張慧

（安徽皖墾種業(yè)股份有限公司懷遠分公司，安徽懷遠 233426）

蘆筍（Asparagus officinalis L.）又名石刁柏，屬百合科天門冬屬，雌雄異株，宿根性多年生草本植物。雄性植株矮，分枝多，開花早，發(fā)生莖多，幼莖單重小，但產(chǎn)量高。雌性植株高大，分枝稀，開花遲，發(fā)生莖很少，幼莖粗大，產(chǎn)量略低。生產(chǎn)上以培養(yǎng)雄株為多。蘆筍質(zhì)地細膩，口感鮮嫩，營養(yǎng)豐富。據(jù)國內(nèi)外研究表明，蘆筍中含有大量活性物質(zhì)，如蘆丁、皂苷、維生素E、天門冬氨酸、天門冬酰胺、葉酸以及硒、鉬、錳等多種微量元素，具有“123+1”的功效，即“一減”：減肥；“二抗”：抗腫瘤、抗衰老；“三降”：降血壓、降血脂、降血糖；“一壯”：壯陽。蘆筍是迄今為止唯一能用于制藥的蔬菜，已經(jīng)有幾種以蘆筍為原料的處方藥用于臨床，并能增進食欲，幫助消化，被譽為“十大名菜之一”“蔬菜之王”。

我國從20 世紀70 年代開始推廣栽培蘆筍，由于缺乏適應我國各地區(qū)蘆筍栽培的品種和科學技術，造成蘆筍的產(chǎn)量低、品質(zhì)差，經(jīng)濟效益不高，嚴重影響我國蘆筍產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。傳統(tǒng)的繁殖方法多采用分株繁殖或種子繁殖，但是由于蘆筍的遺傳性屬雜合型，繁殖后代整齊度差、繁殖速度慢、株間差異大等原因，蘆筍在繁殖過程中難以保持種子性狀的穩(wěn)定，故而經(jīng)常存在減產(chǎn)、品質(zhì)愈劣的現(xiàn)象。而組織培養(yǎng)快繁技術，可以較好地保持良種的優(yōu)良性狀，擴大親本數(shù)量，縮短育種年限，且能夠選擇性培育出全雄植株，提高產(chǎn)量。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 蘆筍。供試材料為安徽省蚌埠市懷遠縣龍亢農(nóng)場一分場蘆筍基地提供的豐島蘆筍嫩莖。

1.1.2 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件。采用MS 為基本培養(yǎng)基，蔗糖濃度 3%，瓊脂濃度 0.7%，pH 為 5.8～6.0，并添加不同濃度的激素。培養(yǎng)室內(nèi)溫度為（26±2）℃，光照時間為13 h/d，光照強度為3 000 lx。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同濃度BA 和NAA 組合對蘆筍芽誘導的影響。3—4 月取豐島新抽出蘆筍，去掉莖尖（莖尖不易消毒，易污染），嫩莖先用75%酒精表面消毒10 s，0.1%升汞消毒10 min，再用無菌水沖洗4～5 遍；在超凈臺中，把嫩莖切成1.4 cm 左右的帶節(jié)莖段，接種于4 種不同濃度激素組合的培養(yǎng)基（表1）中，每處理5 瓶，每瓶4 棵，每天記錄其生長情況。

1.2.2 不同濃度BA 和NAA 組合對蘆筍增殖的影響。當芽長到3～4 cm 時，在超凈臺中分切成莖尖、帶腋芽的莖段，接入6 種不同的增殖培養(yǎng)基（表2）上進行繼代培養(yǎng)。每處理5 瓶，每瓶4 棵，記錄其增殖情況。

1.2.3 不同濃度IBA 和KT 組合對蘆筍生根的影響。當苗長到2～4 cm 時，取3～5 mm 的芽接種于9種不同濃度激素組合的培養(yǎng)基（表3）中進行生根培養(yǎng)，每處理10 瓶，每瓶2 棵，30 d 后統(tǒng)計生根情況。

1.2.4 煉苗移栽。當苗高3.0～4.0 cm 時，根長到1.0 cm 以上并有4～55 條根時，即可煉苗移栽。

2 結果與分析

2.1 不同濃度BA 和NAA 組合對蘆筍芽誘導的影響

由表4 可知，4 種培養(yǎng)基中均能誘導外植體形成愈傷組織，1 號培養(yǎng)基苗生長正常，第6 天腋芽分化出2～3 個小芽，第7 天基部膨大，有愈傷產(chǎn)生，且顏色呈淡黃，2、3 和4 號培養(yǎng)基莖尖和腋芽有膨大現(xiàn)象，但愈傷顏色不正常，有褐化和玻璃化的表現(xiàn)，且苗生長不正常，如節(jié)位畸形。由此得出1 號培養(yǎng)基最適合誘導蘆筍芽的培養(yǎng)基，即MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA（圖 1）。

圖1 誘導培養(yǎng)基莖段前后生長展示

表1 不同組合的蘆筍誘導培養(yǎng)基

表2 不同組合的蘆筍增殖培養(yǎng)基

2.2 不同濃度BA 和NAA 組合對蘆筍增殖的影響

從表5 可以看出，在相同濃度BA 的條件下，0.1 mg/L NAA 更適合蘆筍芽的增殖。芽的增殖系數(shù)最大的為8 號培養(yǎng)基，增殖系數(shù)為2.70；5 號培養(yǎng)基的增殖系數(shù)最小，為1.55。由此得出8 號培養(yǎng)基為最適合增殖蘆筍芽的培養(yǎng)基，即MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA（圖 2）。

2.3 不同濃度IBA 和KT 組合對蘆筍生根的影響

從表6 可以看出，生根率最高的為15 號培養(yǎng)基，高達75%，且根多，根較粗；當IBA 的濃度為0.5 mg/L時，11、12 和13 號培養(yǎng)基的生根率明顯低于其他培養(yǎng)基，且根數(shù)少、細、短，得出IBA 濃度過低時并不利于蘆筍根系的生長。調(diào)節(jié)IBA 和KT 的濃度比是調(diào)節(jié)蘆筍根系健康生長的重要因素。綜合分析表6 得出15 號培養(yǎng)基是最適合蘆筍生根的培養(yǎng)基，即MS+1.0 mg/L IBA+0.03 mg/L KT（圖 3）。

2.4 蘆筍組培苗煉苗

圖2 增殖培養(yǎng)基展示

圖3 生根培養(yǎng)基展示

表3 不同組合的蘆筍生根培養(yǎng)基

表4 不同培養(yǎng)基誘導結果

表5 不同培養(yǎng)基增殖結果

表6 不同培養(yǎng)基生根結果

煉苗苗床設在溫室大棚內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶，倒入適當清水，在陰涼處煉苗3～4 d，將瓶中的試管苗連同培養(yǎng)基倒入溫水（30℃左右）中，洗凈根部的瓊脂，在24 h 內(nèi)移栽于苗床上，苗床使用成品基質(zhì)，移栽第1周需用小拱棚覆膜密封，保持空氣相對濕度90%以上，7～10 d 開始掀開一側薄膜透風，逐漸增加透風量，20 d 左右可以全部掀掉薄膜，采用一般幼苗的管理方法進行管理。移栽當天噴施 500 倍多菌靈藥液，以后每隔1 周左右噴施殺菌劑1 次，不同的殺菌劑交替使用效果更好。

3 結論與討論

蘆筍組織培養(yǎng)方面的報道很多，鹿志偉等以蘆筍高產(chǎn)品種“井崗701”的無菌莖尖為試材，研究不同植物激素濃度組合對其誘導的影響，結果表明，MS+2，4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L 誘導愈傷組織效果最好。董靜等利用蘆筍雜交F1代種子獲得無菌植株，在不同培養(yǎng)基上誘導、增殖和生根，篩選出適宜的誘導、增殖和生根培養(yǎng)基。張元國等以紫蘆筍莖尖為外植體進行組織培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)了啟動培養(yǎng)基、適合紫蘆筍雄株增殖的培養(yǎng)基、適合紫蘆筍雌株增殖的培養(yǎng)基及生根培養(yǎng)基，生根率高達85%。另外湯泳萍等對蘆筍兩性株莖尖組培進行了研究，王會禮對蘆筍超雄株進行了研究，徐化凌等對蘆筍耐鹽材料進行了組培研究，包艷存等對蘆筍“冠軍”親本進行擴繁研究，可以看出眾多研究者針對蘆筍不同特性及性別等對其組培快繁技術進行了大量的研究和報道，但目前組培苗生產(chǎn)較低仍是蘆筍快繁亟待解決的關鍵問題。因此該研究在查閱相關報道的基礎上，對公布的培養(yǎng)基進行優(yōu)化和選擇，利用豐島蘆筍的嫩莖為外植體，篩選效果較好的蘆筍誘導、增殖和生根培養(yǎng)基，即誘導培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA，增殖培養(yǎng)基為MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA，生根培養(yǎng)基為MS+1.0 mg/L IBA+0.03 mg/L KT，并利用3～5 mm 長的芽進行生根培養(yǎng)，生根率最高達到75%，煉苗成活率達90%以上。

針對蘆筍顏色、性別等因素的快繁是該研究所欠缺的，若建立蘆筍完整的擴繁技術體系需進一步研究。此外，該研究僅采用豐島一個蘆筍品種進行組培擴繁研究，篩選出的培養(yǎng)基是否適合其他基因型材料也有待進一步驗證。