雷慧珺 曹建中 李亮 謝夢(mèng)洲 付越 李豐

摘要 中醫(yī)證候研究是中醫(yī)藥學(xué)的研究熱點(diǎn)，基于唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué)探討疾病證候的復(fù)雜性并揭示其科學(xué)內(nèi)涵具有巨大科研潛力?，F(xiàn)分析了慢性胃炎和胃癌脾虛證的聯(lián)系以及疾病的進(jìn)展過(guò)程?；谕僖和饷隗wexoRNA表達(dá)譜，運(yùn)用唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué)的學(xué)科優(yōu)勢(shì)，在中醫(yī)學(xué)同病異證，異病同證的理論指導(dǎo)下，提出尋找其具有臨床價(jià)值的差異表達(dá)的分子標(biāo)志物。進(jìn)一步推動(dòng)證候物質(zhì)基礎(chǔ)的定量、定性研究，并從分子機(jī)制角度切入促進(jìn)中醫(yī)腫瘤證候的精準(zhǔn)化發(fā)展。

關(guān)鍵詞 唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué);唾液外泌體;中醫(yī)證候;同病異證;異病同證;差異分子標(biāo)志物;精準(zhǔn)化

Abstract The research of traditional Chinese medicine （TCM） syndrome is the key problem of TCM research，and it is of great research potential to explore the complexity of disease syndrome and reveal its scientific connotation based on saliva transcriptomics.This paper analyzes the link between chronic gastritis and gastric cancer spleen deficiency syndrome and the progression of the disease.Based on the exoRNA expression profile of salivary exosomes，using the academic advantages of salivary transcriptomics，and the guidance of the theory of Chinese medicine same disease with different syndrome and different disease with the same syndrome，we propose to find molecular markers with different expression of clinical value.We further promote the quantitative and qualitative research on the material basis of syndrome，and promote the precise development of the tumor certificate of Chinese medicine from the perspective of molecular mechanism.

Keywords Saliva Transcriptomics; Saliva Exosome; Traditional Chinese medicine syndrome; Same disease with different syndrome; Different disease with the same syndrome; Differential molecular markers; Precision

中圖分類號(hào)：：R241;R573文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.14.024

人類基因組計(jì)劃（Human Genome Project，HGP）全基因組測(cè)序的完成，標(biāo)志著人類進(jìn)入了后基因組學(xué)時(shí)代，新的以“組學(xué)”為研究標(biāo)志的轉(zhuǎn)錄組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué)，代謝組學(xué)等系統(tǒng)生物學(xué)在生命科學(xué)中得到了廣泛應(yīng)用。證的研究是對(duì)疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中某一特定階段疾病本質(zhì)的觀察，是對(duì)致病因素與機(jī)體的反應(yīng)兩方面具體情況的有機(jī)綜合，是正邪抗?fàn)帒B(tài)勢(shì)情況的反映。相關(guān)研究表明，中醫(yī)的證可以和臨床生化指標(biāo)相同，作為疾病的一類臨床表征，中醫(yī)的證是有物質(zhì)基礎(chǔ)的[1]。證可以通過(guò)基因水平上的生物標(biāo)志物來(lái)量化和表征。唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué)的系統(tǒng)性、動(dòng)態(tài)性、復(fù)雜性與中醫(yī)學(xué)的整體觀念、病證結(jié)合模式、辨證論治理論有極大相似性，在揭示中醫(yī)疾病的證候本質(zhì)方面具有巨大潛力?；谕僖和饷隗wexoRNA表達(dá)譜，尋找不同病證的差異表達(dá)的分子標(biāo)志物，有助于進(jìn)一步推動(dòng)中醫(yī)證候的客觀化研究。

1 慢性胃炎與胃癌的演變進(jìn)展

慢性胃炎是指多種因素引起的胃黏膜的慢性炎癥或萎縮性病變[2-3]，是臨床常見(jiàn)的慢性消化系統(tǒng)疾病之一。流行病學(xué)研究表明，健康人群慢性胃炎發(fā)病率超過(guò)一半，小部分患者最終甚至發(fā)展成為胃癌[2]。目前國(guó)際上公認(rèn)的腸型胃癌的發(fā)生模式為Correa模式[4]，其發(fā)生發(fā)展可能經(jīng)過(guò)如下幾個(gè)過(guò)程：1）正常人（N）;2）慢性淺表性胃炎（CSG）;3）慢性萎縮性胃炎（CAG）;4）CAG伴腸化（Intestinal Metaplusi）和（或）不典型增生（Dysplasia）;5）GC[3]。

胃癌是臨床上常見(jiàn)的起源于胃黏膜上皮細(xì)胞的惡性腫瘤之一，不僅起病隱匿，而且進(jìn)展迅速且存在高轉(zhuǎn)移和高復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，在我國(guó)各種惡性腫瘤中發(fā)病率居首位[1-2，4]。在早期胃癌篩查過(guò)程中，由于患者缺乏特異性的具體臨床表現(xiàn)，醫(yī)者通常不能通過(guò)癥狀、體征進(jìn)行臨床確診，所以傳統(tǒng)上使用影像學(xué)檢查和臨床生化、病理檢查進(jìn)行診斷，但效果并不理想。尋找一種預(yù)防疾病傳變，提高患者5年生存率的早期診斷和治療方法是十分必要的。

2 慢性胃炎和胃癌脾虛證的病因病機(jī)及其歷史沿革

在中醫(yī)古籍里，有類似“胃癌”這一病名記載，其可歸屬于“胃反”“反胃”“積聚”“噎膈”“伏梁”“胃脘痛”等的范疇[5]。《太平圣惠方·第四十七卷》指出：“夫反胃者，為食物嘔吐，胃不受食，言胃口翻也。”《金匱要略·嘔吐噦下利脈證治》曰：“趺陽(yáng)脈浮而澀，浮則為虛，澀則傷脾，脾傷則不磨，朝食暮吐，暮食朝吐，宿谷不化，名曰胃反?！薄鹅`樞·邪氣臟腑病形》指出：“胃病者，腹月真脹，胃脘當(dāng)心而痛。上支兩脅，膈咽不通，食飲不下?！蔽赴┑牟∫蜉^為廣泛和復(fù)雜，主要有外邪犯胃、情志失調(diào)、脾胃素虛，熱毒血瘀、痰瘀壅塞等方面[6]。胃癌的形成是一個(gè)本虛標(biāo)實(shí)、虛實(shí)夾雜日久積聚成塊的過(guò)程[7]。氣滯血瘀、肝氣犯胃、痰濕中阻、胃熱傷陰等實(shí)證以及脾胃虛寒、胃陰不足、氣血兩虛等虛證為胃癌的常見(jiàn)中醫(yī)證型[8]，胃癌的中醫(yī)證型也因治療方式的干預(yù)存在著一些動(dòng)態(tài)變化[9]。

陶麗和楊金坤[10]對(duì)1 266例胃癌患者臨床分型研究結(jié)果顯示脾虛型排在第一位。許玲等[11]對(duì)767例胃癌患者中醫(yī)辨證分型的臨床分析，結(jié)果提示脾胃虛寒在證型比例中占32.9%排在首位。黃美琴等[12]對(duì)154例胃癌患者進(jìn)行證型頻次分析，結(jié)果顯示進(jìn)展期胃癌脾胃虛損頻次在氣血虧虛、氣滯血瘀、胃熱陰虛、痰濕凝結(jié)、肝胃不和5種證型中最高。脾胃虛弱，受納失司，升降失調(diào)，運(yùn)化水濕功能失調(diào)，濕痰飲停滯交阻易結(jié)聚成腫塊。根據(jù)中醫(yī)古籍和古近代醫(yī)家的描述，就胃癌而言，其疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程當(dāng)中，脾胃虧損是所有病機(jī)共同擁有的主線[13]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，慢性胃炎可歸屬于“胃痞”“胃脘痛”“痞滿”“嘈雜”等范疇[14-15]?！端貑?wèn)·至真要大論》謂“太陽(yáng)之復(fù)，厥氣上行……心胃生寒，胸膈不利，心痛痞滿”;《素問(wèn)·太陰陽(yáng)明論》說(shuō)：“飲食不節(jié)，起居不時(shí)者，陰受之，陰受之則入五臟，入五臟則月真滿閉塞?！薄端貑?wèn)·評(píng)熱病論》指出“邪之所湊，其氣必虛”，正氣虧虛是慢性胃炎的發(fā)病關(guān)鍵。脾胃氣虛型是慢性胃炎臨床出現(xiàn)頻次最高的中醫(yī)證型[16]。脾胃共有“后天之本”之稱，脾升胃降，是人體氣機(jī)升降的樞紐。五臟六腑、四肢百骸皆賴脾胃運(yùn)化水谷以充養(yǎng)，為人體正氣之大源。脾胃健旺，正氣抗邪外出;脾胃虛弱，正虛邪侵發(fā)病。因此，脾胃虛弱是胃癌發(fā)生、發(fā)展的基礎(chǔ)，存在于整個(gè)癌前、癌變過(guò)程中，是胃癌病機(jī)的關(guān)鍵所在。

3 唾液活檢，是證候研究的一個(gè)新的方向，是一種有前景的臨床檢測(cè)手段

在諸多可用于醫(yī)學(xué)診斷的體液，唾液由腮腺、頜下腺、舌下腺、無(wú)數(shù)小唾液腺分泌的黏液及齦溝液等組成，其組成與血清相似，包括各種核酸、蛋白質(zhì)及各種小分子。作為人體體液的一部分，其成分水平受機(jī)體各種病理生理變化的影響。對(duì)于廣泛用于醫(yī)學(xué)診斷的血液來(lái)說(shuō)，血液樣本的分析過(guò)程煩瑣、費(fèi)用昂貴，且存在侵入性問(wèn)題。如HBV、HCV、DNAs和抗體以及病毒抗原不僅存在于感染患者的唾液中，也與血液樣本有關(guān)，但血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè)存在著一定的感染風(fēng)險(xiǎn)[17]。相比于唯一與所有器官都有接觸的血液來(lái)說(shuō)，唾液有許多優(yōu)點(diǎn)：1）收集要求不高;2）非侵入性操作;3）樣品處理無(wú)感染性風(fēng)險(xiǎn);4）樣品儲(chǔ)藏方便;5）操作經(jīng)濟(jì)節(jié)約[18]。

隨著生物化學(xué)微量分析技術(shù)的發(fā)展，唾液代替血液作為診斷指標(biāo)開(kāi)始嶄露頭角[17]。作為一種無(wú)創(chuàng)的口腔和全身性疾病診斷指示物中很豐富的生物液體，它在早期檢測(cè)中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)[19]。

唾液被認(rèn)為與中醫(yī)學(xué)概念的脾臟關(guān)系最直接、最密切。在中醫(yī)五臟化液理論中被這樣描述，“脾在液為涎，腎在液為唾”“脾氣通于口”“口為脾之官”，故可認(rèn)為脾直接且主要影響唾液的分泌。此外，脾胃通過(guò)經(jīng)脈相互絡(luò)屬而構(gòu)成表里相合關(guān)系，脾與胃納運(yùn)相成，升降相因，燥濕相濟(jì)，共同完成水谷精微的受納、轉(zhuǎn)運(yùn)。因此，唾液可以反映脾胃功能是否正常，從而客觀地反映個(gè)體當(dāng)前的健康狀況，其中包含的分子信息可以在微觀層面上反映疾病的證候變化。唾液活檢本身具有血清學(xué)和其他檢測(cè)所不能達(dá)到的優(yōu)勢(shì)，并且有中醫(yī)古籍診斷理論的支持，正成為當(dāng)前無(wú)創(chuàng)檢驗(yàn)領(lǐng)域最具潛力和應(yīng)用前景的研究熱點(diǎn)，也是中醫(yī)學(xué)證候研究的創(chuàng)新方向。

4 唾液外泌體exoRNA的新興以及唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué)在證候研究中的潛力

作為新興的研究熱點(diǎn)“外泌體”這一名詞是Trams等[19]在1981年在研究細(xì)胞核酸外切酶活性時(shí)發(fā)現(xiàn)并首次提出的;Johnstone等[20]后又補(bǔ)充發(fā)現(xiàn)外泌體是細(xì)胞分泌的一種由脂質(zhì)雙層膜包裹的直徑為30～100 nm大小不一的納米級(jí)細(xì)胞外囊狀小體，幾乎所有的真核細(xì)胞均分泌這種磷脂雙分子膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞囊泡[21]。

外泌體是由多種細(xì)胞經(jīng)過(guò)“內(nèi)陷-聚集-分選-融合-外排”等一系列過(guò)程分泌的[22-23]。從細(xì)胞膜內(nèi)陷形成早期核內(nèi)體開(kāi)始，mRNA和蛋白質(zhì)分子等開(kāi)始聚集在早期核內(nèi)體中，后成為晚期核內(nèi)體并且在轉(zhuǎn)運(yùn)所需的內(nèi)吞體分選轉(zhuǎn)運(yùn)復(fù)合物及其他相關(guān)蛋白質(zhì)的協(xié)同作用下形成多泡體。多泡體與細(xì)胞膜融合后，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)以囊泡形式即外泌體釋放到細(xì)胞外[24-25]。

作為液體活檢“三駕馬車”（外泌體，循環(huán)腫瘤細(xì)胞，游離DNA）之一，外泌體攜帶有親本細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的多種蛋白質(zhì)、脂類和核酸等生物信息分子，在細(xì)胞間通信、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、免疫調(diào)節(jié)等信息交流、物質(zhì)交換過(guò)程中扮演著不可或缺的角色[26]。其相關(guān)物質(zhì)可通過(guò)直接的膜融合作用、內(nèi)吞作用和配體/受體的相互作用轉(zhuǎn)移到靶細(xì)胞，從而發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能[27]。外泌體中蛋白質(zhì)、核酸（mRNA、microRNA、DNA等）、脂類等內(nèi)容物可以近似真實(shí)地反映其源細(xì)胞的特征和狀態(tài)[28-29]。外泌體豐富的內(nèi)含物極其廣泛的存在，使外泌體檢測(cè)成為一種非常有潛力的無(wú)創(chuàng)診斷方法。新近的研究證明唾液的基因轉(zhuǎn)錄組因其不易降解，具有更好的穩(wěn)定性，包含更多的信息[30]。加州大學(xué)洛杉磯分校（UCLA）David Wong實(shí)驗(yàn)室（2004）首次報(bào)道了唾液中的細(xì)胞exoRNA被用于檢測(cè)口腔癌[31]，隨后發(fā)現(xiàn)唾液RNA分子可用于乳腺癌[32]、胰腺癌等癌癥的早期診斷[33]。由于唾液中含有大量RNase，唾液中的exRNA期初并沒(méi)有受到重視，最近的研究發(fā)現(xiàn)，唾液中的exRNA大多存在于外泌體中并受到保護(hù)。加入表面活性劑后RNA會(huì)迅速的分解[34]。研究還發(fā)現(xiàn)唾液中大量的miRNA，piRNA都主要存在于唾液外泌體內(nèi)[35]，這為進(jìn)一步研究唾液外泌體在全身性疾病尤其是腫瘤領(lǐng)域奠定了基礎(chǔ)。

基于體積小有保護(hù)膜這一特點(diǎn)，腫瘤外泌體在腫瘤細(xì)胞之間、腫瘤細(xì)胞與周圍細(xì)胞之間的信息交流、物質(zhì)交換過(guò)程中扮演著重要的信使角色與遠(yuǎn)端的受體細(xì)胞融合，傳遞蛋白質(zhì)、miRNA和免疫抑制分子）。腫瘤外泌體既可誘導(dǎo)血管生成（有助于建立腫瘤微環(huán)境），形成預(yù)轉(zhuǎn)移龕;又可誘導(dǎo)凋亡細(xì)胞毒性T細(xì)胞引起免疫逃逸，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲轉(zhuǎn)移[36-37]。并且相比于正常細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞可釋放更多且內(nèi)容物差異明顯的外泌體。在液體活檢研究領(lǐng)域中，研究發(fā)現(xiàn)以外泌體方式分泌的胃癌細(xì)胞高表達(dá)CD97可調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的MAPK信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和浸潤(rùn)[38]。胃癌細(xì)胞能通過(guò)外泌體選擇性地將let-7釋放出細(xì)胞，導(dǎo)致胃癌發(fā)生惡性病變[39]。通過(guò)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞外泌體中含有的蛋白質(zhì)和核酸分子或許可以提高腫瘤診斷的特異性和靈敏度。體液中的腫瘤外泌體可視為“液體活檢”的重要組成成分[29]，作為生物標(biāo)志物在消化腫瘤的各項(xiàng)研究中顯示出積極的意義。腫瘤外泌體或許成為一種有潛在價(jià)值的胃癌診療標(biāo)志物。

5 展望

隨著轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)、深度測(cè)序技術(shù)等現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，唾液近十年來(lái)在疾病診斷方面取得了很大發(fā)展，但與中醫(yī)證候研究相結(jié)合還處于早期探索階段。完善唾液分子檢測(cè)數(shù)據(jù)庫(kù)，建立系統(tǒng)的唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué)知識(shí)格，規(guī)范證候診斷標(biāo)準(zhǔn)，充分發(fā)揮我國(guó)巨大的患者資源優(yōu)勢(shì)非常重要。從臨床研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)兩方面入手，擴(kuò)大研究樣本量，可以使數(shù)據(jù)更具重復(fù)性和說(shuō)服力。基于課題組之前的研究，提出了具體的研究途徑：1）構(gòu)建同病異證、異病同證的動(dòng)物模型和收集同病異證、異病同證的臨床患者，并提取樣本作為研究對(duì)象;2）對(duì)每種疾病進(jìn)行唾液轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，找到差異表達(dá)的exoRNA生物標(biāo)志物，并進(jìn)行回復(fù)驗(yàn)證[40];3）獲得具有臨床意義的疾病證候的生物標(biāo)志物。希望最后的結(jié)果可以推動(dòng)基礎(chǔ)研究技術(shù)向臨床椅旁檢測(cè)技術(shù)發(fā)展，使中醫(yī)證候研究朝著更加規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)、客觀的方向發(fā)展，推動(dòng)建立精準(zhǔn)的中醫(yī)診治模式。

參考文獻(xiàn)

[1]張玉，楊亞平.胃癌病理分型及與中醫(yī)證型相關(guān)性的研究綜述[J].陜西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，40（2）：98-101.

[2]周慶勇.胃癌癌前病變的中醫(yī)辨證分型研究[D].南京：南京中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

[3]Rugge M，Correa P，Dixon MF，et al.Gastric mucosal atrophy：interobserver consistency using new criteria for classification and grading[J].Aliment Pharmacol Ther，2002，16（7）：1249-1259.

[4]董凡，鄧銀香，商競(jìng)宇，等.中醫(yī)治療慢性萎縮性胃炎研究近況[J].江蘇中醫(yī)藥，2020，52（7）：88-90.

[5]陳皓，賈永森.胃癌的中醫(yī)證候及用藥特點(diǎn)聚類分析[J].中醫(yī)學(xué)報(bào)，2019，34（1）：149-153.

[6]李星，樊巧玲.胃癌中醫(yī)辨證與方藥應(yīng)用的文獻(xiàn)研究[J].中醫(yī)雜志，2017，58（8）：693-696.

[7]李怡璇，鄒勇.鄒勇教授結(jié)合五運(yùn)六氣治療腫瘤驗(yàn)案3則[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2019，17（19）：106-108.

[8]孫春霞，趙普輝，范煥芳，等.胃癌中醫(yī)證型與基因、蛋白相關(guān)性研究現(xiàn)狀[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2018，24（9）：1335-1338.

[9]安賀軍，張波，郭雁冰，等.172例慢性萎縮性胃炎中醫(yī)證候?qū)W研究分析[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，17（2）：156-158.

[10]陶麗，楊金坤.胃癌中醫(yī)證型與臨床相關(guān)因素的多因素分析[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)，2007，5（5）：510-513.

[11]許玲，魏品康，秦志豐，等.胃癌中醫(yī)證候特點(diǎn)分析767例[J].世界華人消化雜志，2005，13（15）：1804-1808.

[12]黃美琴，丁罡，高志生，等.154例進(jìn)展期胃癌中醫(yī)證型研究分析[J].遼寧中醫(yī)雜志，2016，43（6）：1241-1242.

[13]梁云麒，沈克平，胡兵.中醫(yī)胃癌病機(jī)與治法研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2014，32（3）：513-515.

[14]郭忠聰，文靜.自擬舒胃和肝散治療慢性萎縮性胃炎癌前病變的效果及安全性觀察[J].中國(guó)醫(yī)藥，2018，13（4）：553-557.

[15]安賀軍，朱宏，張波，等.胃絡(luò)瘀血型慢性萎縮性胃炎患者胃經(jīng)穴位電阻測(cè)試分析[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，10（3）：366-368.

[16]覃祥耀.自擬胃痛方治療脾胃氣虛型慢性胃炎療效觀察[J].廣西中醫(yī)藥，2020，43（3）：27-28.

[17]Chen L，Liu F，F(xiàn)an X，et al.Detection of hepatitis B surface antigen，hepatitis B core antigen，and hepatitis B virus DNA in parotid tissues[J].Int J Infect Dis，2009，13（1）：20-3.

[18]高志武.唾液生物標(biāo)記物作為臨床診斷工具的研究進(jìn)展[J].西北國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志，2017，38（4）：275-278.

[19]Trams EG，Lauter CJ，Salem N Jr，et al.Exfoliation of membrane ecto-enzymes in the form of micro-vesicles[J].Biochim Biophys Acta，1981，645（1）：63-70.

[20]Johnstone RM，Adam M，Hammond JR，et al.Vesicle formation during reticulocyte maturation.Association of plasma membrane activities with released vesicles（exosomes）[J].J Biol Chem，1987，262（19）：9412-9420.

[21]Urbanelli L，Magini A，Buratta S，et al.Signaling pathways in exosomes biogenesis，secretion and fate[J].Genes（Basel），2013，4（2）：152-170.

[22]Kowal J，Tkach M，Théry C.Biogenesis and secretion of exosomes[J].Curr Opin Cell Biol，2014，29：116-25.

[23]冷遠(yuǎn)秀，陳芳，羅清.非小細(xì)胞肺癌外泌體研究進(jìn)展[J].中華腫瘤防治雜志，2019，26（6）：437-442.

[24]Ailawadi S，Wang X，Gu H，et al.Pathologic function and therapeutic potential of exosomes in cardiovascular disease[J].Biochim Biophys Acta，2015，1852（1）：1-11.

[25]Wollert T，Hurley JH.Molecular mechanism of multivesicular body biogenesis by ESCRT complexes[J].Nature，2010，464（7290）：864-869.

[26]常文婧，李冬，孫祖俊.外泌體長(zhǎng)鏈非編碼RNA：腫瘤分子診斷新型標(biāo)志物[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2020，41（15）：1793-1799.

[27]Fujita Y，Kosaka N，Araya J，et al.Extracellular vesicles in lung microenvironment and pathogenesis[J].Trends Mol Med，2015，21（9）：533-542.

[28]Zhao L，Liu W，Xiao J，et al.The role of exosomes and “exosomal shuttle microRNA” in tumorigenesis and drug resistance[J].Cancer Lett，2015，356（2 Pt B）：339-346.

[29]魯悅，戴琪，武鑫，等.外泌體的功能及其在腫瘤診療中的應(yīng)用[J].藥學(xué)服務(wù)與研究，2019，19（3）：172-174，179.

[30]Zhang L，Xiao H，Wong DT.Salivary biomarkers for clinical applications[J].Mol Diagn Ther，2009，13（4）：245-259.

[31]Li Y，St John MA，Zhou X，et al.Salivary transcriptome diagnostics for oral cancer detection[J].Clin Cancer Res，2004，10（24）：8442-8450.

[32]Zhang L，Xiao H，Karlan S，et al.Discovery and preclinical validation of salivary transcriptomic and proteomic biomarkers for the non-invasive detection of breast cancer[J].PLoS One，2010，5（12）：e15573.

[33]Zhang L，F(xiàn)arrell JJ，Zhou H，et al.Salivary transcriptomic biomarkers for detection of resectable pancreatic cancer[J].Gastroenterology，2010，138（3）：949-957.e1-7.

[34]Palanisamy V，Sharma S，Deshpande A，et al.Nanostructural and transcriptomic analyses of human saliva derived exosomes[J].PLoS One，2010，5（1）：e8577.

[35]Bahn JH，Zhang Q，Li F，et al.The landscape of microRNA，Piwi-interacting RNA，and circular RNA in human saliva[J].Clin Chem，2015，61（1）：221-230.

[36]Kahlert C，Kalluri R.Exosomes in tumor microenvironment influence cancer progression and metastasis[J].J Mol Med（Berl），2013，91（4）：431-437.

[37]黃劍宇，梁?jiǎn)⒎?，李俊松，?三氧化二砷抗腫瘤作用機(jī)制及其藥物遞送系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J].中草藥，2020，51（23）：6102-6111.

[38]李瑩雪，王銳銀，包永明.芹菜素與丹參酮ⅡA的協(xié)同抗腫瘤作用及機(jī)制[J].中草藥，2020，51（22）：5788-5797.

[39]Li F，Yoshizawa JM，Kim KM，et al.Discovery and Validation of Salivary Extracellular RNA Biomarkers for Noninvasive Detection of Gastric Cancer[J].Clin Chem，2018，64（10）：1513-1521.

[40]Li F，Kaczor-Urbanowicz KE，Sun J，et al.Characterization of Human Salivary Extracellular RNA by Next-generation Sequencing[J].Clin Chem，2018，64（7）：1085-1095.

（2020-11-17收稿 責(zé)任編輯：張雄杰）