高志鵬 楊 坤 陳 凱 習(xí)丙文, 謝 駿,

(1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)無錫漁業(yè)學(xué)院, 無錫 214081; 2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水漁業(yè)和種質(zhì)資源利用重點實驗室, 無錫 214081)

放射孢子蟲是黏孢子蟲生活史中寄生在無脊椎動物宿主的發(fā)育階段; 魚體接觸有放射孢子蟲水體是黏孢子蟲病主要感染途徑之一[1]。自1899年Stolc[2]在顫蚓上首次發(fā)現(xiàn)放射孢子蟲后的很長一段時間, 放射孢子蟲一直被認(rèn)為隸屬于黏體動物門獨立的放射孢子蟲綱[3]。1984年Wolf和Markiw首次證實虹鱒神經(jīng)系統(tǒng)寄生腦碘泡蟲(Myxobolus cerebralis)生活史需要寡毛類(正顫蚓)和魚類兩替換宿主的發(fā)育過程[4]。該研究結(jié)果開創(chuàng)性的將放射孢子蟲和黏孢子蟲的物種統(tǒng)一起來。此后, 黏體動物分類系統(tǒng)中放射孢子蟲原有分類階元被廢止(Suppress),不作為有效分類類群使用。為了容納此前報道大量未鑒定出對應(yīng)黏孢子蟲的種類, 建議將原有屬名作為集合群(Collective group)區(qū)分不同形態(tài)的放射孢子蟲[5,6]。目前共有20個放射孢子蟲的集合類群[3,7—11], 其中以三突放射孢子蟲集合類群報道種類最多(約60種)[10]。由于放射孢子蟲是魚類黏孢子蟲病的病原感染傳播重要途徑, 其相關(guān)研究受到越來越多關(guān)注。

目前, 魚類寄生黏孢子蟲報道有16科62屬2500多種[12—14], 其中一些種類會導(dǎo)致嚴(yán)重的養(yǎng)殖或自然水體魚類疾病: 如洪湖碘泡蟲引起的鯽“喉孢子蟲病”[15], 腦碘泡蟲引起的鮭鱒的“旋轉(zhuǎn)病”[16],吳李碘泡蟲引起的鯽“腹孢子蟲病”等[17]。其中通過實驗室感染或分子生物學(xué)方法闡析了約60種黏體動物生活史[18]。王桂堂和姚衛(wèi)建[19]在2000年首次報道了國內(nèi)發(fā)現(xiàn)的1種三突放射孢子蟲(Triactinomyxon); 習(xí)丙文等[3,20—22]報道了14種放射孢子蟲并鑒定出了其中4種對應(yīng)的黏孢子蟲種類: 武漢單極蟲Thelohanellus wuhanensis)、吳李碘泡蟲(Myxobolus wulii)、培養(yǎng)碘泡蟲(Myxobolus cultus)和汪氏單極蟲(Thelohanellus wangi)。趙丹丹等[23—25]報道了吉陶單極蟲(Thelohanellus kitauei)、龜殼單極蟲(Thelohanellus testudineus)和鲇楚克拉蟲(Zschokkella parasiluri)的生活史。

本研究在對江蘇地區(qū)發(fā)病鯽塘口的放射孢子蟲調(diào)查過程中, 發(fā)現(xiàn)了多種放射孢子蟲。本文報道和描述了其中新發(fā)現(xiàn)的4個集合類群的6種放射孢子蟲。

1 材料與方法

1.1 池塘底泥寡毛類采集和暫養(yǎng)

通過自制采泥器采集養(yǎng)殖池塘底泥(10—15 cm),用鋼篩(40目)篩除污泥, 收集寡毛類帶回實驗室在曝氣自來水中暫養(yǎng), 室溫(25±2)℃。

1.2 放射孢子蟲的檢查和鑒定

吸取暫養(yǎng)水樣, 用浮游計數(shù)框在顯微鏡下(Olympus CX-31, 10倍物鏡)檢查是否有放射孢子蟲。將由單條寡毛類釋放的放射孢子蟲在顯微鏡下拍照, 形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)測量采用系統(tǒng)自帶軟件(TAC-9.0), 單位為微米(μm)。測量后的放射孢子蟲水樣收集到離心管中, -20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 SSU rDNA序列擴(kuò)增

將保存的放射孢子蟲水樣離心(6000 r/min,5min)富集蟲體到1.5 mL離心管中, 用Lysis buffer for microorganism to direct PCR (TaKaRa) 粗提基因組-20℃保存。放射孢子蟲SSU rDNA采用巢式PCR方法擴(kuò)增, 外引物ERIB1和ERIB10[26], 內(nèi)引物Myxosp-F和Myxosp-R[27]。第一輪PCR擴(kuò)增程序: 94℃預(yù)變性5min; 30個循環(huán), 94℃變性30s, 50℃退火45s, 72℃延伸1min; 最后延伸7min; 第二輪PCR擴(kuò)增程序:94℃預(yù)變性5min; 35個循環(huán), 94℃變性30s, 55℃退火45s, 72℃延伸45s; 最后延伸7min。PCR反應(yīng)體系: Ex Taq酶0.5 μL, 10×ExTaqbuffer 5 μL, dNTP 4 μL, 正反引物(10 μmol/L)各1 μL, 模板2—5 μL, 加雙蒸水至50 μL。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1.2%瓊脂糖凝膠電泳分離、純化回收, 送至生工生物工程(上海)測序。

1.4 DNA序列分析

測序獲得的SSU rDNA序列使用SeqMan (Lasergen package, DNAStar Inc.) 進(jìn)行拼接, 通過BLASTN(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/) 在NCBI GenBank數(shù)據(jù)庫中檢索同源性較高序列進(jìn)行比對和系統(tǒng)發(fā)育分析。序列多重比對采用Clustal X軟件[28]; 序列一致性和堿基替換最佳模型分析使用MEGA 7.0軟件[29]。系統(tǒng)發(fā)育分析采用MrBayes 3.1.2軟件的貝葉斯推論法(Bayesian Inference, BI)和MEGA 7.0軟件的最大似然法(Maximum likelihood, ML)。

2 結(jié)果

2018年4月至2019年6月在江蘇溧陽、江陰、大豐和洪澤4個地區(qū)的鯽苗種塘和成魚塘采集的底棲寡毛類水蚯蚓主要是蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyiBeddard, 1892)。在檢查的3000多條蘇氏尾鰓蚓中共發(fā)現(xiàn)10種放射孢子蟲, 分別隸屬于6個集合類群: 三突放射孢子蟲(Triactinomyxon)2種、橘瓣放射孢子蟲(Aurantiactinomyxon)2種、棘放射孢子蟲(Echinactinomyxon)2種、新型放射孢子蟲(Neoactinomyxum)2種、匈牙利放射孢子蟲(Hungactinomyxon)1種和雷氏放射孢子蟲(Raabeia)1種。其中4種與作者實驗室前期報道描述種類一致, 本文主要對其中新發(fā)現(xiàn)的6種放射孢子蟲進(jìn)行鑒定和描述。

2.1 三突放射孢子蟲DF

該類型放射孢子蟲發(fā)現(xiàn)于江蘇大豐(Dafeng),遵循放射孢子蟲命名習(xí)慣將其命名為三突放射孢子蟲DF(圖1和表1)。

形態(tài)學(xué)特征: 孢子具有長橢圓形孢體, 有孢柄和3個錨狀尾突。孢體長(22.62±1.58) μm (19.05—24.79 μm), 孢體寬(9.96±0.91) μm (19.05—12.34 μm);3個等長的梨形極囊位于孢體頂端, 極囊長(4.56±0.48) μm (3.96—5.79 μm), 極囊寬(2.06±052) μm(1.22—2.73 μm); 孢柄長(72.35±1.00) μm (68.87—77.84 μm); 3個幾乎等長錨狀尾突長(142.99±7.39) μm(132.13—156.66 μm)。

圖1 三突放射孢子蟲DFFig.1 Triactinomyxon-type DF

表1 本研究發(fā)現(xiàn)放射孢子蟲及其相似種類的形態(tài)測量數(shù)值(均值±標(biāo)準(zhǔn)差, 最小值—最大值)Tab.1 Morphormetric data of freshly actinosporeans released from the oligochaete Branchiura sowerbyi (mean±SD with ranges in parentheses; μm)

宿主: 蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyi)

采樣地點: 江蘇省鹽城市大豐區(qū)海豐農(nóng)場

感染率: 0.6%(3/500)

DNA序列: GenBank登錄號MN294777

2.2 三突放射孢子蟲HZ

該類型放射孢子蟲發(fā)現(xiàn)于江蘇洪澤(Hongze),遵循放射孢子蟲命名習(xí)慣將其命名為三突放射孢子蟲HZ(圖2和表1)。

圖2 三突放射孢子蟲HZFig.2 Triactinomyxon-type HZ

形態(tài)學(xué)特征: 該放射孢子蟲形態(tài)與三突放射孢子蟲DF較為接近。孢體正面觀呈長柱形, 孢體長(21.30±1.11) μm (19.11—23.31 μm), 孢體寬 (10.60±0.47) μm (9.36—12.80 μm); 3個等大極囊均勻分布在孢體頂端, 極囊長(4.95±0.33) μm (4.41—5.48 μm),極囊寬 (2.79±0.61) μm (1.94—3.43 μm); 孢柄長(81.62±6.17) μm (73.54—91.58 μm); 3個等長的錨狀尾突長 (176.56±2.48) μm (152.51—204.56 μm)。

宿主: 蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyi)

采樣地點: 江蘇省淮安市洪澤區(qū)

感染率: 0.77%(5/650)

DNA序列: GenBank登錄號MN294778

2.3 棘放射孢子蟲LY1

該類型放射孢子蟲發(fā)現(xiàn)于江蘇溧陽(Liyang),遵循放射孢子蟲命名習(xí)慣將其命名為棘放射孢子蟲LY1(圖3和表1)。

形態(tài)學(xué)特征: 孢子具近卵圓形孢體和3個直棘尾突, 整體呈三角支架狀。孢體長 (15.22±1.47) μm(13.17—18.97 μm), 孢體寬 (8.92±0.24) μm (8.21—10.08 μm); 極囊長 (4.71±0.06) μm (4.09—5.45 μm),極囊寬 (2.72±0.16) μm (2.24—3.21 μm); 尾突長(127.69±1.46) μm (121.12—132.56 μm), 尾突寬(5.32±0.28) μm (4.59—6.35 μm)。

宿主: 蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyi)

采樣地點: 江蘇省溧陽前馬鎮(zhèn)

感染率: 0.15%(1/650)

DNA序列: GenBank登錄號MN294775

2.4 棘放射孢子蟲LY2

該類型放射孢子蟲發(fā)現(xiàn)于江蘇溧陽(Liyang),遵循放射孢子蟲命名習(xí)慣將其命名為棘放射孢子蟲LY2(圖4和表1)。

圖3 棘放射孢子蟲LY1Fig.3 Echinactinomyxon-type LY1

圖4 棘放射孢子蟲LY2Fig.4 Echinactinomyxon-type LY2

形態(tài)學(xué)特征: 孢子形態(tài)和測量學(xué)數(shù)據(jù)與棘放射孢子蟲LY1相似; 孢體長 (14.01±0.18) μm (13.57—14.71 μm), 孢體寬 (8.81±0.85) μm (7.88—9.58 μm);3個等長的極囊長 (5.32±0.65) μm (4.65—6.10 μm),極囊寬 (2.98±0.7) μm (2.66—3.44 μm); 3個等長尾突長 (123.52±6.27) μm (111.51—138.81 μm), 尾突寬 (5.89±0.74) μm (4.51—6.76 μm)。

宿主: 蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyi)

采樣地點: 江蘇省溧陽前馬鎮(zhèn)

感染率: 1.5%(10/650)

DNA序列: GenBank登錄號MN294776

2.5 新型放射孢子蟲LY

該類型放射孢子蟲發(fā)現(xiàn)于江蘇溧陽(Liyang),遵循放射孢子蟲命名習(xí)慣將其命名為棘放射孢子蟲LY(圖5和表1)。

形態(tài)學(xué)特征: 孢子頂面觀呈近似三角形, 尾突月牙形, 孢體呈球形, 3個極囊聚集在孢體頂點處凸起。孢體直徑長 (19.69±0.13) μm (18.66—20.87 μm);3個極囊長(2.69±0.49) μm (2.11—3.41 μm); 月牙狀尾突長約占孢體直徑的1/3, 長(6.41±0.31) μm (5.37—7.66 μm), 寬 (18.46±2.62) μm (15.50—20.73 μm)。

宿主: 蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyi)

采樣地點: 江蘇省溧陽市前馬鎮(zhèn)

圖5 新放射孢子蟲LYFig.5 Neoactinomyxum-type LY

感染率: 0.17%(1/600)

DNA序列: GenBank登錄號MN294779

2.6 匈牙利放射孢子蟲DF

該類型放射孢子蟲發(fā)現(xiàn)于江蘇大豐(Dafeng),遵循放射孢子蟲命名習(xí)慣將其命名為匈牙利放射孢子蟲DF(圖6和表1)。

圖6 水體懸浮的匈牙利放射孢子蟲DF, 比例尺=50 μmFig.6 Fresh floating Hungactinomyxon-type DF released by B.sowerbyi.Scale bars=50 μm

形態(tài)學(xué)特征: 由4個近似橘瓣放射孢子蟲的尾突末端連接組成立方體, 與另一個由4個孢子組成的立方體交織形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu); 孢體近球形, 無孢柄,尾突直棘狀。單個孢子的孢體長(13.08±0.44) μm(12.29—13.56 μm), 孢體寬(10.20±0.30) μm (9.71—10.52 μm); 不含有孢柄; 3個等長的尾突(69.84±8.13) μm (56.02—84.52 μm), 尾突寬(9.38±0.68) μm(8.07—10.39 μm); 3個等大的極囊長(4.19±048) μm(3.52—4.88 μm) , 極囊寬(3.00±0.13) μm (2.79—3.22 μm) 。

宿主: 蘇氏尾鰓蚓(Branchiura sowerbyi)

采樣地點: 江蘇省鹽城市大豐區(qū)海豐農(nóng)場

感染率: 0.8%(4/500)

DNA序列: GenBank登錄號MN334159

2.7 SSU rDNA序列比對和系統(tǒng)發(fā)育分析

PCR擴(kuò)增獲得了6種新發(fā)現(xiàn)放射孢子蟲的SSU rDNA序列片段, 其中三突放射孢子蟲DF 845 bp(GenBank登錄號MN294777)、三突放射孢子蟲HZ 856 bp (GenBank登錄號MN294778)、棘放射孢子蟲LY1 830 bp (GenBank登錄號MN294775)、棘放射孢子蟲LY2 842 bp (GenBank登錄號MN294776)、新放射孢子蟲LY 830 bp (GenBank登錄號MN29-4779)、匈牙利放射孢子蟲DF 843bp (GenBank登錄號MN334159)。序列同源性比對分析發(fā)現(xiàn), 三突放射孢子蟲HZ和DF與文獻(xiàn)報道的Triactinomyxon type CZ (GenBank登錄號JX477771)同源性最高, 分別為93.39%和94.48%; 棘放射孢子蟲LY1與Myxobolus lentisuturalis(GenBank登錄號AY119688)同源性最高(96.88%); 棘放射孢子蟲LY2與Hungactinhomyxon type 1 (GenBank登錄號AY779062)相似性最高(97.51%); 新放射孢子蟲LY與Thelohanellussp.相似性最高(92.48%)。匈牙利放射孢子蟲DF和國外文獻(xiàn)報道的Hungactinomyxon序列相似度為99.41%—99.64%, 應(yīng)被鑒定為同一物種。

系統(tǒng)發(fā)育分析顯示棘放射孢子蟲LY1和棘放射孢子蟲LY2位于碘泡蟲支, 其中棘放射孢子蟲LY1與Myxobolus lentisuturalis親緣關(guān)系最近, 聚為姊妹枝; 三突放射孢子蟲DF和三突放射孢子蟲HZ位于四極蟲屬分支; 新放射孢子蟲LY聚在單極蟲一枝。

3 討論

黏孢子蟲病是當(dāng)前魚類養(yǎng)殖中重要的寄生蟲病之一, 如異育銀鯽洪湖碘泡蟲病、鯉吉陶單極蟲病等。由于缺乏明確有效治療藥物, 通過切斷病原生活史中魚體外感染傳播途徑是該類疾病可行的有效防控措施。放射孢子蟲作為黏孢子蟲在無脊椎動物替換宿主內(nèi)發(fā)育的重要階段, 受到魚病學(xué)和寄生蟲學(xué)研究的廣泛關(guān)注[30]。早期在研究黏孢子蟲生活史過程中需要在實驗室完成無脊椎動物感染[31]。由于實驗復(fù)雜和耗時使得進(jìn)展比較緩慢, 而且對于部分種類存在混合感染的孢子使結(jié)果的可靠性顯著降低[32—35]。近年來, 分子生物學(xué)技術(shù)手段, 特別是SSU rDNA序列比對分析, 對黏孢子蟲生活史的研究發(fā)揮重要促進(jìn)作用[18], 共計約50多種黏孢子蟲在兩替換宿主體內(nèi)發(fā)育階段被準(zhǔn)確鑒定。如碘泡蟲(Myxobolus)、單極蟲(Thelohanellus)、尾孢蟲(Henneguya)、擬尾孢蟲(Myxobilatus)、球孢蟲(Sphaerospora)、新角形蟲(Ceratonova)、四極蟲(Chloromyxum)、兩極蟲(Myxidium)、楚克拉蟲(Zschokkella)、霍氏蟲(Hoferellus)以及微囊蟲(Parvicapsula)等屬內(nèi)的不同種類[18]。本研究在對放射孢子蟲鑒定中也采用了SSU rDNA序列比對分析,然而并沒能確定所新發(fā)現(xiàn)的6種類型所對應(yīng)的魚體寄生黏孢子蟲種類。可能的原有主要有兩個方面,一是魚體寄生黏孢子蟲類有2500多種, 目前NCBI數(shù)據(jù)庫中可供參考的序列非常有限; 或者由于黏孢子蟲物種多樣性非常高, 有些種類在魚體還沒有被發(fā)現(xiàn)和報道。隨著魚類黏孢子蟲物種多樣性研究的深度和廣度的不斷增加, 本研究所報道放射孢子蟲及其DNA序列將提供重要的參考依據(jù)。

放射孢子蟲的形態(tài)鑒定主要依據(jù)孢體形狀、孢柄有無、尾突發(fā)生位置和形狀及大小。目前三突放射孢子蟲是已報道種類最多的集合類群。本研究所發(fā)現(xiàn)的Triactinomyxon HZ與文獻(xiàn)中江蘇常州養(yǎng)殖池塘發(fā)現(xiàn)的Triactinomyxon type CZ形態(tài)非常相似, 但在孢子大小上存在差異; 前者尾突和孢柄明顯短于后者(176.56 μmvs.214.0 μm, 81.62 μmvs.119.7 μm, 表1)。本研究所報道的Triactinomyxon DF在孢子大小上顯著小于Triactinomyxon HZ(表1)。SSU rDNA分析發(fā)現(xiàn)序列一致性低于95%,進(jìn)一步確認(rèn)這些孢子大小不同的三突放射孢子蟲屬于不同物種。本研究所發(fā)現(xiàn)的Neoactinomyxum LY與該集合類群中其他種類主要區(qū)別特征在于月牙狀尾突, 但與Borkhanuddin等[10]報道的Neoactinomyxum type 1形態(tài)較為相似; 二者主要區(qū)別在于孢子尾突長和寬大小(6.41 μmvs.8 μm, 18.46 μmvs.20 μm, 表1)。本研究發(fā)現(xiàn)的Echinactinomyxon LY1和LY2的尾突的末端都有明顯的分叉結(jié)構(gòu), 可以與文獻(xiàn)中報道的Echinactinomyxon種類明顯區(qū)分開。Echinactinomyxon LY1和LY2的形態(tài)數(shù)值非常接近很難區(qū)分, 然而SSU rDNA序列(MN294775和MN294776, 96.7%)卻存在很大差異, 表明這2種放射孢子蟲為不同物種。該結(jié)果進(jìn)一步說明由于放射孢子蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)簡單, 僅僅依賴形態(tài)特征容易存在錯誤鑒定, 分子生物學(xué)手段是物種鑒定的有力佐證。

圖7 基于黏體動物SSU rDNA序列建立的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.7 Phylogenetic tree of myxozoans based on the SSU rDNA sequences

本研究發(fā)現(xiàn)的Hungactinomyxon DF, 其形態(tài)與Ráczdeng等[8]在匈牙利蘇氏尾鰓蚓中發(fā)現(xiàn)的Hungactinomyxon type 1及趙丹丹等[25]在湖北大同湖和東西湖異育銀鯽苗種塘發(fā)現(xiàn)的Hungactinomyxon蟲體形態(tài)上非常相近。本研究發(fā)現(xiàn)的Hungactinomyxon蟲體與趙丹丹等[25]描述的放射孢子蟲在形態(tài)上有些不同, 如尾突長比趙丹丹等[25]描述的更長(69.84 μmvs.52 μm), 尾突更細(xì)(9.38 μmvs.12.3 μm); 與Rácz描述的匈牙利放射孢子蟲形態(tài)更接近。此外, 盡管中國和匈牙利地理相隔很遠(yuǎn)且屬于不同動物地理區(qū)系, 但SSU rDNA序列分析表明它們具有＞99%的序列一致性。因此, 本文報道的Hungactinomyxon和匈牙利報道的Hungactinomyxon type 1應(yīng)被鑒定為同一物種的不同地理種群。20世紀(jì)歐洲曾從亞洲地區(qū)引進(jìn)鯉科魚類(鯉、鰱、鳙等)用于養(yǎng)殖和水環(huán)境調(diào)控。Hungactinomyxon type 1[8]在匈牙利的出現(xiàn)極有可能是黏孢子蟲隨魚類宿主種群擴(kuò)散的結(jié)果, 同時其生活史中所需的替換宿主蘇氏尾鰓蚓也是世界廣布種。

系統(tǒng)發(fā)育分析表明本研究所發(fā)現(xiàn)的Echinactinomyxon和Hungactinomyxon與Raabeia類型放射孢子蟲有較近的親緣關(guān)系且都聚集在碘泡蟲(Myxobolusspp.)分支中(圖7)。此前的研究也發(fā)現(xiàn)碘泡蟲屬種類對應(yīng)的放射孢子蟲集合類群具有很高的多樣性[36]。此外, Rocha等[37]認(rèn)為Raabeia類群的尾突形態(tài)具有很高的可塑性, 尾突的直和彎曲不能作為Echinactinomyxon和Raabeia類群的區(qū)分特征; 建議將Echinactinomyxon和Raabeia合并。本研究認(rèn)為目前放射孢子蟲集合類群名稱不是有效的分類階元, 不具有實際分類學(xué)意義; 為了避免描述上的混亂仍然保留Echinactinomyxon集合類群。

由于本研究所報道的放射孢子蟲DNA序列與目前可用于比對分析的魚體寄生黏孢子蟲序列一致性都低于99.0%, 超出普遍認(rèn)為的種內(nèi)差異1%;因此, 未能鑒定出對應(yīng)的黏孢子蟲物種。系統(tǒng)發(fā)育分析表明三突放射孢子蟲Triactinomyxon HZ和DF聚在四極蟲屬分支、Neoactinomyxum LY聚在單極蟲Thelohanellus分支、Echinactinomyxon LY1和LY2及Hungactinomyxon DF聚類在碘泡蟲分支;這些放射孢子蟲應(yīng)分別對應(yīng)了四極蟲、單極蟲和碘泡蟲屬的6種不同黏孢子蟲種類。四極蟲通常為腔寄生, 感染魚的膽囊和膀胱[38]; 碘泡蟲和單極蟲可感染魚幾乎所有的組織器官[39]。進(jìn)一步開展池塘養(yǎng)殖魚類寄生黏孢子蟲多樣性調(diào)查有助于揭示本研究所發(fā)現(xiàn)放射孢子蟲感染傳播途徑。

總之, 本研究基于形態(tài)和分子生物學(xué)特征描述了6種新發(fā)現(xiàn)的放射孢子蟲, 進(jìn)一步豐富了黏孢子蟲物種多樣性的研究內(nèi)容, 為揭示魚類寄生黏孢子蟲病原的生活史提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。