陳躬國，阮海東，趙光輝，鄭英姿，吳漢瓊，林 原，郭德章*

(1.福州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，福建 福州 350018；2.福州市經(jīng)濟作物技術(shù)站，福建 福州 350002)

肺形側(cè)耳[Pleurotuspulmonarius(Fr.) Quél.]商品名為秀珍菇，隸屬于擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)傘菌目(Agaricales)側(cè)耳科(Pleurotaceae)側(cè)耳屬(Pleurotus)[1]。該菌富含多種蛋白質(zhì)、必需氨基酸、多糖、重要礦物質(zhì)和一些維生素，不僅營養(yǎng)價值高，而且還具有抗氧化活性[2]、降低血糖水平[3]、輔助腫瘤化療[4]等藥理作用。目前，肺形側(cè)耳主栽品種仍是多年前從中國臺灣省引進的系列品種，有的品種經(jīng)多年組織擴繁后退化、老化，出現(xiàn)了產(chǎn)量、品質(zhì)和抗病性的不穩(wěn)定。因此，對肺形側(cè)耳菌株生長、子實體性狀和產(chǎn)量等進行綜合評價，篩選出適合本地區(qū)栽培的肺形側(cè)耳菌株，對整個產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展具有重要意義?；疑P(guān)聯(lián)分析(Grey Relational Analysis，GRA)是通過確定參考數(shù)列和比較數(shù)列的幾何形狀相似程度來判斷其聯(lián)系是否緊密，它反映了曲線(數(shù)列)間的關(guān)聯(lián)程度[5]。傳統(tǒng)的作物品種評價方法一般是以產(chǎn)量因素進行單項比較，但只有結(jié)合品質(zhì)、抗病性等其他性狀指標(biāo)做綜合評價，結(jié)果才更具實際意義。近年來，灰色關(guān)聯(lián)分析已在水稻、小麥、棉花和玉米等[6-13]作物新品種的選育及綜合評價中廣泛應(yīng)用，取得了較好的效果。在香菇雜交育種研究中，王卓仁[14]和劉啟燕[15]等根據(jù)育種目標(biāo)、栽培方式、市場需求等各性狀的權(quán)重系數(shù)分配，應(yīng)用灰色關(guān)聯(lián)度分析法對雜交子的各種重要性狀進行綜合定量評價，結(jié)果顯示：灰色關(guān)聯(lián)度分析法排列出的雜交菌株的綜合性狀序列與預(yù)期估測比較吻合，并篩選出綜合性狀優(yōu)良的雜交菌株。樊曉琳等[16]應(yīng)用灰色關(guān)聯(lián)度分析法對采用不同方法分離的雙孢蘑菇As2796菌株進行了綜合評價，篩選出綜合性狀優(yōu)于As2796退化菌株的提純復(fù)壯菌株?；疑P(guān)聯(lián)分析法也應(yīng)用于栽培基質(zhì)配方的篩選，楊士峰等[17]以檸條屑為栽培原材料，部分替代櫟木屑進行香菇秋季栽培試驗，采用灰色關(guān)聯(lián)度分析對供試配方的多個農(nóng)藝和品質(zhì)性狀進行綜合評價，篩選出了最佳配方。

目前，對食用菌品種的評價產(chǎn)大多采用經(jīng)驗直觀分析或依靠產(chǎn)量等單一性狀的方差分析方法進行比較，灰色關(guān)聯(lián)分析方法在食用菌育種和品種評價研究上的應(yīng)用尚少，在對肺形側(cè)耳多個性狀的綜合評價和分析上應(yīng)用還未見報道。本研究采用灰色關(guān)聯(lián)分析法對肺形側(cè)耳菌株的多個重要性狀進行綜合評價與分析，以期為科學(xué)評價和合理利用肺形側(cè)耳種質(zhì)資源，篩選出適合本地區(qū)栽培的優(yōu)良菌株提供更科學(xué)的參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

肺形側(cè)耳供試菌株共16個(表1)，主要引自國內(nèi)科研單位和主產(chǎn)區(qū)栽培企業(yè)，由福建省福州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所食用菌研究室保藏。

1.2 栽培出菇

選用17 cm×33 cm聚乙烯塑料袋，按照栽培培養(yǎng)基配方(雜木屑58%、棉籽殼20%、麩皮20%、石灰1%、石膏1%、培養(yǎng)料含水量62%)將培養(yǎng)料拌勻后裝入塑料袋，每袋裝干料約400 g，常壓滅菌、接種，(24±1) ℃培養(yǎng)至菌絲長滿袋。待肺形側(cè)耳菌絲長滿菌袋，生理成熟后便移入出菇房統(tǒng)一進行出菇管理，出菇管理均按常規(guī)方法進行。測定肺形側(cè)耳各菌株的滿袋天數(shù)、原基發(fā)生天數(shù)、子實體性狀、產(chǎn)量等指標(biāo)。栽培試驗采用隨機區(qū)組設(shè)計，每個菌株設(shè)3次重復(fù)，每個重復(fù)50袋。

1.3 灰色關(guān)聯(lián)分析

表2 肺形側(cè)耳參考菌株的性狀值與權(quán)重系數(shù)

1.3.3 計算關(guān)聯(lián)系數(shù)和關(guān)聯(lián)度 根據(jù)下列公式計算供試肺形側(cè)耳菌株的關(guān)聯(lián)系數(shù)：

ξi(k)=

根據(jù)肺形側(cè)耳菌株選育重要性的不同，賦予不同性狀相應(yīng)的權(quán)重系數(shù)Wk，計算加權(quán)關(guān)聯(lián)系數(shù)。按下式分別計算等權(quán)關(guān)聯(lián)度ri和加權(quán)關(guān)聯(lián)度ri′。

2 結(jié)果與分析

2.1 肺形側(cè)耳菌株主要農(nóng)藝性狀比較

通過對肺形側(cè)耳菌株的農(nóng)藝性狀表現(xiàn)進行相關(guān)分析，由表3可知，各供試菌株滿袋天數(shù)為33.75～38.50 d，其中菌株P(guān)1(秀57)菌絲生長速度最快，平均33.75 d滿袋，其次為菌株P(guān)16(夏秀)和P4(HC810)，P13(秀845)滿袋天數(shù)最長，接種平均38.50 d后菌絲才能長滿菌袋。各菌株原基形成時間為41.08～47.83 d，P13(秀845)最早出現(xiàn)原基，接種41.08 d后開始現(xiàn)蕾；原基形成時間最長的菌株是P5(秀羅源)，平均接種47.83 d后開始現(xiàn)蕾。比較各菌株子實體性狀發(fā)現(xiàn)，P5(秀羅源)的菌蓋最厚，為16.27 mm，菌蓋直徑為41.79 mm，單朵重為7.65 g，朵形較大；而P16(夏秀)菌蓋厚度和菌柄直徑分別為6.84 mm和6.67 mm，單朵重僅為3.97 g，朵形偏小，商品性狀差。對各菌株產(chǎn)量分析比較發(fā)現(xiàn)，菌株P(guān)13(秀珍菇845)產(chǎn)量最高，前三潮袋平均產(chǎn)量為240.56 g，P4(HC810)和P3(秀58)次之，袋平均產(chǎn)量分別為218.33 g和204.44 g；P11(3108)袋平均產(chǎn)量最低，為95.00 g。從表3可以看出，肺形側(cè)耳同一菌株的不同農(nóng)藝性狀表現(xiàn)并不一致，要對這些菌株進行綜合評價，并且進行灰色關(guān)聯(lián)分析。

表3 肺形側(cè)耳供試菌株和參考菌株的農(nóng)藝性狀比較

2.2 原始數(shù)據(jù)的無量綱化處理

由于肺形側(cè)耳菌株內(nèi)各性狀的量綱不一致，需將各性狀值按標(biāo)準(zhǔn)化變換方法轉(zhuǎn)化為無量綱的相對數(shù)，即先分別求出各個性狀值序列的平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差，然后將該序列的各個原始數(shù)據(jù)減去平均數(shù)后再除以標(biāo)準(zhǔn)差后，從而得到一個新的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)列(表4)。其量綱為1，均值為0，標(biāo)準(zhǔn)差為1。

2.3 灰色關(guān)聯(lián)系數(shù)和關(guān)聯(lián)度的計算

表4 肺形側(cè)耳菌株性狀值的標(biāo)準(zhǔn)化變換

表5 供試菌株與參考菌株的關(guān)聯(lián)系數(shù)

按肺形側(cè)耳菌株選育的不同性狀指標(biāo)的相對重要性不同賦予不同權(quán)重系數(shù)Wk(表6)。將已求得的關(guān)聯(lián)系數(shù)值和權(quán)重系數(shù)值Wk分別代入公式，計算得到各供試菌株與參考菌株的關(guān)聯(lián)度，其排序結(jié)果列于表6。

2.4 灰色關(guān)聯(lián)結(jié)果分析

由于參考菌株的各性狀是最優(yōu)性狀的組合，根據(jù)關(guān)聯(lián)度大小及排序結(jié)果，可對供試菌株進行綜合評價。按照灰色系統(tǒng)理論關(guān)聯(lián)分析原則，加權(quán)關(guān)聯(lián)度越大，排序越靠前，說明供試菌株與參考菌株越接近，其綜合性狀越好。

表6 供試菌株與參考菌株關(guān)聯(lián)度及排序

根據(jù)關(guān)聯(lián)度排序結(jié)果，結(jié)合肺形側(cè)耳菌株農(nóng)藝性狀的觀察，篩選出菌株P(guān)5(秀羅源)、P13(秀珍菇845)、P3(秀58)和P4(HC810)等4個綜合性狀優(yōu)良的菌株。菌株P(guān)5(秀羅源)菌蓋肉厚，單朵重為7.65 g，商品性狀好，產(chǎn)量也較高；P13(秀珍菇845)產(chǎn)量高、轉(zhuǎn)潮快、朵形中等。而菌株P(guān)16(夏秀)雖然產(chǎn)量也比較高，但由于其菌蓋厚度和菌柄直徑等子實體性狀的指標(biāo)值也都比較低，單朵重最小，導(dǎo)致其與參考菌株的關(guān)聯(lián)度最小。

3 討論

目前，對食用菌品種的評價，通常是常采用經(jīng)驗直觀分析或是基于產(chǎn)量等某單一性狀的方差分析來進行評價篩選[19]，易忽略其他性狀對品種整體水平的影響，造成評價結(jié)果的偏差?；疑P(guān)聯(lián)度分析法已被廣泛應(yīng)用于農(nóng)作物品種的綜合評價中，利用該方法可對品種的各項性狀指標(biāo)進行綜合定量評價，克服了僅以產(chǎn)量對品種進行評價分析的片面性，使品種的評價更全面、科學(xué)和符合實際[20-21]。灰色關(guān)聯(lián)分析已在香菇[14]、杏鮑菇[22]和木耳[23]等食用菌雜交后代的綜合描述和量化評估工作上成功應(yīng)用，提高了育種的選擇效果。

試驗中肺形側(cè)耳菌株等權(quán)關(guān)聯(lián)度、加權(quán)關(guān)聯(lián)度排序和產(chǎn)量排序不一致，但與各菌株綜合農(nóng)藝性狀實際表現(xiàn)較為吻合，因此應(yīng)用灰色關(guān)聯(lián)分析對肺形側(cè)耳菌株進行綜合評價是可行的，此結(jié)果與鄒永紅[24]、韓永亮[25]等的研究結(jié)果較一致。采用加權(quán)關(guān)聯(lián)度分析法進行菌株的綜合評價，由于不同的育種目標(biāo)所考察的農(nóng)藝性狀指標(biāo)不一定相同，權(quán)重系數(shù)也不相同，不同的權(quán)重確定方法對結(jié)果都有一定的影響。試驗根據(jù)育種目標(biāo)、生產(chǎn)實際等確定肺形側(cè)耳菌株各農(nóng)藝性狀的權(quán)重系數(shù)，等權(quán)關(guān)聯(lián)度和加權(quán)關(guān)聯(lián)度的Spearman秩相關(guān)系數(shù)rs=0.962，達(dá)到極顯著水平，表明等權(quán)和加權(quán)關(guān)聯(lián)度排序高度相關(guān)，說明試驗確定的各農(nóng)藝性狀權(quán)重系數(shù)差異并未對綜合評價結(jié)果造成顯著影響，雙重檢驗保證了綜合評價結(jié)果的可靠性。

本研究根據(jù)不同的育種目標(biāo)、生產(chǎn)實際等確定參考菌株農(nóng)藝性狀值和權(quán)重系數(shù)，應(yīng)用灰色關(guān)聯(lián)分析進行肺形側(cè)耳菌株的綜合評價，對肺形側(cè)耳優(yōu)良品種的選育對篩選具有實際的指導(dǎo)意義。試驗結(jié)果表明，P5(秀羅源)、P13(秀珍菇845)、P3(秀58)和P4(HC810)等4個菌株綜合性狀較好，菌株P(guān)16(夏秀)的綜合性狀表現(xiàn)最差。這與栽培試驗中各菌株的實際表現(xiàn)相吻合，說明采用灰色關(guān)聯(lián)分析法對肺形側(cè)耳菌株進行綜合評價是可行的，且采用此方法可根據(jù)育種目標(biāo)和各性狀的重要性，賦予不同的權(quán)重，使篩選出的肺形側(cè)耳菌株更符合實際需要。