劉 妍，夏志生，孫中超

（上海源耀農(nóng)牧科技有限公司，上海201317）

研究發(fā)現(xiàn)酵母的富集能力最強(qiáng)，且酵母富集金屬離子的研究最為成熟。在一定條件下，將酵母與有機(jī)微量元素共培養(yǎng)，酵母在生長時(shí)可以吸收轉(zhuǎn)化微量金屬離子，在酵母菌菌體內(nèi)金屬離子與小肽、多糖、蛋白質(zhì)相結(jié)合，形成有生物活性的有機(jī)金屬微量元素。無機(jī)微量元素的存在形式與生物體中的微量元素存在形式不同，從而會(huì)對動(dòng)物產(chǎn)生不良作用，刺激腸胃，有機(jī)金屬微量元素與生物體中的微量元素的天然存在形式更加一致，所以動(dòng)物采食后不會(huì)產(chǎn)生刺激作用，更有利于金屬元素的吸收與消化利用[1]。

酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素的一大特點(diǎn)是金屬離子轉(zhuǎn)化率高，較市場上的化工合成有機(jī)微量元素有明顯優(yōu)勢。有機(jī)微量元素高利用率的第一個(gè)前提條件是過胃率高，如果使用的有機(jī)微量元素在胃部全部被解離，其發(fā)揮的作用和無機(jī)微量元素沒有多大區(qū)別。另外，植酸可與金屬離子產(chǎn)生不溶性化合物，降低金屬離子的利用率，纖維素會(huì)與金屬離子發(fā)生配位反應(yīng)，也會(huì)降低金屬離子的利用率，而酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和生物穩(wěn)定性，受這些因素的影響較小，所以更利于動(dòng)物腸道的吸收與利用[2]。

無機(jī)金屬離子的吸收主要靠自由擴(kuò)散或載體參與的主動(dòng)運(yùn)輸，而酵母發(fā)酵微量元素的吸收則不同，因?yàn)榻饘匐x子與小肽、多糖、蛋白質(zhì)相結(jié)合，可以通過胞飲作用進(jìn)行吸收。與傳統(tǒng)的吸收方式相比，這種吸收方式不易飽和而且吸收的更快。酵母發(fā)酵微量元素可以避免吸收過程中金屬離子相互作用發(fā)生化學(xué)反應(yīng)或者在腸壁上競爭載體，從而可提高微量金屬元素的利用率[3]。

無機(jī)微量元素價(jià)格便宜、成本低，但易結(jié)塊，流動(dòng)性差，容易氧化，穩(wěn)定性差，遇水或酸解離率高；消化吸收率低；金屬苦澀味明顯，化學(xué)合成味道明顯，適口性差。比無機(jī)微量元素好一點(diǎn)的金屬離子有蛋白鹽類、小肽鹽類（非有機(jī)），這類金屬離子穩(wěn)定性好，有更多的吸收通道，使用量降低。但過胃解離率高，金屬苦澀味明顯，原料復(fù)雜。酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素使用量低，適口性非常好，無苦澀味，泡水鮮味濃郁，酵母香明顯；環(huán)保且穩(wěn)定性好、有機(jī)轉(zhuǎn)化率高，過胃解離率低、吸收率高；但對微生物要求高、對生產(chǎn)工藝要求高。目前關(guān)于酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素在蛋雞上的應(yīng)用研究較少。因此，本研究通過動(dòng)物飼養(yǎng)試驗(yàn)，系統(tǒng)地評估酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響，以期為飼料廠和養(yǎng)殖廠在選擇和使用該類產(chǎn)品時(shí)提供參考。

1 材 料

1.1 微量元素

無機(jī)微量元素，廣元蜀星飼料礦物元素有限公司產(chǎn)品；酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素，上海源耀生物股份有限公司產(chǎn)品。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀，美國Agilent公司產(chǎn)品產(chǎn)品，同時(shí)蒸餾萃取裝置，北京恒奧德科技有限公司產(chǎn)品，電熱恒溫水浴鍋，寧波新芝生物科技股份有限公司產(chǎn)品，套式恒溫加熱裝置，上海樹立儀器儀表有限公司產(chǎn)品。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

360日齡健康、體重相近海蘭褐商品代蛋雞400只，由江蘇省東臺(tái)市富安鎮(zhèn)養(yǎng)殖戶提供并飼養(yǎng)。

2 方 法

2.1 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素中誘食物質(zhì)的分析

2.1.1 樣品預(yù)處理

取10.0 g酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素加入燒杯中，并加入200 mL水常溫下浸泡30 min。

2.1.2 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素成分的提取

采用同時(shí)蒸餾溶劑萃取法提取酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素中的誘食成分。向燒瓶內(nèi)加入浸泡好的樣品與20 g NaCl混合均勻，然后連接好同蒸裝置，用電熱套對燒瓶進(jìn)行加熱，使其保持微沸。準(zhǔn)確量取60 mL二氯甲烷于萃取瓶中，水浴鍋60℃蒸餾2.5 h，然后加乙酸苯乙酯接冷凝裝置濃縮。

2.1.3 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素成分的分析

取1 mL濃縮后的液體，通過濾膜（孔徑0.22μm）將其注射到色譜瓶中，使用氣相色譜法-質(zhì)譜法聯(lián)用（GC-MS）檢測鑒別酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素中的物質(zhì)，具體參考張俊杰[4]的方法。

2.2 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

2.2.1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧以玉米為主要能量源、以豆粕為主要蛋白源配置，配方參考《海蘭褐殼商品代蛋雞飼養(yǎng)手冊》，基礎(chǔ)日糧中不添加其他形式的金屬微量元素?；A(chǔ)日糧配方見表1，營養(yǎng)水平見表2。

表1 基礎(chǔ)日糧組成（風(fēng)干基礎(chǔ)）%

表2 基礎(chǔ)日糧營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

2.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用360日齡健康海蘭褐商品代蛋雞4 200羽，隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)175只。試驗(yàn)1組為對照組，基礎(chǔ)日糧中添加1.5 kg·t-1無機(jī)微量元素，試驗(yàn)2組基礎(chǔ)日糧中添加1.0 kg·t-1無機(jī)微量元素+0.50 kg·t-1酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素，試驗(yàn)3組基礎(chǔ)日糧中添加0.75 kg·t-1無機(jī)微量元素+0.75 kg·t-1酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素，試驗(yàn)4組基礎(chǔ)日糧中添加1.5 kg·t-1酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素，試驗(yàn)期9周。微量元素的具體添加形式和添加量見表3。

表3 各試驗(yàn)組金屬元素添加情況kg·t-1

2.2.3 指標(biāo)測定

產(chǎn)蛋性能：產(chǎn)蛋率（%）=總產(chǎn)蛋數(shù)/試驗(yàn)蛋雞數(shù)×100%

平均蛋重（g）=每天產(chǎn)蛋總重量/每天產(chǎn)蛋數(shù)

料蛋比=每周飼料用量（kg）/每周收集雞蛋的總重量（kg）

破蛋率（%）=破蛋數(shù)/產(chǎn)蛋總數(shù)×100%

哈夫單位：將雞蛋內(nèi)容物置于玻璃瓶平皿中，用游標(biāo)卡尺測量蛋黃周圍蛋白高度。計(jì)算哈夫單位（HU），HU=100×lg[H+7.57-1.7×(M0.37)]

式中：HU為哈夫單位；H為蛋白高度（mm）；M為雞蛋重量（g）。

蛋黃指數(shù)：分離蛋黃和蛋白，將蛋黃置于玻璃平皿上，使用游標(biāo)卡尺測量蛋黃的高度H和蛋黃的直徑D。計(jì)算蛋黃指數(shù)，蛋黃指數(shù)=H/D。

2.2.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用LSD方法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性比較分析，所有數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”形式表示，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果與分析

3.1 GC-MS分析

酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素經(jīng)GC-MS分析（江南大學(xué)檢測），結(jié)果見圖1，具體物質(zhì)及含量見表4。

圖1 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素GC-MS檢測結(jié)果

表4 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素中誘食物質(zhì)檢測結(jié)果

續(xù)表

酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素中含有28種能夠讓動(dòng)物對采食表現(xiàn)出喜愛和愉悅感的物質(zhì)，其中乙醇、己醛（E）-2-辛烯醛、壬醛、安息香醛、苯乙醇含量較高，這些物質(zhì)對動(dòng)物均有誘食性，可提高動(dòng)物采食量。

3.2 酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響

隨著酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素添加量的提高，蛋雞的產(chǎn)蛋率、平均蛋重也隨之提高，而破蛋率和料蛋比隨之降低，見圖2。哈夫單位和蛋黃指數(shù)見圖3。

圖2 蛋雞產(chǎn)蛋性能指標(biāo)測定結(jié)果

由圖3可知，酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素組雞蛋哈夫單位比對照組高，蛋黃指數(shù)也相對較高，試驗(yàn)組哈夫單位與蛋黃指數(shù)都比對照組高，說明雞蛋品質(zhì)較好。

圖3 雞蛋品質(zhì)測定結(jié)果

4 討 論

必需的微量元素對于生物體的正常運(yùn)轉(zhuǎn)非常重要，例如生長和維持、神經(jīng)調(diào)節(jié)和細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)，因此其缺乏會(huì)帶來巨大的健康風(fēng)險(xiǎn)，并最終導(dǎo)致死亡[5]。缺鋅也會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物食欲降低；皮膚角化不全，嚴(yán)重影響生長[6]。缺銅會(huì)導(dǎo)致生長發(fā)育受阻、有時(shí)也可能引起腹瀉，毛發(fā)色素褪色，骨骼形成受阻、生長受阻、骨關(guān)節(jié)異常、腿關(guān)節(jié)軟弱無力、飛節(jié)松弛、前肢彎曲、雞骨畸形[7]。缺錳導(dǎo)致動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能紊亂。生長發(fā)育受阻、骨骼形成缺陷、繁殖機(jī)能受損。缺碘導(dǎo)致動(dòng)物甲狀腺腫大，生長發(fā)育停滯，皮膚、被毛及性腺發(fā)育不良。缺硒導(dǎo)致的增重緩慢、食欲減退、繁殖能力降低[8]。與傳統(tǒng)無機(jī)微量元素相比，酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素毒副作用小，不會(huì)對對胃腸道產(chǎn)生刺激，而且穩(wěn)定性高，金屬離子有機(jī)轉(zhuǎn)化率高，更易被動(dòng)物吸收，微量元素的利用度更高。酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素對動(dòng)物生長性能的改善已有諸多報(bào)道。楊玉等[9]報(bào)道，添加酵母硒能顯著提高產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋率，蛋雞69周后的產(chǎn)蛋率從71.27%提高到了77%以上（P<0.05）。能顯著緩解老齡化（69周齡以后）蛋雞產(chǎn)蛋性能的下降（P<0.05）。潘清容等[10]研究發(fā)現(xiàn)，富硒、鉻、鋅酵母復(fù)合微量元素可促進(jìn)糖尿病小鼠的糖脂代謝，提高抗氧化能力。王慧等[11]研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加適量酵母鋅（Zn 50 mg·kg-1）可以提高肉雞生長性能，在一定程度上增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能，提高肝臟功能和機(jī)體抗氧化功能。

5 結(jié) 論

不同金屬離子源在蛋雞上應(yīng)用結(jié)果表明，添加酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素能顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、平均蛋重、哈夫單位和蛋黃指數(shù)，顯著降低料蛋比、破蛋率，說明酵母發(fā)酵有機(jī)微量元素使用效果較好。