鄒明 林漢卿 鄧華成 張?zhí)A 袁子龍 徐雄真 徐義洲 覃廷玉* 汪德生 *
1.貴州省思南縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,貴州銅仁 565100
2.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,貴州貴陽(yáng) 550025
貴州白山羊是一個(gè)古老而優(yōu)良的地方山羊品種,1989年被收錄于《中國(guó)羊品種志》,屬哺乳綱(Mammalia)偶蹄目(Artiodactyla)??疲˙ovidae)山羊?qū)伲–apra),主要產(chǎn)于貴州省烏江流域中下游的思南、沿河、務(wù)川等縣。貴州白山羊體型較大、育肥快、抗逆性強(qiáng)、繁殖力強(qiáng)、板皮質(zhì)量好,羊肉肉質(zhì)細(xì)嫩、膻味輕、蛋白質(zhì)含量高、脂肪含量低,屬皮肉兼用型羊品種,1997 年被貴州省科學(xué)技術(shù)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督管理局組織評(píng)估鑒定為貴州省地方優(yōu)良品種。
血液生理生化指標(biāo)與動(dòng)物代謝、營(yíng)養(yǎng)及健康狀況有著密切聯(lián)系,是及時(shí)發(fā)現(xiàn)動(dòng)物健康異常的重要監(jiān)測(cè)手段,可反映不同物種或品種間的種質(zhì)特性,已成為評(píng)價(jià)畜禽生產(chǎn)性能、疾病診斷和飼養(yǎng)管理的重要參考依據(jù)。試驗(yàn)對(duì)不同海拔、不同性別的貴州白山羊血液生理生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定和比較,以期完善貴州白山羊血液生化常值,揭示貴州白山羊的種質(zhì)特性,為疾病診斷提供參考依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物分別在思南縣塘頭鎮(zhèn)(海拔442m)及張家寨鎮(zhèn)(海拔956m)自然放牧羊場(chǎng)隨機(jī)抽取10只健康的貴州白山羊,公母比為1∶1,平均年齡14.3月齡(最大36月齡、最小4月齡),平均體重25.10 kg(最大體重45 kg、最小體重9.50 kg)。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 血液樣品的采集和處理20 只健康山羊在空腹?fàn)顟B(tài)下頸靜脈采血,分別用2mL EDTA 抗凝管紫色頭蓋管、5mL普通血清管收集血液。采血后抗凝管放入冷藏箱;普通血清管置于常溫下凝血,在鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站分離血清于血清離心管內(nèi),將血清離心管與抗凝管樣品一同放入冷藏箱內(nèi)運(yùn)送至農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫情測(cè)報(bào)思南測(cè)報(bào)站獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。經(jīng)布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)為陰性確定健康后,將血液、血清送檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行生理生化指標(biāo)測(cè)定,在獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室完成IgG 測(cè)定并分析。
1.2.2 血液生理指標(biāo)的測(cè)定用全自動(dòng)血液分析儀(BC-6800)測(cè)定山羊血液有形成份指標(biāo),每份血樣重復(fù)測(cè)定3 次,取平均值。
1.2.3 血清生化指標(biāo)測(cè)定用全自動(dòng)生化分析儀(日立-7180 型)測(cè)定血清生化指標(biāo),每份血樣重復(fù)測(cè)定3 次,取平均值。
1.2.4 血清電解質(zhì)及微量元素測(cè)定用全自動(dòng)電解質(zhì)分析儀(奧迪康公司AC9000 系列)測(cè)定血清中的電解質(zhì),用博暉全血清多元素分析儀BH5300 原子吸收光譜儀測(cè)定血清中微量元素含量,同樣做3 個(gè)重復(fù),取平均值。
1.2.5 血清免疫球蛋白(IgG)測(cè)定用深圳子科生物科技有限公司生產(chǎn)的山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA 試劑盒(Goat IgG ELISA KIT)測(cè)定血清免疫球蛋白,操作過(guò)程照說(shuō)明書進(jìn)行。
1.2.6 數(shù)據(jù)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 統(tǒng)計(jì)軟件分析處理,數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示,用Excel 無(wú)重復(fù)雙因素分析方法做差異顯著性分析。
2.1 血液生理指標(biāo)測(cè)定結(jié)果對(duì)20 只貴州白山羊的血液生理指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表1。貴州白山羊的紅細(xì)胞(RBC)、淋巴細(xì)胞比率(LYMPH%)測(cè)定值明顯低于參考值。經(jīng)差異性分析發(fā)現(xiàn),貴州白山羊公羊的血紅蛋白(HGB)極顯著高于母羊(P<0.01),其余指標(biāo)公母間無(wú)明顯差異(P>0.05)。
表1 貴州白山羊血液生理指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
2.2 血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果對(duì)20 只貴州白山羊的血清生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表2。貴州白山羊的堿性磷酸酶(ALP)和肌酸激酶(CK)值明顯高于正常值,淀粉酶(AMY)和肌酐(CRE)值明顯低于參考值,其余指標(biāo)與參考值出入不大。公母羊之間生化指標(biāo)無(wú)明顯差異(P>0.05)。
表2 貴州白山羊血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
2.3 血清電解質(zhì)及微量元素測(cè)定結(jié)果貴州白山羊的血清電解質(zhì)及微量元素測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。鐵含量明顯低于參考值,銅、鉀含量略高于正常值,其余指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。公母羊之間無(wú)明顯差異(P>0.05)。
表3 貴州白山羊血清電解質(zhì)及微量元素測(cè)定結(jié)果
2.4 血清免疫球蛋白測(cè)定結(jié)果
IgG 測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4,編號(hào)1 至5 號(hào)的羊來(lái)自塘頭鎮(zhèn)(海拔442m)某羊場(chǎng),6 至10 號(hào)來(lái)自張家寨鎮(zhèn)(海拔956m)羊場(chǎng)。貴州白山羊公母羊之間IgG 值無(wú)明顯差異(P>0.05),塘頭鎮(zhèn)羊場(chǎng)的羊IgG 值極顯著高于張家寨鎮(zhèn)羊場(chǎng)(P<0.01)。
表4 貴州白山羊血清免疫球蛋白測(cè)定統(tǒng)計(jì)表
研究測(cè)定貴州白山羊公羊的HGB 極顯著高于母羊(P<0.01),說(shuō)明性別對(duì)貴州白山羊血紅蛋白含量存在明顯影響。動(dòng)物體內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)通常受品種、性別、營(yíng)養(yǎng)狀況、海拔等因素的影響,海拔高的地區(qū)含氧量低,動(dòng)物的RBC、HGB 和HCT都會(huì)代償性增加。本次試驗(yàn)測(cè)定的貴州白山羊RBC值為(0.22±0.07)×1012/L,HGB值為(88.36±12.47)g/L,HCT 值為(1.04±0.30)%。田興貴等人測(cè)定的貴州黑山羊母羊HGB 值為(142.34±30.4)g/L,HCT值為(0.22±0.07)%,黃倩等人測(cè)定的貴州白山羊RBC、HGB值分別為(11.90±0.72)×1012/L、(82.83±3.22)g/L。張文麗等測(cè)定會(huì)理黑山羊血液的RBC、HGB 分別為(14.14±2.79)×1012/L、(112.90±12.02)g/L;付志新等測(cè)定波爾山羊血液的RBC、HGB 分別為(10.21±1.80)×1012/L、(73.56±10.38)g/L。由以上數(shù)據(jù)可見(jiàn),此次測(cè)定的貴州白山羊HCT 值高于貴州黑山羊,HGB 數(shù)值居中,RBC 值明顯過(guò)低,這可能與采樣個(gè)體的營(yíng)養(yǎng)狀況有關(guān),也可能是受測(cè)定方式及血液新鮮程度等因素的影響,采樣時(shí)正值炎熱夏季,也可能是造成貧血的原因之一。日后的飼養(yǎng)中應(yīng)適當(dāng)補(bǔ)充飼料營(yíng)養(yǎng),注意防暑。
ALP 屬于成骨細(xì)胞分泌的一組磷酸單酯水解酶,主要分布在骨骼和肝臟中,血液中ALP 的含量與心肝的生理功能及骨骼發(fā)育密切相關(guān)。CK 是人體中的重要激酶,在骨骼肌、心臟、腦部的含量較高,與肌肉收縮、神經(jīng)功能、細(xì)胞的能量反饋調(diào)節(jié)、有氧耐力有關(guān),運(yùn)動(dòng)后骨骼肌超微結(jié)構(gòu)改變可導(dǎo)致血清CK 增高。貴州白山羊的ALP 和CK 含量明顯高于正常值,原因可能是貴州山區(qū)采用自然放牧的飼養(yǎng)模式,運(yùn)動(dòng)量充足,骨骼發(fā)育較好。AMY 活性增高是急性胰腺炎的重要標(biāo)志,也可提示腎功能出現(xiàn)嚴(yán)重障礙,AMY 活性降低則可能發(fā)生肝炎、肝硬化等肝臟疾病。CRE 是肌酸的代謝產(chǎn)物,由腎小球排泄,不被腎小管重吸收,因此血清肌酐濃度是評(píng)價(jià)腎小球?yàn)V過(guò)功能的重要指標(biāo)。本次測(cè)定的羊AMY 及CRE值較低,提示羊肝腎功能可能出現(xiàn)問(wèn)題。
微量元素是動(dòng)物機(jī)體必不可需的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),參與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝,有調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透壓和酸堿平衡、維持細(xì)胞膜滲透壓及神經(jīng)肌肉興奮性、幫助微生物菌群正常繁殖等作用。本次測(cè)定的鐵含量較低,提示抽樣的羊群可能出現(xiàn)缺鐵性貧血??山o羊群補(bǔ)飼富含蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)、鐵的飼料,也可向圈舍內(nèi)灑些紅土或細(xì)沙。嚴(yán)重時(shí)可口服硫酸亞鐵、焦磷酸鐵和乳酸鐵,或注射右旋糖酐鐵、鐵鈷注射液和山梨醇注射液。
IgG 主要是由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞合成,常以Ig 單體形式存在,是動(dòng)物血清中質(zhì)量濃度最高的免疫球蛋白,約占血清Ig 總量的75%~80%,有抗菌、抗病毒、抗毒素等作用,是評(píng)價(jià)動(dòng)物免疫功能的重要指標(biāo)。已有研究表明,海拔對(duì)人體體內(nèi)IgG 濃度有明顯影 響,但尚無(wú)海拔對(duì)畜禽體內(nèi)IgG 濃度影響的研究。本次測(cè)定顯示,較低海拔羊場(chǎng)的羊IgG 濃度極顯著高于高海拔羊場(chǎng)(P<0.01),表明海拔對(duì)動(dòng)物體液免疫功能有明顯影響。
已有大量研究對(duì)不同品種、年齡的羊生理生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定分析,但性別對(duì)貴州白山羊生理生化指標(biāo)的影響及海拔對(duì)IgG 濃度的影響尚未見(jiàn)研究。本研究表明,貴州白山羊公羊的血紅蛋白量極顯著高于母羊,其余生理生化指標(biāo)受性別影響不大;低海拔地區(qū)羊的IgG濃度極顯著高于高海拔地區(qū),性別對(duì)IgG 濃度無(wú)明顯影響。