陳詩杰 宋昀程 陳 靜 錢正祥 李金鑫

（上海豐科生物科技股份有限公司，上海 奉賢 201401）

灰樹花Grifola frondosa，又名舞茸，隸屬擔(dān)子菌亞門Basidiomycota、層菌綱Hymenomycetes、無隔擔(dān)子菌亞綱Holobasidiomycetidae、非褶菌目Aphyllophorales、多孔菌科Polyporaceae、樹花菌屬Grifola[1]，因其口感獨(dú)特，風(fēng)味好，營養(yǎng)豐富，藥用價(jià)值高等，逐漸成為當(dāng)前可食的新興食用菌種類[2-3]?；覙浠ǔ掷m(xù)增長的市場需求刺激其人工栽培趨于規(guī)?；?，陸續(xù)形成設(shè)施化地栽、工廠化袋栽及工廠化瓶栽三大主要栽培模式，工廠化生產(chǎn)產(chǎn)量更高，品質(zhì)更好，發(fā)展空間較大[4-5]。

不同生產(chǎn)模式因在生產(chǎn)環(huán)節(jié)、栽培環(huán)境和栽培工具等方面的差異[6]，使得相應(yīng)生產(chǎn)模式專用菌株的選用要求更高。李紅梅等[7]進(jìn)行引進(jìn)和自主分離野生的灰樹花菌株林地仿野生栽培試驗(yàn)，從中篩選出適合冀中南地區(qū)林下栽培的3個(gè)灰樹花菌株。彭學(xué)文等[8]從6 株野生灰樹花菌株中篩選出適合唐山當(dāng)?shù)馗餐猎耘嗟? 個(gè)灰樹花菌株。金宇昌等[12]采取工廠化袋栽模式篩選出1 個(gè)灰樹花袋栽潛力菌株。為從現(xiàn)有菌株中篩選出適宜工廠化瓶栽的灰樹花潛力菌株，筆者進(jìn)行8 個(gè)灰樹花菌株的瓶栽比較試驗(yàn)，為提升灰樹花規(guī)?；吭陨a(chǎn)整體效能，搭建灰樹花瓶栽專用品種選育提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 供試菌株及培養(yǎng)基

（1）供試灰樹花菌株

供試8個(gè)菌株編號(hào)和來源見表1。

表1 供試灰樹花菌株編號(hào)及來源

（2）供試培養(yǎng)基

PDA 培養(yǎng)基：馬鈴薯800 g，葡萄糖20 g，瓊脂條20 g，水1.0 L，pH 自然。培養(yǎng)基滅菌后取直徑90 mm玻璃平皿倒板，備用。

三角瓶培養(yǎng)基：木屑85%，麩皮15%。料含水量65%，pH自然，滅菌后冷卻，備用。

栽培種培養(yǎng)基：木屑60%，棉籽殼20%，麩皮10%，玉米芯5%，豆渣5%。料含水量65%，pH 自然，瓶裝濕料585～590 g，滅菌后冷卻，備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 供試灰樹花菌株菌絲生長速度

使用打孔器打孔已活化的灰樹花菌株純培養(yǎng)物以制備直徑5 mm 菌餅，將菌餅接于PDA 培養(yǎng)基中央，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)。每日觀察菌絲生長狀態(tài)，3 d后劃線，直至菌絲長滿平板，計(jì)算菌絲生長速度，每個(gè)菌株設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.2.2 供試灰樹花菌株農(nóng)藝性狀

將供試灰樹花菌株接種于三角瓶培養(yǎng)基內(nèi)，每個(gè)菌株接種4 瓶，25 ℃培養(yǎng)15 d 培養(yǎng)原種。將原種接入裝有培養(yǎng)料850 mL規(guī)格塑料瓶中，每個(gè)菌株16瓶。置于23～25 ℃，空氣相對濕度65%～70%，二氧化碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于2 000 mg/kg 的培養(yǎng)房中黑暗培養(yǎng)，菌絲長滿栽培瓶后給予150～200 lx 散射光刺激以促進(jìn)原基生長。待原基隆起吐水后及時(shí)揭蓋，移入18～20 ℃，空氣相對濕度85%～95%，二氧化碳質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于1 000 mg/kg，光照強(qiáng)度200～400 lx 的出菇房內(nèi)進(jìn)行出菇管理。待子實(shí)體長至八成熟時(shí)及時(shí)采收。記錄子實(shí)體的菌蓋顏色、形狀、數(shù)量等農(nóng)藝性狀，每瓶僅采收1潮。

1.2.3 供試灰樹花菌株子實(shí)體生產(chǎn)性能

記錄從接種到搔菌的天數(shù)，即為菌齡；從接種到采收的天數(shù)，即為栽培周期。采收后稱量單朵灰樹花，記錄單產(chǎn)；計(jì)算出菇率和污染率。

出菇率=（每個(gè)菌株開片總朵數(shù)/每個(gè)菌株接種總瓶數(shù)）×100%

污染率=（每個(gè)菌株污染總瓶數(shù)/每個(gè)菌株接種總瓶數(shù)）×100%

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Office Excel 2017 處理數(shù)據(jù)；運(yùn)用SPSS2.0軟件分析比較供試配方之間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試灰樹花菌株菌絲生長速度及菌落形態(tài)

由表2、圖1 可知，8 個(gè)灰樹花菌株菌絲生長速度有顯著差異（P＜0.05，下同），同時(shí)，菌絲長勢、菌絲質(zhì)地及菌落特點(diǎn)也各有差異。菌株GF-6 生長速度最快，為0.68 cm/d，其次是菌株GF-4，生長速度為0.58 cm/d，再次是菌株GF-1、GF-5，生長速度為0.48 cm/d，均與對照菌株152 差異顯著；其他菌株菌絲生長速度與對照菌株152差異不顯著。菌絲生長勢及菌落質(zhì)地，除菌株151、GF-2 較對照菌株弱外，其他菌株菌絲長勢均較強(qiáng)，并基于自身特性形成邊緣和隆起度有異的潔白菌落。

表2 供試灰樹花菌株菌絲生長速度及菌落形態(tài)

2.2 供試灰樹花菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀

供試灰樹花菌株中除菌株GF-4 未形成原基外，其他菌株出菇后子實(shí)體性狀如表3、圖2。對照菌株152的朵形橫縱比最高，朵形最為挺拔，與其他菌株差異顯著；其次是菌株151、GF-5、GF-6，菌株GF-3 的朵形最為平展。另外，菌株151、GF-1、GF-3、GF-6 長寬比較對照菌株152 高，其朵形更為圓潤。供試菌株菌蓋顏色以深色品系為主，除菌株GF-5 為白色外，其他6 個(gè)菌株均為褐色。所有供試菌株菌蓋邊緣平滑，菌柄較長呈匙形，菌株GF-1 和GF-3 菌蓋面積更大，呈扇形。菌株GF-1、GF-2、GF-3、GF-6 較菌株152 的菌蓋數(shù)量更多，朵形更為密集。不同菌株農(nóng)藝性狀各有差異，這為滿足消費(fèi)需求提供多樣的選擇性。

圖2 供試部分灰樹花菌株瓶栽子實(shí)體形態(tài)

表3 供試灰樹花菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀

2.3 供試灰樹花菌株子實(shí)體的生產(chǎn)性能

由表4 可知，對照菌株152 的瓶栽均產(chǎn)為84.76 g，菌株GF-1 均產(chǎn)較對照菌株高，為94.56 g，其次為菌株GF-6，均產(chǎn)為90.96 g。其他菌株的均產(chǎn)均低于對照菌株152，菌株GF-5 最低，瓶栽均產(chǎn)為71.56 g，與菌株GF-1 相差20 g 以上。由此可見，單就瓶單產(chǎn)而言，菌株GF-1、GF-6優(yōu)勢較為明顯。

表4 供試灰樹花菌株生產(chǎn)性能

對照菌株152 的瓶栽出菇率為100%，其次為菌株GF-6，瓶栽出菇率為96.88%；除菌株GF-3、GF-5出菇率為87.5%、50%且表現(xiàn)最差外，其他菌株的出菇率均在90%以上。菌株151 污染率與對照菌株152 相同，為0，其次為菌株GF-1、GF-6，污染率為3.13%，其他菌株污染率較高，菌株GF-5 污染率最高，為37.5%。由此可見，單就出菇率、污染率而言，除對照菌株152 外，菌株151、GF-1、GF-6 表現(xiàn)均較優(yōu)。

菌株GF-1、GF-2、GF-3 的栽培周期為38 d，最短，比對照菌株152 少1 d；菌株GF-5 的栽培周期為44 d，最長。菌株GF-1、GF-2 的菌絲培養(yǎng)周期為24 d，最短，比對照菌株152少5 d；菌株GF-5的菌絲培養(yǎng)周期為30 d，最長。對照菌株152及菌株151的出菇期均為10 d，最短，其次是菌株GF-3，出菇期為12 d，其他菌株出菇期為14～15 d。由此可見，單就栽培周期而言，較對照菌株152，菌株GF-1、GF-2、GF-3優(yōu)勢明顯。

3 小結(jié)

工廠化瓶栽灰樹花的選擇適配菌株至關(guān)重要，是提升工廠化生產(chǎn)產(chǎn)能和產(chǎn)值重要因素[9]。目前廣泛使用（野生馴化或人工選育）的灰樹花菌株，多為應(yīng)用于地栽和袋栽模式[10]，瓶栽研究鮮有報(bào)道。試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)灰樹花菌株瓶栽也能出菇，且具有一定的單產(chǎn)和出菇率，表明現(xiàn)有菌株進(jìn)行工廠化瓶栽是可行的。

綜合分析結(jié)果表明，菌株GF-1、GF-6在瓶栽條件下表現(xiàn)較為突出，瓶栽均產(chǎn)高，污染率低，栽培周期短，可作為進(jìn)一步規(guī)?；痉对耘嗟木?。但相較國外瓶栽專用灰樹花菌株的表現(xiàn)來看，國內(nèi)菌株在朵形、單產(chǎn)和出菇率等性能上仍存在較大的改良空間[11]。因此，今后有必要基于潛力菌株持續(xù)進(jìn)行改良和選育，同時(shí)也需要對相應(yīng)菌株的配套配方、栽培工藝等加以研究和精選，以進(jìn)一步提高適配菌株工廠化生產(chǎn)性能。