廖道林

（靈川縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，廣西 靈川 541200）

柑橘黃斑落葉病是柑橘生產(chǎn)當(dāng)中一種常見的病害，受害植株的葉片上會(huì)產(chǎn)生十多個(gè)甚至上百個(gè)病斑。植株葉片受損后，光合作用受到抑制，導(dǎo)致柑橘生長(zhǎng)勢(shì)頭開始減弱，易出現(xiàn)大面積的落葉，進(jìn)而導(dǎo)致柑橘產(chǎn)量的下降[1]。近年來，柑橘黃斑落葉病在廣西地區(qū)頻繁發(fā)生，給種植戶帶來了極大的經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)過農(nóng)技工作者的不斷努力，該地區(qū)黃斑落葉病的病因已基本查明，病原為小孢擬盤多毛孢菌，但前期防治效果不甚理想，抑制這一病菌的化學(xué)藥劑尚待進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)[2]。因此，針對(duì)性地篩選藥劑對(duì)有效遏制黃斑落葉病有著重要意義。

1 材料和方法

1.1 分離和純化

本次試驗(yàn)中，在樣品的分離環(huán)節(jié)，選取的是廣西地區(qū)種植面積較大，發(fā)病具有典型性的溫柑——日南一號(hào)病葉為樣本[3]。樹勢(shì)較強(qiáng)，枝梢不太密生，枝梢長(zhǎng)而略粗，分枝角度小且直立。葉片較長(zhǎng)，略呈狹長(zhǎng)狀，葉基扁圓形，葉尖漸尖形，葉緣鋸齒明顯，葉柄較長(zhǎng)，無翼葉。日南一號(hào)溫柑的產(chǎn)量也十分可觀，單個(gè)植株產(chǎn)量可達(dá)60kg 以上，產(chǎn)量可達(dá)4500kg/667m2。當(dāng)植株感染黃斑落葉病后，樹勢(shì)會(huì)急速萎靡，產(chǎn)量銳減[4-5]。在試驗(yàn)室環(huán)境中，采用組織分離法，從病葉葉肉組織當(dāng)中分離出誘發(fā)黃斑落葉病的病原菌，而后進(jìn)行分離純化，培養(yǎng)溫度控制在26℃，培養(yǎng)時(shí)常為15d。

1.2 藥效分析

1.2.1 病毒毒力測(cè)定。當(dāng)分離和純化工作完成后，需在室內(nèi)測(cè)定誘發(fā)黃斑落葉病病毒的毒力，選用25%嘧菌酯懸浮劑（武漢豐竹林科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，市售）、25%咪鮮胺乳油（北京鼎瑞（集團(tuán)）化工生產(chǎn)，市售）、80%代森錳鋅可濕性粉劑（山東福川生物科技有限公司生產(chǎn)，市售）、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑（柳州市惠農(nóng)化工有限公司生產(chǎn)，市售）、80%乙蒜素（江蘇科利農(nóng)作物研究有限公司，市售）、25%吡唑醚菌酯（（北京）國(guó)際生物技術(shù)有限公司，市售）、41.7%氟吡菌酰胺（博仕達(dá)（揚(yáng)州）生物科技有限公司，市售）。

將已培養(yǎng)15d 的菌絲（直徑已達(dá)5mm）轉(zhuǎn)移到含有藥物的PDA 上，并將其放置在培養(yǎng)皿中。培養(yǎng)條件為：光暗比例為12∶12，溫度控制在26℃。在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下培養(yǎng)5d 后，測(cè)量菌絲的紙漿，計(jì)算藥物對(duì)菌落的抑制率。

菌絲抑制率（%）=（對(duì)照菌落凈增長(zhǎng)直徑-研究菌落凈增長(zhǎng)直徑）/對(duì)照菌落凈增長(zhǎng)直徑×100。試驗(yàn)結(jié)果（見表1）。

表1 試驗(yàn)藥劑對(duì)小孢擬盤多毛孢菌病毒毒力測(cè)定結(jié)果

從病毒毒力測(cè)定結(jié)果分析來看，試驗(yàn)中所選取的25%嘧菌酯懸浮劑、25%咪鮮胺乳油、80%代森錳鋅可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、80%乙蒜素、25%吡唑醚菌酯、41.7%氟吡菌酰胺對(duì)試驗(yàn)中分離出的小孢擬盤多毛孢菌都具有一定的活性抑制作用。其中，41.7%氟吡菌酰胺、25%嘧菌酯懸浮劑的試驗(yàn)最高劑量未能實(shí)現(xiàn)完全抑制，其它藥物的試驗(yàn)最高劑量可以實(shí)現(xiàn)對(duì)小孢擬盤多毛孢菌的完全抑制。在這5 種試驗(yàn)藥劑當(dāng)中，10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑，25%吡唑醚菌酯的毒性較大。

1.2.2 孢子萌發(fā)毒力測(cè)定。在測(cè)定孢子萌發(fā)毒力的過程中，選取的是25%嘧菌酯懸浮劑、25%咪鮮胺乳油、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、80%乙蒜素、25%吡唑醚菌酯5 種藥劑。每種藥劑設(shè)置5 個(gè)濃度，不同梯度的藥物濃度設(shè)置為2 倍。此次研究中，測(cè)定孢子萌發(fā)毒力采用的是瓊脂法，試驗(yàn)開始前挑選菌齡為15d 的菌絲，從菌絲上提取孢子團(tuán)，將孢子團(tuán)再次置于蒸餾水中，逐步提升孢子團(tuán)濃度。而后將孢子液滴加到瓊脂上，每個(gè)瓊脂凹槽玻璃上滴加2 滴，在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下培養(yǎng)1d后，檢查孢子數(shù)量，計(jì)算藥物對(duì)孢子的抑制率。

孢子萌發(fā)抑制率（%）=（對(duì)照孢子萌發(fā)率-研究孢子萌發(fā)率）/對(duì)照菌孢子萌發(fā)率×100。試驗(yàn)結(jié)果（見表2）。

表2 試驗(yàn)藥劑對(duì)孢子萌發(fā)毒力測(cè)定測(cè)定結(jié)果

在測(cè)定孢子萌發(fā)毒力過程中可以發(fā)現(xiàn)，10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、25%咪鮮胺乳油、25%嘧菌酯懸浮劑3 種藥劑抑制率達(dá)到100%，說明這些藥劑能對(duì)小孢擬盤多毛孢菌產(chǎn)生強(qiáng)效抑制作用。25%吡唑醚菌酯、80%乙蒜素的低劑量組當(dāng)中出現(xiàn)了少數(shù)新生孢子，其余劑量完全抑制了孢子的新生。

1.2.3 田間藥劑試驗(yàn)。選用10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、25%吡唑醚菌酯、50%克菌丹（上?？平菁焉锟萍加邢薰旧a(chǎn)，市售）、25%吡唑醚菌酯，50%硫磺多菌靈（山東福川生物科技有限公司生產(chǎn)，市售）、所需藥品除克菌丹、硫磺多菌靈外，與病毒毒力測(cè)試所用藥品相同，使用推薦劑量，清水對(duì)照，試驗(yàn)結(jié)果（見表3）。

表3 試驗(yàn)藥劑對(duì)小孢擬盤多毛孢菌田間藥劑試驗(yàn)結(jié)果

從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，采用吡唑醚菌酯或吡唑醚菌酯+礦物質(zhì)油的方式能夠取得良好的防治效果，防治率達(dá)到99%以上；采用苯醚甲環(huán)唑，防治率達(dá)94%以上；克菌丹、硫磺多菌靈的防治效果要略遜一籌。

2 結(jié)論

有效防治病蟲害是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的核心環(huán)節(jié)，不僅決定了農(nóng)業(yè)產(chǎn)量，還關(guān)系到農(nóng)民收入。隨著柑橘黃斑落葉病在廣西地區(qū)的不斷遷延，受害面積不斷擴(kuò)大，已嚴(yán)重影響到當(dāng)?shù)馗涕佼a(chǎn)業(yè)的發(fā)展[6]。通過篩選優(yōu)良的藥劑進(jìn)行防治，無論對(duì)農(nóng)戶增收還是區(qū)域經(jīng)濟(jì)發(fā)展都極為有利。

先后通過室內(nèi)菌絲生產(chǎn)速率法、田間藥效試驗(yàn)評(píng)價(jià)法篩選出多種藥劑，結(jié)果顯示：（1）在室內(nèi)條件下，41.7%氟吡菌酰胺、25%嘧菌酯懸浮劑最高劑量未能實(shí)現(xiàn)完全抑制。（2）25%咪鮮胺乳油、80%代森錳鋅可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、80%乙蒜素、25%吡唑醚菌酯最高劑量，可完全抑制小孢擬盤多毛孢菌。（3）10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、25%咪鮮胺乳油、25%嘧菌酯懸浮劑3 種藥劑抑制率達(dá)到100%。（4）25%吡唑醚菌酯、80%乙蒜素的低劑量組中，出現(xiàn)了少數(shù)新生孢子。（5）苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯或吡唑醚菌酯+礦物質(zhì)油的防治率可達(dá)到90%以上。

實(shí)際生產(chǎn)中，對(duì)于發(fā)病一般的果園，建議選用80%代森錳鋅可濕性粉劑600 倍液、80%基硫菌靈可濕性粉劑600 倍液進(jìn)行防治。對(duì)于發(fā)病較為嚴(yán)重的果園，可選用80%吡唑醚菌酯乳油1500 倍液、60%吡唑醚菌·代森聯(lián)可濕性粉劑1500 倍液、10%苯醚甲環(huán)唑可濕性粉劑1000 倍液進(jìn)行防治。同時(shí)，進(jìn)一步加強(qiáng)田間管理，增施有機(jī)物，保水保墑，提高柑橘樹的抵抗力[7-8]。