張敏 王芳 劉惠娟 石巖 張文斌

【摘 要】 中藥質(zhì)量控制是全面提升其應(yīng)用和發(fā)展的保障。因中藥成分復(fù)雜而必須采用多指標(biāo)成分測(cè)定，才反映其內(nèi)在質(zhì)量的實(shí)際情況。一測(cè)多評(píng)法實(shí)現(xiàn)了采用一個(gè)對(duì)照品同時(shí)測(cè)定中藥及其制劑中多個(gè)成分含量的目的，解決了中藥對(duì)照品昂貴、稀缺等問題，為中藥現(xiàn)代化的步伐逐步加快提供有利的支持。文章詳細(xì)論述一測(cè)多評(píng)法的基本原理，列舉近3年來其在中藥和制劑中的應(yīng)用，研究一測(cè)多評(píng)法的適用情況以及存在的主要問題，為中藥質(zhì)量控制提供參考。

【關(guān)鍵詞】 一測(cè)多評(píng);多組分質(zhì)量控制;中藥

【中圖分類號(hào)】R917 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2021）14-0051-05

Abstract：The quality control of Traditional Chinese medicine is the guarantee to comprehensively improve its application and development.Because of the complex composition of Traditional Chinese medicine， it is necessary to adopt quantitative analysis of multi-components by single-marker to reflect the actual situation of its intrinsic quality.The method of one test and multiple evaluation realizes the purpose of using one control substance to simultaneously determine the content of multi- components in traditional Chinese medicine and its preparation， solves the problems of expensive and scarce traditional Chinese medicine control substance， and provides favorable support for the gradual acceleration of the modernization of traditional Chinese medicine.In this paper， the basic principle of the method is discussed in detail， its application in traditional Chinese medicine and preparation in recent 3 years is listed， the application of the method and the main problems are studied， and the reference is provided for the quality control of traditional Chinese medicine.

Keywords：Quantitative Analysis of Multi-components by Single-marker（QAMS） ; Multi-components Quality Control;Traditional Chinese Medicine

中藥作為我國(guó)流傳千年的傳統(tǒng)藥物，其在中醫(yī)理論指導(dǎo)之下，用于預(yù)防、治療、診斷疾病或調(diào)節(jié)人體機(jī)能，是在我國(guó)勞動(dòng)人民長(zhǎng)期與疾病作斗爭(zhēng)的過程中發(fā)展起來的。中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)是中藥現(xiàn)代化的基礎(chǔ)，與單一指標(biāo)相比，多指標(biāo)的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式更符合中藥多成分、多功效的特點(diǎn)[1]。但中藥對(duì)照品由于其本身化學(xué)性質(zhì)、分離難度而導(dǎo)致的高價(jià)等因素，始終處于一個(gè)無法大批量、穩(wěn)定、廉價(jià)供應(yīng)的狀態(tài)。使得多指標(biāo)成分分析受到一定限制。2006年，王智民等[2]首次提出一測(cè)多評(píng)法（Quantitative analysis of multi-components by single-marker QAMS），論證其基本原理，同時(shí)通過對(duì)木通藥材的檢測(cè)，實(shí)踐證實(shí)了一測(cè)多評(píng)法在中藥檢測(cè)領(lǐng)域有優(yōu)良表現(xiàn)。隨后，以《中國(guó)藥典》2010 年版為代表的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)確立了“從單指標(biāo)向多指標(biāo)、從指標(biāo)性成分向藥效成分控制”的發(fā)展方向[3]。2015版《中國(guó)藥典》新增8個(gè)藥材使用一測(cè)多評(píng)法進(jìn)行質(zhì)量分析[4]。隨著發(fā)展，一測(cè)多評(píng)法在中藥檢測(cè)上的研究應(yīng)用仍舊不斷被發(fā)掘出新的應(yīng)用，說明該種方法是中藥現(xiàn)代化進(jìn)步中一個(gè)不可或缺的研究方向。

1 一測(cè)多評(píng)法的基本原理

一測(cè)多評(píng)法的基本原理為，在一定的線性范圍內(nèi)，其組分量（質(zhì)量或者濃度），與檢測(cè)器的響應(yīng)值成正比。在多指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)中，設(shè)置一種穩(wěn)定且廉價(jià)易得的對(duì)照品作為內(nèi)標(biāo)參照物，同時(shí)建立其與其他待測(cè)組之間的相對(duì)校正因子（f），通過即可計(jì)算其他組分含有量[2]，具體如圖1所示。

假設(shè)有個(gè)待測(cè)組分。第1步，選取1～2種組分為內(nèi)標(biāo)參照物，利用公式f=（As/Cs）/（Ai/Ci）計(jì)算其他組分的相對(duì)校正因子f。其中，As為內(nèi)標(biāo)參照物的峰面積，Cs為內(nèi)標(biāo)參照物的濃度，Ai為被測(cè)對(duì)照品的峰面積，Ci為被測(cè)物的濃度。第2步，根據(jù)供試品中測(cè)得的各組分峰面積，求取待測(cè)組分的濃度Cx=f×AxAs′×Cs′，其中，f為第1步中求得的相對(duì)校正因子，Ax為供試品待測(cè)組分峰面積，As′為供試品中內(nèi)標(biāo)參照物的峰面積，為供試品中按照常規(guī)方法測(cè)得的內(nèi)標(biāo)物濃度。

2 一測(cè)多評(píng)法在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用

2.1 一測(cè)多評(píng)法在單一藥材及飲片中的應(yīng)用 自從一測(cè)多評(píng)法提出以來，在多種中藥材及其飲片的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究中都得到了充分的應(yīng)用。表1列出了近3年一測(cè)多評(píng)法在中藥材及其飲片中的的應(yīng)用情況，由表1可以看出，其應(yīng)用多見于同類成分的測(cè)定。同類成分，紫外吸收相近，有利于檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇。測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，體現(xiàn)一測(cè)多評(píng)法的優(yōu)勢(shì)[5]。

2.2 一測(cè)多評(píng)在成方制劑中的應(yīng)用 中藥制劑，相對(duì)于單味藥材和飲片來說，成分更為復(fù)雜。在2015版《中國(guó)藥典》中已經(jīng)收錄了銀杏葉滴丸、銀杏葉膠囊、以及咳特靈膠囊的一測(cè)多評(píng)法應(yīng)用方法。近年來，QAMS在中藥制劑的質(zhì)量分析的應(yīng)用迅速增加。表2列出來近3年的應(yīng)用實(shí)例。

3 一測(cè)多評(píng)法在中藥質(zhì)量控制中的主要問題

3.1 相對(duì)校正因子的測(cè)定 相對(duì)校正因子的準(zhǔn)確與否，直接影響含量測(cè)定結(jié)果。目前，常見的測(cè)定方法為多點(diǎn)校正和斜率法。多點(diǎn)矯正法適用于濃度值在一定范圍內(nèi)的成分分析[5]，其應(yīng)用更加廣泛[32]。斜率法是基于標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行，結(jié)果相對(duì)比較準(zhǔn)確。

在使用一測(cè)多評(píng)法進(jìn)行中藥質(zhì)量控制中，相對(duì)校正因子受測(cè)試條件的影響較大。不同實(shí)驗(yàn)室，不同儀器和色譜柱、不同的PH值、柱溫和檢測(cè)波長(zhǎng)的變動(dòng)等均會(huì)引起值的改變。因此，在進(jìn)行一測(cè)多評(píng)對(duì)中藥進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，需要充分考慮實(shí)際實(shí)驗(yàn)因素對(duì)相對(duì)校正因子的影響，對(duì)導(dǎo)致其產(chǎn)生較大波動(dòng)的因素進(jìn)行限定，以保證最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有可重現(xiàn)性。

3.2 色譜峰的定位 在使用一測(cè)多評(píng)法時(shí)，供試品的測(cè)試中只有內(nèi)標(biāo)參照物使用對(duì)照品，其余成分不設(shè)置對(duì)照品。因此，如何對(duì)待測(cè)成分的目標(biāo)峰進(jìn)行定位是目前一測(cè)多評(píng)法存在的關(guān)鍵問題之一。常見的方法有時(shí)間差法和相對(duì)保留時(shí)間法。時(shí)間差法，據(jù)報(bào)道在不同的儀器和色譜柱上，會(huì)有較大的波動(dòng)[33]。而相對(duì)保留時(shí)間法，應(yīng)用比較廣泛。其原理是先利用各自對(duì)照品的保留時(shí)間，計(jì)算出相對(duì)保留時(shí)間（為相對(duì)保留時(shí)間，為內(nèi)參物對(duì)照品峰保留時(shí)間，為待測(cè)組分對(duì)照品峰保留時(shí)間），后在供試品中根據(jù)確定待測(cè)組分的位置。如圖2所示，峰5（內(nèi)標(biāo)參照物）的保留時(shí)間為24.33min，峰1的R為0.81，即供試品中相對(duì)保留時(shí)間為0.81的色譜峰就定位為成分1。其他成分依法確定。本方法適用于定位與參照物性質(zhì)類似的成分。如果結(jié)構(gòu)相差較大，誤差較大。同時(shí)，還可結(jié)合待測(cè)峰形狀、紫外光譜信息以及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)給出的質(zhì)譜信息等進(jìn)行相關(guān)輔助確認(rèn)。如仍舊不能定位，可以采用待測(cè)成分中藥對(duì)照提取物定位。

4 小結(jié)與展望

對(duì)于目前的中藥現(xiàn)代化研究來說，所面臨的問題之一即是化學(xué)對(duì)照品與質(zhì)量檢測(cè)需求之間的矛盾，而一測(cè)多評(píng)法的出現(xiàn)，能夠顯著降低檢測(cè)成本，取得了方便、廉價(jià)、穩(wěn)定的效果。因此，雖然一測(cè)多評(píng)法在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中尚存在不少問題，依然是中藥現(xiàn)代化一個(gè)重要的前進(jìn)方向，其對(duì)于中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制的闡明、中藥新藥研究和開發(fā)具有重要意義。

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（收稿日期：2020-12-29 編輯：程鵬飛）