劉奇頎，瞿華香，余格輝，喻白鵬，張?jiān)榔?/p>

（1岳陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，湖南 岳陽(yáng) 414000；2湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，長(zhǎng)沙 410000；3岳陽(yáng)市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊(duì)，湖南 岳陽(yáng) 414000）

0 引言

蘆筍(Asparagus officinalis)又名石刁柏，是天冬門科天冬門屬一種多年生草本植物，藥食兼用，營(yíng)養(yǎng)豐富，具有較好的抗腫瘤、抗氧化等功效。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)蘆筍產(chǎn)業(yè)發(fā)展較快，種植面積約1×105hm2，居世界第一[1]。隨著國(guó)內(nèi)蘆筍產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，對(duì)蘆筍種質(zhì)資源和育種技術(shù)的研究也在逐步深入。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)科學(xué)家聚焦于蘆筍資源創(chuàng)新利用研究，已培育出了一批高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的國(guó)產(chǎn)蘆筍品種[2-4]。然而，蘆筍產(chǎn)業(yè)發(fā)展依然面臨自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)優(yōu)良新品種相對(duì)不足、高抗莖枯病品種資源缺乏等產(chǎn)業(yè)實(shí)際問(wèn)題，基于資源創(chuàng)新利用的蘆筍育種技術(shù)創(chuàng)新對(duì)于國(guó)內(nèi)蓬勃發(fā)展的蘆筍產(chǎn)業(yè)仍然具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

1 蘆筍種質(zhì)資源及其特性

蘆筍起源于歐亞大陸及北非河谷及草原地帶，國(guó)內(nèi)早期蘆筍相關(guān)種質(zhì)資源主要依賴于國(guó)外引進(jìn)，早期引進(jìn)的品種主要來(lái)源于美國(guó)，包括‘Mary Washington’、‘Apollo’、‘Grande’、‘Atlas’、‘UC’系列等，并廣泛在浙江、山東、遼寧、福建等省開(kāi)展試種。隨著國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)需求、種植環(huán)境等的變化，又不斷引進(jìn)歐洲等地蘆筍品種資源，主要包括德國(guó)品種‘西德全雄’，荷蘭品種‘Frankllim’、‘Gynlim’、‘Boolim’、‘Thielilm’、‘Gijnlim’，西班牙品種‘Damas’，以及新西蘭品種‘JWC1’、‘Taramea’等[5-10]。國(guó)內(nèi)各地廣泛分布著各類數(shù)量豐富的蘆筍近緣野生種質(zhì)資源，這對(duì)于開(kāi)展資源創(chuàng)新利用、拓寬蘆筍的遺傳背景具有重要意義。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)于國(guó)內(nèi)外不同來(lái)源的蘆筍種質(zhì)資源特性開(kāi)展了相關(guān)研究，這為進(jìn)一步了解不同資源農(nóng)藝性狀并開(kāi)展綜合利用提供了理論基礎(chǔ)。陳河龍等[11]認(rèn)為，蘆筍種質(zhì)資源的最主要農(nóng)藝性狀為株高和莖粗，且蘆筍產(chǎn)量與株高密切相關(guān)。他對(duì)40份蘆筍種質(zhì)資源的莖粗、株高及其相關(guān)性進(jìn)行比較分析。結(jié)果表明，‘Pacific Purple’、‘Purple Passion’、‘UC157’、‘冠軍’、‘JK107’5個(gè)品種在株高和莖粗上表現(xiàn)較好，其中后3個(gè)品種的產(chǎn)量也相應(yīng)較高，但是‘Pacific Purple’和‘Purple Passion’產(chǎn)量并不是太高，可能是由于紫色蘆筍分支相對(duì)較少，導(dǎo)致總產(chǎn)量表現(xiàn)不佳，莖粗和株高相關(guān)性研究結(jié)果顯示大部分品種的株高和莖粗的相關(guān)性不大[11]。為篩選出營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量豐富的種質(zhì)資源，陳河龍等[1]對(duì)46份國(guó)內(nèi)外不同蘆筍種質(zhì)資源的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)進(jìn)行了綜合評(píng)價(jià)，初步篩選到‘Pacific Purple’、‘JK106’、‘Backlim’、‘Gijnlim’等資源。王培等[12]分析發(fā)現(xiàn)，不同種質(zhì)資源之間株高和莖稈數(shù)差異較大，大部分種植株高集中在60～85 cm，莖稈數(shù)集中在5.75～8.25根；其中有2個(gè)紫色蘆筍資源莖稈數(shù)相對(duì)較少，與前文中陳河龍等[11]的研究結(jié)果一致，大多數(shù)種質(zhì)資源的株高和莖稈數(shù)之間沒(méi)有顯著相關(guān)性。

研究發(fā)現(xiàn)，蘆筍生態(tài)適應(yīng)性較強(qiáng)，在國(guó)內(nèi)許多地區(qū)都適宜種植，但不同品種資源在不同氣候條件下的產(chǎn)量和品質(zhì)有較大差異，即使是同一資源品種在不同生態(tài)條件下，其農(nóng)藝性狀、豐產(chǎn)性和品質(zhì)表現(xiàn)都有較大差異[13]。王連平等[7]對(duì)從國(guó)外引進(jìn)的9個(gè)蘆筍品種在浙江主產(chǎn)區(qū)適應(yīng)性進(jìn)行試驗(yàn)，對(duì)其抗病性、產(chǎn)量及商品品質(zhì)等性狀作綜合評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，‘Imperial F1’、‘Grande F1’、‘Apollo F1’和‘Atlas F1’等品種生長(zhǎng)勢(shì)旺盛，品質(zhì)優(yōu)、產(chǎn)量潛力較大，并且夏季筍較少，春季和秋季筍較多，單位面積經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，在浙江的推廣應(yīng)用價(jià)值大。陳振東等[14]為篩選適應(yīng)福建生態(tài)區(qū)的優(yōu)良新品種資源用以示范推廣，對(duì)不同資源在福建省的主要經(jīng)濟(jì)性狀、產(chǎn)量、抗性表現(xiàn)進(jìn)行了初步研究，結(jié)果表明，‘UC142’、‘Thielim’、‘Gijnlim’3個(gè)品種的產(chǎn)量、嫩莖粗度和抗病性都比本地主栽品種高，初步認(rèn)為可作為新一代品種進(jìn)行推廣。曹巖坡等[15]研究表明，在華北地區(qū)‘NJ951’和‘NJ857’表現(xiàn)出產(chǎn)量高、抗病性強(qiáng)及商品品質(zhì)表現(xiàn)優(yōu)良的特性，適宜在中國(guó)華北地區(qū)推廣種植。李改珍等[16]研究表明，‘Apollo’、‘Atlas’、‘京綠蘆1號(hào)’、‘冠軍’、‘Mill’、‘NJ1123’等資源在山西生態(tài)區(qū)種植產(chǎn)量、抗病性及商品品質(zhì)等性狀上表現(xiàn)較好，推廣應(yīng)用價(jià)值較大。鄒金環(huán)等[17]多年資源比較試驗(yàn)表明，‘特拉華2號(hào)’、‘特拉華4號(hào)’抗鹽性、抗病性、品質(zhì)及產(chǎn)量等方面表現(xiàn)良好，適于黃河三角洲地區(qū)栽培。李彩華等[18]連續(xù)3年對(duì)引進(jìn)的15個(gè)蘆筍資源進(jìn)行研究，結(jié)果表明‘Pacific2000’、‘Grande F1’、‘京綠1103’、‘096’4個(gè)品種在生育指數(shù)、干重、鮮重、抗鹽性等方面表現(xiàn)良好，適合黑龍江省鹽堿地區(qū)生長(zhǎng)，而‘Jersey Knight’、‘Apollo F1’、‘NJ977’、‘1034’對(duì)鹽堿地反應(yīng)較為敏感，不適合鹽堿地種植。

2 蘆筍主要育種技術(shù)

2.1 選擇育種

從現(xiàn)有的種質(zhì)資源群體中，選出可供利用的優(yōu)良的自然變異個(gè)體，用來(lái)培養(yǎng)優(yōu)良新品種或新品系，這是蘆筍原始栽培種大多采用的選育方法。據(jù)王秀等[19]報(bào)道，由臺(tái)灣臺(tái)南區(qū)農(nóng)業(yè)改良場(chǎng)從‘UC711’中選育出的‘臺(tái)南選3號(hào)’形態(tài)良好，筍尖緊，嫩莖較‘UC711’粗大，產(chǎn)量比‘UC711’高15%～20%，對(duì)立枯病、根腐病抗性較強(qiáng)，對(duì)莖枯病及褐斑病耐力中等。馬光灼等[20]從‘Mary Washington’群體中選取性狀相對(duì)一致的優(yōu)良雌雄株，經(jīng)過(guò)多代選育，獲得遺傳性狀穩(wěn)定的蘆筍品系，定名為‘黔園9號(hào)’，對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分的研究表明，營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)于‘Mary Washington’。張津來(lái)等[21]以‘Mary Washington 500W’為材料，經(jīng)試管苗莖段離體培養(yǎng)，選育出優(yōu)良品系‘金嶺85’，該品系表現(xiàn)出筍粗、筍多、早發(fā)、豐產(chǎn)等特性。

2.2 雜交育種

蘆筍雌雄異株，長(zhǎng)期異交，這為蘆筍新品種選育提供了豐富的基因資源。同時(shí)，蘆筍為多年生草本，基因型高度雜合，品種選育周期長(zhǎng)，為提高雜交育種效率，通常結(jié)合組培快繁技術(shù)，擴(kuò)繁2個(gè)親本的單株無(wú)性系，利用雌、雄親本無(wú)性系進(jìn)行規(guī)模制種，繁育新品種（系）。張?jiān)獓?guó)等[22]從不同資源試驗(yàn)田篩選出綜合性狀優(yōu)良的變異單株43株，利用有性雜交組配58個(gè)組合，1989年選育出了國(guó)內(nèi)綜合性狀突出的早期蘆筍新品系‘88-5’，通過(guò)品比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，‘88-5’較山東主栽品種‘Mary Washington 500W’增產(chǎn)15.6%，一級(jí)筍率提高9.6%，空心率降低6.2%，抗莖枯病能力較對(duì)照提高45%。1996—1999年李書(shū)華等[23-25]采用來(lái)自‘荷蘭全雄’中的全雄株系與來(lái)自無(wú)性F1代雜種‘Apollo’中的優(yōu)良雌株雜交選育出‘冠軍’；采用來(lái)自‘西德全雄’中的優(yōu)良單株與來(lái)自無(wú)性F1代雜種‘Grande’中的優(yōu)良雌株選育出‘新世紀(jì)’；隨后通過(guò)雜交選育方法選育蘆筍新品種‘蘆筍王子’。繆美華[26]通過(guò)篩選優(yōu)良雜交組合，結(jié)合組培快繁技術(shù)，于1997年育成了高產(chǎn)、抗病的蘆筍新品系‘96-1’，該品系母本是從‘UC800’中選出的優(yōu)良單株，父本是從‘澤西巨大’中選出的優(yōu)良單株。張立賓等[27-28]從耐鹽資源中篩選出品質(zhì)優(yōu)良、耐鹽性強(qiáng)的蘆筍雌雄單株，利用雜交選育方法選育出耐鹽新品系‘鹽筍1號(hào)’，2003年通過(guò)東營(yíng)市科技局成果鑒定。陳光宇等[29]以‘臺(tái)南3號(hào)’優(yōu)良雄性單株為母本，以荷蘭品種‘Backlim’優(yōu)良雄性單株為父本，通過(guò)雜交選育了無(wú)性系雜交F1優(yōu)良綠蘆筍新品種‘井岡701’。葉勁松[30]利用來(lái)源于美國(guó)血統(tǒng)的母本和來(lái)源于荷蘭血統(tǒng)的父本雜交選育出‘京綠蘆1號(hào)’。近年來(lái)，傳統(tǒng)的雜交選育在蘆筍新品種改良種具有廣泛的應(yīng)用，先后取得了一些成功的實(shí)例[31-34]，為培育具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的蘆筍新品種提供重要的技術(shù)方法。

2.3 多倍體育種

蘆筍一般為二倍體，多倍體蘆筍往往表現(xiàn)出植株高大、出筍粗壯、生物量大、抗性較強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)較豐富等特征，蘆筍多倍體育種具有較大的現(xiàn)實(shí)意義[35-37]。濰坊市農(nóng)科院在國(guó)內(nèi)首次利用多倍體育種技術(shù)，以‘UC800’經(jīng)秋水仙堿染色體加倍誘導(dǎo)出的優(yōu)良四倍體單株做父本，‘Mary Washington 500W’的優(yōu)良二倍體單株做母本，雜交選育出三倍體蘆筍品系‘J2-2’[35]。江西省農(nóng)科院從蘆筍試驗(yàn)材料中選擇產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)良的雌雄單株進(jìn)行自交，連續(xù)自交后代經(jīng)組培繁殖優(yōu)良單株于2002年開(kāi)始進(jìn)行配組雜交，培育出以四倍體紫蘆筍‘Purple Passion’的優(yōu)良株系為母本、以四倍體紫蘆筍‘Pacific Purple’的優(yōu)良株系為父本的四倍體紫蘆筍新品種‘井岡紅’[37]。

除多倍體選育，前人更多地對(duì)蘆筍多倍體誘導(dǎo)條件進(jìn)行研究。秋水仙素是應(yīng)用最為廣泛的人工誘導(dǎo)多倍體的化學(xué)誘變劑，于繼慶等[38]研究了秋水仙堿、8-羥基喹啉、對(duì)-二甲苯、富民農(nóng)4種藥劑對(duì)蘆筍染色體加倍效果，結(jié)果表明秋水仙堿對(duì)蘆筍多倍體的誘變效果也是最佳。秋水仙堿的處理濃度和處理時(shí)間顯著影響蘆筍多倍體誘導(dǎo)效果。鄒道謙等[39]用0.2%秋水仙素溶液分別處理蘆筍萌芽種子24、48 h，均獲得了四倍體，處理48 h誘變率更高，可達(dá)36.8%。陳春樺[40]在不同因子對(duì)‘井岡701’二倍體蘆筍誘導(dǎo)效果的研究中也得出了相同的結(jié)論。鄭思鄉(xiāng)等[41]發(fā)現(xiàn)，以濃度為0.1%的秋水仙素溶液浸泡蘆筍試管苗12 h，加倍效果最佳，加倍率6%。這2個(gè)研究的加倍率顯著低于前人的研究，可能是由于處理時(shí)間較短。影響多倍體誘導(dǎo)效果的另一個(gè)重要因素是處理方法的選取。韓成云等[42]以秋水仙堿為誘變劑，分別用浸泡法和涂抹法對(duì)蘆筍試管苗進(jìn)行多倍體誘導(dǎo)，結(jié)果表明，無(wú)論是從形態(tài)學(xué)還是染色體數(shù)目比較，均以涂抹法染色體加倍效果較佳，0.10%秋水仙素涂抹72 h的加倍率可達(dá)94%。張?zhí)煜璧萚43]分別用浸泡法和培養(yǎng)基添加法進(jìn)行多倍體誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中添加0.3%秋水仙堿并處理7天，染色體加倍率和成活率可達(dá)82.5%和80%。值得一提的是，在對(duì)蘆筍多倍體誘導(dǎo)的研究中發(fā)現(xiàn)，蘆筍多倍體誘導(dǎo)過(guò)程中出現(xiàn)了植株加倍倍數(shù)不一的現(xiàn)象，能觀察到四倍體植株和八倍體植株，同時(shí)存在大量嵌合體[40-42]。雖然四倍體植株較二倍體植株粗壯、抗性更強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)成分更高，但是也同時(shí)存在四倍體植株單株結(jié)實(shí)率顯著減少的現(xiàn)象[38]，并且蘆筍四倍體芽的分化與生長(zhǎng)很容易，而根的分化相對(duì)困難，初步研究顯示，NAA、IAA與IBA對(duì)根的分化、生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，2,4-D沒(méi)有作用，6-BA極不利于生根[41]。

2.4 全雄育種

當(dāng)前，全雄育種已成為蘆筍育種的重要突破口之一。前人研究表明，蘆筍的雌雄性別是由一對(duì)等位基因控制的，雄性植株基因型為Mm，雌性植株基因型為mm，還有一種超雄植株的基因型表現(xiàn)為MM。因此，生產(chǎn)上可利用蘆筍超雄株與雌株雜交開(kāi)展全雄育種，即F1代植株全部表現(xiàn)為雄株[44-49]。目前，生產(chǎn)上獲得蘆筍超雄株的主要有2種方法[47]，一是雄性兩性株自交，在自交后代中篩選超雄株；二是花粉培養(yǎng)誘導(dǎo)蘆筍雄核形成雙單倍體單株。

2.4.1 雄性兩性株自交 在自然條件下，蘆筍會(huì)極少地表現(xiàn)出雄性系中兩性花同株現(xiàn)象，這種情況非常罕見(jiàn)，但極有意義。兩性株的基因型為Mm，但卻可以表現(xiàn)出自交結(jié)實(shí)，自交可產(chǎn)生25%的超雄株(MM)后代，利用超雄株與優(yōu)良的雌株開(kāi)展雜交選育，就可以培育蘆筍優(yōu)良全雄新品種。欒法芳等[48]通過(guò)利用兩性株自交，4年間得到28粒種子，最后篩選出1株超雄株。張?jiān)榔降萚44]報(bào)道江西省農(nóng)科院通過(guò)利用兩性株自交后代篩選優(yōu)良超雄株，然后通過(guò)雜交選育方法培育出國(guó)內(nèi)首個(gè)蘆筍無(wú)性系全雄優(yōu)良新品種‘井岡111’。濰坊市農(nóng)科院以優(yōu)良超雄株與優(yōu)良雌株組配雜交組合，選育出了以‘NX10-1’為母本、‘sy20-3’為父本的全雄品種‘WF-8’[50-51]。楊海峰等[52]以雄性兩性株自交S1代超雄株為父本，以‘993A’優(yōu)良雌株為母本，雜交組配篩選出綜合性狀較好的后代組合‘X0812’，具有極強(qiáng)的雜種全雄優(yōu)勢(shì)。

2.4.2 花藥培養(yǎng) 開(kāi)展蘆筍花藥培養(yǎng)的第一步是外植體取材，花粉發(fā)育時(shí)期是影響結(jié)果的關(guān)鍵因素之一。一般來(lái)說(shuō)，處于單核中期或晚期的小孢子活躍度高，是不同分裂方式和發(fā)育途徑的共同起點(diǎn)，培養(yǎng)效果好，通過(guò)確定蘆筍花器的外部形態(tài)特征與小孢子發(fā)育時(shí)期的對(duì)應(yīng)關(guān)系，可以更加便捷地從外觀形態(tài)（通常是花藥長(zhǎng)度）直觀地判斷花粉發(fā)育時(shí)期[53]。前人研究發(fā)現(xiàn)，處于花粉四分子期—單核期的花藥最易形成愈傷組織[54-55]。陳海媛等[56]以‘Apollo’F1代為試材，結(jié)果表明1～2 mm的花蕾愈傷組織誘導(dǎo)效果最佳。前人分析不同倍性蘆筍的花粉誘導(dǎo)效果，二倍體最佳誘導(dǎo)花蕾長(zhǎng)度為1.5～2.0 mm，四倍體最佳誘導(dǎo)花蕾長(zhǎng)度為2.0～2.5 mm[57-59]。試材的生理狀態(tài)（包括所處的溫度、光照條件及營(yíng)養(yǎng)狀況等）也對(duì)花藥培養(yǎng)有一定影響，研究表明，露地栽培的蘆筍材料愈傷組織誘導(dǎo)率高于溫室栽培材料，且接種時(shí)間以4月底為最佳[57,59-60]。低溫能夠改變小孢子的分裂方式，啟動(dòng)雄核發(fā)育，并且對(duì)于蘆筍花藥培養(yǎng)來(lái)說(shuō)，低溫處理的體細(xì)胞愈傷組織形成率也較低[61]。范雙喜等[54]研究認(rèn)為4℃下處理3～5天較為適合蘆筍愈傷組織形成，后人研究中也多采用該處理方式[56,60,62-63]。蘆筍花藥愈傷組織誘導(dǎo)的其他重要條件還包括培養(yǎng)基中添加的激素種類、用量和配比。沈光華等[64]研究表明當(dāng)NAA與6-BA之比為1:1時(shí)，既有利于芽的分化又有利于根的分化。研究認(rèn)為，細(xì)胞分裂素對(duì)蘆筍花藥形成愈傷組織有重要作用，6-BA的影響大于NAA，最佳條件為MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA(6-BA:NAA=2:1)[55-56,60]。亦有研究發(fā)現(xiàn)，2,4-D濃度為0.5～1.0 mg/L能有效提高愈傷組織誘導(dǎo)率，但當(dāng)其濃度過(guò)高時(shí)畸形現(xiàn)象較多[57-58,65]。蔗糖對(duì)小孢子的脫分化和再分化也起到有利作用[58,60-61]。不同蘆筍品種的花藥培養(yǎng)效果差異明顯，不同基因型對(duì)蘆筍花藥培養(yǎng)具有重要影響。品種間差異主要是由品種的遺傳差異引起的，其中也包括基因?qū)ε囵B(yǎng)基成分的適應(yīng)性和選擇性[64-66]。蘆筍花藥愈傷組織誘導(dǎo)率不僅在品種間差異很大，即使同一品種的不同植株誘導(dǎo)率差異也非常顯著[58,60,67-68]。

2.4.3 小孢子培養(yǎng) 蘆筍花藥培養(yǎng)的一個(gè)重要缺陷在于再生植株形成單倍體的頻率比較低，非常容易受到體細(xì)胞的干擾，而采用小孢子培養(yǎng)能較好地避免這個(gè)問(wèn)題。Zhang等[69]研究報(bào)道，蘆筍游離小孢子在1.0 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L BA的液體MS培養(yǎng)基中，可以獲得小孢子胚和愈傷組織，將愈傷組織轉(zhuǎn)瓶至固體MS培養(yǎng)基中，添加激素2,4-D 1.0 mg/L和BA 0.2 mg/L，6周后可獲得單倍體再生植株。湯泳萍等[70]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)花藥顏色為黃或黃綠，花蕾長(zhǎng)度在2.0～2.4 mm時(shí)，大部分小孢子處于單核靠邊期，可作為蘆筍小孢子培養(yǎng)的最佳時(shí)期；變溫處理相較高溫處理更有利于小孢子膨大，促進(jìn)小孢子的雄核發(fā)育機(jī)制；不同的基因型之間小孢子愈傷組織誘導(dǎo)率差異顯著；小孢子培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基為改良MS、0.5 mg/L 6-BA、1.0 mg/L NAA、0.2 mg/L 2,4-D、400 mg/L葡萄糖和6%的蔗糖。蔡坤秀等[71]以25個(gè)基因型的蘆筍為試材，發(fā)現(xiàn)影響成功誘導(dǎo)愈傷組織的一個(gè)關(guān)鍵因素是供體基因型，不同基因型差異顯著。

2.5 分子標(biāo)記輔助育種

獲得超雄株是全雄育種廣大前提，除培育超雄株外，超雄株的篩選也是實(shí)現(xiàn)蘆筍全雄育種的關(guān)鍵。蘆筍屬于多年生草本植物，生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，一般而言，從播種到開(kāi)花的周期約為2年，超雄株與一般雄株在植株生理和開(kāi)花特性表型上都無(wú)明顯區(qū)別。因此，通過(guò)利用與性別決定基因緊密連鎖的DNA分子標(biāo)記進(jìn)行輔助育種，可提高育種效率，實(shí)現(xiàn)在苗期準(zhǔn)確高效鑒定蘆筍性別基因，高效篩選蘆筍超雄株。盧龍斗等[72]研究發(fā)現(xiàn)雌性蘆筍能夠擴(kuò)增出一條相當(dāng)于RAPD標(biāo)記的特異帶，而在雄株中則不能擴(kuò)增出該特異條帶，說(shuō)明該克隆包含有與雌性相連鎖的特異性片段。韓瑩琰等[73]通過(guò)BSA法構(gòu)建了蘆筍雌雄基因池，篩選出了一個(gè)與M基因連鎖的AFLP標(biāo)記。李書(shū)華等[74]通過(guò)AFLP標(biāo)記分析，從蘆筍雄性植株基因組中成功擴(kuò)增出一個(gè)雄性連鎖的AFLP標(biāo)記MLDA555，并將該標(biāo)記轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定且容易操作的SCAR標(biāo)記。周勁松等[75]利用與蘆筍性別決定基因緊密連鎖的DNA分子標(biāo)記Asp1-T7和Asp1-T7sp對(duì)測(cè)交父、母本進(jìn)行多態(tài)性分析，發(fā)現(xiàn)這2個(gè)分子標(biāo)記在目標(biāo)測(cè)交組合父母本間有多態(tài)性，隨后利用Asp1-T7對(duì)測(cè)交組合單株進(jìn)行檢測(cè)篩選出全雄組合，并用Asp1-T7sp對(duì)篩選出的全雄組合進(jìn)行擴(kuò)大檢測(cè)驗(yàn)證，篩選結(jié)果與田間調(diào)查實(shí)際表型結(jié)果基本吻合，說(shuō)明利用現(xiàn)行DNA分子標(biāo)記結(jié)合測(cè)交篩選蘆筍超雄株的方法在理論和實(shí)踐上均可行有效。

3 展望

蘆筍種植經(jīng)濟(jì)效益好，營(yíng)養(yǎng)豐富，富含各種活性成分，符合大健康農(nóng)業(yè)發(fā)展方向，其產(chǎn)業(yè)發(fā)展前景廣闊，面臨較好的產(chǎn)業(yè)發(fā)展機(jī)遇也面臨一些重點(diǎn)技術(shù)挑戰(zhàn)。現(xiàn)有蘆筍商業(yè)品種遺傳背景相對(duì)狹窄，種質(zhì)資源的遺產(chǎn)多樣性偏低，限制了更多的蘆筍優(yōu)質(zhì)、高抗、高活性成分優(yōu)良新品種的選育。在現(xiàn)有蘆筍商業(yè)品種的抗病性鑒定中基本未見(jiàn)有高抗病性品種的報(bào)道，引種的主要來(lái)源歐美等國(guó)，氣候冷涼干燥，蘆筍莖枯病發(fā)生較輕，因此這些品種在蘆筍莖枯病抗性方面不突出，而國(guó)內(nèi)大部分蘆筍產(chǎn)區(qū)莖枯病的病發(fā)率都較高，病害防治成本高、耗工大。雖然花藥培養(yǎng)研究有較多報(bào)道，也獲得了單倍體、雙倍體植株，但成功用于全雄育種的并不多。當(dāng)前蘆筍重要功能基因挖掘與標(biāo)記開(kāi)發(fā)，主要集中于蘆筍性別，其他目標(biāo)性狀研究幾乎未見(jiàn)報(bào)道，蘆筍分子標(biāo)記前景選擇僅局限于雌雄性別。

鑒于此，筆者認(rèn)為今后蘆筍種質(zhì)資源創(chuàng)新和育種技術(shù)研究工作可重點(diǎn)從2個(gè)方面尋求突破。（1）高度重視蘆筍種質(zhì)資源的創(chuàng)新利用，尤其是來(lái)源于國(guó)內(nèi)本土的不同近緣野生種質(zhì)資源，更大程度地拓寬現(xiàn)有蘆筍資源的遺傳背景，為適應(yīng)不同生態(tài)區(qū)的優(yōu)良新品種選育提供材料基礎(chǔ)。特別需要切實(shí)加強(qiáng)蘆筍莖枯病抗性資源的創(chuàng)新利用，選育一系列高抗莖枯病品種，從品種上徹底解決莖枯病這一蘆筍產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要技術(shù)瓶頸。（2）基于傳統(tǒng)技術(shù)手段和蘆筍生物學(xué)特性的育種技術(shù)創(chuàng)新，開(kāi)展多元化育種，高效推進(jìn)優(yōu)質(zhì)、高抗、高活性成分優(yōu)良新品種選育。結(jié)合蘆筍基因組信息平臺(tái)，開(kāi)發(fā)與蘆筍優(yōu)異性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記，持續(xù)推進(jìn)蘆筍全雄育種，蘆筍花藥和小孢子培養(yǎng)重點(diǎn)應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)，解決體細(xì)胞干擾等，建立一套行之有效的培養(yǎng)技術(shù)體系，與蘆筍全雄品種培育緊密結(jié)合。