王珊 蔣文英 刁艷君

(1.西安市第四醫(yī)院，陜西 西安 710004；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院，陜西 西安 710032)

卵巢癌作為婦科常見的惡性腫瘤，其中以上皮性卵巢癌為主。由于上皮性卵巢癌的早期癥狀并不典型，極易被患者忽視[1]，盡早診斷在減低疾病死亡率上至關(guān)重要。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)能夠增加腫瘤血管的通透性，并促進(jìn)惡性腫瘤浸潤，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞不斷繁殖，使腫瘤新發(fā)血管，加重疾病擴(kuò)散或者惡化[2-3]。異黏蛋白(MTDH)可誘導(dǎo)癌癥，在血管產(chǎn)生中具有重要意義。本研究探討上皮性卵巢癌中MTDH、VEGF的表達(dá)，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年7月至2020年4我院上皮性卵巢癌患者62例為A組、良性上皮組織腫瘤患者55例為B組，另選擇同期行子宮肌瘤切除手術(shù)者60例作為對照組。A組年齡25～63歲，平均(41.57±2.03)歲；本科及以上17例，高中至大專22例，小學(xué)及初中23例;體重54～65 kg，平均(60.22±1.01)kg。B組年齡24～65歲，平均(41.80±2.11)歲；本科及以上16例，高中及大專20例，小學(xué)及初中19例；體重54～67 kg，平均(60.59±1.05)kg；對照組年齡25～65歲，平均(41.63±1.98)歲；本科及以上17例，高中及大專23例，小學(xué)及中10例；體重55～64 kg，平均(60.66±1.07)kg。三組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)[4]：(1)A、B組均符合疾病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，病理檢驗(yàn)確診；(2)患者及家屬簽訂知情同意書；(3)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行放化療；(2)具備精神方面疾病或交流障礙；(3)中途退出。

1.2方法 A、B組均在術(shù)中切除卵巢組織后置于液氮內(nèi)速凍，保存在-80℃條件下保存，利用RT-PCR檢查。部分組織可選擇福爾馬林處理，進(jìn)行石蠟包埋切片，利用免疫組化檢查。對照組在子宮肌瘤切除手術(shù)中取正常卵巢組織進(jìn)行對照。RT-PCR檢查：收集所有樣品的總RNA，利用逆轉(zhuǎn)錄酶試劑盒，合成cDNA第一鏈。隨后選擇2 μL cDNA產(chǎn)物放在0.5 μL TransTaq DNApolymerase、5 μL BufferⅡ、4 μL目的片段長度，通過2.5 mmol/LdNTPs對應(yīng)的上下游引物各1 μL，置于50 μL反應(yīng)系統(tǒng)中執(zhí)行PCR擴(kuò)增，另外選擇GAPDH成為內(nèi)參照物。免疫組化檢查：將樣品切片后進(jìn)行微波修復(fù)處理，并嚴(yán)格依照SP試劑盒要求進(jìn)行免疫組化染色，并給予DAB染色。結(jié)果中發(fā)現(xiàn)MTDH表達(dá)在細(xì)胞膜后者胞質(zhì)，VEGF表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，若細(xì)胞質(zhì)或者細(xì)胞顯示棕黃色提示為陽性。

1.3觀察指標(biāo) 觀察比較三組MTDH mRNA與VEGF mRNA表達(dá)，觀察三組中MTDH與VEGF 蛋白表達(dá)情況，最后比較A組中不同臨床病理癥狀者的MTDH mRNA與VEGF mRNA表達(dá)。

2 結(jié) 果

2.1MTDH mRNA與VEGF mRNA A組MTDH mRNA(0.68±0.20)bp，VEGF mRNA(0.72±0.14)bp。B組MTDH mRNA(0.41±0.11)bp，VEGF mRNA(0.28±0.08)bp。對照組MTDH mRNA(0.33±0.09)bp，VEGF mRNA(0.24±0.06)bp。三組MTDH mRNA、VEGF mRNA表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2MTDH與VEGF 蛋白 A組MTDH蛋白陽性45例(72.58%)，VEGF蛋白陽性50例(80.65%)。B組MTDH 蛋白陽性14例(25.45%)，VEGF 蛋白陽性20例(36.36%)。對照組MTDH蛋白陽性7例(11.67%)，VEGF蛋白陽性13例(21.67%)。A組MTDH蛋白、VEGF蛋白表達(dá)高于B組與對照組(P<0.05)；B組MTDH蛋白、VEGF蛋白表達(dá)高于對照組(P<0.05)。

2.3A組不同臨床病理癥狀MTDH mRNA與VEGF mRNA表達(dá) A組中MTDH mRNA與VEGF mRNA表達(dá)在病理類型、組織分化程度上比較無顯著差異(P>0.05)，在分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上差異顯著(P<0.05)。見表1。

表1 A組不同臨床病理癥狀MTDH mRNA與VEGF mRNA表達(dá)

3 討 論

卵巢癌作為女性生殖器官上多見的惡性腫瘤，其中以上皮癌為主，且上皮性卵巢癌的病死率約占各類婦科腫瘤的首位，對女性生命安全造成極大威脅[5-6]。MTDH屬于新型癌基因，在多種惡性腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)。MTDH基因能夠?qū)Χ鄺l信號通道進(jìn)行刺激，進(jìn)而改善其相關(guān)基因的表達(dá)[7]。VEGF具備較高的特異性，屬于促血管生成因子，可直接影響腫瘤生成的主要方式，并在實(shí)體腫瘤發(fā)展過程中具有重要價值[8]。VEGF是從巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞或者各類腫瘤細(xì)胞中產(chǎn)生，并經(jīng)過自分泌、旁分泌途徑來促進(jìn)腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生，并有效提升血管內(nèi)皮細(xì)胞的通透程度，增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖反應(yīng)，進(jìn)而使腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移或者侵襲現(xiàn)象，若能夠抑制其表達(dá)，則可有效降低腫瘤的復(fù)發(fā)與侵襲率[9-10]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三組MTDH mRNA、VEGF mRNA的表達(dá)上比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；A組MTDH蛋白、VEGF蛋白表達(dá)高于B組與對照組(P<0.05)；B組MTDH蛋白、VEGF蛋白表達(dá)高于對照組(P<0.05)；A組中MTDH mRNA與VEGF mRNA表達(dá)在分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移上差異顯著(P<0.05)。MTDH、VEGF表達(dá)在上皮性卵巢癌中可評估疾病發(fā)生與發(fā)展，為臨床治療方案的選擇及預(yù)后評估提供參考依據(jù)。