候春霞，孟夢，郭利彩

(鶴壁市京立醫(yī)院 檢驗科，河南 鶴壁 458030)

感染性腹瀉是一種廣泛流行的傳染性腸道疾病，發(fā)生率較高，可導(dǎo)致免疫功能低下、營養(yǎng)不良、發(fā)育及生長障礙，是兒童(5 歲以下)重要死亡原因[1]。資料顯示，全球范圍內(nèi)因感染性腹瀉死亡患兒約為380 萬/年，在同齡兒童死亡病因中占比約為30%[2]。因此加強臨床防治工作極為重要。引發(fā)感染性腹瀉的病原體較多，如衣原體、真菌、病毒、細(xì)菌，且不同年齡、生活習(xí)慣、地區(qū)、季節(jié)患兒腸道菌群、病原菌譜亦有明顯差異，從而會增加防治難度[3]。故積極探討感染性腹瀉患兒病原菌構(gòu)成及耐藥性變遷狀況顯得尤為關(guān)鍵。本研究回顧性選取鶴壁市京立醫(yī)院感染性腹瀉患兒150例，通過分析其糞便中病原菌構(gòu)成及抗菌藥耐藥性，旨在為臨床科學(xué)使用抗菌藥提供理論依據(jù)。報告如下。

1 資料和方法

1.1 研究對象

選取2019年1月至2020年1月本院150例感染性腹瀉患兒進行回顧性研究，其中65例女，85例男，年齡8 個月～7 歲，平均(3.65±1.29)歲，病程1 ～5 d，平均(2.74±0.59) d，體質(zhì)量指數(shù)(BMI)18 ～22 kg/m2，平均(20.24±0.68) kg/m2。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《兒童急性感染性腹瀉病診療規(guī)范》[4]中感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)；排便頻率增加，≥2 次/d，且大便性狀改變，可見水樣便、稀便、血便或膿血便；伴有肛門不適、排便急迫、大便失禁癥狀；患兒病案、糞便細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)、藥敏試驗、實驗室檢查結(jié)果完整。

排除標(biāo)準(zhǔn)：病毒性腹瀉、過敏性腹瀉、寄生蟲性腹瀉、生理性腹瀉；心、腎、肝、肺等嚴(yán)重器質(zhì)性病變；免疫系統(tǒng)疾病、先天性疾病；伴有其他感染或入組前抗感染治療史。

1.2 方法

試劑、儀器：全自動微生物分析儀( 法國生物梅里埃，Vitek 2 Compact)；基質(zhì)輔助激光解吸飛行時間質(zhì)譜儀(德國Bruker 公司，MALDI-TOF MS)；SS 瓊脂平板、血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、TCBS 瓊脂平板由英國OXOID 公司提供；堿性蛋白胨購自青島海博生物技術(shù)公司：質(zhì)控菌株：銅綠假單胞菌ATCC 27853、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922。

細(xì)菌分離、鑒定：取糞便標(biāo)本，接種至TCBS 瓊脂平板、血瓊脂平板、麥康凱培養(yǎng)基、SS 瓊脂平板、堿性蛋白胨，培養(yǎng)18 ～24 h(35℃)，以全自動微生物分析儀、配套試劑盒及藥敏綜合反應(yīng)板行菌株鑒定、藥敏試驗。

藥敏試驗：以K-B 法實施藥敏試驗，采用多種抗菌藥對不同病原菌實施藥敏分析，根據(jù)CLSI( 美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化研究所) 標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，并出具報告。

1.3 觀察指標(biāo)

(1) 分析病原菌分布情況。(2) 主要革蘭陰性菌耐藥性：包括B 群福氏志賀菌、鼠傷寒沙門菌、植生克雷伯菌、檸檬酸桿菌。(3)主要革蘭陽性菌耐藥性：包括屎腸球菌、糞腸球菌、鉛黃腸球菌。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布

150例患兒糞便標(biāo)本中共分離出132 株病原菌，其中83 株革蘭陰性菌，占比為62.88%；39 株革蘭陽性菌，占比為29.55%；10 株真菌，占比為7.58%。見表1。

表1 病原菌分布

2.2 主要革蘭陰性菌耐藥性

B 群福氏志賀菌對環(huán)丙沙星、氨芐西林耐藥率高于80.00%，對亞胺培南無耐藥性；鼠傷寒沙門菌對氨芐西林、哌拉西林耐藥率高達(dá)100.00%，對慶大霉素、氨芐西林- 舒巴坦、亞胺培南耐藥率較低，均為11.11%；植生克雷伯菌對慶大霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、哌拉西林、氨芐西林耐藥率為100.00%，對亞胺培南耐藥率為0.00%；檸檬酸桿菌對環(huán)丙沙星、復(fù)方磺胺甲噁唑、哌拉西林、氨芐西林耐藥率在70.00%以上，對頭孢曲松、氨芐西林—舒巴坦、亞胺培南耐藥率較低。見表2。

表2 主要革蘭陰性菌耐藥性

2.3 主要革蘭陽性菌耐藥性

鉛黃腸球菌對氨芐西林、青霉素、慶大霉素、羅米沙星、環(huán)丙沙星、紅霉素耐藥率高于60%，屎腸球菌對氨芐西林、青霉素、慶大霉素、羅米沙星、紅霉素耐藥率大于70%，而糞腸球菌對紅霉素耐藥率較高，為90.91%；但三者對利奈唑胺、萬古霉素耐藥率較低。見表3。

表3 主要革蘭陽性菌耐藥性

3 討 論

感染性腹瀉為兒科多發(fā)疾病，常見于6 個月～3 歲幼兒，發(fā)生率僅次于呼吸道疾病[5]。由于幼兒消化系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，防御能力較弱，極易引發(fā)嘔吐、腹瀉，若未及時控制，可導(dǎo)致水電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂，甚至可誘發(fā)休克，嚴(yán)重危害兒童生長發(fā)育及生命健康。故強化腹瀉防治十分關(guān)鍵。

感染性腹瀉病原菌菌譜較廣，且隨時間推移病原菌譜會逐漸變遷。故加強病原菌菌譜監(jiān)測有重要作用。胡玲等[6]研究指出，革蘭陰性菌是感染性腹瀉主要致病菌，構(gòu)成比為86.89%，其中排名前3 位分別為沙門菌屬(31.15%)、志賀菌屬(24.59%)、弧菌屬(18.03%)。本研究顯示，150例感染性腹瀉患兒糞便標(biāo)本中共分離出132 株病原菌，包括83 株(62.88%) 革蘭陰性菌、39株(29.55%) 革蘭陽性菌，10 株(7.58%) 真菌，其中前2 位致病菌分別是B 群福氏志賀菌(24.24%)、屎腸球菌(11.36%)，與上述研究不同。分析原因可能與不同地區(qū)、不同時間、不同醫(yī)療機構(gòu)感染防治差異有關(guān)。因此臨床需積極監(jiān)測本地區(qū)感染性腹瀉病原菌菌譜變遷，以進行針對性防治。

抗菌藥物是感染性腹瀉有效治療手段，但若未合理使用可增加致病菌耐藥性，加大治療難度。另外臨床實踐表明，抗菌藥使用與病原菌實際構(gòu)成、藥敏試驗結(jié)果差異越大，效果越差，不僅影響病情控制，且不利于患兒營養(yǎng)吸收及正常發(fā)育[7-8]。故明確病原菌構(gòu)成同時，還需根據(jù)藥敏試驗結(jié)果用藥，以提高療效。

本研究發(fā)現(xiàn)，主要革蘭陰性菌對哌拉西林、氨芐西林耐藥率較高，對氨芐西林—舒巴坦、亞胺培南耐藥率較低，而主要革蘭陽性菌對慶大霉素、氯霉素、羅米沙星、紅霉素耐藥率較高，對利奈唑胺、萬古霉素耐藥率較低，提示哌拉西林、氨芐西林、慶大霉素、氯霉素、羅米沙星、紅霉素不宜作為感染性腹瀉首選治療藥物，而針對B 群福氏志賀菌、鼠傷寒沙門菌、植生克雷伯菌、檸檬酸桿菌感染宜采用氨芐西林—舒巴坦、亞胺培南治療，針對鉛黃腸球菌、屎腸球菌、糞腸球菌感染宜選擇利奈唑胺、萬古霉素治療。另外本研究后續(xù)未分析采用利奈唑胺、萬古霉素、亞胺培南等高效敏感抗菌藥的應(yīng)用效果，仍有不足之處，尚需進一步研究。

綜上所述，感染性腹瀉患兒致病菌種類繁多，且各致病菌耐藥性不同，故臨床需積極監(jiān)測病菌均分布及抗菌藥耐藥性，以合理使用抗菌藥，增強疾病防治效果。