梁魁景，于占晶，侯曉杰

（衡水學(xué)院生命科學(xué)系 河北衡水 053000）

當(dāng)前市場(chǎng)上，防治蘋果斑點(diǎn)落葉病的藥品種類較多[1]。有鄭曉蓮等報(bào)道的10%世高對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病有很好的防效[2]。林忠敏等報(bào)道了70%安泰生對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病有較好的控制作用[3]。崔琳霞等報(bào)道，3%多抗霉素AS對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病防治有較好的效果[4]。金立平等報(bào)道50%醚菌酯WP防治蘋果斑點(diǎn)落葉病有較好的防效，防效達(dá)到92.77%[5]。曲健祿等報(bào)道，43%戊唑醇SC對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病及輪紋病有較好防治效果[6]。李云國等報(bào)道，80%代森錳鋅WP用于防治蘋果斑點(diǎn)落葉病有一定的效果，防效隨使用劑量的增加而有所提高[7]。吳玉星等通過試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，50%異菌脲SC、10%多抗霉素WP和10%苯醚甲環(huán)唑WG對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病均具有較好的抑制作用，抑制率達(dá)到90%以上[8]。

目前防治蘋果斑點(diǎn)落葉病的藥品雜亂無章，用藥選擇是多了，但很多藥品都缺乏藥效評(píng)價(jià)，果農(nóng)也就無從下手、不知所措。這就要求我們做更多的室內(nèi)試驗(yàn)和田間試驗(yàn)，對(duì)目前生產(chǎn)上的藥劑做出客觀評(píng)價(jià)，并為果農(nóng)推薦出首選藥劑，這是目前蘋果早期落葉病防治工作中亟待解決的問題。本研究收集衡水地區(qū)農(nóng)藥市場(chǎng)銷售的常見的5種防治蘋果斑點(diǎn)落葉病的化學(xué)藥劑對(duì)其進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，以期獲得對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病有較好拮抗作用的化學(xué)藥劑為進(jìn)一步的田間防治提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試藥劑 本試驗(yàn)選用45%代森銨、3%多抗霉素、10%苯醚甲環(huán)唑、3%苦參堿和80%代森錳鋅5種藥劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定，具體藥劑、劑型、廠家信息見表1。

表1 供試藥劑名稱、劑型、廠家信息

1.3 供試培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基。

1.4 試驗(yàn)方法 菌絲生長速率法：將供試藥劑稀釋成不同濃度的溶液，在無菌條件下，吸取1 mL藥液加入到冷卻至40～50℃的99 mL滅菌培養(yǎng)基中，充分搖勻，倒入培養(yǎng)皿中，制成相應(yīng)濃度的含藥平板，以不含藥劑的處理做空白對(duì)照。每個(gè)處理重復(fù)4次。凝固后，將培養(yǎng)好的病原菌用6 mm的滅菌打孔器自菌落邊緣切取菌餅，用接種針將菌餅接種于平板中央，菌絲面朝上，于25℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，待對(duì)照的菌落長到全皿時(shí)，用十字交叉法測(cè)量各處理菌落直徑。以濃度對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，抑制幾率值（由抑制百分率換算）為縱坐標(biāo)，做回歸直線，求出毒力回歸方程，根據(jù)最小二乘法計(jì)算出有效中濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)r。

1.5 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)處理利用Excel軟件，毒力回歸方程、EC50值和相關(guān)系數(shù)r由DPS軟件分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病菌絲生長的影響

如表2所示，蘋果斑點(diǎn)落葉病原菌在PDA含藥培養(yǎng)基平板上菌絲生長均受到不同程度的抑制，接菌6 d后從菌絲平均生長量來看，10%的苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果最好，最適藥劑濃度為1 000 mg/L，其平均菌落生長量為5.90 mm；其次為3%多抗霉素，藥劑濃度為1 000 mg/L，其平均菌落生長量為9.90 mm；45%代森銨抑菌效果最差，藥劑濃度為1 000 mg/L，其平均菌落生長量為33.8 mm。從菌絲抑制生長率的大小來看，5種藥劑隨著其濃度的增加，抑菌率也隨著提高。3%多抗霉素和10%苯醚甲環(huán)唑的抑制率明顯高于其他3種供試殺菌劑。其中10%苯醚甲環(huán)唑藥劑在濃度為1 000 mg/L時(shí)，抑制率達(dá)到91.99；3%多抗霉素藥劑在濃度為1 000 mg/L時(shí)，抑制率為87.80；45%代森銨藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病原菌菌絲生長抑菌作用最小，在濃度達(dá)到1 000 mg/L時(shí)抑制率僅為56.38。

表2 5種藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病病菌菌絲生長影響

2.2 不同藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病菌絲的室內(nèi)毒力測(cè)定 藥劑EC50的數(shù)值是衡量藥劑抑制病原菌強(qiáng)度大小的重要指標(biāo)[16]，EC50的數(shù)值越小也就表示藥劑的毒力越強(qiáng)。室內(nèi)毒力測(cè)定得出5種藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病原菌抑制的EC50數(shù)值如表3所示，每種藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病菌都有明顯的抑制效果，其中10%苯醚甲環(huán)唑的抑制作用最好，EC50為197.02；其次為3%多抗霉素，EC50為204.479；抑制效果最差的殺菌劑是45%代森銨，EC50為650.670。5種殺菌劑的相關(guān)系數(shù)在0.907 4～0.993 5，說明殺菌劑對(duì)菌絲生長量的抑制作用與藥劑的濃度呈正相關(guān)。

表3 5種藥劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病菌菌絲的室內(nèi)毒力測(cè)定

3 討論

從室內(nèi)抑菌試驗(yàn)結(jié)果看出，用于本次試驗(yàn)的5種殺菌劑對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病病原菌的生長有著不同程度的影響，且均起到了一定的抑制作用。其中10%苯醚甲環(huán)唑?qū)μO果斑點(diǎn)落葉病菌的毒性最強(qiáng)，EC50為197.020。80%代森錳鋅可濕性粉劑，3%多抗霉素可濕性粉劑和3%苦參堿抑制效果較好，45%代森銨抑制效果最差。

本研究結(jié)果與鄭曉蓮等報(bào)道的10%世高（苯醚甲環(huán)唑）對(duì)蘋果斑點(diǎn)落葉病有較好防效，測(cè)定結(jié)果基本一致。本次試驗(yàn)主要是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定的抑菌活性，在田間使用上的作用效果可能還有差別，田間的影響因素較多，如溫度、風(fēng)速等環(huán)境影響，所以有待作進(jìn)一步田間的防治效果試驗(yàn)。