張紅升，陳萍，王培，安磊，羅愛華，廖偉彪

(1.寧夏職業(yè)技術學院生物與制藥技術系，寧夏 銀川 750021；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學園藝學院，甘肅 蘭州 730070)

百合(Liliumspp.)為百合科(Liliaceae)百合屬(Lilium)多年生球根花卉，是世界六大切花之一，食用和藥用價值均較高，以絢麗多姿、花朵豐碩著稱，為世界著名的切花和盆栽花卉[1-2].目前我國栽培的百合品種主要引自荷蘭.我國百合栽培起步晚，產(chǎn)量與銷量不及切花百合，但發(fā)展趨勢較快，尤其是一些高檔優(yōu)質(zhì)品種經(jīng)常供不應求.但由于對百合資源評價研究不足，導致百合的引種和推廣受阻.因此，探討盆栽百合品種評價指標，開展盆栽東方百合引種篩選研究，對寧夏地區(qū)盆栽百合規(guī)模化設施栽培和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)具有重要意義.

近期，我國出臺了一系列關于加快林下經(jīng)濟發(fā)展的意見，提出“努力建成一批規(guī)模大、效益好、帶動性強的林下經(jīng)濟示范基地”的目標[3].因此，國內(nèi)多地運用層次分析法(AHP)進行了百合引種栽培試驗研究.李浩錚等[4]在山西太谷地區(qū)開展了 3個百合新品種的引進研究.黃成名等[5]通過對10個百合新品種的物候、主要觀賞性狀進行觀測，篩選出適宜宜昌地區(qū)栽培的切花百合品種.楊佳明等[6]從16個百合新品種中篩選出了7個作為沈陽地區(qū)適宜栽培的品種進行推廣.

目前，針對百合的綜合評價研究主要集中于切花百合，而關于篩選適應性強、觀賞性狀優(yōu)良、適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的盆栽東方百合品種的研究則鮮見報道.此外，由于百合是一種易遭受病害侵染的植物，因此綜合評價中也應將病害抗性指標作為參考指標[7-9].鑒于此，本研究通過觀測盆栽東方百合觀賞性狀、栽培特性、品種適應性及抗病性等4個方面的21個性狀指標，采用層次分析法構(gòu)建其綜合評價指標體系，篩選出適合寧夏地區(qū)設施栽培的優(yōu)良品種，旨在為探索百合盆栽技術和尋求適合寧夏地區(qū)種植生產(chǎn)的盆栽百合品種提供科學依據(jù).

1 材料與方法

1.1 試驗材料

從荷蘭引進12個盆栽東方百合品種，分別為White Express(白色印象)、Pink Secret(粉色秘密)、Barletta(巴列塔)、Joyous Event(喜來臨)、Little Rainbow(小彩虹)、Souvenir(蘇紋)、Mona Lisa(蒙娜麗莎)、Rololfa(雷都爾弗)、Free Choice(自選)、Boulevard(林蔭大道)、Starlight Express(星光)和Entertainer(娛樂圈)，種球規(guī)格為16～18 cm.

1.2 試驗方法

試驗于2019年3月至2019年6月在寧夏職業(yè)技術學院節(jié)能日光溫室中進行.

本試驗使用花盆直徑為25 cm，先在盆底裝入厚2 cm的混合基質(zhì)(泥炭∶珍珠巖∶椰糠=5∶1∶1， pH 5.5)，施用有機肥0.35 kg/m2，每個百合品種處理6盆，每盆3個種球，共3次重復，每個品種隨機選取25株進行項目指標測定.

1.3 栽培與管理

1.3.1 種球處理 將東方百合種球基生根短剪，對種球質(zhì)量全面檢查，剔除斷芽或病鱗等損傷部位，置于500 mg/L多菌靈溶液浸泡40 min，晾干后定植于花盆中.

1.3.2 種植 種植時保證種球芽尖向上，種球頂部應朝向盆壁，種球上覆蓋厚約8 cm的混合基質(zhì)，準備插牌，注明品種、規(guī)格、種植日期等，澆透水后進行常規(guī)管理.

1.3.3 水肥管理 種植后實時觀察土壤墑情，避免過澇過旱，尤其發(fā)根期和采收期需水量較大.當幼苗株高15 cm時開始每周施肥，前2次偏重于氮肥和鈣肥，幫助催苗和發(fā)根；后2次偏重于磷鉀肥，促進枝條硬度，避免肥料接觸葉片造成燒葉現(xiàn)象.

1.3.4 病害防控與檢測 病害防治：發(fā)根期可用硫酸銅鈣和農(nóng)用鏈霉素800倍液灌根處理防治莖腐病和疫??；切花期可使用百菌清、腐霉利等化學藥劑防治灰霉??；另外增加光照和加強通風，避免燒葉、落蕾、花芽干縮等現(xiàn)象.蟲害防控：蚜蟲，采用吡蟲啉噴施；螨蟲，噴施噠螨靈或阿維菌素藥劑；線蟲，使用可線靈、阿維菌素或氟吡菌酰胺等藥劑.

病害檢測：在百合成株期進行常見的真菌、細菌和病毒病檢測與調(diào)查.真菌采用顯微鏡鏡檢；細菌采用16S rDNA擴增：利用細菌基因組DNA提取試劑盒(北京天根)對植物組織進行DNA提取，采用細菌通用引物(由生工生物工程(上海)股份有限公司合成)27F (5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和1492R (5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′).PCR 反應體系(50 μL)：2×Taq PCR Master Mix 25 μL、上下游引物各1.0 μL、DNA 模板1.0 μL，ddH2O 加入22 μL.PCR反應條件： 94 ℃ 5 min；94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 90 s，30 個循環(huán)；72 ℃ 10 min.反應結(jié)束后，取5 μL PCR擴增產(chǎn)物在1.0%瓊脂糖凝膠電泳上檢測.百合斑駁病毒RNA提取按試劑盒的提取說明要求進行，提取的RNA置于-80 ℃保存.cDNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒按照大連寶生物公司反轉(zhuǎn)錄試劑盒的說明步驟進行，采用特異性引物[10]LMoV(+)：ATGGTCTGATGGTTTGGTGC；LMoV(-)：TCATCTGCTGTATGCCTCTC.片段大小為421 bp[10].

常規(guī)RT-PCR反應體系：2×TaqPCR Master Mix 10 μL，上下游引物各 0.5 μL，cDNA模板1 μL，ddH2O補足至20 μL.反應程序：94 ℃ 3 min；94 ℃ 30 s，58 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s，35個循環(huán)后，72 ℃延伸10 min.PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳(110 V，35 min)檢測后，凝膠成像系統(tǒng)分析結(jié)果.

1.4 指標測定

物候期調(diào)查：分別記錄出苗期、現(xiàn)蕾期、初花期、盛花期和末花期(以各品種有70%性狀表現(xiàn)相應時期特征為準).

植物學性狀調(diào)查：花性狀指標包括花徑、花形、花色、花香、第一花梗長、成花率、花蕾數(shù)、花蕾長和花蕾寬.

待百合生長后期針對不同品種進行抗病性調(diào)查：品系群體抗病性劃分標準：高抗，病情指數(shù) 0～5.0；抗病，病情指數(shù)5.1～20；耐病，病情指數(shù)20.1～40.0；感病，病情指數(shù)40.1～60.0；高感，病情指數(shù)> 60.0.

莖葉性狀指標包括葉片長、葉片寬、葉片數(shù)、葉色、葉形、株高、莖粗和株型緊湊度(葉片數(shù)與株高的比值)等，其中植株的高度是指從地面開始到植株的最高處，葉片數(shù)為植株上綠色的活體葉片數(shù)，莖粗以距離花土以上5 cm粗度為準，葉寬以葉面最寬處為準；生長適應性指標包括葉燒情況[11]、落葉情況(下部葉片落葉數(shù))和鱗片繁殖力(籽球出球率)等.每個品種分別隨機選取10盆，每盆3株，測量和計算各指標.

構(gòu)建東方百合切花綜合評價體系：借鑒前人研究方法[12-17]，應用層次分析法對東方系列百合進行綜合評價.同時根據(jù)大眾意見法制訂百合切花綜合評價體系，選擇花徑(P1)、花型(P2)、花色(P3)、花香(P4)、第一花梗長(P5)、成花率(P6)、花蕾數(shù)(P7)、花期(P8)、單花期(P9)、葉片長(P10)、葉片寬(P11)、葉片數(shù)(P12)、葉色(P13)、葉形(P14)、株高(P15)、徑粗(P16)、株型緊湊度(P17)、葉燒情況(P18)、落葉情況(P19)、鱗片繁殖力(P20)和抗病性(P21)21個指標作為具體評價指標，建立標準層，擬定百合品種評選的評分標準(表1).

表1 東方百合栽培評價指標的評分標準Table 1 Appraisal criteria of evaluation indexes for potted Oriental lily cultivars

評價指標Evaluationindex等級評分Gradingcriteria5分5score4分4score3分3score2分2score1分1scoreP1花徑/cmFlowerdiameter≥20.0018.00～19.9916.00～17.991266.00～15.99≤12.00P2花形Flowershape完整,均勻,緊湊完整,較均勻,緊湊較完整,較均勻,較緊湊不完整、均勻,較松散不完整、均勻,松散P3花色Flowercolor花色純正,鮮艷花色純正花色較純正花色一般花色不純,暗淡P4花香Flowerfragrance濃香比較香香淡香無香P5第一花梗/cmFirstpedicellength5.50～6.404.50～5.403.50～4.40≥6.50≤3.50P6成花率/%Flowerformationrate10090807060P7花蕾數(shù)/個Budnumber65431.0～2.0P8花期/dFlorescence≥3529～3425～2820～24<20P9單花期/dSingleflorescence≥1211～109～87～65～4續(xù)表1 Continuedtable1評價指標Evaluationindex等級評分Gradingcriteria5分5score4分4score3分3score2分2score1分1scoreP10葉片長/cmLeaflength>9.008.00～9.007.00～8.006.00～7.00<6.00P11葉片寬/cmLeafwidth≥3.003.00～2.502.40～2.001.90～1.40≤1.50P12葉片數(shù)/片Leafnumber≥3734～3730～3326～29≤25P13葉色Leafcolor亮綠,有光澤亮綠有光澤暗綠,無光澤略有褪色P14葉形Leafshape完整,挺直完整,較挺直較完整,較挺直不完整,較下耷不完整,下耷P15株高/cmPlantheight30.00～35.0036.00～40.0025.00～29.0041.00～49.00≥50.00P16莖粗/cmStemdiameter≥0.900.8～0.90.7～0.80.6～0.7≤0.70P17株型緊湊度Planttypecompactdegree≥1.00≥0.90≥0.80≥0.70≥0.60P18葉燒情況Leafburn無葉燒輕微葉燒中度葉燒較嚴重葉燒嚴重葉燒P19落葉情況Leafabscission無落葉輕微落葉中度落葉較嚴重落葉嚴重落葉P20鱗片繁殖力Scalefecundity強比較強中等比較弱弱P21抗病性Resistance高抗抗病耐病感病高感

2 結(jié)果與分析

2.1 物候期比較

物候期中的花期長短是觀花植物重要的經(jīng)濟指標.由表2可知，Joyous Event、Rololfa和Boulevard出苗最早，定植后7 d即出苗，Starlight express和Entertainer出苗較晚，分別為定植后13 d和15 d出苗；Joyous Event現(xiàn)蕾最早，在定植后22 d即現(xiàn)蕾，Entertainer現(xiàn)蕾較遲，在定植后38 d才現(xiàn)蕾；Pink Scret總花期歷時最短，為22 d，而Starlight Experss和Little rainbow總花期歷時最長，分別為38 d和35 d.

表2 盆栽東方百合品種的物候期調(diào)查結(jié)果Table 2 Phenophase investigation of potted oriental lily cultivars d

2.2 植株性狀比較

從表 3可看出，White Express生長勢最強，植株最高為68 cm，較耐高溫；其次是Pink Scret，株高為59.00 cm；最矮的是Souvenir、Free Choice和Boulevard，僅有 30.00 cm.莖粗反映了植物莖干的軟硬程度，從測量結(jié)果看，莖粗以Entertainer最粗(0.97 cm)，且葉色濃綠，葉數(shù)最多(41片) ，其次是Starlight Express(0.91 cm)，White Express最細，僅有 0.62 cm.從葉片長和寬可以看出，Mona Lisa系列百合長、寬分別為11.50、5.10 cm，相對葉面積最大.Pink Scret的株型緊湊度最小，為0.36，Little Rainbow的株型緊湊度最大，為1.53；從葉燒程度、落葉情況和鱗片繁殖力方面分析，Entertainer、Starlight Express和Little Rainbow 3個品種未出現(xiàn)葉燒、落葉現(xiàn)象，且鱗片繁殖力較強.

表3 盆栽東方百合植物學性狀調(diào)查結(jié)果Table 3 Botanical characters of potted oriental lily cultivars

2.3 花期特征觀察

由表4可知，Little rainbow、Starlight Express和Souvenir的花徑較高，分別為22.54、21.33和20.57 cm，Pink Scret的株高最矮，為9.28 cm；從花形上看，White Express、Little rainbow、Souvenir和Starlight Express為花星狀碗形，其他品種均為碗形.Pink Scret、Barletta和Souvenir花色為淺粉紅，斑點較少；Joyous Event和Boulevard分別為粉紅色、黃色.Starlight Express和Entertainer為洋紅色，花瓣有白邊，其他品種均為白色.Starlight Express第一花梗長最長，為5.71 cm，F(xiàn)ree Choice最短，為3.65 cm.White Express和Pink Scret品種成花率較低，分別為80%、70%，其他品種均為100%.Starlight express的花徑最大，為21.53 cm，Souvenir的花徑最小，為10.50 cm；Souvenir的花蕾數(shù)最多，為6.4個，Belonica的花蕾數(shù)最少，為2.6個.Little rainbow的花瓣長和寬為最大，分別為13.42、6.12 cm，而Free Choice長和寬分別為11.23和4.12 cm，花瓣面積最小.

表4 盆栽東方百合植物學性狀調(diào)查結(jié)果(花)Table 4 Botanical characters of potted oriental lily cultivars (flower)

2.4 病害調(diào)查結(jié)果

利用顯微鏡鏡檢結(jié)合RT-PCR分子檢測技術對成株期百合進行診斷，結(jié)果表明(表5,圖1)：不同栽培品種存在復合侵染情況較為嚴重，其中Barletta被4種病害所侵染，分別是炭疽病、根腐病、莖基腐病和百合斑駁病毒；White Express、Pink Scret和Rololfa被3種病害所侵染；Joyous Event、Mona Lisa、Free Choice和Boulevard被2種病害所侵染；而Little Rainbow、Souvenir、Starlight Express和Entertainer均受到單一病害侵染.

表5 盆栽東方百合病害發(fā)生危害情況Table 5 Occurrence of diseases of potted oriental lily

圖1 盆栽東方百合病害侵染情況Figure 1 Infection situation of potted oriental lily

2.5 東方系列百合品種的性狀綜合評價結(jié)果

按照盆栽東方百合21個評價指標的評價標準(表1)，賦予各品種相應的分值，計算出盆栽東方百合的綜合評價得分，根據(jù)得分情況將12個盆栽東方百合分為4個等級(表6)：Ⅰ級(分值≥4.00分)為優(yōu)秀品種，各性狀均表現(xiàn)突出，可作為引進品種進行規(guī)?；a(chǎn)；Ⅱ級 (4.00分>分值≥3.50分)為優(yōu)良品種，整體性狀表現(xiàn)優(yōu)良，也可作為引進品種進行規(guī)模化生產(chǎn)；Ⅲ級(3.50分>分值≥3.00分)為一般品種，整體性狀表現(xiàn)一般，不宜作為引進品種，可作為后期育種材料利用；Ⅳ級(分值<3.00分)為較差品種，整體性狀表現(xiàn)差，利用價值有限，可淘汰.根據(jù)等級劃分結(jié)果，Little Rainbow、Souvenir、Starlight Experss和Entertainer為一級優(yōu)秀品種，Joyous Event為二級優(yōu)良品種，在花性狀方面具有花朵碩大、花型協(xié)調(diào)、花期長且集中等優(yōu)點，莖葉性狀方面表現(xiàn)莖稈粗壯、高度合適、株型緊湊和葉片整齊，且抗病性較強，適宜作為引進品種進行規(guī)模化種植.

表6 盆栽東方百合品種的綜合評價和等級劃分Table 6 Comprehensive evaluation and grading of potted oriental lily cultivars

2.6 市場銷售分析

盆栽百合一般在最下一朵花蕾顯色至初花期可上市出售，上市時間為春節(jié)前10 d 左右或在春節(jié)至情人節(jié)(2月14日)期間.市場銷售調(diào)查發(fā)現(xiàn)，Joyous Event的現(xiàn)蕾期較早，提前上市的優(yōu)勢較大.受網(wǎng)絡大眾好評及心理趨向性因素的影響，Souvenir的價位、滿意度和銷量較高，且花色為粉色，色彩艷麗，花期持久，花蕾數(shù)多，植株較矮，莖桿粗壯，葉片著生緊密，便于運輸和攜帶，適合家庭盆栽觀賞，因此，節(jié)慶期間作為禮品盆花深受消費者喜愛.從市場接受整體分析，隨著產(chǎn)品大規(guī)模標準化生產(chǎn)的加快，Starlight Expers和Entertainer兩個品種很快將進入花卉市場，必將受到大眾和顧客青睞.

3 討論與結(jié)論

目前針對百合品種評價體系的研究主要為探討切花百合植株的形態(tài)特征、開花特性、物候期和生長發(fā)育的適應性等.劉世堯[18]從重慶地區(qū)引種觀賞百合，以營養(yǎng)生長量、花期性狀和籽球更新繁殖能力中選取株高、葉片數(shù)、莖粗、生長勢、花色、花蕾數(shù)量、花蕾長度、單花壽命、更新種球數(shù)及種球周徑等作為綜合評價指標；楊爽等[19]采用觀賞百合國家分級標準及觀賞百合農(nóng)業(yè)部分級標準構(gòu)建東方百合的評價標準[19].由于盆栽百合與切花百合在觀賞方式與觀賞價值上存在差異，本研究在綜合已有研究方法、品種特性及種植地區(qū)氣候條件和市場情況的基礎上，將株高、莖粗及抗病性指標等列入評價指標中，符合盆栽百合預期觀賞目標，從12個盆栽東方百合品種中篩選的優(yōu)秀品種為Little rainbow、Souvenir、Starlight Experss和Entertainer，與當?shù)厣a(chǎn)實際情況基本符合，可作為寧夏地區(qū)設施盆栽百合栽培品種進行規(guī)模生產(chǎn)；但是同一品種百合的特性會因引種地點不同而有所不同，寧云芬等[20]觀測Entertainer的株高為49.22 cm，本研究Entertainer的株高為40.00 cm.此外，刁義維等[13]觀測結(jié)果顯示Black Out株高為 119.4 cm，但李茂娟等[21]研究得出，Black Out平均株高僅為 90 cm，相差近 30 cm.以上研究結(jié)果的差異，主要原因可能是栽培方式、氣候與土壤以及管理水平的差異所致.

本次試驗篩選出相對抗病品種為Little rainbow、Souvenir、Starlight Experss和Entertainer 4種，僅被1種病害侵染，分別是炭疽病和百合斑駁病毒.Barletta、White Express和Pink Scret品種抗病性較低，被3～4種病害侵染，因此不宜作為引進品種.唯一不足之處是沒有檢測到細菌性病害和其他病毒病，后期要加大百合品種種類和病害檢測范圍.

此外，今后要加大盆栽優(yōu)良百合的種質(zhì)資源收集和研究工作，大力培育盆栽百合新品種，加快育種進程.培育性狀優(yōu)良，具有更好的氣候和栽培條件適應性，且能滿足市場需求的百合品種.

本次試驗明確了12個百合品種的生長習性和栽培特性，可為寧夏地區(qū)百合品種的引種和規(guī)?；柙陨a(chǎn)提供一定的科學依據(jù).為了促進盆栽百合產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展，今后還需進一步探索其高效、節(jié)能的栽培技術流程.