郭淑珍，包永清,*，馬登錄,*，馬忠濤+，王文飆，拉毛杰布，楊潤(rùn)喜， 包扎西加措，才讓鬧日，徐 海

(1.甘南藏族自治州畜牧工作站，甘肅合作747000；2.夏河縣畜牧工作站，甘肅夏河 747100)

甘南州是甘肅省乃至全國(guó)的主要牧區(qū)之一，地方優(yōu)良畜種甘南牦牛是甘南州的主體畜種,牦牛肉、牦牛乳等純天然無(wú)污染的綠色畜產(chǎn)品是甘南州的優(yōu)勢(shì)畜產(chǎn)品。牦牛產(chǎn)業(yè)涉及全州7縣1市，涵蓋全州69.5%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2020年年末各類牲畜存欄351.23萬(wàn)頭(只),其中全州存欄牦牛108.5萬(wàn)頭(其中能繁母牛占58.02%)，全州牛肉產(chǎn)量5.39萬(wàn)t，奶產(chǎn)量9.94萬(wàn)t。多年來(lái)，為了提高牦牛個(gè)體生產(chǎn)性能及肉奶產(chǎn)量，我州先后引進(jìn)野牦牛及大通牦牛凍精、娟姍牛、黑暗格斯牛等優(yōu)良凍精利用人工授精技術(shù)進(jìn)行牦牛提純復(fù)壯和雜交改良工作，取得了一定的成效。但由于以往人工授精采用傳統(tǒng)的直腸把握輸精方法，發(fā)情鑒定也采用外部觀察和直腸檢查相結(jié)合的方法，這對(duì)人工授精技術(shù)人員的要求較高，需要技術(shù)人員有較高的技術(shù)含量，并且操作起來(lái)需要多人協(xié)作，整體耗時(shí)費(fèi)力，如果操作不當(dāng)還有可能造成感染，對(duì)牦牛的損害較大。此外，牦牛發(fā)情表現(xiàn)沒(méi)有黃牛明顯，發(fā)情鑒定比較困難，致使牦牛人工授精受胎率不高。2019年來(lái)，為了解決牦牛人工授精中所遇到的發(fā)情鑒定不準(zhǔn)確、受胎率低、農(nóng)牧民繁殖員對(duì)人工授精技術(shù)掌握不夠等諸多難題，筆者在牦牛雜交改良中采用牛可視輸精槍和排卵測(cè)定儀進(jìn)行人工授精操作，提高了受胎率，取得了明顯的雜交效果。

1 甘南牦牛雜交改良現(xiàn)狀

牦牛是青藏高原特有畜種，主要分布在青海、西藏、四川、新疆、甘肅、云南等六省區(qū)的高原草地和高寒山區(qū)。對(duì)高海拔、寒冷、缺氧、缺草等惡劣氣候條件有很強(qiáng)的適應(yīng)能力，牦牛常年放牧、野性較大，很大程度上限制了凍精改良技術(shù)的開(kāi)展，從而在高原牧區(qū)推廣應(yīng)用牦牛凍精改良技術(shù)的難度相對(duì)較大。甘南州牦牛人工授精工作起始于20世紀(jì)70年代，主要用野牦牛、半血野牦牛、海福特牛、西門(mén)塔爾牛、黑白花牛、黑安格斯牛凍精在碌曲、瑪曲、夏河、卓尼等縣開(kāi)展牦牛提純復(fù)壯和種間雜交試驗(yàn)，平均受胎率30%左右。由于牦牛混群放牧飼養(yǎng)，冬春飼草料缺乏，人工授精操作不嫻熟，受胎率和繁殖成活率低，再加上當(dāng)?shù)啬戈笈ｓw格偏小，而雜種犏牛的胎兒大，母牦牛到懷孕后期往往缺乏營(yíng)養(yǎng)，易造成母牛難產(chǎn)和死亡，影響了牧民群眾的積極性[1]。為了大力發(fā)展高原奶牛產(chǎn)業(yè)，從2014年開(kāi)始，我州用娟姍牛凍精人工授配甘南母牦牛繁育生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)犏牛，犏母牛用作奶牛，犏公牛育肥出欄。所產(chǎn)的娟犏牛公牛犢平均初生重20.40 kg，體高62.16 cm，12月齡平均體重145.33 kg，體高100.40 cm，18月齡平均體重210.53 kg，體高111.93 cm；娟犏牛母牛犢平均初生重19.04 kg，體高59.63 cm，12月齡平均體重133.17 kg，體高99.22 cm,18月齡平均體重193.73 kg，體高108.67 cm。娟犏公母牛犢初生重比同期公母牦牛犢分別重7.05 kg，6.17 kg，分別提高了52.81%，47.94%；娟犏公母牛犢18月齡體重比同期公母牦牛犢分別重74.30 kg，65.95 kg，分別提高了54.54%，51.61%；雜交效果顯著，很受群眾歡迎，使甘南州犏牛繁育工作取得了實(shí)質(zhì)性進(jìn)展[2]。但由于農(nóng)牧民文化水平低，科技宣傳不夠，科技投入欠缺，技術(shù)人員培訓(xùn)不夠，基礎(chǔ)設(shè)施薄弱，技術(shù)服務(wù)體系不完善，牦牛飼養(yǎng)管理?xiàng)l件差，科學(xué)養(yǎng)殖技術(shù)落后，配種員隊(duì)伍不穩(wěn)定，特別是牦牛發(fā)情鑒定、直腸檢查和直腸把握輸精法操作難度大，除專業(yè)技術(shù)人員外，農(nóng)牧民群眾很難掌握，人工配種成功率較低等因素制約著牦牛凍配改良技術(shù)的推廣。為此，急需推廣先進(jìn)的配種設(shè)備及技術(shù)加大我州畜種改良力度，提高牦牛生產(chǎn)性能，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)?zāi)概＜胺纸M

試驗(yàn)組：在夏河縣選取阿木去乎鎮(zhèn)牙利吉贊格爾牦牛養(yǎng)殖合作社、興輝奶牛養(yǎng)殖合作社、勒加秀毛牦牛養(yǎng)殖合作社等11個(gè)牦牛(奶牛)養(yǎng)殖專業(yè)合作社的年齡4～7歲、膘情中等、經(jīng)產(chǎn)空懷的當(dāng)年適配母牦牛985頭，作為試驗(yàn)牛；以專業(yè)合作社為單位組成11個(gè)牦牛人工授精群，試驗(yàn)?zāi)戈笈Ｔ诳莶萜谶M(jìn)行補(bǔ)飼，添加母牛營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充飼料，滿足母牛在各個(gè)時(shí)期的營(yíng)養(yǎng)需求；試驗(yàn)?zāi)戈笈＞粠?、?dāng)年能發(fā)情配種。如果試驗(yàn)?zāi)戈笈Ｔ?個(gè)情期人工授精后有返情的可繼續(xù)人工授精補(bǔ)配。

對(duì)照組：采用郭淑珍等發(fā)表的“高寒牧區(qū)娟姍牛與甘南牦牛雜交效果觀察”一文中的數(shù)據(jù)[3]。

2.2 試驗(yàn)時(shí)間

2019年6月上旬對(duì)州縣畜牧站及專業(yè)合作社繁殖技術(shù)人員進(jìn)行可視輸精槍及排卵測(cè)定儀使用的技術(shù)培訓(xùn)，6月下旬開(kāi)始進(jìn)點(diǎn)進(jìn)行人工授精，試驗(yàn)時(shí)間為2019年6月下旬至9月上旬。

2.3 試驗(yàn)地點(diǎn)

項(xiàng)目在夏河縣阿木去乎鎮(zhèn)牙利吉辦事處的興輝奶牛養(yǎng)殖及贊格爾、勒加秀毛、阿納扎西、彭次合、雪域更盼、格勒更盼、達(dá)曲牦牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社和吉倉(cāng)鄉(xiāng)那婁才奶牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社、木道奶牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社、西合道杰犏雌牛養(yǎng)殖專業(yè)合作社實(shí)施。

2.4 試驗(yàn)器械及材料

牛用可視輸精槍、排卵測(cè)定儀和精液解凍恒溫杯從北京倍特雙科技發(fā)展有限公司購(gòu)買(mǎi)，娟姍牛常規(guī)凍精和性控凍精從大連金弘基種畜有限公司購(gòu)買(mǎi)，氯前列烯醇鈉(PG)、消毒液、輸精槍套管、一次性長(zhǎng)臂手套、一次性乳膠手套、噴灑壺、缺口剪等人工授精所用小器械及耗材均從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)。

2.5 試驗(yàn)方法

人工授精母牦牛于配種季節(jié)前1個(gè)月組群，與種公牛及其他牛群隔開(kāi)，并在獨(dú)立的牧場(chǎng)放牧，大多數(shù)母牦牛采用自然發(fā)情配種，個(gè)別母牦牛直至8月下旬仍不發(fā)情的采用激素(PG)處理后配種。

2.5.1 人工授精 人工授精時(shí)，母牦牛群體中按照1∶30左右投放結(jié)扎的試情公牛，放牧員跟群觀察發(fā)情情況，主要觀察母牦牛的外陰變化、生殖道變化以及發(fā)情時(shí)間等，發(fā)現(xiàn)有外觀發(fā)情變化的母牦牛采用排卵測(cè)定儀進(jìn)行數(shù)值測(cè)定，測(cè)子宮口分泌黏液的數(shù)值，數(shù)值在280～300 Ω范圍時(shí)，用可視輸精槍觀察母牛陰道黏膜變化規(guī)律，當(dāng)子宮粘膜充血潮紅，子宮頸外口柔軟開(kāi)張，黏液逐漸變稠時(shí)，使用可視輸精槍輸精，間隔12 h重復(fù)輸精1次，即早晨和上午發(fā)情的母牦牛，當(dāng)天下午和次日上午輸精。下午和晚間發(fā)情的母牛，次日早晨和下午輸精。輸精后做好配種記錄，準(zhǔn)確填寫(xiě)母牛號(hào)、發(fā)情配種時(shí)間、發(fā)情表現(xiàn)與凍精號(hào)等內(nèi)容。做好妊娠檢查，若最后一次輸精后30～60 d內(nèi)有返情的母牦牛，重新進(jìn)行輸精。并及時(shí)檢查和填充液氮，以防液氮消耗后影響凍精質(zhì)量。

2.5.2 妊娠檢查 在激素藥物處理前，必須對(duì)所有選擇母牛進(jìn)行妊娠檢查，確定空懷和無(wú)生理缺陷的母牛才能進(jìn)行藥物處理。母牛配種后3個(gè)月內(nèi)用直腸檢查和獸用B超儀進(jìn)行初檢和復(fù)檢，通過(guò)直腸檢查和影像分析，確定母牛是否懷孕。

2.5.3 受胎母牛的飼養(yǎng)管理 受配母牦牛由專人管理，白天跟群放牧，隨時(shí)觀察母牦牛的吃草飲水情況，進(jìn)入枯草期后白天放牧，晚上進(jìn)行補(bǔ)飼，提高懷孕母牦牛的營(yíng)養(yǎng)水平，保證能量和蛋白質(zhì)的供給，特別是補(bǔ)充蛋白質(zhì)飼料，促進(jìn)胎兒生長(zhǎng)發(fā)育。

2.5.4 犢牛飼養(yǎng)管理 犢牛出生后，要放在5～10 ℃的環(huán)境溫度下，地面應(yīng)干燥柔軟，并及時(shí)讓犢牛吃上初 乳，以增加抗病力，當(dāng)母牛的奶水不足時(shí)，用牛奶進(jìn)行人工喂養(yǎng)。

3 結(jié)果與分析

對(duì)2019年采用娟姍牛凍精用排卵測(cè)定儀和可視輸精槍進(jìn)行人工授精的985頭母牦牛的繁殖情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果表明，用可視輸精槍輸精法凍配的母牦牛受胎率、產(chǎn)仔成活率、繁殖成活率等指標(biāo)均比2018年前用直腸把握輸精法凍配(對(duì)照組)[1]的高。其中，受胎率為73.78%，比直腸把握輸精法(受胎率57.48%)提高16.30%，流產(chǎn)率為6.17%，比直腸把握輸精法(流產(chǎn)率7.22%)降低1.05%，產(chǎn)仔成活率為96.52%，比直腸把握輸精法(產(chǎn)仔成活率92.80%)提高3.72%，繁殖成活率為62.03%，比直腸把握輸精法(繁殖成活率49.49%)提高12.54%。詳見(jiàn)表1。

表1 不同輸精方法在牦牛人工授精中的繁殖情況

4 結(jié)論與討論

(1)近年來(lái)，為了減少草畜矛盾，發(fā)展草原生態(tài)畜牧業(yè)，提高畜種質(zhì)量和數(shù)量，甘南州采用牦牛凍配改良技術(shù)，用野血牦牛凍精提純復(fù)壯甘南牦牛，用娟姍牛凍精雜交改良牦牛繁育犏牛，用黑安格斯肉牛凍精進(jìn)行牦牛三元雜交，取得了一定的效果。但傳統(tǒng)的直腸檢查和用直腸把握輸精法進(jìn)行牦牛人工授精，技術(shù)難度較大，養(yǎng)殖戶很難掌握，受胎率較低。而可視輸精槍改變了傳統(tǒng)輸精方式，無(wú)需直腸把控，避免人工直腸操作，能很直觀的觀察母牦牛陰道及子宮頸，把本看不到的輸精細(xì)節(jié)通過(guò)高清顯示器展現(xiàn)在操作者面前，同時(shí)，也可以看到母牦牛生殖系統(tǒng)病變，有效預(yù)防人畜共患疾病的發(fā)生，并且會(huì)讓母牦牛在舒適、安全感的狀態(tài)下接受輸精?？梢曒斁珮尣捎靡淮涡暂斁坠芗安僮鞔?，無(wú)需重復(fù)清洗、消毒，干凈衛(wèi)生，避免交又感染。配合排卵測(cè)定儀，通過(guò)測(cè)定儀的電阻數(shù)值可以準(zhǔn)確判定母牦牛發(fā)情狀況[4]。采用可視輸精槍輸精，無(wú)需專業(yè)人員,操作簡(jiǎn)單，通過(guò)簡(jiǎn)單培訓(xùn)，養(yǎng)殖戶可以直接為自己的母牦牛進(jìn)行輸精，降低了養(yǎng)殖成本。

(2)應(yīng)用可視輸精槍在深入子宮授精時(shí)清晰度較高，容易掌握授精位置，可以輕松通過(guò)子宮頸，直接輸精到準(zhǔn)確位置，真正實(shí)現(xiàn)子宮內(nèi)輸精，大大提高了人工授精受胎率及繁殖成活率。從2019年開(kāi)始，可視輸精槍、排卵測(cè)定儀在甘南州牦牛人工授精過(guò)程中廣泛應(yīng)用，通過(guò)課堂講解和現(xiàn)場(chǎng)操作技術(shù)培訓(xùn)，使牦牛(犏牛)養(yǎng)殖專業(yè)合作社的養(yǎng)殖人員都能熟練操作，人工授精母牦牛的受胎率保持在60%以上。從上述試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，與采用直腸把握輸精法人工授精的母牦牛受胎率(57.48%)、繁殖成活率(49.49%)相比，采用可視輸精槍人工授精的母牦牛受胎率(73.78%)、繁殖成活率(62.03%)更高，分別提高16.30%，12.54%，推廣應(yīng)用前景廣闊，特別適用于專業(yè)合作社及養(yǎng)殖場(chǎng)。

(3)可視輸精槍圖像清晰可見(jiàn)，不局限使用環(huán)境，攜帶方便，可拍照、錄像、輸出、打印。適用范圍廣，可以在母?？諔哑趹?yīng)用，通過(guò)空懷期母牛的產(chǎn)道觀察，早期發(fā)現(xiàn)母牛生殖系統(tǒng)疾病，如陰道炎，子宮內(nèi)膜炎，子宮發(fā)育不良等；在母牛發(fā)情時(shí)，通過(guò)可視輸精槍檢查母牛陰道顏色和子宮黏膜的變化，可以掌握母牛的排卵時(shí)間，做到適時(shí)配種[5]。