國佳鑫 侯麗 蔡和平 栗梟杰 楊茜茹 張思親 董青

摘要 目的：通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探討新加良附方治療胃癌的作用機(jī)制。方法：在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP）中獲取高良姜、香附、穿山龍的有效成分及靶蛋白，通過Genecards、OMIM數(shù)據(jù)庫篩選出胃癌的靶點(diǎn)，利用Venn軟件獲取共同靶點(diǎn)，使用Cytoscape3.7.2進(jìn)行“化合物-靶點(diǎn)-疾病”的網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建。通過String數(shù)據(jù)庫獲取蛋白互作網(wǎng)絡(luò)（PPI），最后進(jìn)行GO功能、KEGG通路富集分析。結(jié)果：從新加良附方中篩選出高良姜素、槲皮素、木犀草素、薯蕷皂苷元等主要有效活性成分，作用于87個胃癌靶點(diǎn)，篩選出AKT1、MYC、CASP3、EGFR等關(guān)鍵靶點(diǎn)，并確定了PI3K-Akt信號通路、p53信號通路、Wnt信號通路等關(guān)鍵代謝信號通路，參與蛋白結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性、酶活性調(diào)節(jié)、受體活性等過程。結(jié)論：新加良附方通過多個靶點(diǎn)、多條通路發(fā)揮治療胃癌的作用。

關(guān)鍵詞 新加良附方;寒凝血瘀;高良姜;香附;穿山龍;胃癌;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);作用機(jī)制

Based on the Key Pathogenesis Theory of “Cold Coagulation and Blood Stasis” Discussing the Network Pharmacology Study of Modified Liang-Fu Formula In The Treatment of Gastric Cancer

GUO Jiaxin1，HOU Li1，CAI Heping2，LI Xiaojie1，YANG Qianru1，ZHANG Siqin3，DONG Qing1

（1 Dongzhimen Hospital，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100020，China; 2 Beijing Traditional Chinese Medicine Hospital Shunyi Hospital，Beijing 101399，China; 3 Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610075，China）

Abstract Objective：To explore the mechanism of action of modified Liang-Fu Formula in the treatment of gastric cancer through network pharmacology method.Methods：The effective components and target proteins of Alpinia officinarum Hance，Cyperus rotundus L and Discorea nipponica Makino were from the traditional Chinese medicine system pharmacology analysis platform （TCMSP）.And the target of gastric cancer was gotten through the Genecards and OMIM database.Venn online software was used to obtain the common target，and the “compound-target-disease” network diagram was constructed by using Cytoscape 3.7.2 software.The String database was used to draw the protein interaction（PPI） network.Finally，enrichment analysis of GO function and KEGG pathway was carried out.Results：The main active components，such as galangin，quercetin，luteolin and diosgenin，were screened out from the negaeliang side，and acted on 87 gastric cancer targets.Key targets，such as AKT1，MYC，CASP3 and EGFR，were screened out，and key metabolic signaling pathways，such as pi3K-Akt signaling pathway，p53 signaling pathway，and Wnt signaling pathway，were determined.It was involved in protein binding，transcription factor activity，enzyme activity regulation，receptor activity and other processes.Conclusion：Modified Liangfu Formula plays a role in the treatment of gastric cancer through multiple targets and pathways.

Keywords Modified Liang-Fu Formula; Cold coagulation and blood stasis; Alpinia officinarum Hance; Cyperus rotundus L; Discorea nipponica Makino; Gastric cancer; network pharmacology; Mechanism of action

中圖分類號：R285文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.03.004

在世界范圍內(nèi)，亞洲為胃癌發(fā)病率最高的地區(qū)。據(jù)統(tǒng)計，2015年中國惡性腫瘤新發(fā)病例42.92萬例，死亡病例28.14萬例，而胃癌的發(fā)病率和病死率分別為679.1/10萬和498/10萬[1]。盡管近年來胃癌的發(fā)病率及病死率均有所下降，但胃癌患者的治療及其由此產(chǎn)生的不良反應(yīng)仍是困擾醫(yī)學(xué)界的一大難題。中醫(yī)藥在改善胃癌患者癥狀、延遲生存期方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢，有待進(jìn)一步研究。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是通過對生物系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)分析，選取特定信號節(jié)點(diǎn)進(jìn)行多靶點(diǎn)藥物分子分析的新方法[2]。體現(xiàn)了中藥復(fù)方“多成分、多靶點(diǎn)、多途徑”的治療特點(diǎn)，符合中醫(yī)藥對疾病本質(zhì)的認(rèn)識。新加良附方由《良方集腋》中的良附丸加味化裁而來，主要用于寒凝血瘀證。本研究基于寒凝血瘀關(guān)鍵病機(jī)理論，以新加良附方為切入點(diǎn)，用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析方法探討其治療胃癌的作用機(jī)制，以期為臨床提供新的治療思路。

1 資料與方法

1.1 胃癌相關(guān)靶點(diǎn)的獲取

以“Gastric Cancer”為關(guān)鍵詞，在GeenCards（https：//www.genecards.org/）和OMIM（https：//omim.org/）2個疾病數(shù)據(jù)庫中檢索，獲取胃癌相關(guān)靶點(diǎn)。

1.2 藥物活性成分以及對應(yīng)靶點(diǎn)的獲取

應(yīng)用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)與分析平臺（http：//tcmspw.com/tc-msp.php），分別檢索新加良附方中3種藥物高良姜、香附、穿山龍的有效成分，時間截止在2019年9月13日，通過類藥性指數(shù)（DL）和口服生物利用度（OB）進(jìn)行設(shè)定限制條件，篩選閾值設(shè)定為OB>30%且DL>0.18，并通過篩選結(jié)果在此平臺獲得有效成分的蛋白作用靶點(diǎn)。

1.3 構(gòu)建藥物有效成分-靶點(diǎn)和胃癌疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的可視圖

用Veen軟件獲取藥物作用靶點(diǎn)與疾病作用靶點(diǎn)的交集，以獲得藥物與疾病潛在靶點(diǎn)的相互作用，然后運(yùn)用Cytoscape3.7.2軟件構(gòu)建藥物有效成分-靶點(diǎn)和胃癌疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的可視圖。

1.4 新加良附方治療胃癌靶點(diǎn)蛋白互相作用網(wǎng)絡(luò)（PPI）的構(gòu)建

將獲取的藥物-靶點(diǎn)共同作用蛋白上傳到在線String數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org/），設(shè)置“Homo Sapiens（人類）”進(jìn)行操作，構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)模型，獲得PPI網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 GO功能富集分析與KEGG通路富集分析

將藥物有效作用靶點(diǎn)上傳到David6.8數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/），進(jìn)行GO功能富集分析與KEGG通路富集分析，獲取核心部分的生物學(xué)過程及信號通路，探索新加良附方治療胃癌可能的作用機(jī)制。

2 結(jié)果

2.1 胃癌疾病靶點(diǎn)的篩選

通過檢索GeenCards數(shù)據(jù)庫共得到與胃癌相關(guān)靶點(diǎn)11 353個，以Relevance score>23為篩選條件，篩選后共獲取510個相關(guān)靶點(diǎn)，在OMIM數(shù)據(jù)庫中共檢索到490個相關(guān)靶點(diǎn)，通過篩選重復(fù)值后，共獲得929個相關(guān)靶點(diǎn)。

2.2 藥物活性成分及作用靶點(diǎn)

通過TCMSP的檢索及OB>30%且DL>0.18的條件篩選后，獲得高良姜的有效成分13種，香附的有效成分18種，穿山龍的有效成分3種。見表1。在有效成分檢索中，獲得194個藥物作用靶點(diǎn)。

2.3 構(gòu)建藥物有效成分-靶點(diǎn)和胃癌疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的可視圖

將檢索得到的194個藥物作用靶點(diǎn)和929個胃癌相關(guān)靶點(diǎn)通過Uniprot數(shù)據(jù)庫進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，然后通過Veen軟件得到疾病相關(guān)靶點(diǎn)和藥物作用靶點(diǎn)的交集，共獲得87個共同靶點(diǎn)。見圖1。通過Cytoscape3.7.2軟件構(gòu)建藥物活性成分-靶點(diǎn)和胃癌疾病-靶點(diǎn)的可視化網(wǎng)絡(luò)圖。見圖2，表2。

2.4 藥物治療胃癌的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

將藥物與疾病共同的87個靶點(diǎn)上傳至String數(shù)據(jù)庫，設(shè)置置信度大于0.4，獲得PPI網(wǎng)絡(luò)。見圖3。共獲得87個關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白，1 624條相互作用蛋白之間相互作用的邊線，根據(jù)count值篩選出藥物治療胃癌的前30個關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白。見圖4。

2.5 藥物治療胃癌的功能富集分析與通路富集分析

2.5.1 GO功能富集分析

將藥物與疾病相關(guān)的87個靶點(diǎn)導(dǎo)入David平臺進(jìn)行GO功能富集分析，以P<0.01為篩選條件，篩選出GO條目共92個，其中主要涉及受體活性、蛋白結(jié)合、酶活性調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄因子活性等方面，根據(jù)其生物學(xué)功能排名獲取前20的條目。見圖5。包括泛素樣蛋白連接酶結(jié)合、泛素蛋白連接酶結(jié)合、激酶調(diào)節(jié)活動、細(xì)胞因子受體結(jié)合、DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活劑活性，RNA聚合酶Ⅱ特異性、細(xì)胞因子活性、活化轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、蛋白激酶調(diào)節(jié)活性、磷酸酶綁定、蛋白磷酸酶綁定、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、核受體的活動、轉(zhuǎn)錄因子活性，直接配體調(diào)控序列特異性DNA結(jié)合、整合素結(jié)合、受體配體活動、激酶活化劑活動、生長因子受體結(jié)合等。

2.5.2 KEGG通路富集分析

將87個靶點(diǎn)導(dǎo)入David平臺進(jìn)行KEGG通路富集分析，共確定了149條富集通路，涉及癌癥、炎性反應(yīng)、感染等各方面。排名靠前的通路主要包括膀胱癌、乙型肝炎、前列腺癌、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、胰腺癌、IL-17信號通路、人類巨細(xì)胞病毒感染、糖尿病并發(fā)癥信號通路、丙型肝炎、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化、結(jié)腸直腸癌、肝細(xì)胞癌、EB病毒感染、EGFR酪氨酸激酶抑制劑耐藥、非小細(xì)胞肺癌、細(xì)胞衰老等。通路富集結(jié)果涵蓋了以下幾個重要通路：PI3K-Akt信號通路、p53信號通路、Wnt信號通路等。

3 討論

在中醫(yī)學(xué)中，胃癌歸屬于“噎膈”“反胃”“癥瘕”“胃積”等范疇，其發(fā)病與飲食、情志、正氣不足等多方面因素有關(guān)[3]，其關(guān)鍵病機(jī)為寒凝血瘀[4]，中醫(yī)治療以溫陽散寒化痰為主要原則。此方以溫中散寒、理氣化痰、活血止痛為主要功效，主要用于寒凝血瘀證，高良姜溫胃止嘔、散寒止痛;香附疏肝解郁、理氣寬中、調(diào)經(jīng)止痛;二藥疏氣散寒;穿山龍祛風(fēng)除濕、活血止痛、止咳平喘，可融于良附丸之中活血祛瘀，制約高良姜之辛熱，防止香附之辛散。三藥合用，奏溫中散寒、理氣化痰、活血化瘀之效，是針對“脾陽不振、內(nèi)外寒邪交織”導(dǎo)致“寒凝血瘀、氣機(jī)阻滯、集結(jié)胃腑”所致的胃癌的治療良劑?，F(xiàn)代研究表明，新加良附方可能通過逆轉(zhuǎn)胃癌細(xì)胞中p16甲基化這一效應(yīng)機(jī)制來發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用，而且此方的臨床療效與劑量成正比的關(guān)系[5]。還有研究發(fā)現(xiàn)，新加良附方可以通過調(diào)節(jié)Bcl-2與Akt的表達(dá)進(jìn)而抑制人胃癌BGC-823細(xì)胞的增殖[6]，通過調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞中Caspase-3、Fas、Survivin、FasL蛋白的表達(dá)來誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞進(jìn)行凋亡[7-9]。以上研究成果均表明新加良附方在抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)其凋亡等方面具有良好的作用。

3.1 藥物有效成分

本次研究結(jié)果顯示，高良姜的有效活性成分主要包括高良姜素、槲皮素、美迪紫檀素、谷甾醇等，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其有效成分在抗腫瘤細(xì)胞增殖、抗氧化、抗炎性反應(yīng)和鎮(zhèn)痛等方面具有較明顯的效果[10]。香附的有效成分主要包括山柰酚、豆甾醇、木犀草素、槲皮素等，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其有效成分具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、抑制血小板聚集、解熱鎮(zhèn)痛抗炎等作用[11-13]。穿山龍的有效活性成分主要包括薯蕷皂苷元、表紫杉醇、土茯苓素等，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其在抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抗炎等方面具有較明顯的作用[14]。

根據(jù)研究中的“有效成分-靶點(diǎn)-疾病”可視化網(wǎng)絡(luò)圖可見高良姜素、槲皮素、木犀草素、薯蕷皂苷元等有效成分作用靶點(diǎn)較多，且度值和介數(shù)較高，提示這些有效成分是治療胃癌的關(guān)鍵有效成分。高良姜素是一種天然的黃酮類化合物，賀文煜等[15]通過體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，高良姜素與阿帕替尼聯(lián)合使用可能通過2個通路對胃癌細(xì)胞起到抑制其增殖、誘導(dǎo)其凋亡的作用，這2個通路分別是PI3K/Akt通路和p38-MAPK通路;同時國外有研究表明，高良姜素單藥可以抑制胃癌細(xì)胞的增殖[16]。Bestwick等[17]通過實(shí)驗(yàn)得出高良姜素可能通過影響caspase-3的表達(dá)增強(qiáng)對胃癌細(xì)胞抑制增殖的作用。許云霞等[18]通過噻唑藍(lán)法對細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)得出，高良姜素可能通過線粒體途徑抑制胃癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡。另有研究表明，高良姜素具有明顯抑制胃癌活性的作用，可能與抑制STAT3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與周期通路的作用機(jī)制有關(guān)系[19]。

槲皮素是一種黃酮類化合物，是高良姜和香附共同具有的化合物。耿威等[20]在實(shí)驗(yàn)中得出結(jié)論表明槲皮素可以降低胃癌細(xì)胞增殖和并延緩其侵襲正常的細(xì)胞，這些功能可能是通過調(diào)節(jié)Cav-1蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。另有研究表明槲皮素能升高Caspase-3和Caspase-9的活性，進(jìn)而抑制胃癌MKN45細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡[21]。王曉燕等[22]在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)槲皮素可能通過下調(diào)MMP-2基因的表達(dá)進(jìn)而明顯降低胃癌BGC-823細(xì)胞的侵襲能力。張燦燦等[23]通過實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，槲皮素和si-FSCN1聯(lián)合可能通過抑制Wnt/β-catenin信號通路的活化進(jìn)而達(dá)到抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。有研究通過實(shí)驗(yàn)表明槲皮素聯(lián)合伊馬替尼可能通過調(diào)控Caspase-9和Caspase-3的表達(dá)進(jìn)而抑制胃癌細(xì)胞的生長并誘導(dǎo)其凋亡[24]。有研究顯示槲皮素可能通過阻滯SGC-7901細(xì)胞周期于S期來達(dá)到抑制胃癌細(xì)胞增殖[25]。

木犀草素是一種黃酮類化合物，它存在于蔬菜、中藥和水果等植物中。有國外研究表明，它可以治療多種惡性腫瘤，例如胃癌、肺癌、乳腺癌等，其作用機(jī)制可能通過不同的信號通路誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，在體內(nèi)外阻斷腫瘤的發(fā)展。Lu等[26]認(rèn)為木犀草素可能通過MAPK和PI3K信號通路對胃癌細(xì)胞的增殖進(jìn)行雙重抑制。李艷紅等[27]通過實(shí)驗(yàn)得出木犀草素體外抗胃癌腫瘤的主要機(jī)制可能是通過改變細(xì)胞周期分布和誘導(dǎo)其凋亡。有研究表明木犀草素可能通過阻滯細(xì)胞周期和線粒體途徑來誘導(dǎo)胃癌MGC803細(xì)胞的凋亡[28]。王鵬等[29]認(rèn)為木犀草素通過調(diào)節(jié)MMP-7蛋白表達(dá)進(jìn)而抑制胃癌HGC-27細(xì)胞的遷移能力。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，穿山龍總皂苷是穿山龍發(fā)揮藥理作用的主要活性成分，其在抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫和消炎鎮(zhèn)痛等方面具有較明顯的作用[30]。薯蕷皂苷元可以調(diào)控miR-34a，下調(diào)E2F1、E2F3及CCND1基因表達(dá)，從而降低胃癌細(xì)胞的增殖、克隆，并抑制其遷移及侵襲等功能[31]。霍中華等[32]在研究中發(fā)現(xiàn)，薯蕷皂苷元能夠降低內(nèi)皮細(xì)胞增殖活性并且減少腫瘤血供，同時還直接作用于胃癌細(xì)胞減少其遷移。有研究表明薯蕷皂苷元能夠影響人胃癌BGC-823與SGC-7901細(xì)胞的異型性、擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移等多個方面，其作用機(jī)制可能是作用于MAPK通路中的p-p38通路[33]。何忠梅等[34]采用MTT比色法進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)薯蕷皂苷元具有抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡的作用，但其細(xì)胞周期未受到明顯的影響。

以上各類化合物通過不同方式來抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)其凋亡、抑制胃癌細(xì)胞侵襲能力等達(dá)到對胃癌的治療效果。

3.2 藥物作用靶點(diǎn)

通過對87個靶蛋白進(jìn)行PPI分析發(fā)現(xiàn)，AKT1、MYC、CASP3、EGFR等30個核心靶蛋白度，表明這些靶蛋白在新加良附方治療胃癌過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，揭示了此方治療胃癌可能的作用機(jī)制為抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)其凋亡等。余南榮等[35]在實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，影響胃癌細(xì)胞的生物學(xué)行為是通過LncRNA CCAT1調(diào)控MYC蛋白表達(dá)激活MAPK信號通路而實(shí)現(xiàn)，LncRNA CCAT1可以誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡，并且抑制其侵襲和遷移。還有研究表明胃癌細(xì)胞的增殖和凋亡是通過miRNA-490-3p直接靶向AKT1進(jìn)行調(diào)控[36]。有的學(xué)者認(rèn)為胃癌病因可能是細(xì)胞凋亡的非正常降低及增生過度導(dǎo)致的，其機(jī)制是CASP-3低表達(dá)和bcl-xl的高表達(dá)[37]。楊俊娥等[38]通過免疫組織化學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法研究得出，胃癌的發(fā)生與ALDH1A1和EGFR在胃腺癌組織內(nèi)異常表達(dá)有關(guān)，這2個靶點(diǎn)在胃癌的發(fā)生過程中起到協(xié)同的作用。

以上研究說明，靶點(diǎn)AKT1、MYC、CASP3、EGFR有抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡、調(diào)控蛋白表達(dá)等作用，對于胃癌的治療有重要意義。

3.3 核心靶點(diǎn)的富集分析

GO功能富集分析結(jié)果顯示，新加良附方治療胃癌主要涉及受體活性、蛋白結(jié)合、酶活性調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄因子活性等方面，說明新加良附方治療胃癌是一個十分復(fù)雜的生物學(xué)過程。

KEGG富集分析可見，新加良附方治療胃癌的重要信號通路包括PI3K-Akt信號通路、p53信號通路、Wnt信號通路等多種信號通路。徐江江等學(xué)者通過實(shí)驗(yàn)得出，異常激活PI3K/Akt信號通路可能導(dǎo)致其在胃癌干細(xì)胞中的高表達(dá)，進(jìn)而引起胃癌的發(fā)生[39]。有研究發(fā)現(xiàn)胃癌的發(fā)生是由PI3K/AKT/mTOR信號通路參與，其作用機(jī)制與PTEN在胃癌細(xì)胞組織中低表達(dá)，p-AKT和p-mTOR在胃癌組織中高表達(dá)有關(guān)[40]。劉豪杰等[41]發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞自噬水平和細(xì)胞凋亡可能與促進(jìn)p53/AMPK/mTOR信號通路表達(dá)有關(guān)。Song等[42]認(rèn)為TNF-α通過激活Wnt/β-cateni/TCF信號通路進(jìn)而誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞中Wnt10a和Wnt10b的表達(dá)，導(dǎo)致胃癌發(fā)生。故新加良附方治療胃癌的主要通路可能為PI3K-Akt信號通路、p53信號通路、Wnt信號通路等，可能通過蛋白結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性、酶活性調(diào)節(jié)、受體活性等來治療胃癌。

4 結(jié)語

本文通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究方法，對新加良附方中“寒凝血瘀”病機(jī)采用溫陽散寒化痰法治療胃癌的有效活性成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)、作用機(jī)制及可能的關(guān)鍵通路做了初步探討。結(jié)果顯示，新加良附方治療胃癌過程中較為重要的成分可能是高良姜素、槲皮素、木犀草素、薯蕷皂苷元等，可能主要是通過MYC、AKT1、CASP3、EGFR等靶點(diǎn)來達(dá)到治療目的，主要通路可能為PI3K-Akt信號通路、p53信號通路、Wnt信號通路等，可能通過蛋白結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性、酶活性調(diào)節(jié)、受體活性等來治療胃癌，說明新加良附方通過多成分、多靶點(diǎn)、多途徑產(chǎn)生協(xié)同治療胃癌的作用，體現(xiàn)了中醫(yī)學(xué)整體性的特點(diǎn)。但是，本研究主要是通過數(shù)據(jù)庫和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討新加良附方治療胃癌的作用機(jī)制，具有一定的理論局限性，有待后續(xù)學(xué)者通過實(shí)驗(yàn)研究對其機(jī)制進(jìn)行驗(yàn)證。

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（2021-01-05收稿 責(zé)任編輯：徐穎）