陳 杭，趙航軻，馬 薇，劉良珍，羊玉蓉，唐 瑤，降初拉爾布，唐明先

（甘孜州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，四川 康定 626000）

白肉靈芝（Ganoderma leucocontextum T.H.Li et al.）發(fā)現(xiàn)于中國西藏，分布于西藏、四川、云南等高海拔地區(qū)，在當(dāng)?shù)乇环Q為藏靈芝、藏白靈芝或白靈芝[1-2]。藏靈芝是青藏高原四大名貴特色中藏藥材之一，與冬蟲夏草、川貝母、藏紅花齊名。據(jù)藏醫(yī)學(xué)經(jīng)典《晶珠本草》記載，藏靈芝性溫，味苦，為補益強身之藥，具有抗缺氧、補氣安神、補肺益腎、止咳平喘、扶正培本、延年益壽等功效[3]。藏靈芝含有多種功能活性成分，據(jù)熊衛(wèi)萍[4]報道，白肉靈芝中抗腫瘤活性化合物有22種，降血糖活性化合物6種，降血脂活性化合物18種，其中新結(jié)構(gòu)靈芝三萜化合物16種，三萜類化合物GL22能顯著抑制肝癌細(xì)胞的活性，開發(fā)前景廣闊。

康定靈芝是甘孜州農(nóng)科所從本地野生藏靈芝中馴化選育出的一個白肉靈芝新品種，經(jīng)廣東省微生物研究所鑒定，其分類學(xué)上屬于白肉靈芝[5]。近年來，由于藏靈芝的價值逐漸被市場所認(rèn)知，甘孜州野生藏靈芝資源被過度開采而產(chǎn)量銳減，市場價格持續(xù)攀升。在此背景下，菇農(nóng)對栽培康定靈芝的積極性越來越高。但由于甘孜州地處青藏高原高山峽谷區(qū)，海拔落差大，氣候多變，栽培海拔的差異有可能影響康定靈芝的性狀特征。因此，通過初步研究海拔對栽培的康定靈芝性狀的影響，旨在為康定靈芝的生產(chǎn)推廣和后續(xù)試驗研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌種

康定靈芝，保藏于甘孜藏族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所。

1.1.2 段木材料

厚皮青杠，學(xué)名栓皮櫟（Quercus variabilis），又稱耳棒，落葉時砍伐，購于當(dāng)?shù)剞r(nóng)戶。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗點選擇

大渡河流域耕地主要集中在沿河河谷和河谷半高山區(qū)域，因此試驗選擇了這兩個具有代表性的區(qū)域開展康定靈芝栽培研究。

試驗點Ⅰ：瀘定縣杵坭鄉(xiāng)金華村（海拔1 250 m），地處大渡河沿河干熱河谷地帶，光照充足，氣溫偏高，降雨較少。試驗點Ⅱ：瀘定縣田壩鄉(xiāng)上松村（海拔1 850 m）。地處大渡河沿河半高山，光照充足，氣溫較低，降雨較多。

1.2.2 試驗方法

1） 栽培方法

采用短段木熟料栽培[6]，將直徑8 cm～12 cm的段木青杠，截斷成長18 cm～20 cm的木段，經(jīng)高壓滅菌冷卻后進行康定靈芝接種，接種季節(jié)一般為11月中下旬到次年1月下旬。靈芝菌絲培養(yǎng)結(jié)束后在次年4月～5月播種，播種時畦床寬100 cm，走道寬40 cm，畦床上菌棒行距15 cm～20 cm。播種后覆蓋薄土1 cm～2 cm，后續(xù)進入養(yǎng)菌和出菇管理，待靈芝金邊消失成熟后，進行性狀調(diào)查和檢測分析。

2） 性狀調(diào)查

康定靈芝成熟后，在試驗點Ⅰ和試驗點Ⅱ分別進行隨機抽樣計數(shù)，每個試驗點隨機選擇3個點，每點面積2 m2，統(tǒng)計自然出芝密度和靈芝單株重量和產(chǎn)量，在此基礎(chǔ)上，再在每個抽樣點中隨機挑選10株靈芝，對菌蓋大小、菌柄長度進行測量，計算菌蓋直徑/菌柄長度比值[7]。

3） 功能成分檢測

依據(jù)《中國藥典》2015版“靈芝”部分的測定方法[8]，對各試驗點康定靈芝主要功能成分靈芝多糖、三萜及甾醇含量進行測定。

4） 數(shù)據(jù)處理

采用軟件PASW Statistics 18進行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 栽培海拔對康定靈芝子實體大小的影響

試驗點Ⅰ、試驗點Ⅱ栽培的康定靈芝田間生長情況見圖1，子實體大小統(tǒng)計結(jié)果見表1、表2。

表1 不同海拔栽培的康定靈芝子實體大小的比較Tab.1 Comparison of fruiting body size of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different elevations

表2 不同海拔栽培康定靈芝子實體菌蓋直經(jīng)與菌柄長度比值的標(biāo)準(zhǔn)偏差Tab.2 Standard deviation of the ratio of cap diameter to stalk length of fruiting body of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different elevations

圖1 不同海拔大棚栽培的康定靈芝田間生長情況Fig.1 Growth of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different greenhouse elevations

由圖1、表1、表2可知，試驗點Ⅰ、試驗點Ⅱ栽培的康定靈芝子實體菌蓋大小、菌柄長度等性狀表現(xiàn)不同。試驗點Ⅱ康定靈芝子實體菌蓋大小為（10.11±2.03） cm，明顯大于試驗點Ⅰ，但其子實體菌柄長是（4.41±0.94） cm，比試驗點Ⅰ子實體明顯偏短；其次，試驗點Ⅰ、Ⅱ的康定靈芝子實體菌蓋直經(jīng)/菌柄長度比值結(jié)果顯示，試驗點Ⅱ的比值大于試驗點Ⅰ。不同海拔栽培的康定靈芝子實體大小的方差分析見表3。

表3 不同海拔栽培的康定靈芝子實體大小的方差分析Tab.3 Variance analysis of fruiting body size of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different elevations

由表3方差分析結(jié)果顯示，2個處理間F值為106.985，P=0<0.01，表明2個區(qū)域子實體大小存在極顯著差異。

2.2 栽培海拔對康定子實體單株重量和產(chǎn)量的影響

不同海拔栽培的康定靈芝自然出芝密度、單株重量和產(chǎn)量比較結(jié)果見表4，單株重量方差分析見表5。

由表4、表5可知，試驗點Ⅰ和試驗點Ⅱ子實體單株重量差異明顯，試驗點Ⅰ子實體平均單株重量為9.71 g，小于試驗點Ⅱ的子實體平均單株重量34.4 g。試驗處理間F值為 42.163，P=0.003＜0.01，表明2個區(qū)域子實體單株重量存在極顯著差異。試驗點Ⅱ的子實體產(chǎn)量為685 g·m-2，高于試驗點Ⅰ的子實體產(chǎn)量。

表4 不同海拔栽培康定靈芝的子實體單株重量和產(chǎn)量的比較Tab.4 Comparison of fruiting weight and yield per plant of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different elevations

表5 不同海拔栽培康定靈芝單株重量差異的方差分析Tab.5 Variance analysis of individual plant weight difference of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different altitude

2.3 不同海拔栽培對康定靈芝主要功能成分含量的影響

不同海拔栽培的康定靈芝的主要功能成分差異見表6。

表6 不同海拔栽培的康定靈芝主要功能成分的差異Tab.6 The difference of main functional components of Kangding Ganoderma leucocontextum cultivated at different altitude

由表6可知，試驗點Ⅰ、試驗點Ⅱ栽培的康定靈芝的主要功能成分靈芝多糖、三萜及甾醇含量均大大超過《中國藥典》（2015版）靈芝章節(jié)的要求，其中試驗點Ⅱ檢測出的三萜及甾醇含量達1.68%，是2015版《中國藥典》靈芝三萜含量要求（≥0.5%） 的3.36倍，且試驗點Ⅱ產(chǎn)出的康定靈芝多糖、三萜及甾醇含量比試驗點Ⅰ分別增加21.5%和20.0%，功能成分含量差異明顯。

3 結(jié)論

在大渡河流域沿河河谷和河谷半高山2個不同海拔區(qū)域栽培康定靈芝。結(jié)果顯示，試驗點Ⅰ、試驗點Ⅱ栽培出的康定靈芝子實體菌蓋直徑與菌柄長度比值有明顯差異；子實體單株平均重量分別是9.71 g、34.4 g，方差分析顯示，2個試驗點的子實體大小、單株重量差異極顯著；通過測產(chǎn)比較，試驗點Ⅱ的子實體產(chǎn)量為685 g·m-2，明顯高于試驗點Ⅰ的258.33 g·m-2，產(chǎn)量差異明顯；對主要功能成分含量檢測分析發(fā)現(xiàn)，試驗點Ⅰ和試驗點Ⅱ子實體所含靈芝多糖、三萜及甾醇含量均遠(yuǎn)超《中國藥典》（2015版）的要求，其中試驗點Ⅱ子實體靈芝多糖、三萜及甾醇含量達1.58%、1.68%，是藥典規(guī)定含量的1.76倍和3.36倍，比試驗點Ⅰ分別增高21.5%和20.0%。綜上結(jié)果顯示，康定靈芝在半高山試驗點Ⅱ栽培性狀表現(xiàn)優(yōu)于沿河河谷試驗點Ⅰ。造成差異的可能原因有：康定靈芝本身屬于高原靈芝品種，海拔過低會影響其生長特性。甘孜州屬于青藏高原季風(fēng)型氣候，季風(fēng)環(huán)流是影響氣候的基本因素，地形的不均一破壞了氣候的緯度地帶性分布規(guī)律，氣候類型多，綜合差異大，垂直分布清晰，由河谷到極高山依次呈現(xiàn)河谷亞熱帶、山地暖溫帶、山地涼溫帶、高山亞寒帶等。本試驗的試驗點分布在大渡河流域海拔1 250 m的沿河河谷和海拔1 850 m的河谷半高山，海拔差異導(dǎo)致降水、溫度等氣候差異，從而影響靈芝生長性狀[9]；不同試驗點土壤母質(zhì)、氣溫和光照差異，有可能影響靈芝多糖、三萜含量變化。由于僅進行了2個主要區(qū)域的栽培試驗，海拔跨度較大，研究具有一定局限性，后續(xù)將進一步細(xì)化試驗海拔梯度，對子實體和孢子粉產(chǎn)量和品質(zhì)進一步研究，為規(guī)劃高品質(zhì)栽培區(qū)和指導(dǎo)農(nóng)戶生產(chǎn)服務(wù)。