文│孫芳(山東省青島市市級公園管理服務中心)
傳染性支氣管炎是由傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的一種急性、高度接觸性傳染病,不同品種和日齡的雞均可感染。一經發(fā)病,會出現上呼吸道癥狀和泌尿生殖系統衰竭,導致產蛋率下降和雞死亡。
雖然臨床癥狀可以作為傳染性支氣管炎的初步鑒定,但IBV誘發(fā)的癥狀不明。因此,實驗室檢測是必需的,以檢測和鑒定IBV,最常用的鑒定試驗包括病毒分離、血清學和分子生物學檢測方法。
1.病毒分離。在初期觀察到與感染疑似癥狀時立即收集樣本,因為在感染后第一周IBV滴度峰值,可能在臨床表現之前。氣管組織或咽喉拭子是首選的樣本,尤其是在急性期。為了便于檢測雞群中的IBV,應該從有癥狀的和健康的雞群中混合采集樣本。樣品應存放在冰上,并迅速送至實驗室,以保存病毒的活性。比細胞培養(yǎng)更有效,IBV胚胎培養(yǎng)時,會引起腎尿酸沉積、發(fā)育遲緩和胚胎死亡。使用SPF雞胚時,常在第三代內觀察到病變。應采用血清學或分子生物學檢測方法進一步鑒定分離菌株,病毒分離由于其長時間和嚴格的要求而不是常規(guī)的用于診斷目的,但在疫苗生產、全基因組測序前樣品濃縮、致病性試驗和評估疫苗對強毒力挑戰(zhàn)的保護等方面仍然很有用。
2.血清學方法。以抗體檢測為基礎,包括瓊脂凝膠沉淀(AGP)、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、病毒中和(VN)和血凝抑制(HI)等多種血清學檢測方法。
AGP是快速和廉價的方法,但不被常規(guī)采用,因為它缺乏敏感性,并且主要的沉淀抗體(即IgM)在暴露后幾周才被檢測出來。
商業(yè)ELISA檢測是最常用的常規(guī)血清學監(jiān)測,因為其成本效益和快速檢測。抗體滴定有助于監(jiān)測疫苗接種反應,特別是在蛋雞和育種雞。為了作出正確的解釋,應根據對當地情況的定期監(jiān)測來確定基線值,因為抗體滴度取決于許多因素,如品種、類型、抽樣年齡、接種計劃和時間表。大多數可用的ELISA試劑盒都是為了檢測針對整個病毒的多克隆抗體而設計的,不允許血清分型。
VN和HI試驗可以識別血清型特異性抗體,因此有助于評估疫苗株的特異性反應。然而,只有vn才是血清學分型的選擇方法,因為使用HI的交叉反應更頻繁。
3.分子生物學檢測方法。目前,生物分子學檢測方法因其靈敏性和快速時間而成為IBV檢測的最常用工具。除了病毒RNA檢測之外,它們還可以從遺傳學的角度對檢測到的菌株進行定性,使人們能夠正確地規(guī)劃和評估疫苗接種方案,并評估是否存在特定的野生菌株。
適合PCR檢測的樣本包括咽喉拭子、組織和糞便。這些含有保護核酸和滅活病原體而不受污染的化學物質,儲存和運輸所需的條件不那么嚴格,但可能造成敏感性的損失。樣本通常采集在氣管或泄殖腔,但根據具體癥狀和病變的存在,他們也應該從腎或輸卵管采取。因此,從不同地區(qū)收集的樣本可能會產生不同的結果。
任何技術本身都不能被認為是完全決定性的,通常需要綜合多項測試才能全面了解單個動物、雞群或較大種群的感染狀況。與其實施一套標準的檢測方法,最好的診斷方法可能應該逐案決定,以適應流行病學的特殊要求和特點。
共同采用多種活疫苗可能會使診斷過程復雜化,并掩蓋現場菌株的同時存在。因此,在解釋結果時,應考慮到已實施的疫苗接種方案。其他因素包括取樣的時間、癥狀的存在和類型、畜舍類型,以及其他呼吸道和免疫抑制病原體的存在。
一旦確診雞群感染本病后,首先需要選用抗菌消炎類藥物來減緩呼吸道癥狀和防治雞群繼發(fā)感染其他疾病為主,生產中經常使用:恩諾沙星、替米考星、酒石酸泰樂菌素等藥物。同時選擇中藥來抑制病毒復制,可以使用具有清熱解毒、去咳化痰、宣肺理氣等中草藥,對治療本病和防止繼發(fā)感染具有明顯效果,可以大大降低雞群的死亡率,幫助雞群盡快恢復健康狀況。
IBV對家禽生產的顯著經濟影響鼓勵了大規(guī)模接種策略的實施,其廣泛采用需要解決理想應用和實際應用之間的問題。至于其他病原體,則可透過良好的管理、正確的禽鳥密度、空氣質素、全進全出持續(xù)時間等,以紓緩IBV的控制。
防止IBV的第一個基本障礙是生物安保,嚴格執(zhí)行控制動物、人、用品和廢物糞肥流動的外部和內部措施。為了減少IBV感染的危險,必須有足夠的消毒程序。為了彌補這些方面的不足,接種疫苗是最有效和最常用的辦法:即使疫苗不能完全預防感染,也可以減少臨床癥狀、降低傳染壓力。