李 倩，陳丕坤，宋 揚(yáng)

（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

新型鴨呼腸孤病毒（Novel duck reovirus，NDRV）病又稱鴨壞死性肝炎。NDRV在血清學(xué)上完全不同于之前的番鴨呼腸孤病毒，造成鴨一種以肝臟不規(guī)則壞死、出血斑/點(diǎn)和心肌出血為主要特征的傳染性疾病[1]，番鴨、半番鴨、麻鴨和北京鴨等均可發(fā)病，發(fā)病無明顯季節(jié)性，發(fā)病鴨一般為3～25 日齡，鴨的日齡愈小，發(fā)病率和死亡率愈高[2]。NDRV的感染嚴(yán)重?fù)p害鴨的免疫器官，造成免疫抑制，導(dǎo)致其他傳染病的繼發(fā)[3]。鴨呼腸孤病毒病最先于2005 年在我國(guó)的福建、浙江和廣東等地鴨群中出現(xiàn)和流行，后蔓延至全國(guó)，近年來由于該病的肆虐給我國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失，現(xiàn)地急需有效疫苗或抗體對(duì)該病進(jìn)行防控。為了控制該病的發(fā)生，使用卵黃抗體做緊急預(yù)防接種有較大的實(shí)踐意義。但使用卵黃抗體時(shí)，卵黃抗體在機(jī)體內(nèi)的被動(dòng)免疫期是決定卵黃抗體免疫程序的決定性因素。為此，本試驗(yàn)對(duì)哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司試制的新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體進(jìn)行雛鴨接種后不同時(shí)間攻毒與抗體保護(hù)效果的相關(guān)性研究，以確定新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體在雛鴨體內(nèi)的被動(dòng)免疫持續(xù)期。

1 材料

1.1 卵黃抗體

新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司試制，批號(hào)分別為202001、202002、202003。

1.2 檢驗(yàn)用強(qiáng)毒

新型鴨呼腸孤病毒檢驗(yàn)用強(qiáng)毒，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)，批號(hào)為20202，病毒含量為107.17TCID50/0.1 mL，規(guī)格為2.0 mL·瓶-1。

1.3 易感雛鴨

1日齡健康雛鴨，購(gòu)自海城市凱丹畜禽養(yǎng)殖專業(yè)合作社。

2 方法

選取1日齡易感雛鴨40只作為抗體試驗(yàn)組，于頸部皮下注射卵黃抗體，1.0 mL·只-1；同時(shí)設(shè)同批次同日齡易感雛鴨各40 只作為攻毒對(duì)照組，肌肉注射生理鹽水，1.0 mL·只-1；取同批次同日齡易感雛鴨10只，不注射任何藥品作為健康對(duì)照組。在抗體注射后1、3、5、7 d 分別從抗體試驗(yàn)組和攻毒對(duì)照組雛鴨中隨機(jī)抽取10 只，肌肉注射新型鴨呼腸孤病毒攻毒，0.1 mL·只-（1含106.0TCID50），各組鴨同條件下隔離飼養(yǎng)觀察10 d。觀察期結(jié)束后剖殺全部雛鴨檢查肝臟和脾臟病變情況，以攻毒對(duì)照組至少80%雛鴨出現(xiàn)呼腸孤病毒感染導(dǎo)致的肝臟或脾臟有典型壞死癥狀為試驗(yàn)成立，計(jì)算抗體保護(hù)率[抗體保護(hù)率=（總數(shù)-發(fā)病數(shù)）/總數(shù)]。共計(jì)進(jìn)行3 批抗體試驗(yàn)。

3 結(jié)果與分析

1日齡易感雛鴨注射卵黃抗體后不同時(shí)間攻擊新型鴨呼腸孤病毒強(qiáng)毒，攻毒后觀察10 d。卵黃抗體對(duì)雛鴨的攻毒保護(hù)情況見表1～2。

表1 新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動(dòng)免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果

表2 新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動(dòng)免疫持續(xù)期試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

由表1～2 可知，3 批卵黃抗體注射的1 日齡易感雛鴨，注射后1～5 d，抗體對(duì)雛鴨的保護(hù)率為93.3%～100%；注射后7 d的攻毒保護(hù)率為53.3%；各時(shí)間點(diǎn)攻毒對(duì)照組鴨均90%～100%發(fā)病。

剖檢抗體試驗(yàn)組及攻毒對(duì)照組發(fā)病雛鴨，可見肝臟和脾臟均呈典型的壞死及出血性病理變化；抗體試驗(yàn)組存活雛鴨剖檢無病理變化；健康對(duì)照組雛鴨均100%健活，剖檢無病理變化。

4 討 論

卵黃抗體注射動(dòng)物機(jī)體后，抗體在體內(nèi)能持續(xù)存在一段時(shí)間，并產(chǎn)生被動(dòng)免疫保護(hù)作用。本試驗(yàn)用哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備的新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體注射雛鴨，并于注射后不同時(shí)間注射新型鴨呼腸孤病毒強(qiáng)毒，觀察卵黃抗體對(duì)雛鴨的保護(hù)效果，從而確定卵黃抗體的被動(dòng)免疫持續(xù)期。試驗(yàn)結(jié)果顯示，接種抗體后1～5 d，抗體對(duì)1日齡雛鴨的攻毒保護(hù)率均在90%以上；注射后第7天的攻毒保護(hù)率為53.3%；各時(shí)間點(diǎn)攻毒對(duì)照組雛鴨90%～100%發(fā)病，剖檢抗體試驗(yàn)組及攻毒對(duì)照組發(fā)病雛鴨，發(fā)現(xiàn)肝臟和脾臟均呈典型的壞死及出血性病理變化；抗體試驗(yàn)組存活雛鴨剖檢無病理變化；健康對(duì)照組雛鴨均100%健活，剖檢無病理變化。試驗(yàn)結(jié)果表明，注射卵黃抗體后5 d，抗體仍能對(duì)雛鴨產(chǎn)生良好地保護(hù)作用，而7 d后抗體保護(hù)作用大幅減弱。

5 結(jié) 論

哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備的新型鴨呼腸孤病毒卵黃抗體被動(dòng)免疫保護(hù)期為5 d。