曹嵐嵐，程雪梅，楊立國(guó)，王秀蘭，奧·烏力吉，王長(zhǎng)虹

蒙藥砂藍(lán)刺頭定性與定量質(zhì)量控制方法研究

曹嵐嵐1，程雪梅1，楊立國(guó)2，王秀蘭2，奧·烏力吉2，王長(zhǎng)虹1*

1. 上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，中藥標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市復(fù)方中藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，上海 201203 2. 內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，蒙藥研發(fā)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，內(nèi)蒙古 通遼 028000

建立砂藍(lán)刺頭的質(zhì)量控制方法。采用薄層色譜法，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（6∶1∶1∶0.8）為展開(kāi)劑對(duì)砂藍(lán)刺頭花中1-甲基-4-甲氧基-8-(β--葡萄吡喃型糖苷)-2(1H)-喹啉酮（MMQ）進(jìn)行定性鑒別；建立砂藍(lán)刺頭HPLC指紋圖譜，并對(duì)MMQ的含量測(cè)定方法進(jìn)行研究。建立的TLC方法對(duì)照品斑點(diǎn)清晰，分離度好；建立的指紋圖譜分析方法能夠區(qū)分砂藍(lán)刺頭與近源植物，標(biāo)定了8個(gè)特征峰，并指認(rèn)出其中4個(gè)成分。定量方法測(cè)定結(jié)果顯示MMQ在2.024～151.800 μg/mL呈良好線性關(guān)系，平均加樣回收率為101.54%，RSD為1.46%。7批樣品中MMQ的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.13%～0.53%。建立的質(zhì)量控制方法科學(xué)、可靠，可為砂藍(lán)刺頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

砂藍(lán)刺頭花；質(zhì)量控制；薄層色譜法；高效液相色譜法；1-甲基-4-甲氧基-8-(β--葡萄吡喃型糖苷)-2(1)-喹啉酮

菊科藍(lán)刺頭屬L.植物在全世界有120余種[1]，分布于南歐、北非和中亞。我國(guó)有19種，主要分布于我國(guó)東北、華北及西北地區(qū)[2-3]。藍(lán)刺頭屬植物中含有有機(jī)酸類[4]、噻吩類[5]、黃酮類[6]和生物堿類[7]等化學(xué)成分。該屬植物多數(shù)有藥用價(jià)值，在我國(guó)中醫(yī)藥或者少數(shù)民族醫(yī)藥中均有所應(yīng)用[1]，具有抗腫瘤[8]、降血糖[9]、抗炎、抗氧化[10]等多種藥理活性。

砂藍(lán)刺頭Turcz.為民間常用藥材，在遼寧、吉林、內(nèi)蒙古、寧夏、陜西、甘肅、青海、新疆等省區(qū)沙漠地區(qū)均有分布[11]。其藥用部位包括干燥根、頭狀花序以及全草。根為常用中藥，具有清熱解毒、通乳、排膿的功效[12]，多入湯劑[13]。在蒙醫(yī)中，全草具有止血、安胎、舒筋通脈的功效[14]；頭狀花序有固骨質(zhì)、接骨愈傷、清熱止痛之效，可治療骨折、骨熱、刺痛以及瘡瘍等疾病[13]。相關(guān)研究主要集中在砂藍(lán)刺頭植物的化學(xué)成分提取分離[15-17]以及生態(tài)資源[18-19]等方面。未見(jiàn)關(guān)于砂藍(lán)刺頭花的有效成分和質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究報(bào)道。本課題組前期從砂藍(lán)刺頭花（簡(jiǎn)稱EGT）中分離得到了1-甲基-4-甲氧基-8-(β--葡萄吡喃型糖苷)-2(1)-喹啉酮（1-methyl-4-methoxy-8-(β-- glucopyranoside)-2(1)-quinolinone，以下簡(jiǎn)稱MMQ）。以其為指標(biāo)，建立EGT的薄層鑒別和含量測(cè)定方法，并結(jié)合指紋圖譜進(jìn)行多成分定性評(píng)價(jià)，從而達(dá)到對(duì)EGT的定性和定量控制的目的。

1 材料

1.1 儀器

Linomat-Ⅵ型薄層色譜自動(dòng)點(diǎn)樣器（瑞士CAMAG公司）、Reprostar 3型薄層色譜攝像儀（瑞士CAMAG公司）、Mettler AE200型電子分析天平、KQ-250DB數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、Waters e2695 HPLC色譜儀、SX2-4-10型系列箱式電阻爐（上海陽(yáng)光實(shí)驗(yàn)儀器）。

1.2 試藥

EGT樣品S1（批號(hào)20180823）、S2（批號(hào)20180830）、S6（批號(hào)20180901）、S7（20180905），均采集于內(nèi)蒙古通遼；S3（批號(hào)20180811）采集于內(nèi)蒙錫林郭勒；S4（批號(hào)20180811）采集于內(nèi)蒙錫林浩特；S5（批號(hào)20180905）采集于內(nèi)蒙科左中旗；S8（批號(hào)20120814）和S9（批號(hào)20120815），采集于甘肅張掖；大藍(lán)刺頭花樣品S10（批號(hào)20110730），采集于新疆阿勒泰；硬葉藍(lán)刺頭花樣品S11（批號(hào)20120801），采集于新疆阿勒泰，S12（批號(hào)20110725）和S13（批號(hào)20120728）采集于新疆烏魯木齊；全緣藍(lán)刺頭花樣品S14（批號(hào)20120801）和S15（批號(hào)20110731）采集于新疆阿勒泰；藍(lán)刺頭花樣品S16（批號(hào)20101110）采集于內(nèi)蒙古。以上藥材經(jīng)上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心吳立宏研究員分別鑒定為砂藍(lán)刺頭Turcz.、大藍(lán)刺頭Golosk.、硬葉藍(lán)刺頭L.、全緣藍(lán)刺頭Kir.和藍(lán)刺頭Tausch.的干燥頭狀花序。MMQ對(duì)照品由實(shí)驗(yàn)室自制，HPLC面積歸一化法，質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%。乙腈（色譜純，美國(guó)Fisher公司），水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 MMQ的分離與制備

取EGT藥材1.2 kg，95%乙醇回流提取3次、60%乙醇回流提取1次，提取1～2 h，回收乙醇。將濃縮液依次用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取，合并并回收各有機(jī)溶劑。取正丁醇部位過(guò)MCI小孔樹(shù)脂，依次用不同濃度甲醇水體系洗脫，取30%甲醇段減壓濃縮后得浸膏5 g，通過(guò)硅膠和MCI等手段，分離得到目標(biāo)化合物。經(jīng)1H-NMR、13C-NMR鑒定，確定該成分為生物堿類化合物MMQ，經(jīng)HPLC面積歸一法測(cè)定其質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于98%。

2.2 薄層色譜鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備 取EGT粉末（過(guò)3號(hào)篩）0.25 g，加70%甲醇25 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)?0%甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 取MMQ適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.2.3 薄層色譜分別吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠HSGF254薄層板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（6∶1∶1∶0.8）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。采用上述色譜方法對(duì)7批不同產(chǎn)地的EGT藥材（S1～S7）進(jìn)行薄層色譜鑒別（S8、S9因采集時(shí)間較久，未采用），結(jié)果樣品中MMQ分離度較良好，斑點(diǎn)清晰，比移值（f）合適，并且7批藥材具有良好的一致性，見(jiàn)圖1。

2.3 指紋圖譜的建立

2.3.1 供試品溶液的制備 取EGT樣品（S5，過(guò)3號(hào)篩）0.25 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，稱定質(zhì)量，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）處理30 min，放冷，用70%甲醇補(bǔ)充減失質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

S-MMQ S1～7-EGT樣品

2.3.2 色譜條件 以Diamonsil Plus C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）為色譜柱；乙腈（A）-0.1%甲酸（B）為流動(dòng)相梯度洗脫（0～7 min，5% A；7～35 min，5%～28% A；35～53 min，28%～90% A；53～65 min，90% A）；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為275 nm；進(jìn)樣量為10 μL。

2.3.3 精密度試驗(yàn) 稱取樣品粉末0.25 g（S5），按“2.3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.3.2”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，以MMQ（S）峰為參照峰，計(jì)算色譜圖中特征峰相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，結(jié)果顯示RSD分別為0.05%～0.49%和0.39%～2.15%。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同批次砂藍(lán)刺頭粉末（S5）1份，按“2.3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.3.2”項(xiàng)下色譜條件分別于0、1、2、4、6、12、24 h進(jìn)樣，以MMQ峰為參照峰，記錄和計(jì)算各共有峰相對(duì)保留時(shí)間、相對(duì)峰面積。結(jié)果顯示RSD分別為0.06%～0.54%和0.33%～1.89%。

2.3.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批次砂藍(lán)刺頭粉末（S5）6份，按“2.3.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.3.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，以MMQ為參照峰，記錄和計(jì)算各共有峰保留時(shí)間、相對(duì)峰面積，計(jì)算其RSD分別為0.07%～1.11%和0.32%～3.19%。

2.3.6 指紋圖譜的建立與分析 按“2.3.1”項(xiàng)和“2.3.2”項(xiàng)對(duì)樣品進(jìn)行制備和測(cè)定，記錄色譜圖。運(yùn)用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)研究版（2004版）”，導(dǎo)入S1～S9號(hào)樣品HPLC數(shù)據(jù)，以S1為參照?qǐng)D譜，選擇平均數(shù)法進(jìn)行自動(dòng)峰匹配，生成EGT對(duì)照指紋圖譜（圖2-A）。以EGT對(duì)照指紋圖譜為參照?qǐng)D譜，同時(shí)導(dǎo)入7批（S10～S16）藍(lán)刺頭屬其他種樣品HPLC圖譜數(shù)據(jù)，選擇平均數(shù)法進(jìn)行自動(dòng)峰匹配，得到藍(lán)刺頭屬其他種圖譜（圖2-B）并計(jì)算相似度。計(jì)算得到S1～S9號(hào)樣品相似度分別為0.970、0.950、0.922、0.989、0.959、0.978、0.980、0.916、0.697，偽品相似度分別為0.849、0.452、0.806、0.327、0.499、0.580、0.832。除批號(hào)為20120815樣品外，其余EGT樣品相似度均在0.9以上，種內(nèi)相似度較高，而藍(lán)刺頭屬其他種植物樣品相似度均低于0.9。將S1～S9號(hào)樣品與藍(lán)刺頭屬其他種樣品的指紋圖譜進(jìn)行比較，并結(jié)合各色譜峰的峰形、峰高以及分離情況等信息，標(biāo)定了8個(gè)特征峰，并經(jīng)對(duì)照品指認(rèn)4個(gè)峰，分別為2號(hào)峰是水楊酸、4號(hào)峰是綠原酸、5號(hào)峰是MMQ、6號(hào)峰是異綠原酸，其中MMQ是本研究發(fā)現(xiàn)的含量較高的專屬性成分，其色譜峰的對(duì)稱性好、峰較高，與相鄰色譜峰達(dá)到基線分離，故選定MMQ為參照峰（S）。并計(jì)算得到各特征峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD均小于3%，表明特征峰的出峰時(shí)間較為穩(wěn)定，但其相對(duì)峰面積的RSD相差較大，表明不同批次中各成分含量存在一定的差異。將16批樣品指紋數(shù)據(jù)進(jìn)行初步數(shù)據(jù)篩選，篩選出峰面積比＞2%的指紋數(shù)據(jù)，結(jié)果導(dǎo)入SIMCA 13.0軟件，進(jìn)行最小二乘法判別分析（orthogonal projections to latent structures discriminant analysis，OPLS-DA）與聚類分析（hierarchical cluster analysis，HCA），結(jié)果見(jiàn)圖3和圖4。從OPLS-DA和HCA結(jié)果顯示，EGT與藍(lán)刺頭屬其他種樣品分成2大類，說(shuō)明所建立的EGT特征指紋圖譜有一定的鑒別作用，可用于EGT的質(zhì)量評(píng)價(jià)。VIP結(jié)果顯示13號(hào)峰（MMQ）為最主要的貢獻(xiàn)成分，該成分為EGT的專屬性成分，可作為EGT含量測(cè)定的指標(biāo)成分。

2-水楊酸 4-綠原酸 5-MMQ 6-異綠原酸

圖3 藍(lán)刺頭屬OPLS-DA圖(A) 及VIP (VIP＞1.0，B) 圖

圖4 藍(lán)刺頭屬聚類分析

2.4 MMQ的定量測(cè)定

2.4.1 色譜條件 采用Diamonsil Plus C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色譜柱；乙腈-0.1%甲酸水溶液（14∶86）為流動(dòng)相，體積流量為1.0 mL/min，柱溫30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，進(jìn)樣量為10 μL。理論板數(shù)按MMQ峰計(jì)不低于2500。對(duì)照品溶液和供試品溶液的HPLC見(jiàn)圖5。

圖5 MMQ對(duì)照品(A) 和砂藍(lán)刺頭花藥材(B) HPLC圖

2.4.2 供試品溶液的制備 取EGT樣品（過(guò)3號(hào)篩）0.25 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，稱定質(zhì)量，超聲（功率250 W、頻率40 kHz）處理30 min，放冷，用70%甲醇補(bǔ)充減失質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.4.3 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取MMQ對(duì)照品10.12 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成含1.012 mg/mL MMQ的溶液，作為對(duì)照品貯備溶液。

2.4.4 線性關(guān)系考察 用70%甲醇對(duì)貯備液進(jìn)行逐級(jí)稀釋，得到2.024、20.240、50.600、101.200、151.800 μg/mL的系列對(duì)照品溶液，分別精密吸取溶液各10 μL，注入色譜儀進(jìn)行測(cè)定，以對(duì)照品的進(jìn)樣質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（），峰面積為縱坐標(biāo)（），進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為＝35.919－4.386 4，＝1.000 0，結(jié)果表明，MMQ在2.024～151.800 μg/mL線性關(guān)系良好。

2.4.5 定量限和檢測(cè)限 取對(duì)照品貯備溶液，逐步稀釋，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10 μL，信噪比（）為10∶1，測(cè)得MMQ的定量限約為2.024 μg/mL。信噪比（）為3∶1時(shí)，MMQ的檢測(cè)限約為0.607 μg/mL。

2.4.6 精密度試驗(yàn) 選取高、中、低（101.200、50.600、20.240 μg/mL）3個(gè)質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件下同1 d內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)得MMQ峰面積的RSD分別為0.73%、0.95%、1.37%。連續(xù)測(cè)定3 d，每天進(jìn)樣1次，記錄MMQ峰面積，測(cè)得MMQ峰面積的RSD分別為2.06%、1.61%、1.88%。結(jié)果顯示日內(nèi)、日間精密度均小于3%。表明日內(nèi)、日間精密度良好，儀器穩(wěn)定。

2.4.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取樣品粉末0.25 g（S5），按“2.4.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，平行6份，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10 μL，記錄MMQ的峰面積。采用外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算MMQ的含量，樣品中MMQ的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.28 mg/g，RSD為1.37%，表明此方法重復(fù)性好。

2.4.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取樣品粉末0.25 g（S5），按“2.4.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件分別于0、1、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣，進(jìn)樣量為10 μL，結(jié)果顯示MMQ峰面積的RSD為1.81%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的EGT粉末0.125 g（S5）精密稱定，按已測(cè)定的50%、100%、150%精密加入對(duì)照品溶液，按“2.4.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄峰面積，采用外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算加樣回收率。結(jié)果MMQ的平均加樣回收率為101.5%，RSD為1.46%。

2.4.10 定量測(cè)定 取7批EGT樣品，按“2.4.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，經(jīng)HPLC測(cè)定后，結(jié)果顯示7批EGT（S8、S9因采集時(shí)間較久，未測(cè)定）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍在0.13%～0.53%，見(jiàn)表1。

3 討論

3.1 指標(biāo)成分的選擇

EGT為蒙古族習(xí)用藥材，目前無(wú)相關(guān)的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)以及專屬性成分的研究，本研究通過(guò)MCI色譜、硅膠色譜、高效液相色譜等分離手段，得到專屬性成分，經(jīng)核磁鑒定為一種喹啉酮類生物堿（MMQ）。本實(shí)驗(yàn)將EGT與其它4種近源樣品：大藍(lán)刺頭、硬葉藍(lán)刺頭、全緣藍(lán)刺頭和藍(lán)刺頭，進(jìn)行薄層色譜和HPLC檢測(cè)比較，結(jié)果顯示大藍(lán)刺頭、硬葉藍(lán)刺頭、全緣藍(lán)刺頭不含有MMQ，在藍(lán)刺頭樣品中雖含有少量MMQ，但遠(yuǎn)低于其檢測(cè)線。因此MMQ作為砂藍(lán)刺頭中含量較高且專屬性較強(qiáng)的成分，建立以其為指標(biāo)成分定性定量方法，有一定的科學(xué)性與實(shí)用性，可以更好地評(píng)價(jià)EGT藥材的質(zhì)量。

表1 7批EGT藥材中MMQ含量測(cè)定結(jié)果(n＝3)

3.2 薄層色譜鑒別

在薄層鑒別展開(kāi)劑的考察中，發(fā)現(xiàn)酸對(duì)于薄層展開(kāi)體系的影響較大，非酸體系下，斑點(diǎn)較少、分離度較差。篩選了多種顯色劑，包括磷鉬酸、碘化鉍鉀、碘、10%硫酸乙醇等，顯色效果均不佳，不顯色或者顯色不靈敏，最終定為以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（6∶1∶1∶0.8）為展開(kāi)劑，254 nm紫外燈下檢視熒光斑點(diǎn)即可。比較了不同廠家的薄層板：銀龍-HSGF254板、黃海-HSGF254板、德國(guó)MNSGF板和德國(guó)MNHSGF板，所建立的薄層方法在上述幾種板中均能獲得很好的展開(kāi)效果，其中以德國(guó)MNHSGF板分離效果最好。

3.3 指紋圖譜建立

中藥色譜指紋圖譜能夠較為全面地反映中藥的整體質(zhì)量。本實(shí)驗(yàn)建立指紋圖譜分析方法能很好地將EGT與同屬其他植物相區(qū)別。相似度分析評(píng)價(jià)中，S9（批號(hào)20120815）相似度僅為0.679，其他EGT樣品相似度均高于0.9，這提示EGT樣品陳置過(guò)久可能會(huì)影響其藥材質(zhì)量。這一發(fā)現(xiàn)為藥材市場(chǎng)中EGT藥材年限控制提供數(shù)據(jù)參考。不同來(lái)源的9批樣品指紋圖譜中的共有峰在數(shù)目以及相對(duì)保留時(shí)間上保持一致，但各共有峰相對(duì)峰面積有一定的差異，說(shuō)明各批次藥材之間的質(zhì)量存在差異，推測(cè)可能與藥材產(chǎn)地、生長(zhǎng)年限、采收期等因素有關(guān)。將EGT和其他種藍(lán)刺頭的指紋數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，主成分分析和聚類分析結(jié)果一致，均能實(shí)現(xiàn)EGT與同屬其他植物（藍(lán)刺頭、全緣葉藍(lán)刺、硬葉藍(lán)刺頭和大藍(lán)刺頭）的區(qū)別。在PCA中，16批樣品聚為2大類，S1～S9號(hào)樣品為不同批次EGT，S10～16號(hào)樣品為藍(lán)刺頭屬其他種樣品，其中S8和S9號(hào)樣品為2012年收集的樣品，雖經(jīng)放置多年，成分有所下降，但仍歸為EGT中。在聚類分析中，S8和S9號(hào)樣品處于同一組中；S14和S15號(hào)樣品為全緣藍(lán)刺頭也在同一組中，該結(jié)果與OPLS-DA結(jié)果一致。

3.4 含量測(cè)定

在建立MMQ的定量分析方法實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行了提取方法（超聲、加熱回流）、提取溶劑（純甲醇、70%甲醇、50%甲醇）、提取時(shí)間和提取次數(shù)的考察。最終確定的提取方便操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，對(duì)砂藍(lán)刺頭中MMQ提取率高。考察了乙腈-水、乙腈-醋酸銨緩沖鹽水溶液、甲醇-0.1%甲酸水溶液、乙腈-0.1%甲酸水溶液等流動(dòng)相體系對(duì)液相色譜分離效果的影響。最終確定的含測(cè)方法重復(fù)性好，MMQ的分離度和含量測(cè)定RSD均符合檢測(cè)要求。另外，由于S8和S9藥材采集時(shí)間過(guò)久，為了不影響含量限度制定的準(zhǔn)確性，未對(duì)這2批藥材進(jìn)行含量測(cè)定。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Study on qualitative and quantitative control method for

CAO Lan-lan1, CHENG Xue-mei1, YANG Li-guo2, WANG Xiu-lan2, AO Wu-liji2, WANG Chang-hong1

1. Institute of traditional Chinese Medicine, Shanghai University of traditional Chinese Medicine, key Laboratory of Chinese Medicine Standardization Ministry of Education, Shanghai compound Chinese Medicine key Laboratory, Shanghai Research Center for Standardization of traditional Chinese Medicine, Shanghai 201203, China 2. School of Mongol Medicine, Inner Mongolia University for Nationalities, National and Local Joint Engineering Research Center for Mongolian Medicine Research and Development, Tongliao 028000, China

To establish the quality control method for of.Thin layer chromatography (TLC) method was used for quanlitative analysis of the 1-methyl-4-methoxy-8-(β--glucopyranoside)-2 (1H)-quinolinone (MMQ) with a mixture of trichloromethane-ethyl acetate-methanol-formic acid (6∶1∶1∶0.8) as the developing solvent. The HPLC fingerprint of the capitulum ofand the determination of MMQ were conducted by HPLC.The spots on TLC plate were clear, well-separated and specific without any interference. The linear range of calibration curve was 2.024—151.800 μg/mL, and the average recovery was 101.5% with RSD of 1.46%, which can be used for the quality control of. The contents of MMQ in seven batches ofwere 0.13%—0.53%.The qualitative and quantitative determination method is scientific and reliable, which can provide an experimental basis for the establishment of the quality standard of.

Turcz.; quality control; TLC; HPLC; 1-methyl-4-methoxy-8-(β--glucopyranoside)-2(1)-quinolinone.

R286.6

A

0253 - 2670(2021)06 - 1759 - 06

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.06.026

2020-08-06

蒙藥研發(fā)國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心開(kāi)放基金項(xiàng)目（MDK2019043）；內(nèi)蒙古自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局內(nèi)蒙古蒙藥材標(biāo)準(zhǔn)研究課題采購(gòu)項(xiàng)目（JYCZ18-026）；中央引導(dǎo)地方科技發(fā)展專項(xiàng)資金計(jì)劃項(xiàng)目：蒙醫(yī)藥現(xiàn)代化關(guān)鍵技術(shù)研究及蒙藥產(chǎn)業(yè)化

曹嵐嵐，碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴幮轮苿┡c體內(nèi)過(guò)程研究。Tel: (021)51322511 E-mail: c18516607305@126.com

王長(zhǎng)虹，博士，研究員，研究方向?yàn)橹兴幮轮苿┡c體內(nèi)過(guò)程研究。Tel: (021)51322511 E-mail: wchcxm@163.com

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