唐琳
摘要:本試驗以甜瓜(Muskmelon )品種之一的“超甜小麥酥”品種為實驗材料,采用盆栽培養(yǎng)法,實驗研究結(jié)果表明:隨著H2O2處理濃度的增加,MDA和相對電導(dǎo)率逐漸降低,說明植株在的膜質(zhì)過氧化程度得到了緩解。當植株處于脅迫環(huán)境中,能通過提高相關(guān)抗氧化酶的活性來提高對逆境的適應(yīng)能力。
關(guān)鍵詞:甜瓜;過氧化氫;鹽脅迫;生理
1? 實驗測定指標及其方法
1.1? 甜瓜幼苗丙二醛(MDA)含量的測定
實驗材料:甜瓜植株幼苗。
實驗儀器與設(shè)備:離心機,光度計,電子天平(精確到0.001g),水浴缸等。
實驗試劑:三氯乙酸,硫代巴比妥酸溶液,石英砂等。
實驗方法:用上述各種材料先取出甜瓜葉片,用電子天平(精確到0.001g)
稱量出1g,加入一定量的石英砂,三氯乙酸,用研缽體研磨成勻漿狀態(tài)即可。
將研磨好的勻漿液放入離心機中大概十五分鐘,離心后取出其上清液放在事先準備好的試管中。在經(jīng)過一定處理,最后將它們分別放在532、500以及450nm的波長下進行吸光度的測定并計算出各組甜瓜幼苗丙二醛(MDA)的含量,作記錄。
1.2? 相對電導(dǎo)率
取新鮮葉片,清洗擦凈組織表面污物,剪碎并去中脈,混勻。同時用量筒稱取50ml去離子水并置于燒瓶中,測其電導(dǎo)率并記錄。再稱取已剪碎的新鮮樣品0.5g左右,置于燒瓶中,浸泡2h后再測其電導(dǎo)率并記錄。最后水浴加熱至80℃,并冷卻至室溫,測其相對電導(dǎo)率。
1.3 甜瓜幼苗超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)活性的測定
實驗材料:甜瓜植株幼苗。
實驗器具:試管,滴管,容量瓶,剪刀,膠頭滴管,離心機,光度儀,電
子天平(精確到0.001g),濾紙等。
實驗試劑:磷酸鹽、乙二胺四乙酸、抗壞血酸、聚乙烯吡咯烷酮等。
實驗方法:取葉(0.3g)加入2毫升含有50mmol·L-1 磷酸鹽緩沖液(pH值7.8)、0.2mmol·L-1 乙二胺四乙酸、2 mmol·L-1 抗壞血酸和2%(W/V)聚乙烯吡咯烷酮的冰緩沖溶液,勻漿離心15分鐘,在4°C條件下由此產(chǎn)生的上清液中進行酶活性的測定。超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定采用Stewart & Bewley(1980)[16]描述的光化學(xué)法,過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)活性的測定根據(jù)Cakmak & Marschner(1992)[17]酶所描述的方法。記錄下實驗所測得的數(shù)據(jù)并分析。
2? 結(jié)果與分析
2.1? 甜瓜幼苗株高、莖粗、干重的分析
在同一列含有相同字母的是沒有顯著性差異的(P<0.05 )。從表1可以看出,每一列T1和T2都是有顯著性差異的,并且三項指標(株高、莖粗、干重)都是顯著性降低,這說明鹽脅迫對于甜瓜幼苗的生長產(chǎn)生了負面效應(yīng)。隨著H2O2的加入,各項指標又有顯著性的提高,這說明過氧化氫對緩解幼苗鹽脅迫起到了積極作用。在H2O2低濃度(5~15μmol·L-1 )處理下,隨著濃度的增加,各項指標得到了顯著的增長,這說明5~15μmol·L-1處理中,過氧化氫的濃度越高,對于幼苗鹽脅迫的緩解效果越好。特別是在15μmol·L-1,效果最好。但是可以看出,在20μmol·L-1處理下幼苗的生長三項指標又顯著的降低,這說明過氧化氫濃度太高也會使緩解鹽脅迫的作用效果變差。
2.2 過氧化氫對鹽脅迫下甜瓜幼苗丙二醛(MDA)含量的影響
膜脂質(zhì)過氧化的分析以MDA含量的多少來表示。上面含有不同字母的分組有顯著性差異,T2顯著性的高于T1,說明鹽脅迫下幼苗的生長顯著差于對照組,這說明鹽脅迫對于幼苗產(chǎn)生了不利影響。隨著H2O2處理的加入,MDA明顯降低,T3、T4、T5和T2相比顯著性降低,這說明H2O2的加入影響了MDA的含量,改善了鹽脅迫造成的負面生理效應(yīng),在H2O2低濃度(5-15μmol·L-1)隨著濃度的增加改善情況越明顯,到達高濃度20μmol·L-1時,達到平衡。綜上所述,H2O2的加入可以明顯改善鹽脅迫造成的幼苗膜脂質(zhì)過氧化,緩解幼苗鹽脅迫。
3? 小結(jié)與討論
由此可見,鹽脅迫對植物生長有許多不利的影響,它能使植物的生長和發(fā)育受到抑制。在目前的研究中,我們發(fā)現(xiàn)鹽脅迫可以使甜瓜幼苗生長停滯,對其生理產(chǎn)生許多不利的影響。然而,觀察到H2O2的補充降低了鹽脅迫對甜瓜幼苗生長的不利影響(表1)。同時,從表1可以看出,隨著H2O2濃度的增加H2O2對鹽脅迫下甜瓜幼苗生長越來越有益,15μmol·L-1時達到最大有益效應(yīng)。15μmol·L-1后,在H2O2高濃度(20μmol· L-1)的處理下,緩解鹽脅迫的有益效應(yīng)明顯下降,
參考文獻
[1] 武雁軍,劉建輝.低溫脅迫對厚皮甜瓜幼苗抗寒性生理生化指標的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2007,35(3):139-143.
[2] 袁琳.鹽脅迫對阿月渾子可溶性糖、淀粉、Pro含量的影響[J].新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)報,2004,27(2):19-23.