吳文錦，汪蘭，孫靜，丁安子，喬宇，石柳，李新*

（1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工與核農(nóng)技術(shù)研究所，湖北 武漢 430064；2.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，湖北 武漢 430064）

我國(guó)是家禽養(yǎng)殖大國(guó)，近年來(lái)家禽屠宰加工業(yè)得到了快速發(fā)展，產(chǎn)生大量的禽血副產(chǎn)物。目前禽血轉(zhuǎn)化利用率不到10%，通常加工為血豆腐、血粉等初級(jí)加工產(chǎn)品，大部分以污水的形式排放丟棄，導(dǎo)致蛋白質(zhì)資源流失，造成嚴(yán)重的環(huán)境污染[1]。禽血中含有豐富的血漿蛋白與血紅蛋白，如進(jìn)行深度開(kāi)發(fā)利用，制備具有功能特性的食品輔料，可以顯著提高家禽產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。缺鐵性貧血是全世界最常見(jiàn)的營(yíng)養(yǎng)缺乏癥，約20%的人口尤其是婦女、兒童存在這種癥狀[2]。血紅素鐵吸收優(yōu)于非血紅素鐵，可以通過(guò)補(bǔ)充富含血紅素鐵強(qiáng)化食品來(lái)解決缺鐵性貧血[3]。血紅素與珠蛋白通過(guò)四鍵相結(jié)合構(gòu)成血紅蛋白，其中兩個(gè)是丙酸基與珠蛋白的結(jié)合鍵，另兩個(gè)是通過(guò)鐵與珠蛋白中組氨咪唑環(huán)的氮環(huán)或配位鍵結(jié)合[4]。血紅素是由卟啉和一分子的亞鐵離子結(jié)合的鐵卟啉類(lèi)化合物，具有非常重要的生理生化功能，可以廣泛應(yīng)用于營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)鐵劑和色素添加劑[5]。

目前關(guān)于血紅素提取制備主要采用冰醋酸法、酸性丙酮法，當(dāng)pH值低于3.5時(shí)，二價(jià)鐵離子與組氨酸配位鍵離解，導(dǎo)致血紅素分子斷開(kāi)，這是酸性試劑分離血紅素的原理，但存在有機(jī)物污染的風(fēng)險(xiǎn)[6-8]。應(yīng)用蛋白酶酶解提取分離血紅素，具有效果高、反應(yīng)條件溫和、環(huán)境影響小等優(yōu)點(diǎn)[9-10]。有研究表明，采用超聲波、凍融、均質(zhì)等方法破壞血紅細(xì)胞形態(tài)，使血紅素更加徹底地分離，提高血紅素得率，然而這些方法不適合大批量的動(dòng)物血液處理[11-13]。本研究以新鮮雞血為原料，采用蛋白酶水解血紅蛋白，結(jié)合離心、凍干等方法制備血紅素，為提高禽血資源的高值轉(zhuǎn)化利用、減少禽血排放造成的污染提供了可行途徑。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮雞血：武漢市洪山區(qū)南湖生鮮市場(chǎng)。雞宰殺時(shí)收集雞血，添加0.2%乙二胺四乙酸二鈉（ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt，EDTA-2Na），攪拌均勻，置于冰盒中備用，離心處理（4 000 r/min，20 min），收集沉淀，凍干即為血紅蛋白粉。

EDTA-2Na、硝酸、高氯酸、硫酸、硼酸、鹽酸、氫氧化鈉、甲醛、乙醇、甲酸、鄰苯二甲酸氫鉀、硫酸銅、硫酸鉀、甲基紅、溴甲酚綠、酚酞、硫酸鐵銨（分析純）、氯化血紅素（標(biāo)準(zhǔn)品，純度>99.99%）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；酸性蛋白酶（酶活力≥50 U/mg）、中性蛋白酶（酶活力≥100 U/mg）、堿性蛋白酶（酶活力≥200 U/mg）：合肥博美生物科技有限公司；以上試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

GL-25MS高速冷凍離心機(jī)：上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司；L5S紫外分光光度計(jì)：上海儀電分析儀器有限公司；TAS-990原子吸收分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；SH220F石墨消解儀：濟(jì)南海能儀器股份有限公司；SIM FDS-2.5E真空冷凍干燥機(jī)：美國(guó)SIM公司；LC-30AD液相色譜：日本SHIMMADZU公司；Qtrap 4500質(zhì)譜儀：美國(guó)AB SCIEX公司。

1.3 方法

1.3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以血紅蛋白粉為酶解底物，分別選用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶酶解，根據(jù)蛋白酶最適反應(yīng)溫度、pH值調(diào)整酶解體系溫度與pH值。底物濃度分別設(shè)定為 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 g/100 mL，蛋白酶添加量分別設(shè)定為 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 g/100 mL，酶解時(shí)間分別設(shè)定為 3、4、5、6、7 h。研究分析蛋白酶種類(lèi)、底物濃度、酶添加量、酶解時(shí)間對(duì)血紅蛋白水解度、血紅素得率、血紅素純度的影響。

通過(guò)單因素試驗(yàn)結(jié)果分析，確定適宜的蛋白酶種類(lèi)，并選取底物濃度（A）、酶添加量（B）、酶解時(shí)間（C）為試驗(yàn)因素，以血紅素得率、純度為考核指標(biāo)，采用L9（34）正交試驗(yàn)確定最佳試驗(yàn)條件。因素水平見(jiàn)表1。

表1 正交試驗(yàn)水平因素表Table 1 Factors and levels of orthogonal test

采用最優(yōu)酶解工藝參數(shù)酶解，離心（4 000 r/min，20 min），收集沉淀，經(jīng)冷凍干燥得到血紅素產(chǎn)品，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（lipid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）分析確定血紅素濃度。

1.3.2 營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)

水分含量測(cè)定參照GB 5009.3—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定》[14]；蛋白質(zhì)含量測(cè)定參照GB 5009.5—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》[15]；脂肪含量測(cè)定參照 GB 5009.6—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定》[16]；灰分含量測(cè)定參照GB 5009.4—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測(cè)定》[17]；鐵含量測(cè)定參照GB 5009.90—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中鐵的測(cè)定》[18]。

1.3.3 水解度（degree of hydrolysis，DH）測(cè)定

按照式（1）計(jì)算水解度。

式中：AN為甲醛電位滴定法測(cè)定[19]的氨基態(tài)氮含量，g/100 mL；TN為凱氏定氮法測(cè)定[15]的總氮量，g/100 mL。

1.3.4 血紅素得率測(cè)定

采用原子吸收分光光度法測(cè)定血紅素得率。準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品0.5 g～3.0 g于帶刻度的消化管中，加入10 mL硝酸和0.5 mL高氯酸，在電熱爐上消解（120℃/0.5 h～1 h、180℃/2 h～4 h、220℃/0.5 h～1 h），冷卻后將消化液轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，用少量水洗滌2次～3次，合并洗滌液于容量瓶中并定容，混勻備用。將鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液按質(zhì)量濃度由低到高的順序分別導(dǎo)入原子吸收分光光度計(jì)，測(cè)定吸光度，以鐵質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線為：y=0.27x+0.07（R2=0.962 9）。將樣品溶液分別導(dǎo)入原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，根據(jù)鐵質(zhì)量濃度換算成血紅素質(zhì)量濃度（鐵的質(zhì)量濃度×11.0），按式（2）計(jì)算血紅素得率。

1.3.5 血紅素純度測(cè)定

采用紫外分光光度法測(cè)定血紅素純度。血紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶液于波長(zhǎng)385 nm處測(cè)定光吸收值，以血紅素濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，血紅素標(biāo)準(zhǔn)曲線為：y=82.556 x-0.004（R2=0.999 3）。稱(chēng)取樣品20mg于10mL容量瓶中，加入0.1mol/L NaOH溶解并定容，于波長(zhǎng)385 nm處測(cè)定吸收值，按式（3）計(jì)算樣品中血紅素純度。

1.3.6 血紅素產(chǎn)品的質(zhì)譜分析

稱(chēng)取一定量的血紅素產(chǎn)品，用5%氨水+75%水溶解，用0.22 μm微濾膜過(guò)濾，超聲波脫氣后進(jìn)行定性半定量分析。

色譜條件為色譜柱：采用 C18柱（1.8 μm，2.0 mm×75 mm）；流動(dòng)相：A相，純甲醇溶液；B相，0.02%甲酸-水溶液（體積分?jǐn)?shù)）；流速：0.25 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL；色譜柱溫度：40℃；采用梯度洗脫，流速保持不變，初始 B 相為 80%，0～2 min；B 相 60%，2 min～4 min；B相 50%，4 min～6 min；A 相 100%，保持 8 min～9 min；B相80%，保持1 min。

質(zhì)譜條件：采用電噴霧離子源（electron spray ionization，ESI）離子化；正離子模式掃描；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（multiple reaction monitoring，MRM），電噴霧電壓（ionspray，IS）5 500 V，離子化溫度（temperature，TEM）300℃；霧化氣壓力（gas1，GS1）50psi（1psi=6.895kPa），輔助氣壓力（gas 2，GS2）50 psi，氣簾氣壓力（curtain gas，CUR）35 psi；定量離子對(duì) 616.1>557.2、去簇電壓（declustering potential，DP）175 V、碰撞電壓（collision energy，CE）51 V；定性離子對(duì) 616.1>498.2、DP 175 V、CE 69 V。

按式（4）計(jì)算產(chǎn)品中血紅素含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，試驗(yàn)重復(fù)3次，使用Excel、Origin 8.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和制圖，采用SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件檢驗(yàn)組間差異顯著性（P<0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 雞血營(yíng)養(yǎng)成分

雞血營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表2。

表2 雞血營(yíng)養(yǎng)成分Table 2 Nutrition of chicken blood

由表2可知，新鮮雞血主要成分是水，含量達(dá)到94.94%；其次是蛋白質(zhì)，含量為5.03%，主要包含血紅蛋白、肌紅蛋白、血漿蛋白；雞血脂肪含量非常少，僅為0.18%；雞血灰分含量為 0.38%，主要為 Na、Fe、Mg、Ca等礦物質(zhì)元素；雞血中鐵含量為148.78 mg/kg，鐵與卟啉環(huán)絡(luò)合，結(jié)合在卟啉環(huán)中央構(gòu)成血紅素，而血紅素是血紅蛋白、肌紅蛋白和紅細(xì)胞的輔基，是重要的天然卟啉鐵化合物[20]。雞血中含有絕大部分水，從雞血中分離提取血紅素，去除水分是關(guān)鍵，亦是影響血紅素得率、純度的主要因素。因此本文采用離心提取血液中血紅蛋白，再通過(guò)冷凍干燥得到血紅蛋白粉，以血紅蛋白粉為酶解底物，便于后續(xù)酶解工藝，也有利于提高血紅素得率和純度。

2.2 蛋白酶種類(lèi)對(duì)血紅蛋白水解度的影響

以血紅蛋白為底物，選用堿性蛋白酶、中性蛋白酶與酸性蛋白酶酶解，水解度見(jiàn)圖1。

圖1 3種蛋白酶水解度隨時(shí)間變化趨勢(shì)Fig.1 Changes of DH of 3 proteases with time

由圖1可知，隨著酶解時(shí)間延長(zhǎng)，水解度呈增加趨勢(shì)，其中酶解2 h，水解度增加顯著，2 h后，水解度呈緩慢上升趨勢(shì)；中性蛋白酶、堿性蛋白酶水解度高于酸性蛋白酶，水解度與蛋白酶的酶活力呈正相關(guān)。考慮堿性蛋白酶酶解過(guò)程中添加堿液調(diào)整pH值，且不利于酶解液后期處理，因此確定中性蛋白酶為雞血血紅素酶解提取專(zhuān)用酶。胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等蛋白酶都可以用于血液中血紅素提取，單一酶解或復(fù)合酶解取決于酶活力與酶解目的[21]。

2.3 底物濃度對(duì)血紅蛋白水解度與血紅素得率、純度的影響

不同底物濃度下的水解度、血紅素得率、血紅素純度見(jiàn)表3。

表3 不同底物濃度下的水解度、血紅素得率、血紅素純度Table 3 Changes of DH，heme yield and heme purity with different contents of substrate

由表3可知，隨著血紅蛋白濃度增加，水解度呈增加趨勢(shì)。酶解反應(yīng)液中底物濃度較低時(shí)，底物可以與酶充分接觸發(fā)生降解反應(yīng)，水解度顯著增加，隨著底物濃度增加，而酶濃度恒定時(shí)，與酶接觸發(fā)生反應(yīng)的底物只能是一定的，另外隨著酶解進(jìn)行，酶解產(chǎn)物與底物處于競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，導(dǎo)致底物不能被完全水解，水解度趨于穩(wěn)定。結(jié)果表明，底物濃度1.0 g/100 mL～5.0 g/100 mL時(shí)，均處于有效底物濃度范圍，即均能被蛋白酶有效降解。

底物濃度為2.0 g/100 mL時(shí)，血紅素得率達(dá)到最高值52.08%，底物濃度為3.0 g/100 mL～5.0 g/100 mL時(shí)，血紅素得率下降并趨于穩(wěn)定，分別為32.31%、32.60%、30.30%，由此可以說(shuō)明，底物濃度在2.0g/100mL時(shí)，血紅蛋白中珠蛋白可以被有效降解，使血紅素游離出來(lái)。底物濃度超過(guò)2.0 g/100 mL，雖然珠蛋白與酶發(fā)生降解反應(yīng)，水解度隨之增加，但珠蛋白沒(méi)有被完全降解，使血紅素仍處于與珠蛋白（或肽）結(jié)合的狀態(tài)，血紅素得率下降。

血紅素純度隨底物濃度變化趨勢(shì)與血紅素提取率變化基本一致，底物濃度為2.0 g/100 mL時(shí)，血紅度純度達(dá)到最高值53.72%，隨著底物濃度增加，血紅度純度顯著下降，底物濃度為3.0 g/100 mL～5.0 g/100 mL時(shí)，血紅度純度分別為26.87%、25.09%、19.58%。由此可以表明，底物濃度2.0 g/100 mL時(shí)，血紅蛋白可以被徹底降解，血紅素純度最高。

2.4 酶添加量對(duì)血紅蛋白水解度與血紅素得率、純度的影響

不同酶添加量下的水解度、血紅素得率、血紅素純度見(jiàn)表4。

表4 不同酶添加量下的水解度、血紅素得率、血紅素純度Table 4 Changes of DH，heme yield and heme purity with different contents of enzyme

由表4可知，隨著酶添加量增加，血紅蛋白水解度整體呈緩慢增加趨勢(shì)，酶添加量為1.5 g/100 mL時(shí)，水解度為10.54%，酶添加量2.0 g/100 mL～2.5 g/100 mL時(shí)，水解度增加不明顯。由此可以推斷添加1.5 g/100 mL的酶可以有效降解底物，酶濃度繼續(xù)增加，處于過(guò)飽和狀態(tài)，而血紅蛋白濃度一定，因此底物水解度上升不明顯。酶解開(kāi)始時(shí)，底物濃度、酶濃度較高，酶活性也最大，隨著酶解反應(yīng)進(jìn)行，底物濃度降低，酶活性也降低，表現(xiàn)為水解度幾乎不增加[22-23]。

隨著酶添加量增加，血紅素得率先緩慢上升后略下降，其中酶添加量為1.5 g/100 mL時(shí)，血紅素得率為最高值37.70%；酶添加量為1.5 g/100 mL～2.5 g/100 mL時(shí)，血紅素得率呈下降趨勢(shì)。當(dāng)?shù)孜餄舛?、酶解反?yīng)時(shí)間一定時(shí)，酶與底物發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性水解反應(yīng)，使底物水解不徹底，導(dǎo)致血紅素得率下降。

隨著酶添加量增加，血紅素純度先增加后降低，變化趨勢(shì)與血紅素得率基本一致。酶添加量為1.5g/100 mL時(shí)，血紅素純度達(dá)到最高值31.95%，酶添加量為1.5 g/100 mL～2.5 g/100 mL時(shí)，血紅素純度下降。由此表明，酶濃度過(guò)飽和時(shí)，酶與底物發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，使底物水解不完全，導(dǎo)致血紅素純度降低。

2.5 酶解時(shí)間對(duì)血紅蛋白水解度與血紅素得率、純度的影響

不同酶解時(shí)間下的水解度、血紅素得率、血紅素純度見(jiàn)表5。

表5 不同酶解時(shí)間下的水解度、血紅素得率、血紅素純度Table 5 Changes of DH，heme yield and heme purity with different hydrolysis time

由表5可知，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，血紅蛋白水解度呈平緩增加趨勢(shì)，由此表明，酶解初始階段，即酶解3 h之前，底物濃度較高，酶活性也較強(qiáng)，水解度迅速增加，當(dāng)酶解3 h后，底物濃度降低，酶活性也降低，水解度緩慢增加。延長(zhǎng)酶解時(shí)間有利于提高水解度，但綜合考慮生產(chǎn)周期、能耗等問(wèn)題，確定酶解時(shí)間5 h比較適宜。血紅素得率隨酶解時(shí)間增加呈緩慢上升后略有降低趨勢(shì)，酶解3h，血紅素得率已達(dá)到33.54%，酶解5h，血紅素得率達(dá)到最高值39.52%。由此可以推斷，血紅素得率隨著酶解時(shí)間增加達(dá)到穩(wěn)定值，表明酶解體系中底物已被徹底水解，血紅蛋白中血紅素已游離出來(lái)，再增加酶解時(shí)間，只會(huì)導(dǎo)致血紅蛋白中的珠蛋白進(jìn)一步降解成小肽或氨基酸，而這一階段對(duì)血紅素得率無(wú)影響。另外，血紅蛋白自動(dòng)氧化是不可以避免的，血紅素中的亞鐵與氧氣結(jié)合生成三價(jià)鐵，使血紅素呈黑褐色，因此有必要控制酶解時(shí)間以保證血紅素品質(zhì)[24-25]。

血紅素純度隨酶解時(shí)間變化趨勢(shì)與血紅素得率變化基本一致。酶解3 h，血紅素純度達(dá)到27.47%，酶解5 h，血紅素純度達(dá)到最高值33.80%，酶解7 h，血紅素純度降低。由此表明，隨酶解時(shí)間延長(zhǎng)，酶解體系中底物已被完全水解，使血紅素釋放出來(lái)，血紅素純度達(dá)到穩(wěn)定值，再增加酶解時(shí)間，血紅素中的鐵離子與小肽結(jié)合生成小肽鐵螯合鹽，使血紅素純度降低[26]。

2.6 正交試驗(yàn)

正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果Table 6 Orthogonal array experimental design and results

由表6 R值分析可知，影響血紅素得率、純度的因素主次順序均為A>B>C，即底物濃度是主要因素，其次是酶添加量，而酶解時(shí)間影響最小。k值結(jié)果表明，最優(yōu)酶解工藝條件是A3B3C3，即血紅蛋白粉濃度為4.0 g/100 mL，酶添加量 2.0 g/100 mL，酶解 6 h，在此條件下，血紅素得率與純度分別為52.76%、50.17%。鑒于酶解時(shí)間對(duì)血紅素得率與純度影響不明顯，且考慮生產(chǎn)周期問(wèn)題，選擇酶解工藝條件為A3B3C1，此條件下血紅素得率與純度分別為52.23%、49.26%，與最優(yōu)工藝條件下血紅素得率、純度差異不明顯。

2.7 血紅素產(chǎn)品的質(zhì)譜分析

血紅素標(biāo)品與血紅素產(chǎn)品色譜圖見(jiàn)圖2、圖3。

圖2 血紅素標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Fig 2 Chromatogram of heme standard

圖3 血紅素產(chǎn)品色譜圖Fig 3 Chromatogram of heme product

血紅素標(biāo)準(zhǔn)品與血紅素產(chǎn)品峰面積見(jiàn)表7。

表7 血紅素標(biāo)準(zhǔn)品與血紅素產(chǎn)品峰面積Table 7 Peak area of heme standard and product

根據(jù)確定的最優(yōu)酶解工藝水解雞血血紅蛋白，離心后沉淀經(jīng)冷凍干燥獲得雞血血紅素產(chǎn)品，采用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀鑒定產(chǎn)品中血紅素含量。血紅素保留時(shí)間分別為6.70、6.68 min，血紅素產(chǎn)品中血紅素保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品相對(duì)應(yīng)，由此可以判定產(chǎn)品中血紅素以氯化血紅素形式存在。根據(jù)血紅素標(biāo)準(zhǔn)品、血紅素產(chǎn)品質(zhì)量濃度與峰面積（表7）分析計(jì)算，確定產(chǎn)品中血紅素含量為50.24%。產(chǎn)品中血紅素主要以血紅素單體形式存在，血紅素與肽或蛋白類(lèi)物質(zhì)結(jié)合物較少，驗(yàn)證了優(yōu)化后的酶解工藝可以有效水解血紅素-珠蛋白之間肽鍵，使血紅素釋放出來(lái)。

3 結(jié)論

通過(guò)單因素試驗(yàn)探討蛋白酶種類(lèi)、底物濃度、酶添加量、酶解時(shí)間對(duì)血紅蛋白水解度、血紅素得率與純度的影響，結(jié)果表明，雞血中含有大量的水分，因此酶法提取血紅素有必要以干燥血紅蛋白為底物，有利于提高血紅素得率與純度；中性蛋白酶、堿性蛋白酶酶解水解度高于酸性蛋白酶，中性蛋白酶因不需調(diào)整底物pH值更方便于血紅素提??；中性蛋白酶酶解提取雞血血紅素最優(yōu)工藝條件：血紅蛋白粉濃度4.0 g/100 mL，酶添加量2.0 g/100 mL，酶解4 h，血紅素得率與純度分別為52.23%、49.26%。應(yīng)用液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜方法確定血紅素產(chǎn)品中血紅素以氯化血紅素形式存在，含量為50.24%。雞血血紅素得率、純度與血紅蛋白中血紅素含量直接相關(guān)，而血紅素含量與屠宰過(guò)程中雞的個(gè)體差異直接相關(guān)，因此必須采用血紅蛋白大批量制樣來(lái)減少血紅素得率與純度差異變化。在工業(yè)生產(chǎn)中，家禽屠宰副產(chǎn)物——血液比較集中，因此相關(guān)設(shè)備必須與處理量相匹配，如離心、凍干、酶解等設(shè)備。本文為禽血蛋白酶水解提取血紅素提供理論數(shù)據(jù)與技術(shù)參考，實(shí)現(xiàn)家禽屠宰血液高值轉(zhuǎn)化應(yīng)用，有效解決對(duì)外排放導(dǎo)致的環(huán)境污染問(wèn)題。