方改霞，王明月，侯凱玉，黃金絨，李冰冰*, 洪 軍

(1.河南城建學(xué)院 生命科學(xué)與工程學(xué)院，河南 平頂山 467036； 2.河南省健康食品工程技術(shù)研究中心，河南 平頂山 467036)

0 引言

【研究意義】球蟲病是一種體內(nèi)寄生蟲病，在畜牧業(yè)動(dòng)物飼養(yǎng)中頻發(fā)，造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，尤其在兔養(yǎng)殖業(yè)中為最。球蟲孢子化卵囊經(jīng)口被兔攝入體內(nèi)[1]，經(jīng)1～2 d即可發(fā)育為感染性孢子化卵囊，感染宿主；兔感染球蟲，一般呈普遍性、混合性[2]等特點(diǎn)。目前，針對(duì)球蟲病常用手段多為化學(xué)藥物抑制，長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性，對(duì)動(dòng)物機(jī)體造成損害[3]，且使用的所有化學(xué)藥物均有耐藥性記錄[4]，故當(dāng)前急需研發(fā)新型無毒害抗球蟲藥物?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】中草藥綠色安全，長(zhǎng)期使用不易產(chǎn)生耐藥性，可有效提高動(dòng)物機(jī)體的抗氧化水平，降低脂質(zhì)過氧化，改善腸胃功能，增強(qiáng)動(dòng)物免疫機(jī)能等[5-6]，越來越多的研究者嘗試篩選能預(yù)防和控制球蟲病的中草藥[7-9]。劉陽等[10]在前期探索了6種中草藥對(duì)球蟲卵的抑制作用；張國[11]探索了4種中草藥對(duì)兔球蟲卵囊孢子化的影響。然而這些研究選用的中草藥大多含有白頭翁、青蒿等，相對(duì)缺少對(duì)其他中草藥的研究?！狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前桉葉、蛇床子、土荊皮、石榴皮、枯礬、穿心蓮和蒼術(shù)等8種中藥材對(duì)微生物抑制作用的研究較普遍，且均具較好的殺菌效果，而涉及抗球蟲卵囊孢子化作用研究較少?！緮M解決的關(guān)鍵問題】探究桉葉、蛇床子、土荊皮、石榴皮、枯礬、(甘)川楝子、穿心蓮及蒼術(shù)等8種中藥材的抗球蟲卵囊孢子化作用，旨在篩選出對(duì)球蟲病具有抑制效果的中藥材，以期為中草藥應(yīng)用于兔球蟲病的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

初檢感染球蟲病死的幼兔盲腸內(nèi)容物或兔新鮮糞便，由平頂山市郊區(qū)某兔場(chǎng)提供。

中藥材：桉葉、蛇床子、土荊皮、石榴皮、枯礬、(甘)川楝子、穿心蓮及蒼術(shù)。其中桉葉購自方士居淘寶網(wǎng)店，其他均購自平頂山市張仲景大藥房。

試劑：氯化鈉(分析純)，購自天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司；重鉻酸鉀(分析純)，購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。生理鹽水、飽和食鹽水溶液和2.5%重鉻酸鉀溶液均為自制。

儀器：冷凍干燥機(jī)(型號(hào)為Scientz-12N)，寧波新芝生物科技股份有限公司生產(chǎn)；低速臺(tái)式離心機(jī)(型號(hào)為L(zhǎng)530)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司；生化培養(yǎng)箱(型號(hào)為ZXSD-A1090)，上海智城分析儀器制造有限公司生產(chǎn)；高速離心機(jī)(型號(hào)為Centrifuge 5424)，德國艾本德有限公司生產(chǎn)；恒溫振蕩器(型號(hào)為THZ-98A)，上海一恒科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；普通光學(xué)顯微鏡(型號(hào)為UB120i)，寧波舜宇儀器有限公司生產(chǎn)；高壓蒸汽滅菌鍋(型號(hào)為MJ-78A)，美國施都凱儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 中藥材提取液制備 取50 g干燥中藥材用蒸餾水浸泡1 h，將其轉(zhuǎn)移到電動(dòng)中藥鍋中，加3～5倍體積的水，先武火自動(dòng)煎煮15 min 2次后文火手動(dòng)煎煮15 min 1次。將煎出的藥劑先紗布過濾，再濾紙過濾，再抽濾1次，后凍干至粉末狀，凍存于冰箱。各藥材提取量分別為蛇床子5.3 g、土荊皮2.4 g、石榴皮3.4 g、枯礬50 g、(甘)川楝子4.3 g、穿心蓮2.7 g及蒼術(shù)9.6 g。

1.2.2 兔球蟲卵囊的分離收集 對(duì)初檢感染球蟲病死的幼兔盲腸內(nèi)容物或兔新鮮糞便采用飽和食鹽水漂浮法[12-13]分離并收集球蟲卵囊，置于2.5%重鉻酸鉀溶液中，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行卵囊計(jì)數(shù)并鏡檢分離的卵囊情況。初步鏡檢判定卵囊[14]為未孢子化的艾美耳球蟲。

1.2.3 8種中藥材的處理濃度及時(shí)間 將8種中藥材水煎提取物配制成濃度為125 mg/mL、100 mg/mL、75 mg/mL、50 mg/mL和25 mg/mL的溶液。分別對(duì)分離出的球蟲卵作用2 h、4 h、16 h，檢測(cè)每種中藥材提取物在不同濃度下作用不同時(shí)間對(duì)球蟲卵的抑/殺效果。每組試驗(yàn)3次重復(fù)，以生理鹽水作空白對(duì)照。

1.2.4 8種中藥材水提物對(duì)兔球蟲卵的抑/殺效果 分別向2 mL無菌離心管中加1 mL濃度為104個(gè)/mL的卵囊液，4 000 r/min離心6 min，棄上清液，向沉淀中加1 mL藥液。同時(shí)，取1 mL生理鹽水作空白對(duì)照?；靹颍?0℃下分別培養(yǎng)2 h，4 h，16 h后，4 000 r/min離心6 min，棄上清液，向沉淀中加入1 mL生理鹽水，4 000 r/min離心6 min，棄上清液。重復(fù)上一步2次。最后1次向沉淀中加入1 mL重鉻酸鉀溶液，搖勻，29℃培養(yǎng)48 h后，取出后鏡檢，計(jì)數(shù)總卵囊數(shù)和孢子化卵囊數(shù)，計(jì)算球蟲卵囊孢子化率[15]。

卵囊孢子化率=孢子化卵囊數(shù)量/(孢子化卵囊數(shù)量+未孢子化卵囊數(shù)量)×100%

卵囊孢子抑制率=(試驗(yàn)組平均未孢子化率—對(duì)照組平均未孢子化率)/(1—對(duì)照組平均未孢子化率)×100%

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20. 0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”表示，并進(jìn)行方差分析、多重比較及不同因素間的主體間效應(yīng)檢驗(yàn)分析，主要對(duì)濃度、時(shí)間、濃度與時(shí)間3個(gè)因素進(jìn)行主體間效應(yīng)檢驗(yàn)分析，

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率

2.1.1 卵囊孢子化率 從表1可知，不同濃度和處理時(shí)間下，土荊皮、桉葉、穿心蓮、枯礬、蛇床子、石榴皮、蒼術(shù)和川楝子對(duì)兔球蟲卵的卵囊孢子化率。

表1 8種中藥材提取物不同處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率Table 1 Sporulation rate of rabbit coccidian oocysts treated with eight Chinese medicine extracts with different time

1) 土荊皮。兔球蟲卵的卵囊孢子化率，在土荊皮濃度為25 mg/mL和125 mg/mL時(shí)，不同處理時(shí)間差異極顯著，均表現(xiàn)為處理16 h的卵囊孢子化率最小，分別為29.22%和16.56%；在土荊皮濃度為50 mg/mL時(shí)，處理2 h與4 h間無顯著差異，二者與處理16 h間差異極顯著，處理16 h的卵囊孢子化率最小，為27.59%；土荊皮濃度為75 mg/mL和100 mg/mL時(shí)，處理2 h與16 h間無顯著差異，但二者與處理4 h間差異極顯著。當(dāng)處理時(shí)間相同時(shí)(處理2 h、4 h和16 h)均表現(xiàn)為不同濃度間存在極顯著差異，且125 mg/mL的卵囊孢子化率最小。

2) 桉葉。在桉葉濃度相同時(shí)，不同處理時(shí)間兔球蟲卵的卵囊孢子化率均在處理16 h最小。桉葉濃度為25 mg/mL、50 mg/mL和 100 mg/mL時(shí)，不同處理時(shí)間間無顯著差異；桉葉濃度為75 mg/mL時(shí)，處理2 h與4 h無顯著差異，2 h與16 h間差異極顯著，4 h與16 h間無顯著差異；桉葉濃度125 mg/mL時(shí)，處理2 h與4 h、16 h間差異極顯著，處理4 h與16 h間無顯著差異。當(dāng)桉葉處理時(shí)間相同，濃度不同時(shí)，均表現(xiàn)為125 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。當(dāng)處理時(shí)間為2 h時(shí)，桉葉濃度125 mg/mL、100 mg/mL與25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL間差異極顯著，100 mg/mL與125 mg/mL間無顯著差異。在處理時(shí)間為4 h時(shí)，桉葉濃度25 mg/mL、50 mg/mL與75 mg/mL、100 mg/mL、125 mg/mL間差異極顯著，75 mg/mL與125 mg/mL間差異極顯著，100 mg/mL與125 mg/mL間差異顯著。在處理時(shí)間為16 h時(shí)，不同桉葉濃度間差異極顯著。

3) 穿心蓮。在穿心蓮濃度相同時(shí)，不同處理時(shí)間兔球蟲卵的卵囊孢子化率均在處理2 h最小。在穿心蓮濃度為25 mg/mL時(shí)，不同處理時(shí)間間差異極顯著；穿心蓮濃度為50 mg/mL時(shí)，4 h、16 h與2 h間呈極顯著差異，4 h與16 h間無顯著差異；穿心蓮濃度為75 mg/mL時(shí)，處理2 h、4 h與16 h間差異極顯著，處理2 h與4 h間無顯著差異；穿心蓮濃度為100 mg/mL時(shí)，處理2 h與4 h、16 h間差異極顯著，處理4 h與16 h間無顯著差異；穿心蓮濃度為125 mg/mL時(shí)，處理2 h與16 h差異極顯著，處理4 h與16 h、處理2 h與4 h間差異顯著。

在穿心蓮處理時(shí)間相同，濃度不同時(shí)，處理2 h以125 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，處理4 h和16 h時(shí)，均為100 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。當(dāng)處理時(shí)間為2 h，穿心蓮濃度25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL與100 mg/mL、125 mg/mL間差異極顯著，100 mg/mL與125 mg/mL間無顯著差異。當(dāng)處理時(shí)間為4 h，穿心蓮濃度100 mg/mL、125 mg/mL與25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL間差異極顯著，100 mg/mL與125 mg/mL間差異顯著。當(dāng)處理時(shí)間為16 h，穿心蓮濃度100 mg/mL、125 mg/mL與25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL間差異極顯著，100 mg/mL與125 mg/mL、50 mg/mL與75 mg/mL間無顯著差異。

4) 枯礬。在枯礬濃度相同時(shí)，除125 mg/mL在處理2 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小外，其余濃度均表現(xiàn)為處理16 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小?？莸\濃度為25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL、125 mg/mL時(shí)，各處理時(shí)間間均無顯著差異；枯礬濃度為100 mg/mL時(shí)，處理2 h、4 h與16 h間差異極顯著，處理2 h與4 h間無顯著差異。

在枯礬處理時(shí)間相同時(shí)，均表現(xiàn)為枯礬濃度75 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。當(dāng)處理時(shí)間為2 h與4 h時(shí)，枯礬濃度75 mg/mL與其余濃度處理間差異極顯著，其余濃度處理間無顯著差異；當(dāng)處理時(shí)間為16 h時(shí)，枯礬濃度75 mg/mL和100 mg/mL與25 mg/mL、50 mg/mL、125 mg/mL間差異極顯著，75 mg/mL與100 mg/mL間，25 mg/mL、50 mg/mL與125 mg/mL間均無顯著差異。

5) 蛇床子。在蛇床子濃度相同時(shí)，除125 mg/mL在處理2 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小外，其余濃度均表現(xiàn)為處理4 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。蛇床子濃度為25 mg/mL和100 mg/mL時(shí)，不同處理時(shí)間間無顯著差異；蛇床子濃度為50 mg/mL時(shí)，處理4 h與2 h、16 h間差異極顯著，處理2 h和16 h間無顯著差異；蛇床子濃度為75 mg/mL和125 mg/mL時(shí)，不同處理時(shí)間間差異極顯著。

當(dāng)處理時(shí)間為2 h，蛇床子濃度為125 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小；處理時(shí)間為4 h和16 h，蛇床子濃度均為75 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。處理時(shí)間2 h時(shí)，蛇床子濃度125 mg/mL與25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL、100 mg/mL間差異極顯著；處理時(shí)間4 h時(shí)，蛇床子濃度75 mg/mL與25 mg/mL、100 mg/mL、125 mg/mL間差異極顯著；處理時(shí)間16 h時(shí)，蛇床子濃度75 mg/mL與25 mg/mL、50 mg/mL、125 mg/mL間差異極顯著。

6) 石榴皮。在石榴皮濃度為25 mg/mL和50 mg/mL時(shí)，均表現(xiàn)為處理2 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，其余濃度均表現(xiàn)為處理4 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。石榴皮濃度為25 mg/mL、50 mg/mL和100 mg/mL時(shí)，不同處理時(shí)間兔球蟲卵的卵囊孢子化率差異極顯著。石榴皮濃度為75 mg/mL時(shí)，處理4 h與16 h、2 h與16 h間差異極顯著；石榴皮濃度為125 mg/mL時(shí)，處理4 h與2 h、2 h與16 h間差異極顯著，4 h與16 h間無顯著差異。相同處理時(shí)間，均以125 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，且與其余濃度處理間差異極顯著。

7) 蒼術(shù)。當(dāng)蒼術(shù)濃度為25 mg/mL和50 mg/mL時(shí)，均表現(xiàn)為處理4 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，其余濃度均表現(xiàn)為處理16 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。蒼術(shù)濃度為25 mg/mL，處理4 h和2 h間無顯著差異，4 h和16 h、2 h和16 h間差異極顯著；蒼術(shù)濃度為50 mg/mL，處理4 h和2 h間差異極顯著，處理4 h和16 h、2 h和16 h間無顯著差異；蒼術(shù)濃度為75 mg/mL和 100 mg/mL，不同處理時(shí)間間無顯著差異。蒼術(shù)濃度為125 mg/mL，處理2 h與16 h間差異極顯著，處理2 h和4 h、4 h與16 h無顯著差異。

當(dāng)蒼術(shù)處理時(shí)間相同，均表現(xiàn)為125 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，且與其余濃度處理間差異極顯著。

8) 川楝子。當(dāng)川楝子濃度為25 mg/mL、100 mg/mL和125 mg/mL時(shí)，均表現(xiàn)為處理16 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，其余濃度均表現(xiàn)為處理4 h兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小。川楝子濃度為25 mg/mL、75 mg/mL和100 mg/mL，不同處理時(shí)間間無顯著差異；川楝子濃度為50 mg/mL，處理4 h和2 h、16 h間差異極顯著，16 h和2 h間無顯著差異；川楝子濃度為125 mg/mL，處理16 h與2 h、4 h間差異極顯著，4 h和2 h間無顯著差異。

當(dāng)川楝子處理時(shí)間相同，均表現(xiàn)為125 mg/mL處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率最小，且與其余濃度處理間差異極顯著。

2.1.2 濃度、時(shí)間、濃度與時(shí)間的主體效應(yīng) 對(duì)濃度、時(shí)間、濃度與時(shí)間進(jìn)行主體間效應(yīng)檢驗(yàn)結(jié)果表明，三者對(duì)石榴皮、穿心蓮、土荊皮、川楝子、枯礬、蛇床子處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率影響極顯著，其中對(duì)石榴皮、穿心蓮處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率的影響依次為濃度>時(shí)間>濃度與時(shí)間；對(duì)土荊皮、川楝子、枯礬處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率的影響依次為濃度>濃度與時(shí)間>時(shí)間；對(duì)蒼術(shù)處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率的孢子化率影響顯著，依次為濃度>濃度與時(shí)間>時(shí)間；對(duì)蛇床子處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率的影響依次為濃度與時(shí)間>濃度>時(shí)間。濃度、時(shí)間對(duì)桉葉處理兔球蟲卵的卵囊孢子化率影響極顯著，依次為濃度>時(shí)間。

2.2 不同處理兔球蟲卵的抑卵囊孢子率

由表2可知，土荊皮抑卵囊孢子率在同一時(shí)間梯度內(nèi)與藥液濃度呈正相關(guān)，同一濃度梯度內(nèi)與藥液作用時(shí)間亦呈正相關(guān)，且濃度125 mg/mL時(shí)，作用16 h后抑孢子化程度最好，抑制率達(dá)83.10%；桉葉抑卵囊孢子率在同一時(shí)間梯度內(nèi)與藥液濃度呈正相關(guān)，同一濃度梯度內(nèi)與藥液作用時(shí)間亦呈正相關(guān)，藥液濃度125 mg/mL時(shí)，作用4 h后抑孢子化程度最好，抑制率為80.83%；穿心蓮?fù)燎G皮抑卵囊孢子率在同一時(shí)間梯度內(nèi)與藥液濃度呈正相關(guān)，藥液濃度125 mg/mL時(shí)，作用2 h后抑孢子化程度最好，抑制率達(dá)55.65%；枯礬藥液濃度75 mg/mL時(shí)，作用4 h后抑孢子化程度最好，抑制率達(dá)53.45%；蛇床子藥液濃度75 mg/mL時(shí)，作用4 h后抑孢子化程度最好，抑制率達(dá)48.29%；石榴皮同一濃度梯度內(nèi)與藥液作用時(shí)間呈正相關(guān)，藥液濃度125 mg/mL時(shí)，作用4 h后抑孢子化程度最好，抑制率達(dá)33.45%；蒼術(shù)藥液濃度125 mg/mL時(shí)，作用16 h后抑孢子化程度最好，抑制率達(dá)13.88%；川楝子抑卵囊孢子率最弱，125 mg/mL作用16 h后抑制率僅達(dá)13.27%。

表2 8種中藥材提取物處理不同時(shí)間兔球蟲卵的抑卵囊孢子率 Table 2 Inhibitory rate of 8 Chinese medicine extracts treated rabbit coccidian oocysts with different time

3 討論

我國中藥材資源豐富，為篩選抗球蟲藥物提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。土荊皮是具有殺蟲、治癬疥等功效的常用中藥材，內(nèi)含土荊皮二萜酸、多酚(酸)類物質(zhì)等多種化合物。桉葉主要含有桉葉油、黃酮類、有機(jī)酸類、酚類等具有較高生理活性的能抑制寄生蟲的有效成分。研究發(fā)現(xiàn)，土荊皮和桉葉均有很好的抑制兔球蟲卵囊孢子化的效果，可能與二者的主要化學(xué)成分有關(guān)?？莸\主要用于收濕斂瘡、止血化腐，對(duì)大腸桿菌、痢疾桿菌等致病菌也有明顯的抑菌作用。研究發(fā)現(xiàn)，枯礬的抑/殺球蟲孢子化的效果也較好。

周鈺奇等[16]用穿心蓮片飼喂感染柔嫩艾美耳球蟲的雞發(fā)現(xiàn)，200 mg組中感染雞的血便排出推遲1 d，且明顯降低血便記分和糞便卵囊排出量，同時(shí)給予穿心蓮片劑能部分緩解球蟲感染對(duì)中樞免疫器官發(fā)育的抑制作用。李宗波等[17]用川楝子治療雞球蟲病效果明顯，且能夠促進(jìn)雞免疫器官的發(fā)育和增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。研究發(fā)現(xiàn)，穿心蓮對(duì)兔球蟲卵有一定的效果，而川楝子效果最差，后期可考慮在兔體內(nèi)用藥做進(jìn)一步研究。馬明智[18]用含有蛇床子、蒼術(shù)等中草藥煎劑飼飲患球蟲病獺兔，總有效率達(dá)90%。祝學(xué)珍[13]研究發(fā)現(xiàn)，蛇床子、蒼術(shù)有一定的抑制雞球蟲卵囊孢子化的效果，蒼術(shù)優(yōu)于蛇床子，但研究中蛇床子抑殺效果好于蒼術(shù)，蒼術(shù)的效果不明顯，可能與球蟲的種類不同有關(guān)，同時(shí)也提示蛇床子和蒼術(shù)不管在體內(nèi)還是體外對(duì)兔球蟲卵囊孢子化均有抑殺效果。王璽德等[19]研究發(fā)現(xiàn)，石榴皮水提物有較好的體外抑制兔球蟲卵囊孢子化的效果；但劉陽等[10]用石榴皮水提物直接對(duì)人工感染球蟲病的兔新鮮糞便進(jìn)行孢子化抑制效果檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其抑制效果弱。研究發(fā)現(xiàn)，石榴皮對(duì)兔球蟲卵囊孢子化也有一定的抑制效果，但效果不佳，可能和藥液的用藥劑量有關(guān)。因此在尋找藥物時(shí)，不僅要關(guān)注藥物的品種，還要對(duì)藥物的不同質(zhì)量濃度進(jìn)行研究。多數(shù)中草藥以高濃度抑球蟲卵囊效果優(yōu)于低濃度。綜上，土荊皮、桉葉等中藥材對(duì)兔球蟲卵囊孢子化具有顯著抑制效果，川楝子對(duì)抑制兔球蟲卵囊孢子化效果不理想，下一步可以考慮將單味中藥材制成復(fù)合制劑。研究還發(fā)現(xiàn)，穿心蓮、川楝子、蛇床子、蒼術(shù)等藥物的體外抑殺球蟲效果與體內(nèi)用藥的報(bào)道不太一致，可能因?yàn)榍蛳x在體內(nèi)外的發(fā)育階段和環(huán)境不同所致。研究中大部分中草藥對(duì)球蟲卵囊孢子化的抑制是隨著濃度的增大而加強(qiáng)，與田美杰等[7]的研究結(jié)果一致。說明濃度是影響土荊皮等中藥材體外抗球蟲卵效果的重要因素。試驗(yàn)所選用的中草藥均具有驅(qū)蟲殺蟲、祛濕、清熱解毒、止血等功用，但試驗(yàn)結(jié)果表明，部分藥物對(duì)球蟲的抑/殺效果明顯，仍有一些藥物效果不太理想。因此，要篩選出有效的抗球蟲藥物，除考慮中草藥本身功用，或與其他藥物聯(lián)用外，還需進(jìn)一步對(duì)中藥材作用的濃度和作用對(duì)象進(jìn)行研究。研究表明，所選用的8味中藥材水提物對(duì)兔球蟲卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用，大部分中藥材濃度越高，抑制效果越好，與作用時(shí)間有一定的相關(guān)性。抑制兔球蟲卵囊孢子化的效果與藥材種類有關(guān)，蛇床子的抑殺效果與時(shí)間和濃度共同作用有關(guān)，土荊皮、桉葉、穿心蓮及枯礬等7種的濃度是影響體外抗球蟲卵效果的重要因素。

4 結(jié)論

根據(jù)卵囊孢子抑制率，125 mg/mL土荊皮作用16 h效果最好，其對(duì)兔球蟲卵的抑卵囊孢子率為83.10%；125 mg/mL川楝子作用16 h的效果最差，其對(duì)兔球蟲卵的抑卵囊孢子率為13.27%。