鄭洋濱，劉寧，艾力奇，劉波，洪燕，任琦

1.江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局中成藥質(zhì)量評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西省藥品與醫(yī)療器械質(zhì)量工程技術(shù)研究中心，江西 南昌 330029；2.南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院，江西 南昌 330029

消炎鎮(zhèn)痛膏是一種含有薄荷腦、冰片、樟腦、薄荷腦、顛茄流浸膏、麝香草腦、鹽酸苯海拉明等藥物的中藥貼膏劑［1］。主要用于神經(jīng)痛，風(fēng)濕痛，肩痛，扭傷，關(guān)節(jié)痛，肌肉疼痛等。輔料為橡膠、氧化鋅、松香、凡士林、溶劑油等。由于橡膠膏劑透氣性較差、載藥量小，易引發(fā)皮膚過(guò)敏和刺激反應(yīng)［2］。《中國(guó)藥典》并未對(duì)中藥貼膏劑進(jìn)行安全性監(jiān)控，為了考察其安全性，故參照國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局頒發(fā)的《中藥、天然藥物局部刺激和溶血性研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》《中藥天然藥物免疫毒性（過(guò)敏性、光過(guò)敏反應(yīng)）研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，對(duì)國(guó)抽品種消炎鎮(zhèn)痛膏進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)。為了解消炎鎮(zhèn)痛膏的使用安全性現(xiàn)狀提供數(shù)據(jù)參考。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

新西蘭兔108 只，普通級(jí)，體質(zhì)量2～3 kg，雌雄兼用，動(dòng)物合格證號(hào)：NO.0001375，購(gòu)于贛州市畜牧業(yè)研究所，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（贛）2018-0009；豚鼠560 只，普通級(jí)，體質(zhì)量250～350 g，雌雄兼用，動(dòng)物合格證號(hào)：NO.43006700018725，購(gòu)于長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（湘）：2019-0014。上述動(dòng)物均飼養(yǎng)于江西省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院普通級(jí)環(huán)境中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（贛）：2019-0001。

1.2 試驗(yàn)樣品

18 家不同廠家的消炎鎮(zhèn)痛膏各1 批，共18 批；7 批生產(chǎn)原料（水楊酸甲酯、麝香草酚、顛茄流浸膏、薄荷腦、樟腦、冰片、苯海拉明）；2 批輔料（溶劑油、松香）；2,4-二硝基氯苯

2 試驗(yàn)方法

2.1 試驗(yàn)分組

皮膚刺激試驗(yàn)：采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法，各試驗(yàn)組4 只，陰性對(duì)照物為吸收性紗布；產(chǎn)品說(shuō)明書明確寫明不可用于破損皮膚，故未進(jìn)行破損皮膚的皮膚刺激性試驗(yàn)。

皮膚過(guò)敏試驗(yàn):陽(yáng)性對(duì)照物為2,4-二硝基氯苯（誘導(dǎo)濃度：1%，激發(fā)濃度：0.1%）；陰性對(duì)照物為吸收性紗布，動(dòng)物數(shù)：試驗(yàn)組20 只，對(duì)照組10 只。

2.2 皮膚刺激性試驗(yàn)［3-6］

2.2.1單次皮膚刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)前將試驗(yàn)動(dòng)物背部脊柱兩側(cè)被毛剪掉，去毛范圍各為3 cm×3 cm，成品：取成品2.5 cm×2.5 cm；原料和輔料:取受試物約0.5 g 加到 2.5 cm×2.5 cm 大小的吸收性紗布?jí)K上。用繃帶固定敷貼片4 h，另一側(cè)用吸收性紗布作為對(duì)照。在去除藥物后的第1、24、48 和72 h 肉眼觀察，并記錄給藥部位有無(wú)紅斑和水腫等情況。

2.2.2多次皮膚刺激性試驗(yàn)前期步驟同單次皮膚刺激性試驗(yàn)。每次去除藥物后1 h 和再次貼敷前觀察并記錄紅斑及水腫、涂敷部位是否有出血點(diǎn)、色素沉著、皮膚菲薄或皮膚粗糙等情況及其發(fā)生與消退時(shí)間，并對(duì)紅斑及水腫按表1 進(jìn)行評(píng)分。每天敷貼一次，連續(xù)敷貼14 d。末次貼敷后，在去除藥物后1、24、48 和72 h 肉眼觀察并記錄涂敷部位有無(wú)紅斑和水腫等情況。

2.2.3皮膚刺激結(jié)果評(píng)價(jià)（1）單次給藥皮膚刺激性試驗(yàn)，按表1 計(jì)算每一觀察時(shí)間點(diǎn)的各組受試物及賦形劑皮膚反應(yīng)積分的平均分值。將受試物的皮膚反應(yīng)平均分值減去賦形劑皮膚反應(yīng)積分的平均分值得到原發(fā)性刺激指數(shù)。（2）多次給藥皮膚刺激性試驗(yàn)，按表1 計(jì)算每個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)中各組的原發(fā)性刺激積分均值，然后計(jì)算觀察期限內(nèi)每天每只動(dòng)物刺激積分均值，即累積刺激指數(shù)。

表1 皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分

刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)：評(píng)分≤0.5 分為無(wú)刺激性，評(píng)分＞0.5～3 分為輕度刺激性，評(píng)分＞3～6 分為中度刺激性，評(píng)分＞6～8 分為強(qiáng)刺激性。

2.3 皮膚過(guò)敏性試驗(yàn)

2.3.1皮膚過(guò)敏方法試驗(yàn)前24 h 將豚鼠背部左側(cè)去毛，去毛范圍約為4 cm2，用75%乙醇清潔豚鼠背部去毛區(qū)，將受試物約2.5 cm2貼在每只豚鼠去毛區(qū)，以二層紗布和一層玻璃紙覆蓋,再以膠布封閉固定6 h，記第0 d。在第7 d 和第14 d 同法再給藥一次進(jìn)行誘導(dǎo)。第28 d 將約2.5 cm2受試物貼在豚鼠背部右側(cè)2 cm2去毛區(qū)，然后用二層紗布和一層玻璃紙覆蓋，再以膠布封閉固定6 h 進(jìn)行激發(fā)，6 h 后除去受試藥物并用溫水清潔給藥部位。觀察激發(fā)接觸后24 h 和48 h 皮膚反應(yīng)［7-9］。

2.3.2皮膚過(guò)敏結(jié)果評(píng)價(jià)按表3 評(píng)分，當(dāng)受試物組動(dòng)物出現(xiàn)皮膚反應(yīng)積分≥2 時(shí)，判為該動(dòng)物出現(xiàn)皮膚變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性。

判定受試物的過(guò)敏強(qiáng)度：過(guò)敏率≤8%為弱，過(guò)敏率＞8%～28%為輕度，過(guò)敏率＞28%～64%為中度，過(guò)敏率＞64%～80%為強(qiáng)度，過(guò)敏率＞80%～100%為極強(qiáng)度。

表2 過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)皮膚反應(yīng)評(píng)分

3 試驗(yàn)結(jié)果

18 批成品、7 種原料、1 種輔料均未見(jiàn)過(guò)敏反應(yīng)。（溶劑油）動(dòng)物在第一次誘導(dǎo)后出現(xiàn)死亡，在第二次誘導(dǎo)后動(dòng)物全部死亡；18 批成品、7 種原料、1種輔料在單次皮膚刺激試驗(yàn)后，均未見(jiàn)皮膚刺激反應(yīng)。在進(jìn)行14 天的多次皮膚刺激反應(yīng)試驗(yàn)后，4 個(gè)廠家的樣品出現(xiàn)輕度皮膚刺激反應(yīng)，其余廠家樣品未出現(xiàn)皮膚刺激反應(yīng)；3 種原料出現(xiàn)輕度和中度皮膚刺激反應(yīng)；1 種輔料出現(xiàn)中度皮膚刺激反應(yīng)。見(jiàn)表5。

表3 各樣品皮膚刺激及過(guò)敏反應(yīng)（分）

4 討論

中藥外用為傳統(tǒng)中醫(yī)藥治療疾病尤其是皮膚疾病的重要手段，但近年來(lái)隨著中草藥的廣泛應(yīng)用，過(guò)敏事件時(shí)有發(fā)生。橡膠膏劑中存在過(guò)敏因素，其變態(tài)、刺激反應(yīng)引起皮膚過(guò)敏問(wèn)題，降低了橡膠膏劑的舒適型、安全性［10-11］。

在單次皮膚刺激反應(yīng)試驗(yàn)中，所有成品、原料和輔料均未出現(xiàn)皮膚刺激反應(yīng)。在皮膚過(guò)敏性試驗(yàn)中，成品與原料均未出現(xiàn)皮膚過(guò)敏反應(yīng)。其中溶劑油組動(dòng)物在完成誘導(dǎo)試驗(yàn)后動(dòng)物死亡，可能是由于溶劑油揮發(fā)性較強(qiáng)，在誘導(dǎo)給藥后，動(dòng)物吸入引起的中毒反應(yīng)。在多次皮膚刺激試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)消炎鎮(zhèn)痛膏中有2 種原料存在輕度的皮膚刺激反應(yīng)，1 種原料和1 種輔料存在中度皮膚刺激反應(yīng)。而成品中僅4 個(gè)廠家生產(chǎn)的消炎鎮(zhèn)痛膏出現(xiàn)輕度皮膚刺激反應(yīng)，說(shuō)明市售消炎鎮(zhèn)痛膏具有較好的安全性。

綜上所述，本次試驗(yàn)中，市售消炎鎮(zhèn)痛膏僅在多次皮膚刺激試驗(yàn)中，顯示輕度的皮膚刺激反應(yīng)，具有較好的安全性。