李艷群 , 陳柔雯 , 林宗豪 , 田新朋 , 尹浩

1. 中國科學(xué)院熱帶海洋生物資源與生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 中國科學(xué)院南海海洋研究所, 廣東 廣州 510301;

2. 中國科學(xué)院大學(xué), 北京 100049;

3. 南方海洋科學(xué)與工程廣東省實(shí)驗(yàn)室(廣州), 廣東 廣州 511458;

4. 廣東省海洋藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 中國科學(xué)院南海海洋研究所, 廣東 廣州 510301

群體感應(yīng)(Quorum sensing, QS)是微生物群體根據(jù)自身細(xì)胞密度變化釋放的信號分子達(dá)到一定閾值后, 影響微生物特定基因的表達(dá), 調(diào)控自身生理活動, 實(shí)現(xiàn)微生物種群自我協(xié)調(diào)的一種群體行為。QS調(diào)控機(jī)制與病原微生物的毒力和致病性密切相關(guān)(Manefield et al, 1999; Zhang, 2003)。群體感應(yīng)抑制劑(Quorum sensing inhibitors, QSIs)是具有前景的傳統(tǒng)抗生素替代物。QSIs 通過調(diào)節(jié)致病菌的QS 行為, 降低其致病性和毒力。QSIs 控制病菌的機(jī)理不同于傳統(tǒng)抗生素阻斷、干擾致病菌的生物合成途徑, 不易對致病菌形成選擇性壓力, 因而致使致病菌產(chǎn)生耐藥性的幾率非常小(張煉輝, 2019)。

QS 現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)與海洋微生物密切相關(guān)。Nealson 等(1970)首次報(bào)道了一種海洋費(fèi)氏弧菌(Vibrio fischeri)的菌體密度與發(fā)光呈正相關(guān), 該發(fā)光現(xiàn)象是由高絲氨酸信號分子介導(dǎo)的群體感應(yīng), 由此引發(fā)了關(guān)于QS 的猜想。海洋細(xì)菌哈維弧菌(V. harveyi)有復(fù)雜的QS 信號產(chǎn)生和感應(yīng)系統(tǒng), 現(xiàn)在被廣泛用作QS 研究的模式微生物(Miller et al, 2002)。

海洋微生物已經(jīng)成為QS 抑制活性菌株的重要來源。Dobretsov 等(2013)發(fā)現(xiàn)海洋環(huán)境中的芽孢桿菌(Bacillus)、弧菌(Vibrio)、假單胞菌(Pseudomonas)具有對附生或伴生細(xì)菌的QS 信號分子產(chǎn)生響應(yīng)和干擾的能力。Kanagasabhapathy 等(2009)的研究表明, 海洋生物的共附生微生物中也存在著豐富的QSIs生產(chǎn)菌株, 屬于芽孢桿菌科(Bacillaceae)、假單胞菌科(Pseudomonadaceae) 、 假交替單胞菌科(Pseudoalteromonadaceae)和弧菌科(Vibrionaceae)。目前, 已從海洋活性菌株中發(fā)現(xiàn)了一批重要的QSIs, 如利用紫色桿菌模型從海洋革蘭氏陰性細(xì)菌Rheinheimera aquimaris QSI02 中發(fā)現(xiàn)了活性化合物二酮哌嗪cyclo(Trp-Ser)(Sun et al, 2016), 從海洋放線菌Streptomyces parvulus HY026 次級代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了放線菌素D(actinomycin D)(Miao et al, 2017), 以及從海洋真菌Penicillium sp. SCS-KFD08 中分離并鑒定出了Aculene E 和Aspergillumarins B (Kong et al, 2017)。再如，使用銅綠假單胞菌模型發(fā)現(xiàn)了海洋藍(lán)細(xì)菌 Lyngbya majuscula 的次級代謝產(chǎn)物Malyngolide(Kwan et al, 2010), 它在濃度為3.57～57mmol·L–1時(shí)可抑制基于銅綠假單胞菌LasR受體的Acylated homoserine lactone (AHL)報(bào)告基因的表達(dá), 且不會影響銅綠假單胞菌自身的生長。

QS 快速檢測技術(shù)的發(fā)展為活性菌株的發(fā)現(xiàn)帶來了便利。紫色桿菌(Chromobacterium violaceum)模型是發(fā)現(xiàn)QS 抑制活性的有效指示菌之一。紫色桿菌是一種革蘭氏陰性細(xì)菌, 其紫色菌素的產(chǎn)生受QS 嚴(yán)格調(diào)控。當(dāng)自身細(xì)胞密度達(dá)到一定臨界濃度時(shí), 紫色桿菌向環(huán)境釋放的信號分子 N-Hexanoyl-L- homoserine lactone (C6-HSL)與接受信號的其他細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白CviR 結(jié)合, 啟動紫色菌素基因的表達(dá)(Mcclean et al, 1997), 從而產(chǎn)生紫色菌素, 并指示 QS 作用的發(fā)生。本研究所用的紫色桿菌(C. violaceum 026, CV026 )為信號分子基因缺失突變株, 當(dāng)受到外源信號分子C6-HSL 刺激時(shí), 也能夠啟動QS 調(diào)控的紫色菌素產(chǎn)生(Mcclean et al, 1997)。若有QSIs 存在, 則能抑制紫色菌素的產(chǎn)生。紫色桿菌作為一種準(zhǔn)確、便捷、直觀的指示菌株(Martinelli et al, 2004), 已經(jīng)在QS 相關(guān)研究中被廣泛應(yīng)用。

本研究利用紫色桿菌CV026 模型, 對南海中西部和印度洋深海沉積物樣品中40 株放線菌的QS 抑制活性進(jìn)行了評價(jià), 并篩選到了1 株具有明顯QS 抑制活性的菌株, 本文將其命名為SCSIO 53717。根據(jù)形態(tài)學(xué)特征和 16S rRNA 基因序列分析, 鑒定SCSIO 53717 菌株為Kocuria 屬。這是對該屬菌種具有QS 抑制活性的首次報(bào)道。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株

40 株待篩選的放線菌分離自南海中、西部不同深度(0～4500m)的沉積物樣品和印度洋深海(水深>4000m)沉積物樣品, 菌種保藏于中國科學(xué)院海洋微生物研究中心。紫色桿菌指示菌株CV026 由中國海洋大學(xué)宮倩紅教授惠贈。

1.1.2 培養(yǎng)基

2216E 培養(yǎng)基: 蛋白胨 5.00g, 酵母粉 1.00g, CaCl21.80g, FeC6H5O70.10g, KBr 0.08g, KCl 0.55g, H3BO322.00mg, MgCl25.90g, NaCl 19.45g, Na2CO30.16g, NaF 2.40mg, (NH4)NO31.60mg, Na2HPO48.00mg, Na2SiO3·9H2O 4.00mg, Na2SO43.24g, SrCl234.00mg, 超純水 1000mL, pH7.6, 1×105Pa 滅菌20min, 備用。加入15g 瓊脂為2216E 固體培養(yǎng)基。

LB 培養(yǎng)基: 胰蛋白胨 10g, 酵母提取物 5g, NaCl 10g, 超純水 1000mL, pH7.0, 1×105Pa 滅菌20min, 備用。加入15g 瓊脂為LB 固體培養(yǎng)基。

1.1.3 試劑

實(shí)驗(yàn)所用細(xì)菌基因組 DNA 提取試劑盒(EasyPure?Stool Genomic DNA Kit)和PCR 擴(kuò)增預(yù)混液(PCR SuperMix)均購于北京全式金生物技術(shù)有限公司(TransGen Biotech)。信號分子C6-HSL 和呋喃酮 C30((Z-)-4-Bromo-5-(bromomethylene)-2(5H)- furanone, C5H2Br2O2)均購于Sigma 公司。所用生化試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 待測放線菌菌株的活化及其提取物的制備

分別將40 株海洋來源的放線菌涂布于2216E固體培養(yǎng)基, 在30℃培養(yǎng)10～12h 進(jìn)行復(fù)蘇。挑取單克隆菌落劃線分離純化, 將純化菌株接種于2216E液體培養(yǎng)基, 30℃、180rpm 振蕩培養(yǎng)7d, 加入等體積的乙酸乙酯溶液, 經(jīng)超聲清洗儀清洗10min 后萃取, 收集上層萃取液, 重復(fù)萃取3 次。將所有乙酸乙酯萃取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至干, 得到各放線菌的提取物, 用甲醇溶解成200mg·mL–1溶液, 用于QS 抑制活性菌株的篩選。

1.2.2 QS 抑制活性菌株篩選

挑取劃線純化的紫色桿菌CV026 單菌落接種于LB 液體培養(yǎng)基中, 30℃、180rpm 振蕩培養(yǎng)至對數(shù)生長期(OD600≈0.7), 作為母液。配制LB 瓊脂培養(yǎng)基100mL, 1×105Pa 滅菌20min, 待其冷卻至55℃左右, 分別加入100μL 50mg·mL–1卡那霉素溶液、100μL二甲基亞砜(DMSO)溶解的0.2mmol·L–1C6-HSL 和5mL 紫色桿菌CV026 菌液, 混勻后倒平板。待平板冷卻凝固后, 用打孔器打孔(6mm), 每個(gè)孔內(nèi)分別均勻加入5μL 提取物, 以5μL 甲醇溶解的2mmol·L–1呋喃酮C30 作為陽性對照, 5μL 甲醇溶液作為陰性對照。將平板置于30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若待測物具有QS 抑制活性, 則可以觀察到相應(yīng)樣品的孔周圍有紫色桿菌生長, 但不產(chǎn)生紫色桿菌素, 而是出現(xiàn)無色不透明的環(huán)圈。

1.2.3 菌株SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026生長的影響

挑取劃線純化的紫色桿菌CV026 單菌落接種于LB 液體培養(yǎng)基中, 30℃、180rpm 振蕩培養(yǎng)至對數(shù)生長期(OD600≈0.7), 用新鮮LB 培養(yǎng)液稀釋1000 倍, 分裝為5 組, 每組3 個(gè)平行; 每組分別加入提取物, 使各組培養(yǎng)基中提取物的終濃度分別為0、125、250、500 和1000mg·mL–1; 30℃、180rpm 振蕩培養(yǎng), 每隔2h 分別測定各管OD600吸光值, 直至對數(shù)生長后期, 以檢測提取物SCSIO 53717 對紫色桿菌CV026 生長的影響。

1.2.4 菌株SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026紫色菌素產(chǎn)量的影響

挑取劃線純化的紫色桿菌CV026 單菌落接種于LB 液體培養(yǎng)基中, 30℃、180rpm 振蕩培養(yǎng)至對數(shù)生長期(OD600≈0.7), 加入與培養(yǎng)基體積比為 1‰的0.2mmol·L–1C6-HSL 后混勻, 分裝為5 組, 每組3個(gè)平行; 每組分別加入提取物, 使各組培養(yǎng)基中提取物的終濃度分別為 0、125、250、500 和1000mg·mL–1; 空白對照組: 0mmol·L–1C6-HSL, 0mg·mL–1SCSIO 53717 提取物; 30℃、180rpm 振蕩培養(yǎng)20h。紫色菌素的提取和測定方法參考相關(guān)文獻(xiàn)(Skogman et al, 2016; Zhang et al, 2018)并作改進(jìn), 具體操作如下: 吸取 1mL 上述培養(yǎng)好的菌液于1.5mL 離心管中, 室溫8000g 離心10min, 使紫色菌素和菌體充分沉淀, 去掉上清液; 加1mL DMSO, 渦旋振蕩, 使紫色菌素充分溶解于DMSO 中, 室溫8000g 再次離心10min, 使菌體及碎屑沉淀。吸取300μL 上清液轉(zhuǎn)移至96 孔板中, 測定上清OD585值, 以檢測提取物對紫色桿菌CV026 紫色菌素產(chǎn)量的影響。

1.2.5 菌株SCSIO 53717 的形態(tài)觀察

將純化的菌株SCSIO 53717 劃線接種于LB 固體培養(yǎng)基上, 30℃培養(yǎng)2～3d, 觀察其菌落的形狀、顏色、大小等形態(tài)特征。挑取劃線純化的SCSIO 53717單菌落接種于LB 液體培養(yǎng)基, 30℃、180rpm 培養(yǎng)過夜。用接種環(huán)蘸取SCSIO 53717 菌液于載玻片上, 自然干燥后通過火焰2～3 次固定, 滴加草酸銨結(jié)晶紫染色1min, 蒸餾水沖洗, 滴加碘液覆蓋1min, 吸水紙吸去水分, 滴加95%酒精脫水20s, 吸水紙吸去水分, 滴加番紅染色 1min, 蒸餾水沖洗, 自然晾干, 置于顯微鏡下觀察菌體形態(tài)特征。

1.2.6 菌株SCSIO 53717 種屬的鑒定

按照細(xì)菌基因組DNA 提取試劑盒(EasyPure?Stool Genomic DNA Kit)說明書, 提取放線菌SCSIO 53717 的基因組DNA 作為擴(kuò)增模板; 采用細(xì)菌16S rRNA 通用引物(27F: 5'-AGAGTTTGATCCTGGCTC AG-3'; 1492R: 3'-GGTTACCTTGTTACGACTT-5')進(jìn)行PCR 擴(kuò)增反應(yīng)。反應(yīng)條件為94℃預(yù)變性5min; 然后94℃變性30s, 53℃退火30s, 72℃延伸1min, 30個(gè)循環(huán); 最后72℃延伸10min。PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測, 陽性PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物委托天一輝遠(yuǎn)基因科技有限公司進(jìn)行測序, 所得到的基因序列經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)菌株數(shù)據(jù)庫EzBioCloud 網(wǎng)站(https://www. ezbiocloud.net)進(jìn)行核酸序列比對分析, 獲取與之最相似的模式菌株。利用 NCBI BLAST(https:// blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)對菌株SCSIO 53717的16S rRNA 基因序列進(jìn)行同源性比對和相似性分析; 運(yùn)用MEGA 6 軟件中的鄰接法(Neighbor-Joining)構(gòu)建生物系統(tǒng)進(jìn)化樹。

2 結(jié)果與討論

2.1 海洋來源QS 抑制活性菌株的篩選

紫色菌素在紫色桿菌中受QS 嚴(yán)格調(diào)控。呋喃酮C30 是一種人工合成的QSIs——溴代呋喃酮, 能抑制紫色菌素的生成, 在固體培養(yǎng)基加樣孔周圍表現(xiàn)出渾濁但不透明的褪色圈(Hentzer et al, 2003)。根據(jù) 40 株海洋來源放線菌的篩選結(jié)果發(fā)現(xiàn), 菌株SCSIO 52865、SCSIO 53279 和SCSIO 53717 的粗提物均具有紫色桿菌QS 抑制活性, 其中菌株SCSIO 53717 的活性最強(qiáng)。

將 SCSIO 53717 發(fā)酵液提取物制成 25～ 200mg·mL–1的樣品, 加入平板后均顯示具有QS 抑制活性, 同時(shí)色素抑制圈的直徑隨樣品濃度增加而增加(圖1), 初步表明該菌株提取物對 CV026 的QS抑制有劑量依賴性。雖然SCSIO 53717 提取物的活性與陽性對照呋喃酮C30 相比并沒有優(yōu)勢, 但是該提取物是未經(jīng)分離純化的混合物, 其中的有效成分含量并不高, 通過對有效成分的濃縮可能將獲得高活性的QSIs。如尹守亮(2011)運(yùn)用紫色桿菌CV026和銅綠假單胞菌(P. aeruginosa)QS 篩選模型, 發(fā)現(xiàn)海洋來源的真菌QY013 提取物具QS 抑制活性, 并從中分離得到活性單體化合物 5,6-dihydro-4- methyl-2H-pyran-2-ketone。因此, 本研究發(fā)現(xiàn)的菌株SCSIO 53717 發(fā)酵提取物具有QS 抑制活性, 存在抑制QS 的有效成分, 具有進(jìn)一步研究與開發(fā)的價(jià)值。

圖1 SCSIO 53717 提取物抑制紫色菌素的產(chǎn)生 圖中數(shù)字1、2、3、4、5 依次表示濃度為25、50、100、150、200mg·mL–1 的SCSIO 53717 提取物(5μL); 6 為陽性對照(加入5μL 呋喃酮C30); 7 為陰性對照(加入5μL 甲醇溶液) Fig.1 Inhibition of violacein production by SCSIO 53717 extracts. The numbers 1, 2, 3, 4, and 5 in the figure indicate the SCSIO 53717 extract (5μL) with a concentration of 25, 50, 100, 150, and 200 mg·mL–1, respectively; the number 6 is the positive control (adding 5μL of furanone C30); and the number 7 is the negative control (adding 5μL of methanol solution)

結(jié)合試樣的制備過程, 還可以推測 SCSIO 53717 提取物中的QSIs 屬于能和信號分子在與受體結(jié)合過程中產(chǎn)生競爭的小分子類物質(zhì)。已有的研究表明抑制QS 系統(tǒng)主要有三種途徑(Hoang et al, 1999; Fan et al, 2013; Horke et al, 2015): 1) 促進(jìn)AHL 信號分子的降解; 2) 抑制信號分子的合成; 3) 干擾信號分子與受體蛋白的結(jié)合。本研究中, 信號分子為外源添加物, 不存在抑制信號分子產(chǎn)生的條件; 此外, 使用的有機(jī)溶劑提取物中一般不含大分子蛋白, 因而通過酶催化降解AHL 分子的可能性也很小。因此, 提取物中可能存在與信號分子產(chǎn)生競爭的小分子QS 抑制活性物質(zhì), 可以降低C6-HSL 與受體蛋白結(jié)合的幾率。

2.2 菌株SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026生長的影響

本研究測試了菌株SCSIO 53717 提取物對指示菌生長的影響, 結(jié)果如圖2 所示。向CV026 培養(yǎng)液中分別加入不同濃度的SCSIO 53717 提取物后, 培養(yǎng)過程中對菌密度的監(jiān)測表明: 在終濃度為0～1000mg·L–1的范圍內(nèi), 這些紫色桿菌CV026 的生長曲線沒有明顯的差異。這進(jìn)一步證實(shí)了 SCSIO 53717 提取物對CV026 生長無影響, 具有典型的QS抑制活性。

該研究結(jié)果與Manefield 等(1999)報(bào)道的結(jié)果相符。許多QSIs 可以干擾病原菌的QS 系統(tǒng), 抑制致病因子的正常表達(dá), 從而產(chǎn)生顯著的抗病效果, 但它們并不抑制微生物本身的生長, 這種抗菌機(jī)理不易對致病菌形成選擇性壓力而導(dǎo)致其產(chǎn)生耐藥性。

圖2 SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026 生長的影響 Fig.2 Effect of extract from strain SCSIO 53717 on the growth of C. violaceum CV026

2.3 菌株SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026紫色菌素產(chǎn)量的影響

不同濃度的菌株SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026 紫色菌素產(chǎn)量的影響如圖3 所示。在終濃度為0.2μmol·L–1信號分子C6-HSL 存在的情況下, CV026 紫色菌素OD585值隨提取物加入量的增加而有規(guī)律地降低, 即色素的濃度依次下降, 表明菌株SCSIO 53717 提取物抑制了紫色菌素的生成, 而且抑制的強(qiáng)度存在明顯的劑量依賴性, 與本文2.1 中的平板模型篩選結(jié)果一致。

圖3 不同濃度菌株 SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026 紫色菌素產(chǎn)量的影響 *-C6HSL 為空白對照組, 不產(chǎn)生紫色菌素 Fig.3 Inhibition of violacein production using extracts of strain SCSIO 53717 at different concentrations. *-C6HSL is a blank control and does not produce violacein

結(jié)合菌株 SCSIO 53717 提取物對紫色桿菌CV026 生長的影響(圖2)可知, 在0～1000mg·L–1濃度范圍內(nèi), 提取物并不影響紫色桿菌CV026 的生長。這進(jìn)一步證明, 菌株SCSIO 53717 提取物對于紫色桿菌CV026 紫色菌素產(chǎn)生的抑制作用并不是通過影響紫色桿菌CV026 的生長, 而是通過干擾紫色桿菌的QS 系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的。

2.4 菌株SCSIO 53717 的形態(tài)特征

將菌株SCSIO 53717 劃線接種于LB 固體培養(yǎng)基, 置于30℃生長2～3d 后的菌落形態(tài)如圖4 所示。菌株SCSIO 53717 的菌落呈圓形, 直徑3～5mm, 略凸, 光滑, 略帶紅色。革蘭氏染色結(jié)果如圖5 所示。菌株SCSIO 53717 屬于革蘭氏陽性菌, 細(xì)胞為球形, 呈現(xiàn)成對和成簇。根據(jù)Kumar 等(2018)對Kocuria sp. rsk4 的描述判斷, 菌株SCSIO 53717 的形態(tài)結(jié)構(gòu)與Kocuria sp. rsk4 相同。

圖4 菌株SCSIO 53717 的菌落形態(tài) Fig.4 Morphological characteristics of SCSIO 53717 strain

圖5 菌株SCSIO 53717 的革蘭氏染色結(jié)果 Fig.5 Gram staining result of SCSIO 53717 strain

2.5 菌株SCSIO 53717 的鑒定

菌株SCSIO 53717 的16S rRNA 基因序列經(jīng)EzBioCloud 網(wǎng)站比對, 結(jié)果顯示其與Kocuria rosea DSM 20447T的相似度最高, 同源性達(dá)到99.79%。菌株SCSIO 53717 的生物系統(tǒng)進(jìn)化樹如圖6 所示。SCSIO 53717 與K. oceani FXJ8.095、K. polaris CMS 76or 和K. rosea DSM 20447T聚為一支, 且與K. rosea DSM 20447T的親緣關(guān)系最近。結(jié)合菌株SCSIO 53717 的形態(tài)特征和16S rRNA 基因序列分析結(jié)果, 可以將其鑒定為Kocuria 屬。

Kocuria 是革蘭氏陽性菌, 在自然界廣泛存在。目前, 已有關(guān)于Kocuria 屬放線菌產(chǎn)生抗菌物質(zhì)的報(bào)道(Kumar et al, 2018), 并在該屬放線菌化學(xué)成分的研究中發(fā)現(xiàn)了環(huán)肽、N-乙酰色胺、類胡蘿卜素等物質(zhì)(姚蓉 等, 2017), 但尚未出現(xiàn)有關(guān)該屬菌株具有QS 抑制活性與QSIs 的報(bào)道。本文首次報(bào)道了該屬菌株的QS 抑制活性, 說明從中發(fā)現(xiàn)新型QSIs 的幾率較大, 這是本文認(rèn)為該菌株值得深入研究的依據(jù)之一。因此, 我們擬在下一步的工作中對菌株SCSIO 53717 的提取物進(jìn)行活性跟蹤分離, 闡明其活性機(jī)理, 尋找海洋放線菌來源的新型QSIs。

圖6 基于菌株SCSIO 53717 及其近緣屬種以16S rRNA 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹 線段0.005 代表1/200 進(jìn)化距離單位; 分支上的數(shù)值為自舉1000 次的結(jié)果 Fig.6 Neighbor-Joining tree constructed showing the phylogenetic relationships among SCSIO 53717 strain and other related strains based on 16S rRNA gene sequence. Scale bar: 0.005 nucleotide substitution per 200 nucleotides of 16S rRNA gene sequence. Numerals on branches are the supporting percentage by 1000 replicates

3 結(jié)論

本文利用紫色桿菌CV026 篩選模型, 對40 株來源于海底沉積物樣品的放線菌提取物進(jìn)行了QS抑制活性的篩選, 發(fā)現(xiàn)了活性菌株SCSIO 53717, 其提取物能夠抑制紫色菌素的產(chǎn)生, 且在有效終濃度為0～1000mg·L–1的范圍內(nèi)不影響紫色桿菌CV026的生長。菌種鑒定結(jié)果表明菌株SCSIO 53717 屬于Kocuria 屬, 這是關(guān)于該屬菌種具有QS 抑制活性的首次報(bào)道。