戴建軍 李丹陽* 孫玲偉 吳彩鳳 呂玉華 張樹山 林月霞 張德福**

(1.上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，上海 201106；2.上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,動物遺傳工程研究室，上海 201106)

傳統(tǒng)羊飼養(yǎng)模式為牧區(qū)放牧，嚴(yán)重依賴草場轉(zhuǎn)場，受自然環(huán)境限制。早在20世紀(jì)20年代，英美等發(fā)達(dá)國家開始出現(xiàn)全混合日糧(total mixed ration，TMR)技術(shù)[1]，至20世紀(jì)90年代初，該技術(shù)引入我國，并在奶牛生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用[2]。全價顆粒飼糧是在TMR的研究基礎(chǔ)上，參照單胃動物圈養(yǎng)模式下營養(yǎng)供應(yīng)的模式，確定羊?qū)Υ值鞍踪|(zhì)、能量、粗纖維、礦物質(zhì)和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)的需要，把揉碎的粗料、精料和各種營養(yǎng)補(bǔ)充劑充分混合，采用工業(yè)化方式加工而成的顆粒狀營養(yǎng)平衡的飼糧[3]。有研究表明，顆粒飼糧可以增加甘肅高山細(xì)毛羊[4]、湖羊[5]、無角道賽特×小尾寒羊羔羊[6]的增重效果。目前，顆粒飼糧在山羊和綿羊的研究主要集中在育肥效果方面，其是否會對機(jī)體健康和生長性能產(chǎn)生影響的相關(guān)研究報道仍比較少。孫建忠等[7]用顆粒飼糧飼喂反芻動物，發(fā)現(xiàn)可以防止采食過多精料導(dǎo)致瘤胃消化功能紊亂。周蓉等[8]發(fā)現(xiàn)粗飼料比例為35%～40%的全價顆粒飼糧能更好地改善荷斯坦斷奶犢牛機(jī)體免疫功能和腎臟功能。因此，本研究通過研究全價顆粒飼糧對白山羊生長性能、血液生理生化指標(biāo)和主要臟器組織學(xué)結(jié)構(gòu)的影響，評估山羊?qū)︻w粒飼糧的適應(yīng)性，為今后的肉羊顆粒飼養(yǎng)模式推廣提供理論與實(shí)踐支持，加快顆粒飼糧在養(yǎng)羊生產(chǎn)中的應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)用白山羊來源于上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院崇明食草動物試驗(yàn)站。試驗(yàn)選取4月齡、健康狀況良好的長三角洲白山羊36只，隨機(jī)分為3組，每組12只(公母各占1/2)，TMR組飼喂TMR，自由采食；顆粒組飼喂全價顆粒飼糧，由TMR組飼糧經(jīng)干燥粉碎后加工而成，自由采食；限制采食組飼喂全價顆粒飼糧，飼喂量根據(jù)顆粒組采食量進(jìn)行換算，換算方法為顆粒組山羊每kg體重采食量×同期限制采食組山羊體重×0.8，飼喂量每周調(diào)整1次。預(yù)試期為1周，逐步增加顆粒飼糧投喂比例，正試期8周。

TMR和全價顆粒飼糧使用相同原料和配比制作而成，其組成及營養(yǎng)水平見表1。TMR和全價顆粒飼糧委托江蘇波杜農(nóng)牧股份有限公司加工而成，工藝如下：玉米秸稈經(jīng)干燥、揉搓、粉碎，粉碎機(jī)篩板孔徑為5 mm。其他原料直接粉碎，粉碎機(jī)篩板孔徑為2 mm。粉碎后各組成成分按比例經(jīng)均勻混合為TMR。全價顆粒飼糧為全價粉料制粒而成。制粒條件為80 ℃調(diào)質(zhì)45 s，90 ℃制粒，風(fēng)冷方式冷卻。

表1 TMR和全價顆粒飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.2 飼養(yǎng)管理

每日07:30和15:30各飼喂1次，自由飲水。TMR組和顆粒組飼喂前飼糧稱重，飼喂后收集剩余飼糧稱重。限制采食組則將單日飼喂量平均分2次飼喂，未發(fā)現(xiàn)有剩余飼糧。

1.3 測定指標(biāo)

1.3.1 生長性能測定

試驗(yàn)開始至結(jié)束，每周定期對試驗(yàn)羊進(jìn)行稱重，并計(jì)算每組羊的平均周體重和試驗(yàn)期平均日增重(ADG)。

1.3.2 樣品采集

正試期開始第0(正式飼喂開始前的時間點(diǎn))、2、4、6和8周分別對山羊采集空腹全血和乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血5 mL，全血采集后，4 ℃靜置4 h后，1 200×g離心10 min，收集血清，-80 ℃保存?zhèn)溆??？鼓糜谑覝兀? h內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室，用于血常規(guī)指標(biāo)測定。

1.3.3 血清激素含量測定

使用卡邁舒(上海)生物科技有限公司的相關(guān)試劑盒對第0、4和8周的山羊血清中激素含量進(jìn)行檢測。檢測指標(biāo)包括：生長激素(GH)、生長抑素(SS)、生長激素釋放多肽(GHRP)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、胰島素樣生長因子(IGF)含量。

1.3.4 血清生化指標(biāo)測定

用全自動生化分析儀(英諾華小型全自動生化分析儀，DS261)對第0、4和8周山羊血清進(jìn)行生化指標(biāo)檢測。測定指標(biāo)包括：堿性磷酸酶(ALP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性及膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)和尿素(UN)含量。

1.3.5 血液生理指標(biāo)測定

使用美國愛德士ProCyte DxTM全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血液生理檢測。檢測指標(biāo)包括：白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)和紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)(RDW)。

1.3.6 血清抗氧化指標(biāo)測定

使用上海碧云天生物技術(shù)有限公司的試劑盒進(jìn)行試驗(yàn)第8周山羊的血清抗氧化指標(biāo)的檢測，檢測指標(biāo)包括：活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性，其中ROS為用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測定吸光度(OD)值。

1.3.7 屠宰率測定

試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)選擇5只白山羊進(jìn)行屠宰。屠宰白山羊禁食12 h后稱重，放血屠宰，除去頭、蹄、血液、毛、內(nèi)臟，其余作為胴體重量，屠宰率計(jì)算公式如下：

屠宰率(%)=(胴體重量/活體重)×100。

1.3.8 肉質(zhì)性能測定

屠宰后分離背最長肌，去除表面筋膜，參考夏安琪等[9]的方法測定pH(屠宰后30 min和24 h)、剪切力、滴水損失、蒸煮損失和肉色。

1.3.9 主要臟器組織切片觀察

屠宰后，選取肝臟、睪丸、附睪、十二指腸0.5 cm3，于4%多聚甲醛中固定，樣品送武漢賽維爾生物科技有限公司進(jìn)行組織切片和常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用SPSS 13.0進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”的形式表示，并采用單因子方差分析(one-way ANOVA)和LSD法分析各組數(shù)據(jù)之間的顯著性差異，P<0.05時表明差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 不同形式飼糧對白山羊體重的影響

由表2可知，各組之間山羊初始體重(第0周)均無顯著差異(P>0.05)，符合試驗(yàn)要求。顆粒組的終末體重(第8周)顯著高于TMR組(P<0.05)，限制采食組的終末體重亦高于TMR組，但差異不顯著(P>0.05)。顆粒組的平均日增重顯著高于TMR組和限制采食組(P<0.05)。

2.2 不同形式飼糧對白山羊屠宰率和肉質(zhì)性能的影響

由表3可知，顆粒組屠宰率最高，限制采食組次之，TMR組最低，其中顆粒組屠宰率比TMR組提高了1.48%，但差異不顯著(P>0.05)。顆粒飼糧飼喂沒有明顯改變山羊的肉質(zhì)性能，表現(xiàn)為3組之間的pH、剪切力、滴水損失、蒸煮損失和肉色均沒有顯著變化(P>0.05)。

表3 不同形式飼糧對白山羊屠宰率和肉質(zhì)性能的影響

2.3 不同形式飼糧對山羊血清激素含量的影響

由表4可知，在相同時間點(diǎn)，不同形式飼糧對白山羊血清中GH、SS、GHRP、T3、T4和IGF含量均無顯著影響(P>0.05)。隨著飼喂時間的延長，血清GH含量在3組內(nèi)均呈下降趨勢，SS和T4含量在3組內(nèi)均表現(xiàn)為隨著飼喂時間的延長呈上升趨勢。

表4 不同形式飼糧對白山羊血清激素含量的影響

2.4 不同形式飼糧對白山羊血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，在飼喂第4周時，限制采食組血清ALP活性出現(xiàn)一個異常波動，顯著高于TMR組和顆粒組(P<0.05)，到第8周時下降，但仍顯著高于顆粒組(P<0.05)。在血清ALT和AST活性指標(biāo)方面，不同形式飼糧之間無顯著差異(P>0.05)，且均隨著飼喂時間的延長而呈逐步下降趨勢。在血脂指標(biāo)方面，血清CHOL和HDL含量在不同組的不同時間點(diǎn)均無顯著差異(P>0.05)。血清TG和LDL含量在第4周也未表現(xiàn)出明顯變化，在第8周時，顆粒組的TG含量顯著高于TMR組和限制采食組(P<0.05)，LDL含量則顯著低于TMR組(P<0.05)。3組血清ALB、TP和GLU含量均隨著飼喂時間的延長而呈下降趨勢，但在相同時間點(diǎn)，3組間均差異不顯著(P>0.05)。隨著飼喂時間的延長，顆粒組和限制采食組的血清UN含量均顯著高于TMR組(P<0.05)。

表5 不同形式飼糧對白山羊血清生化指標(biāo)的影響

2.5 不同形式飼糧對白山羊血液生理指標(biāo)的影響

由表6可知，不同形式飼糧下，除了WBC、RBC和HCT在飼喂第2周出現(xiàn)一定波動外，其余時間點(diǎn)3組呈一致變化趨勢，表明飼喂不同形式飼糧對育肥期山羊血常規(guī)指標(biāo)基本未產(chǎn)生明顯影響，其中顆粒組的WBC在第2周時顯著低于TMR組(P<0.05)。

表6 不同形式飼糧對白山羊血液生理指標(biāo)的影響

2.6 不同形式飼糧對白山羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表7可知，在試驗(yàn)結(jié)束后，各組之間血清ROS、MDA含量及SOD和GSH-Px活性均沒有顯著差異(P>0.05)。

表7 不同形式飼糧對白山羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.7 不同形式飼糧對白山羊組織形態(tài)的影響

如圖1所示，不同形式飼糧下，肝臟、睪丸和附睪組織的組織切片觀察均無明顯差異。各組肝臟組織可見明顯肝小葉結(jié)構(gòu)，睪丸曲細(xì)精管發(fā)育完全，均可見曲細(xì)精管中有精子細(xì)胞存在，附睪管中也可見成團(tuán)的成熟精子。十二指腸的組織學(xué)觀察中，均可見排列整齊的腸絨毛，其中限制采食組和顆粒組的腸絨毛長度略高于TMR組。

圖1 不同形式飼糧下多個器官的組織學(xué)觀察

3 討 論

3.1 不同形式飼糧對白山羊生長性能和肉質(zhì)性能的影響

反芻動物由于消化結(jié)構(gòu)復(fù)雜，其全價顆粒飼糧的研究和應(yīng)用一直落后于單胃動物。近年來，全價顆粒飼糧在肉羊育肥中應(yīng)用越來越廣泛，但缺乏相關(guān)安全性評價研究。傳統(tǒng)飼喂方式存在飼糧可食性差等問題，易出現(xiàn)羊挑食的情況，致使?fàn)I養(yǎng)需求無法得到全面滿足。顆粒飼糧是由各種來源的成分揉碎，并通過機(jī)器混合加工成顆粒，可避免羊挑食現(xiàn)象出現(xiàn)，大大增加了飼料利用效率。同時顆粒飼糧含水量較低，可在一定程度上提高動物的干物質(zhì)采食量，從而提高其生長速度[10-11]。張紅崗等[12]研究發(fā)現(xiàn)，舍飼羔羊飼喂顆粒全混合飼糧，平均日增重提高31%，飼料轉(zhuǎn)化率提高17%，幼羊的斷奶應(yīng)激癥狀和羔羊腹瀉率都有所減緩和降低。林嘉等[13-14]使用與粉狀飼料相同組成的顆粒飼糧，結(jié)果顯著提高了湖羊的平均日增重。Khandoker等[15]在孟加拉黑山羊的研究中也發(fā)現(xiàn)，飼喂全混合顆粒飼糧增加了粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維消化率，顯著提高了采用相同飼糧來源和營養(yǎng)水平的TMR所達(dá)到的增重效果。本試驗(yàn)中，顆粒組和限制采食組的生長速度顯著高于TMR組，與上述結(jié)果相似。本試驗(yàn)中，顆粒組屠宰率較TMR組雖無顯著變化，但仍高出1.48個百分點(diǎn)，肉質(zhì)性能良好，該結(jié)果亦與Singh等[16]在印度Jamunapari山羊上的研究結(jié)果相一致。肉質(zhì)性能檢測各組羔羊宰后pH30 min與pH24 h都處于正常范圍內(nèi)，失水率、熟肉率和肉色指標(biāo)都無明顯差異，表明顆粒飼料飼喂對白山羊肉質(zhì)性能影響不大。

3.2 不同形式飼糧對白山羊血清激素含量和抗氧化指標(biāo)的影響

有研究證實(shí)，營養(yǎng)對動物生長的調(diào)控與生長軸中相關(guān)因子的介導(dǎo)作用密不可分，其中血清激素及其受體在其中發(fā)揮重要作用[17-19]。本試驗(yàn)中，不同組別的血清GH含量在同一飼喂時間點(diǎn)內(nèi)均無顯著差異，且在不同時間點(diǎn)表現(xiàn)較為一致的變化趨勢，不同形式飼糧并未顯著改變山羊的激素分泌水平。

動物處于應(yīng)激狀態(tài)時，機(jī)體內(nèi)的抗氧化酶活性會逐漸下降，從而降低消除體內(nèi)氧化代謝產(chǎn)物的能力，打破機(jī)體內(nèi)自由基產(chǎn)生和清除的動態(tài)平衡，導(dǎo)致自由基逐漸的積累并產(chǎn)生氧化損傷，ROS、MDA、SOD和GSH-Px目前廣泛用于機(jī)體抗氧化能力的檢測[20]。本研究中，全價顆粒飼糧和顆粒飼糧限制采食均未對山羊血清ROS、MDA含量及SOD、GSH-Px活性產(chǎn)生影響，表明山羊能夠適應(yīng)顆粒飼糧的長期飼喂，并未使山羊產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)。

3.3 不同形式飼糧對白山羊血清生化指標(biāo)的影響

動物機(jī)體血清生化指標(biāo)的變化受發(fā)育階段、飼糧營養(yǎng)水平等影響，反映機(jī)體在某一階段的健康狀態(tài)。馬寧等[21]研究發(fā)現(xiàn)，顆粒飼糧并未對灘羊的血清生化指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響。有研究表明，血清AST和ALT是檢測肝臟和心臟功能是否受損的敏感指標(biāo)，當(dāng)其臟器受到損傷的時候，血清中AST和ALT活性會隨之上升[22]。本研究中，血清AST和ALT活性在各組間未見顯著的變化，表明山羊的肝臟及心臟功能并沒有受到影響，該結(jié)果與淡明等[23]利用全價顆粒飼糧進(jìn)行肉牛育肥的試驗(yàn)結(jié)果相似。ALP具有調(diào)控機(jī)體腸道功能和鈣磷代謝作用[24]，同時也與肝腎功能的損傷密切相關(guān)[25]。本研究中，限制采食組血清ALP活性在限飼中期出現(xiàn)明顯高于TMR組的情況，可能與該組早、中期采食量不足導(dǎo)致的營養(yǎng)不良有關(guān)，這與限制采食組在飼喂早期的第1～3周中出現(xiàn)體重下降情況相關(guān)。營養(yǎng)攝入不足可導(dǎo)致血清鈣、磷水平降低，從而引起血清ALP活性急速升高。隨著飼喂試劑的延長和采食量的增加，顆粒組和顆粒限制組血清ALP活性逐步降低，且第8周時與TMR組無顯著差異。

血清CHOL、TG、HDL和LDL含量可以反映出動物機(jī)體的脂類代謝情況，血液LDL轉(zhuǎn)運(yùn)肝臟中膽固醇至肝外組織進(jìn)行利用，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)過量積累則導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)生[26]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂第8周時顆粒組血清TG含量顯著高于限制采食組和TMR組，可能與顆粒飼糧自由采食導(dǎo)致山羊脂肪過度蓄積有關(guān)。在第4周和第8周，顆粒組和限制采食組血清LDL含量低于TMR組，未對心血管系統(tǒng)造成不利影響，該結(jié)果與Zhong等[11]利用顆粒飼糧飼喂烏珠穆欽羔羊的結(jié)果一致，均表現(xiàn)為顆粒飼糧可以部分提高烏珠穆欽羔羊的血清HDL含量，降低LDL含量。

血清UN含量是反芻動物氮利用率的重要指標(biāo)，其與飼糧中蛋白質(zhì)的攝入和蛋白質(zhì)在瘤胃中的分解利用有關(guān)[27-28]。而血清ALB、TP和GLU含量則與蛋白質(zhì)營養(yǎng)供應(yīng)狀況和水平密切相關(guān)。在本研究中，血清UN含量在顆粒組和限制采食組中均要高于TMR組，分析原因可能與下面因素相關(guān)：一方面顆粒飼糧飼喂通過增加了干物質(zhì)采食量從而提高了蛋白質(zhì)的攝入量；另一方面顆粒飼糧飼喂可增加反芻動物瘤胃對蛋白質(zhì)的分解和利用。本試驗(yàn)的研究結(jié)果與Karimizadeh等[29]和李博[30]在利用顆粒飼糧在羔羊育肥中的結(jié)果相一致。在試驗(yàn)第8周，顆粒組山羊的這3種指標(biāo)均要高于TMR組，但差異不顯著，表明顆粒飼糧飼喂有利于提高山羊的營養(yǎng)水平，該結(jié)果與劉圈煒等[31]利用全價顆粒飼糧飼喂海南黑山羊中的試驗(yàn)結(jié)果一致。

3.4 不同形式飼糧對白山羊血常規(guī)指標(biāo)的影響

血常規(guī)指標(biāo)主要包括血液中各種細(xì)胞的數(shù)量，可以直觀地反映出動物機(jī)體的健康狀況。研究顯示，不同飼糧的營養(yǎng)水平也會對血常規(guī)指標(biāo)產(chǎn)生影響，如尹福泉等[32]研究不同精粗比飼糧對雷州山羊血常規(guī)指標(biāo)影響時就發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞數(shù)量隨飼糧精料比例的提高顯著降低。本研究中，除了WBC、RBC和HCT在飼喂第2周出現(xiàn)一定波動外，其余時間點(diǎn)3組呈一致變化趨勢，說明在反芻動物飼喂中應(yīng)用顆粒飼糧整體不會對動物產(chǎn)生負(fù)面影響。張士敏等[33]對飼喂全混合顆粒飼料斷奶驢駒研究發(fā)現(xiàn)，不同蛋白質(zhì)水平提高了驢駒RBC、HGB和HCT，增強(qiáng)機(jī)體攜氧能力，其余除WBC外都處于正常范圍。與其結(jié)果相反，本試驗(yàn)中顆粒組的WBC和RBC低于其TMR組，可能與山羊前期為適應(yīng)飼糧，攝入不足而引起的輕微貧血有關(guān)。

3.5 不同形式飼糧對白山羊組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

組織形態(tài)學(xué)觀察中，顆粒飼料未對肝臟產(chǎn)生不利影響，與本研究的肝功能指標(biāo)檢測結(jié)果一致。睪丸和附睪的組織學(xué)觀察表明顆粒飼糧飼喂不影響山羊性腺功能的發(fā)育。小腸絨毛高度與腸道的消化吸收功能呈正相關(guān)。本研究中，顆粒組和顆粒限制組的小腸絨毛較TMR組高，提示顆粒飼料可能更有利于山羊小腸絨毛的發(fā)育，從而促進(jìn)了小腸的吸收能力，提高小腸對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

4 結(jié) 論

顆粒飼糧飼喂對育肥期長江三角洲白山羊增重效果明顯，且不影響動物的激素分泌、生理生化指標(biāo)和血清抗氧化指標(biāo)，這種簡化的飼喂模式對育肥期山羊的健康無不利影響。