ-1FD無菌操作臺(tái)，上海蘇凈實(shí)業(yè)有限公司；魚躍580型血糖儀，江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 試劑制備

果桑復(fù)配袋泡茶浸提液凍干粉：將袋泡茶在水溫75 ℃，茶水比1∶100(g∶mL)，沖泡時(shí)間50 min的條件下沖泡1次，取其浸提液置于真空冷凍干燥機(jī)中凍干備用。

10%果桑復(fù)配茶高脂飼料：將果桑復(fù)配茶添加10%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))到高脂飲食飼料中，并壓制成復(fù)合飼料備用。

STZ溶液：現(xiàn)用現(xiàn)配，臨用時(shí)使用0.1 mol/L、pH 4.5檸檬酸緩沖液配制，按照給藥劑量35 mg/kg配制成質(zhì)量濃度為3.5 mg/mL的STZ溶液。

0.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))CMC-Na：稱取CMC-Na 0.5 g，加入雙蒸餾水至100 mL，并加熱溶解至澄清溶液，置于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 動(dòng)物分組及處理

小鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室穩(wěn)定喂養(yǎng)7 d后禁食不禁水過夜12 h，次日通過剪尾取血法測(cè)定小鼠空腹血糖和體重，剔除極值后隨機(jī)選取10只小鼠作為正常對(duì)照組給予普通飼料喂養(yǎng)，其余小鼠采用高脂飲食飼養(yǎng)16周致小鼠呈肥胖狀態(tài)，按小鼠體重注射35 mg/kg STZ溶液，給藥量為0.1 mL/10g，7 d后血糖水平高于11.1 mmoL/L即為建模成功。

將血糖水平高于11.1 mmoL/L的小鼠穩(wěn)定性飼養(yǎng)4周后，按照空腹血糖水平隨機(jī)分組為4組，每組10只，分別為正常對(duì)照組(Control)、模型對(duì)照組(Model)、陽性對(duì)照組(Metformin)及果桑茶試藥組GD-2組、GD-3組，共5組。GD-2受試組采用小鼠自由攝食的方式，正常對(duì)照組、模型對(duì)照組及GD-3受試組采取灌胃方式進(jìn)行給藥，給藥劑量依據(jù)《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》中“標(biāo)準(zhǔn)體重動(dòng)物劑量換算表”來確定，水提物灌胃劑量為200 mg/kg，具體分組及給藥情況見表1。灌胃開始后，根據(jù)小鼠體重變化調(diào)整小鼠灌胃劑量，持續(xù)28 d。

表1 試驗(yàn)小鼠分組及給藥情況Table 1 Grouping and administration of experimental mice

1.3.3 樣品采集

連續(xù)給藥28 d后禁食12 h，每組隨機(jī)選3只小鼠收集糞便并于液氮中貯存。

1.3.4 DNA提取及測(cè)序

樣本DNA提取并進(jìn)行高可變區(qū)PCR擴(kuò)增后，使用Nova Seq PE250 測(cè)序平臺(tái)對(duì)各組小鼠腸道內(nèi)容物16S rDNA V3+V4區(qū)進(jìn)行測(cè)序。細(xì)菌16S rDNA V3+V4區(qū)的通用引物名稱為341F(5′-CCTACGGGNGGCWGCAG-3′,)、805R(5′-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3′)。測(cè)序數(shù)據(jù)使用最新的性能更優(yōu)的QIIME 2分析流程，調(diào)用DADA2[21]對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行去噪，相當(dāng)于以100%的相似度聚類，去冗余后得到特征(Feature)，然后基于Feature數(shù)據(jù)進(jìn)行菌群結(jié)構(gòu)組成及菌群多樣性分析。

1.4 數(shù)據(jù)分析

將高通量測(cè)序得到的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行優(yōu)化，得到有效數(shù)據(jù)，基于有效數(shù)據(jù)按97%相似性進(jìn)行操作分類單元(operational taxonomic unit, OTU)聚類分析，對(duì)OTU序列進(jìn)行物種注釋?；贠TU結(jié)果，通過α多樣性分析小鼠腸道菌群多樣性、β多樣性分析小鼠腸道菌群間的組成差異，根據(jù)繪制的樣品各分類水平下的群落結(jié)構(gòu)圖、熱圖分析菌群結(jié)構(gòu)組成，根據(jù)線性判別分析(linear discriminant analysis，LDA)值分布柱狀圖和進(jìn)化分支圖進(jìn)行LEfSe(LDA effect size)多級(jí)物種差異判別分析，采用SPSS 19.0進(jìn)行顯著性差異分析，P<0.05認(rèn)為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 果桑茶對(duì)T2DM模型小鼠空腹血糖值影響

如表2所示，當(dāng)連續(xù)給藥后，與模型組相比，其他各組小鼠的空腹血糖值明顯降低，差異極顯著(P<0.01)，陽性組的降糖幅度為43.60%，GDm組的降糖幅度為40.05%，其降糖作用與陽性組相比無明顯差異；GDh組其降幅為25.83%。以上結(jié)果說明，果桑茶具有和二甲雙胍藥物一樣的降血糖功效，其中GDm組降糖效果最明顯。

表2 果桑茶對(duì)T2DM模型小鼠空腹血糖值影響Table 2 Effect of fruit mulberry tea on fasting blood glucose in T2DM model mice

2.2 菌群多樣性分析

2.2.1 α多樣性分析

本研究采用Chao1、Shannon及Simpson指數(shù)來評(píng)估小鼠腸道菌群的豐富度和多樣性，Good′s Coverage反映樣本的測(cè)序深度。由表3可知，5個(gè)組的Good′s Coverage值均為1，說明測(cè)序深度已飽和，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)合理可用。Chao1指數(shù)反映菌群的總數(shù)，Chao1值越大，菌群數(shù)越多，所測(cè)定樣品中，果桑茶給藥組(GDh組、GDm組)菌群的多樣性均高于模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組，但低于正常對(duì)照組。Shannon和Simpson指數(shù)反映菌群的多樣性，Shannon值越大，菌群多樣性越高，5組樣品中正常對(duì)照組的Shannon值最大，模型對(duì)照組最小，其余3個(gè)組差別不大，均小于正常對(duì)照組，大于模型對(duì)照組；Simpson值越大，菌群多樣性越低，GDh組的Simpson值最小，陽性對(duì)照組次之，其余3個(gè)組的值為0.96～0.98。以上結(jié)果表明，長(zhǎng)期持續(xù)的高脂高糖飲食會(huì)很大程度地降低小鼠腸道菌群的多樣性，而果桑茶產(chǎn)品對(duì)調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群多樣性有顯著效果，這可能是果桑茶中的降糖成分發(fā)揮了積極作用。

表3 α多樣性比較結(jié)果Table 3 α diversity comparison results

2.2.2 β多樣性分析

β多樣性分析可反映不同樣本菌群間是否存在差異性。本試驗(yàn)采用主成分分析(principal component analysis，PCA)分析樣本間的多樣性。

如圖1所示，橫坐標(biāo)為PCA1，貢獻(xiàn)率為40.44%，縱坐標(biāo)為PCA2，貢獻(xiàn)率為14.04%，可以代表大部分變量信息，是樣品菌群結(jié)構(gòu)組成差異的主要因子。分析可知，果桑茶給藥組、模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組腸道菌群組成結(jié)構(gòu)較正常對(duì)照組發(fā)生了偏移，模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組均與GDh組在物種組成上有一定程度的相似，而GDm組與正常對(duì)照組最接近，說明GDm組在調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群方面效果較為顯著。

圖1 樣本細(xì)菌主成分分析Fig.1 Principal component analysis of bacteria in samples

2.3 菌群構(gòu)成分析

2.3.1 菌群組成分析

各組小鼠腸道中相對(duì)豐度較高的菌群比較如表4所示。由圖2、圖3可知，在門水平上5個(gè)樣品腸道菌群以厚壁菌門、擬桿菌門(Bacteroidetes)、變形菌門(Proteobacteria)等為主。其中，擬桿菌門是正常對(duì)照組的絕對(duì)優(yōu)勢(shì)菌門，其相對(duì)豐度為47.89%，與其他組差異顯著(P<0.05)，模型對(duì)照組中擬桿菌門的相對(duì)豐度為15.86%，比正常對(duì)照組少32.03%，GDm組擬桿菌門的相對(duì)豐度為21.06%；厚壁菌門為正常對(duì)照組的次要優(yōu)勢(shì)菌門，相對(duì)豐度為39.10%，在模型對(duì)照組中其相對(duì)豐度達(dá)到了54.49%，成為絕對(duì)優(yōu)勢(shì)菌門，經(jīng)果桑茶給藥喂養(yǎng)后，給藥組厚壁菌門數(shù)量有不同幅度降低，逐漸接近正常對(duì)照組水平，其中GDm組效果最明顯，與正常對(duì)照組相比差異不顯著(P<0.05)；變形菌門在正常對(duì)照組中的相對(duì)豐度為4.72%，而在模型對(duì)照組中增加至20.35%，經(jīng)藥物治療后，該菌群漲幅不大，與模型對(duì)照組無顯著差異(P<0.05)，說明果桑茶對(duì)此菌群的調(diào)節(jié)作用不明顯。

屬水平上的物種相對(duì)豐度如圖4所示。Muribaculaceae_unclassified是一種有益菌屬[22]，由圖4、圖5可知，其是正常對(duì)照組的優(yōu)勢(shì)菌屬，相對(duì)豐度為28.89%，在模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、GDm組、GDh組的相對(duì)豐度分別為2.79%、0.20%、6.63%和4.25%，說明果桑茶能在一定程度上抑制有益菌屬M(fèi)uribaculaceae_unclassified的下降。嗜膽菌屬(Bilophila)為模型對(duì)照組的優(yōu)勢(shì)菌屬，其相對(duì)豐度為11.23%，而在正常對(duì)照組中僅占0.06%，陽性對(duì)照組、果桑茶給藥組均有效地抑制了這種現(xiàn)象，其中以陽性對(duì)照組的效果最為顯著，嗜膽菌屬的相對(duì)豐度為1.56%，其次是GDh組，嗜膽菌屬的相對(duì)豐度為7.86%。陽性對(duì)照組、GDm組和GDh組的優(yōu)勢(shì)菌屬分別為L(zhǎng)achnospiraceae_unclassified、艾克曼菌屬(Akkermansia)和毛螺菌科NK4A136群(Lachnospiraceae_NK4A136_group)。

以上結(jié)果表明T2DM模型組小鼠與正常組小鼠腸道微生物群落結(jié)構(gòu)存在明顯差異，果桑茶可增加糖尿病小鼠中有益菌群的相對(duì)豐度，具有調(diào)節(jié)糖尿病小鼠腸道菌群失調(diào)的效果[23]。

表4 各組小鼠豐度較高的微生物比較Table 4 Microbe comparison of mice with higher abundance in each group

圖2 門水平上的物種相對(duì)豐度Fig.2 Relative abundance of species at the phylum level

圖3 門水平上有顯著性差異的主要物種Fig.3 The main species with significant difference at the phylum level注：圖中不同字母表示不同樣品間物種差異顯著(P<0.05)(下同)

圖4 屬水平上的物種相對(duì)豐度Fig.4 Relative abundance of species at the genus level

圖5 屬水平上有顯著性差異的主要物種Fig.5 The main species with significant difference at the genus level

2.3.2 菌群結(jié)構(gòu)差異性分析

將屬水平豐度排名在前30的菌群，以不同組間豐度相似性聚類的方式繪制熱圖，根據(jù)顏色的深淺定義數(shù)值的大小，通過顏色的不同來反映各組小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)組成的相似性及差異性。由圖6分析可知，GDh組和模型對(duì)照組歸為一類，GDh組中毛螺菌科NK4A136群(Lachnospiraceae_NK4A136_group)相對(duì)豐度極高，相關(guān)研究表明人體腸道共生菌群中的毛螺菌科成員可表達(dá)2種“超級(jí)抗原”，這類超級(jí)抗原可激活體內(nèi)的免疫球蛋白A(immunoglobulin A，IgA)應(yīng)答，在腸道穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用[24]，說明果桑茶能促進(jìn)高脂飲食小鼠體內(nèi)有益菌群的增長(zhǎng)。GDm組和正常對(duì)照組歸為一類，表明GDm組小鼠腸道菌群聚類分析結(jié)果與正常小鼠最為接近，GDm組調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群的效果最好。

由以上分析可知，不同組小鼠的腸道菌群具有相似性的同時(shí)也存在一定差異性，高脂飲食造模致糖尿病的過程中小鼠腸道菌群逐漸偏離正常，而果桑茶對(duì)小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)具有積極作用。

圖6 屬水平上的相對(duì)豐度聚類熱圖Fig.6 Cluster heatmap of relative abundance at the genus level

2.4 LEfSe多級(jí)物種差異判別分析

LEfSe是一種用于發(fā)現(xiàn)和解釋高維度數(shù)據(jù)生物標(biāo)識(shí)的分析工具，能夠在組與組之間尋找具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的生物標(biāo)志物 (biomarker)。圖7是從門到種水平下各組樣本的LDA值分布柱狀圖，物種的LDA得分用橫坐標(biāo)來表示，LDA值>3的物種為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的biomarker。圖8是各組樣本的進(jìn)化分支圖。

結(jié)合圖7、圖8分析可知，正常對(duì)照組中對(duì)群落結(jié)構(gòu)影響較大的物種有擬桿菌綱(Bacteroidia)、擬桿菌門、擬桿菌目(Bacteroidales)、Muribaculaceae、Muribaculaceae-unclassfied、Muribaculum等。陽性對(duì)照組中對(duì)群落結(jié)構(gòu)影響較大的物種有厚壁菌門、梭桿菌目(Clostridiales)、梭桿菌綱(Clostridia)、Bacteria、Ruminiciostridium-9-unclassfied、Ruminiciostridium-9等。模型對(duì)照組中對(duì)群落結(jié)構(gòu)影響較大的有嗜膽菌屬、unclassfied-Bilophila、理研菌科(Rikenellaceae)、另枝菌

屬、Paramuribaculum、Paramuribaculum-intestinale、Alistipes-unclassfied，Alistipes是小鼠中細(xì)菌最豐富的屬之一，它與調(diào)節(jié)胰島素釋放和逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗的腸道激素的釋放有關(guān)[25]。GDm組中對(duì)群落結(jié)構(gòu)影響較大的物種有擬桿菌屬(Bacteroides)、擬桿菌科(Bacteroidaceae)、unclassfied-Bacteroides-sp、Desulfovibrionaceae-unclassfied、副擬桿菌屬(Parabcteroides)、Tannerellaceae、Parabcteroides-unclassfied。GDh組中對(duì)群落結(jié)構(gòu)影響較大的物種有毛螺菌科(Lachnospiraceae)、瘤胃菌屬UCG014(Ruminococcaceae-UGG-014)、Ruminococcaceae-UGG-014-unclassfied、消化鏈球菌科(Peptostreptococcaceae)、Romboutsia。

圖8 各組樣本的進(jìn)化分支圖Fig.8 Evolutionary branch diagram of each group of samples注：小圓圈:圖中由內(nèi)至外輻射的圓圈代表了由門至屬的分類級(jí)別。 不同分類級(jí)別上的每一個(gè)小圓圈代表該水平下的一個(gè)分類，小圓圈 直徑大小與相對(duì)豐度大小呈正比；顏色：無顯著差異的物種統(tǒng)一著色 為黃色，差異顯著的物種Biomarker跟隨組別進(jìn)行著色，紅色節(jié)點(diǎn)表示 在紅色組別中起到重要作用的微生物類群，綠色節(jié)點(diǎn)表示在綠色組別中 起到重要作用的微生物類群；未能在圖中顯示的Biomarker對(duì)應(yīng)的物種 名會(huì)展示在右側(cè)，字母編號(hào)與圖中對(duì)應(yīng)

3 討論

腸道菌群的狀態(tài)可以通過糞便菌群的變化反映出來，高通量測(cè)序技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于腸道菌群研究等多個(gè)領(lǐng)域，與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比，具有更準(zhǔn)確定量、實(shí)時(shí)檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)。本研究通過高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)小鼠糞便進(jìn)行檢測(cè)，分析探討果桑茶對(duì)2型糖尿病模型小鼠腸道菌群的調(diào)節(jié)效果。

菌群α多樣性分析表明，模型對(duì)照組小鼠腸道菌群的多樣性與正常對(duì)照組相差較大，正常對(duì)照組與給藥組的Chao1和Shannon值均大于模型對(duì)照組，模型對(duì)照組的Simpson值大于GDm組和正常組而小于GDh組和陽性對(duì)照組，說明糖尿病的產(chǎn)生會(huì)降低小鼠腸道菌群的多樣性，而果桑茶可以提高腸道菌群的豐度，其中GDm組效果最好。β多樣性分析發(fā)現(xiàn)正常對(duì)照組與GDm組、GDh組與陽性對(duì)照組群落構(gòu)成差異較小，GDm組小鼠的腸道菌群構(gòu)成最接近正常對(duì)照組。

菌群構(gòu)成分析發(fā)現(xiàn)，在門和屬水平上，各組小鼠腸道菌群存在明顯差異。在門分類水平上，擬桿菌門和厚壁菌門是正常對(duì)照組小鼠腸道菌群中的優(yōu)勢(shì)菌門，這與BEZIRTZOGLOU等[26]，QIN等[27]的研究結(jié)果相似，厚壁菌門和擬桿菌門能共同促進(jìn)對(duì)糖的分解利用[28]，相關(guān)研究表明厚壁菌門與擬桿菌門比值與個(gè)體體重呈正相關(guān)，經(jīng)高脂飲食后，模型對(duì)照組中厚壁菌門相對(duì)豐度升高而擬桿菌門相對(duì)豐度降低，給藥治療后，擬桿菌門相對(duì)豐度有所增加，GDm組效果最顯著。在屬分類水平上，Muribaculaceae_unclassified是正常組中的優(yōu)勢(shì)菌屬，其在模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組中的豐度最低，與之相比在果桑茶給藥組中其豐度有明顯提高。嗜膽菌屬是一種2型糖尿病的標(biāo)志物，其中的沃氏嗜膽菌Bilophilawadsworthia能引起和加重炎癥[29]，與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組中嗜膽菌屬呈明顯上升趨勢(shì)，而給藥組有效地抑制了這種現(xiàn)象。GDm組中的優(yōu)勢(shì)菌屬艾克曼菌屬可降解黏蛋白生成短鏈脂肪酸，與肥胖、糖尿病等疾病呈負(fù)相關(guān)[30]。GDh組優(yōu)勢(shì)菌屬毛螺菌科NK4A136群對(duì)腸道黏膜損傷具有一定的修復(fù)作用，在調(diào)節(jié)和穩(wěn)定腸道菌群方面發(fā)揮著重要作用[31]。說明果桑茶能在調(diào)節(jié)2型小鼠糖尿病腸道菌群方面發(fā)揮積極作用。

LEfSe多級(jí)物種差異判別分析表明，與模型對(duì)照組相比，GDm組中的嗜膽菌屬等有害菌群的豐度降低，而有益菌群擬桿菌屬等的豐度增高；此外，GDm組小鼠的腸道菌群多樣性和物種豐富度較模型對(duì)照組顯著提高，與正常對(duì)照組小鼠接近，這些結(jié)果表明果桑茶在將糖尿病小鼠腸道菌群紊亂調(diào)節(jié)到接近正常狀態(tài)方面具有一定的功效，這可能與果桑茶中的多糖、黃酮等生物活性物質(zhì)有關(guān)[32]。

4 結(jié)論

本研究采用高通量測(cè)序?qū)２鑼?duì)2型糖尿病模型小鼠腸道菌群的影響進(jìn)行研究。結(jié)果不僅驗(yàn)證了2型糖尿病會(huì)破壞小鼠腸道菌群平衡，降低菌群豐度，同時(shí)證明了果桑茶能提高小鼠腸道菌群的豐度，并在一定程度上增加有益菌群的數(shù)量，降低高血糖特征菌群及有害菌群的影響，促進(jìn)腸道菌群良性發(fā)展。本研究的結(jié)果可為果桑資源的綜合應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)，同時(shí)為果桑茶應(yīng)用于2型糖尿病的干預(yù)治療提供一定的科學(xué)依據(jù)。