胡佳祥，王雄延，張植元，陳 嬌，劉浩翔

（四川水利職業(yè)技術(shù)學院，四川 成都 611231）

硬刺松潘裸鯉（G ymnocy pris potanini firmispinat us）隸屬于裂腹魚亞科，裸鯉屬，主要分布在金沙江水系，地方又叫竹根魚（樂佩琦，2000）。已有的報道表明，硬刺松潘裸鯉分布范圍較小，資源量有限，近年來由于人為干擾、流域水電工程開發(fā)等原因，其生境受到大幅的壓縮，資源量逐年下降（胡佳祥，2016）。因此，硬刺松潘裸鯉人工繁育的研究對其物種和自然資源增殖具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

試驗地點為華電金中公司梨園水電站魚類增殖站，位于云南省麗江市玉龍縣。該站所用水源來自于電站庫區(qū)，試驗期間水溫為13℃～15.8℃，溶氧6.0 mg/L，海拔1 717 m。

1.2 親魚來源與人工馴化

硬刺松潘裸鯉親魚為2017年1月10日在麗江市金沙江支流黎明景區(qū)采集的160尾硬刺松潘裸鯉親魚，其中雌魚132尾（規(guī)格47～112 g）、雄魚28尾（規(guī)格7.5～18 g），親魚用魚罐車運輸至增殖站內(nèi)，置于直徑3 m、深1 m的養(yǎng)殖缸內(nèi)隔離暫養(yǎng)，期間使用質(zhì)量分數(shù)為2×10-6亞甲基藍和10×10-6鹽酸土霉素浸泡消毒殺菌。隔離7 d后轉(zhuǎn)移到循環(huán)水系統(tǒng)車間養(yǎng)殖缸（直徑3 m，深1 m）內(nèi)馴化培育。

親魚在培育過程中，保持水質(zhì)清澈，進水口以斜45°角順時針沖水，使養(yǎng)殖缸內(nèi)形成環(huán)流，流速0.2 m/s。每天早晚投喂海大1.0浮性料和動物性餌料水蚯蚓（用質(zhì)量分數(shù)5×10-6高錳酸鉀浸泡消毒10 min），投餌比例為親魚體質(zhì)量的1%。

1.3 親魚挑選

選擇健碩無傷，性腺發(fā)育良好的雌雄親魚18組。雌魚腹部膨大，有明顯的卵巢輪廓，下腹部柔軟，生殖孔較突出；雄魚體表、臀鰭上布滿珠星，手感粗糙，輕壓腹部有白色精液流出（圖1a）。

1.4 人工催產(chǎn)

共催產(chǎn)親魚36尾，雌雄比例1∶1。催產(chǎn)水溫13℃～15.8℃，催產(chǎn)劑為鯉魚腦垂體（PG）、促黃體釋放激素類似物（LRH-A3）、絨毛膜促性腺激素（HCG）。采用胸鰭基部注射（圖1b），注射劑量及催產(chǎn)劑組合見表1。雌魚采用3次注射，注射時間間隔為24 h，雄魚為一次注射，注射劑量減半。4月9日10時親魚開始追逐，13時30分開始人工授精。

1.5 人工授精

采用人工干法授精，首先用濕毛巾包裹親魚頭部，再用干毛巾擦干雌雄親魚的腹部及鰭條上水分，然后在白色干燥瓷盆中同時擠入雌、雄親魚個體卵子和精液；加入10 mL生理鹽水，再用雞毛按照順時針方向攪拌1 min；待卵子充分受精之后，加入少量水靜置3 min；再用清水洗滌受精卵3次，洗去精液和雜質(zhì)（圖1c）。

表1 硬刺松潘裸鯉親魚注射藥物及劑量統(tǒng)計Tab.1 Parental stock of Gymnocypris potanini firmispinatus injection drug and dose statistics

1.6 人工孵化

待受精卵充分吸水后，將受精卵轉(zhuǎn)入孵化框（60 cm×40 cm×20 cm）中淋水孵化，孵化期間保證水質(zhì)溶氧超過6 mg/L，水體日交換率＞500%；同時每天定時挑除孵化框中的死卵（圖1d）。

圖1 硬刺松潘裸鯉人工繁殖流程圖Fig.1 Artificial reproduction process of G.p.firmispinatus

1.7 繁殖力

隨機挑選7尾Ⅳ期雌性硬刺松潘裸鯉，對其懷卵量進行計數(shù)統(tǒng)計，其體長范圍為17.10～21.80 cm。絕對繁殖力為1 224～1 656粒，相對繁殖力為29.66～44.35粒/g。

2 結(jié)果

2.1 受精情況

本次人工繁殖共對18組硬刺松潘裸鯉親魚進行人工催產(chǎn)，成功催產(chǎn)12組，催產(chǎn)率為66.67%；獲得魚卵1.5×104粒，在受精卵發(fā)育到胚孔封閉期檢查發(fā)現(xiàn)受精卵0.92×104粒，受精率為61.32%。受精卵淡黃色、沉性、微黏性，卵徑為3.01±0.24 mm，卵周隙為0.39±0.04 mm。

2.2 出苗情況

在水溫14℃～15℃的孵化條件下，歷時204 h仔魚出膜（以50%硬刺松潘裸鯉仔魚出膜鑒定出膜期），獲得初孵仔魚0.6×104尾，孵化率為65.2%。

2.3 魚苗培育情況

硬刺松潘裸鯉初孵仔魚全長8.33 mm，仔魚靜臥于水底；在孵化框中培育10 d后，仔魚全長為12.88 mm，開始平游，開口攝食，開口餌料為鹵蟲無節(jié)幼體；投喂25 d后開始轉(zhuǎn)食升索料，仔魚全長達20 mm；再經(jīng)4個月的培育魚苗達60 cm，達到增殖放流標準，獲得魚苗5 000尾，魚苗培育存活率為83.33%（見圖2）。

圖2 硬刺松潘裸鯉魚苗Fig.2 Gymnocypris potanini firmispinatus fry

3 討論

3.1 繁殖力

硬刺松潘裸鯉絕對繁殖力較低，均值為1 467.77粒，低于大多數(shù)裂腹魚類，如拉薩裂腹魚21 693粒（周賢君，2014）、異齒裂腹魚21 190粒（馬寶珊，2011）、尖裸鯉34 211粒（霍斌，2014），這與硬刺松潘裸鯉體型較小無法擁有較大的懷卵量相關(guān)。但硬刺松潘裸鯉卵粒較大，相對繁殖力均值為33.061粒/g，明顯高于拉薩裂腹魚13.4粒/g（周賢君，2014）、異齒裂腹魚16.8±3.9粒/g（馬寶珊，2011）、青海湖裸鯉28.8粒/g（張信與熊飛等，2005）、色林錯裸鯉25.8粒/g（劉軍，2006）等。相對繁殖力較高，這也就意味著硬刺松潘裸鯉受精率與幼體成活率較其他裂腹魚高。

3.2 雌雄差異較大

硬刺松潘裸鯉雌魚個體遠大于雄魚，但雄魚數(shù)量多于雌魚，這是硬刺松潘裸鯉長期演化而形成的繁殖策略。

3.3 水霉病和小瓜蟲病防治

野生捕撈硬刺松潘裸鯉親魚時，如果體表有傷口，易感染水霉病。每天以體積分數(shù)400×10-6食鹽水+400×10-6小蘇打浸泡1 h，每半個月以0.1×10-6～0.3×10-6二氧化氯（8%）全池潑灑，防治效果較明顯。

硬刺松潘裸鯉小瓜蟲病是在親魚馴化繁殖階段最主要病害，常導致親魚較大的損失。2×10-6亞甲基藍浸泡6 h，每隔3 d泡1次，連用3次，初期使用有一定效果。

3.4 魚苗培育

硬刺松潘裸鯉卵黃囊仔魚期時間較長，在15℃水溫條件下，15 d卵黃囊才吸收完，這有助于魚苗延長混合營養(yǎng)期以度過臨界期，提高子代的存活率。同時魚苗較大，全長8.33 mm，口裂較大，開口可投食鹵蟲無節(jié)幼體，這樣培育的魚苗存活率高，體質(zhì)好。