黃 蕙 楊河川 許杰妤 王 芳 李 婷
(1.成都彩虹電器(集團(tuán))股份有限公司,四川成都,610045;2.四川省農(nóng)藥檢定所,四川成都,610041)
高效氯氰菊酯為非內(nèi)吸性但具備觸殺和胃毒作用的殺蟲(chóng)劑,通過(guò)與害蟲(chóng)鈉離子通道相互作用而破壞其神經(jīng)系統(tǒng)的功能,用于公共衛(wèi)生和畜牧業(yè)中防治多種害蟲(chóng),如蠅、蟑螂、蚊、蚤、虱、臭蟲(chóng)、動(dòng)物體外寄生蟲(chóng)如蜱、螨等[1]。右旋反式氯丙炔菊酯外觀(guān)為淺黃色晶體,熔點(diǎn)90℃,在水中及其他羥基溶劑中溶解度很小,能溶于甲苯、丙酮、環(huán)己烷等大多數(shù)有機(jī)溶劑。對(duì)光、熱穩(wěn)定,在中性及微酸性介質(zhì)中穩(wěn)定,堿性條件下易分解。主要應(yīng)用:對(duì)蒼蠅和蟑螂有很好的擊倒和殺死活性[2]。
致倦庫(kù)蚊(Cuelx pipiens quinquefasciatus)是我國(guó)重要的家棲蚊種,作為衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑預(yù)防控制的主要靶標(biāo)生物,是傳播疾病的重要傳播媒介[3]。致倦庫(kù)蚊多在夜間出沒(méi),除了具有嚴(yán)重的騷擾性以外,還是傳播乙型腦炎的“兇手”,對(duì)人類(lèi)的健康造成嚴(yán)重威脅。
擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)化合物是防治蚊蟲(chóng)的主要有效成分,具有高效低毒、低殘留的特點(diǎn),是目前防治衛(wèi)生害蟲(chóng)的重要?dú)⑾x(chóng)劑[4-6]。市場(chǎng)上主要常用的昆蟲(chóng)擊倒劑為胺菊酯、烯丙菊酯,使用量大、使用時(shí)間長(zhǎng),蚊蟲(chóng)易產(chǎn)生抗性。所以使用新型擊倒劑能夠更有效地殺滅害蟲(chóng)。另外,右旋反式氯丙炔菊酯對(duì)蚊、蠅的致死活性較差,故應(yīng)與其他致死劑復(fù)配使用為宜。根據(jù)右旋反式氯丙炔菊酯的卓越擊倒活性、高效氯氰菊酯的觸殺和胃毒作用特點(diǎn),將兩種擬除蟲(chóng)菊酯混配在一起作用機(jī)制互補(bǔ),本文即是對(duì)采用擬除蟲(chóng)菊酯化合物為有效成分的氣霧劑進(jìn)行液相色譜檢測(cè),建立檢測(cè)方法進(jìn)行分離和定量分析,并進(jìn)一步通過(guò)生物測(cè)試研究具體有效驅(qū)蚊活性配比。
致倦庫(kù)蚊(Cuelx pipiens quinquefasciatus),引種于四川省疾病預(yù)防控制中心,羽化后第3—5天未吸血雌成蟲(chóng)。進(jìn)行試驗(yàn)溫度(26±1)℃,相對(duì)濕度65%±10%,保持室內(nèi)空氣流通。
供試樣品:殺蟲(chóng)氣霧劑樣品由我公司配制;正己烷(色譜級(jí))和乙酸乙酯(分析純)均為成都市科隆化學(xué)品有限公司;高效氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%)為江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司;右旋反式氯丙炔菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%)為江蘇揚(yáng)農(nóng)化工股份有限公司。
儀器:Waters 2695-2996液相色譜儀(帶VWD檢測(cè)器,沃特世);色譜柱(50mm×4.6mm×5μm,Aglient Si不銹鋼色譜柱,安捷倫);微量注射器(10ul,安捷倫)。
1.3.1高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯液相色譜分析
準(zhǔn)確稱(chēng)取0.05g高效氯氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(精確至0.0002g)和0.03g右旋反式氯丙炔菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(精確至0.0002g)于25mL容量瓶中,用正己烷定容,搖勻;準(zhǔn)確移取5.0mL于25mL容量瓶中,用正己烷定容,搖勻備用。取一罐氣霧劑樣品,將其置于約-15℃低溫箱中放置4h取出,在罐的頂部開(kāi)一個(gè)直徑約0.2mm的小孔,在46℃水浴中放置1h,讓拋射劑緩慢揮發(fā)掉,再將孔擴(kuò)大,倒出料液。準(zhǔn)確稱(chēng)取氣霧料液5g(精確至0.0002g)于25mL容量瓶中,用正己烷定容,搖勻待分析。色譜條件:柱溫(30±2)℃;流動(dòng)相:正己烷+乙酸乙酯=98+2(v/v);流速:1.5ml/min;檢測(cè)波長(zhǎng):230nm;進(jìn)樣量:10ul。公式計(jì)算:產(chǎn)品中高效氯氰菊酯或右旋反式氯丙炔菊酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)=(樣品峰面積×標(biāo)準(zhǔn)溶液中標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量×標(biāo)準(zhǔn)品純度質(zhì)量分?jǐn)?shù)×放完推進(jìn)劑后藥液質(zhì)量)/(標(biāo)準(zhǔn)品峰面積×稱(chēng)取氣霧劑樣品的質(zhì)量×(一整罐氣霧劑樣品質(zhì)量-倒出料液后空罐質(zhì)量)×5稀釋因子)。
1.3.2高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)蚊的趨避活性
按照GB/T 13917-2009相關(guān)規(guī)定進(jìn)行試驗(yàn)。
(1)室內(nèi)藥效:采用拉板無(wú)色透明有機(jī)玻璃圓筒裝置,將致倦庫(kù)蚊30只通過(guò)放蟲(chóng)孔分別釋放于帶拉板封蓋的圓筒內(nèi)。待試蟲(chóng)回復(fù)正?;顒?dòng)后將待測(cè)氣霧劑筒放至水平狀,噴嘴垂直向下,通過(guò)噴藥孔噴施藥劑(1.0±0.1)g,噴霧后立即用膠塞將噴藥孔塞住。于1min后將拉板抽掉,立即計(jì)時(shí),每隔一定時(shí)間記錄被擊倒的試蟲(chóng)數(shù)。20min后將全部供試?yán)ハx(chóng)轉(zhuǎn)移至清潔的養(yǎng)蟲(chóng)籠中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng),24h檢查記錄試蟲(chóng)死亡數(shù)。
(2)模擬現(xiàn)場(chǎng):在模擬現(xiàn)場(chǎng)距離地面1.5m、兩相鄰墻壁0.5m,垂直相交的4個(gè)點(diǎn)及中央共計(jì)掛掛籠5個(gè),每個(gè)籠內(nèi)釋放試蟲(chóng)20只。待試蟲(chóng)恢復(fù)正常活動(dòng)后,試驗(yàn)人員穿戴好防護(hù)服裝,站于模擬現(xiàn)場(chǎng)的中央,手持氣霧劑罐,按0.3g/m3劑量,噴嘴向上45度進(jìn)行噴霧,噴霧時(shí)應(yīng)轉(zhuǎn)身360度。施藥完畢,試驗(yàn)人員立即離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng),關(guān)閉門(mén)窗并計(jì)時(shí)。1h將被擊倒的試蟲(chóng)收集至清潔養(yǎng)蟲(chóng)籠中,用5%糖水棉球喂養(yǎng)。未被擊倒的試蟲(chóng)不收回,計(jì)入24h活蟲(chóng)數(shù),24h檢查死試蟲(chóng)數(shù)。
2.1.1 分析方法的線(xiàn)性相關(guān)性
分別配制5個(gè)不同質(zhì)量濃度的高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯標(biāo)準(zhǔn)溶液,按上述操作條件分別測(cè)定,以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo),繪制工作曲線(xiàn)。結(jié)果表明樣品峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系。高效氯氰菊酯線(xiàn)性方程:y=6E+06x+17121,R2=0.998;右旋反式氯丙炔菊酯線(xiàn)性方程:y=3E+06x-78927,R2=0.997。
2.1.2 分析方法的精密度試驗(yàn)和準(zhǔn)確度
高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的測(cè)定采用正相液相色譜法。隨機(jī)取一個(gè)樣品,對(duì)高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯平行測(cè)定。本方法對(duì)高效氯氰菊酯平行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.003899,變異系數(shù)為3.48%;對(duì)右旋反式氯丙炔菊酯的平行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.001967,變異系數(shù)為3.66%,精密度較好。取經(jīng)分析已知高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯準(zhǔn)確含量的樣品,分別加入已知含量高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯,分別測(cè)定高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的回收率。高效氯氰菊酯的添加回收率在99.13%—100.65%之間,平均回收率99.96%,RSD為0.68%;右旋反式氯丙炔菊酯的添加回收率在99.32%—100.55%之間,平均回收率99.8%,RSD為0.55%。
5個(gè)濃度高效氯氰菊酯·右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)蚊的室內(nèi)和模擬現(xiàn)場(chǎng)藥效如表1。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,按照GB/T 13917.2-2009、GB/T13917.10-2009規(guī)定的方法及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了評(píng)價(jià),配方①殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效不合格、模擬現(xiàn)場(chǎng)為B級(jí)產(chǎn)品;配方②殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為B級(jí)產(chǎn)品;配方③殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為B級(jí)產(chǎn)品;配方④殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為A級(jí)產(chǎn)品;配方⑤殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效為A級(jí)產(chǎn)品、模擬現(xiàn)場(chǎng)為B級(jí)產(chǎn)品。0.10%高效氯氰菊酯·0.05%右旋反式氯丙炔菊酯殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊的室內(nèi)藥效和模擬現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)最佳。
表1 5個(gè)不同配比殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊藥效試驗(yàn)結(jié)果
本試驗(yàn)首先建立了液相色譜法檢測(cè)殺蟲(chóng)氣霧劑產(chǎn)品中有效成分高效氯氰菊酯和右旋反式氯丙炔菊酯的分析方法,該分析方法準(zhǔn)確可靠,可應(yīng)用于生產(chǎn)質(zhì)量控制。另外,按照GB/T 13917.2-2009、GB/T13917.10-2009規(guī)定的方法及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了評(píng)價(jià),配方①殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效不合格、模擬現(xiàn)場(chǎng)為B級(jí)產(chǎn)品;配方②殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為B級(jí)產(chǎn)品;配方③殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為B級(jí)產(chǎn)品;配方④殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為A級(jí)產(chǎn)品;配方⑤殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效為A級(jí)產(chǎn)品、模擬現(xiàn)場(chǎng)為B級(jí)產(chǎn)品。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果,篩選確定了用于趨避致倦庫(kù)蚊殺蟲(chóng)氣霧劑的最佳配比為高效氯氰菊酯:右旋反式氯丙炔菊酯為0.10%:0.05%,該配比的殺蟲(chóng)氣霧劑對(duì)致倦庫(kù)蚊室內(nèi)藥效及模擬現(xiàn)場(chǎng)均為A級(jí)產(chǎn)品。本文研究的內(nèi)容基本確立了高效氯氰菊酯及右旋反式氯丙炔菊酯經(jīng)復(fù)配后能對(duì)致倦庫(kù)蚊起到良好的驅(qū)避效果,并且能對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行有效把控,可以進(jìn)一步完善產(chǎn)品,投放市場(chǎng)。