謝永廣，張進(jìn)，王懷昕，羅華輝，魏朝宇，鐘光躍，陳敦學(xué)

（1.貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院/貴州大學(xué)漁業(yè)資源與環(huán)境研究中心，貴州 貴陽 550025；2.清遠(yuǎn)市現(xiàn)代棘胸蛙良種研究中心，廣東 清遠(yuǎn) 513000；3.遵義市農(nóng)科院，貴州 遵義 563100；4.四川省內(nèi)江市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，四川 內(nèi)江 642000）

棘胸蛙（Quasipaa spinosa）又名石蛙、棘蛙，是一種重要的兩棲類經(jīng)濟(jì)動物。蝌蚪期是其生長周期中的重要階段，研究蝌蚪期的生長對提高棘胸蛙的養(yǎng)殖產(chǎn)出具有重要意義。營養(yǎng)組成是蝌蚪成活率的限制因子，同時也影響蝌蚪變態(tài)和幼蛙成活率[1]；投喂頻率是影響水產(chǎn)動物生長速度的重要因子，不合理的投喂頻率會降低水產(chǎn)動物的生長速度或者降低飼料利用率，進(jìn)而造成養(yǎng)殖成本上升與養(yǎng)殖環(huán)境惡化[2]。改進(jìn)飼料配方和投喂頻率，是實(shí)現(xiàn)棘胸蛙養(yǎng)殖“節(jié)本增效”的有效手段。

飼料中蛋白營養(yǎng)水平會顯著影響蛙類的生長，飼料中添加動物性蛋白飼料會促進(jìn)蛙類生長和提高變態(tài)存活率[3-6]。王鵬倞發(fā)現(xiàn)棘胸蛙蝌蚪飼料中，蛋白質(zhì)種類多，蛋白比例相對平衡，會促進(jìn)蝌蚪對蛋白的吸收，使其具有較快的生長速度[7]。肖調(diào)義等認(rèn)為動物性飼料能加速蝌蚪發(fā)育，植物性飼料則能延緩蝌蚪的變態(tài)，因此在不同的階段需要使用不同的飼料，以確保蝌蚪養(yǎng)殖效益[8]。關(guān)于飼料投喂頻率對水產(chǎn)動物影響的研究已經(jīng)有較多報(bào)道[9-11]，例如卵形鯧鲹的生長率就與飼料投飼頻率呈正相關(guān)，并在投飼頻率達(dá)到3 次/d 時達(dá)到最佳生長效率[12]，點(diǎn)籃子魚隨著投喂頻率由1 次增加到4 次時，其特定增長率也顯著增加[13]。不同的養(yǎng)殖品種有不同的最佳投飼頻率，該研究將結(jié)合投飼頻率和飼料營養(yǎng)水平對棘胸蛙蝌蚪生長的影響，摸索出適合養(yǎng)殖蝌蚪的飼喂模式和符合蝌蚪營養(yǎng)水平的飼料，從而解決了棘胸蛙蝌蚪飼養(yǎng)關(guān)鍵基礎(chǔ)瓶頸，對棘胸蛙的推廣養(yǎng)殖具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物來源與養(yǎng)殖設(shè)施

試驗(yàn)所需棘胸蛙來自英德市盈信農(nóng)業(yè)有限公司生態(tài)石蛙養(yǎng)殖基地，選取3 齡以上，體質(zhì)量220 g左右的棘胸蛙作為試驗(yàn)親本，進(jìn)行抱對產(chǎn)卵，將蛙卵集中孵化后，選取個體大小一致（平均6～9 mm）的蝌蚪（8 100 尾）進(jìn)行分組試驗(yàn)。蝌蚪落池3 d 后開始攝食。試驗(yàn)所用養(yǎng)殖池為3 m×3 m×1 m 的水泥池，池子底部呈“鍋底型”且中間開孔布置紗布網(wǎng)，用于池底排污。養(yǎng)殖池采用射水式進(jìn)行增氧，確保水體溶解氧≥5.0 mg/L，遮光率60%，池內(nèi)水深固定在15 cm，放置60 cm×60 cm 的瓷片一塊，供蝌蚪躲藏。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼料配比

將試驗(yàn)所用8 100 尾蝌蚪隨機(jī)分為A、B、C 3組，每組3 個平行池，每池900 尾，水溫22 ℃，按照每天兩次（8：00 和19：00）進(jìn)行投喂（蝌蚪體質(zhì)量的5%進(jìn)行投喂），各種飼料配比與營養(yǎng)成分詳見表1。

表1 飼料主要營養(yǎng)成分與營養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)投喂方式設(shè)置

選取A 組飼料配方進(jìn)行投喂頻率試驗(yàn)，設(shè)置不同的投喂頻率，分別為每日投喂2 次、3 次、4 次、5次，標(biāo)記為D、E、F、G 組，該4 組按照“四定原則”進(jìn)行投喂，日投喂量為蝌蚪體質(zhì)量的5%。

1.4 蝌蚪生長發(fā)育測量

利用人工孵化的同一批棘胸蛙蝌蚪在養(yǎng)殖基地水泥池中飼養(yǎng)，每隔10 d 隨機(jī)撈取池中30 尾測量相關(guān)數(shù)據(jù)。用游標(biāo)卡尺記錄蝌蚪的全長（自吻端至尾端的長度），長度精確到0.01 cm，利用分析天平測定蝌蚪的體質(zhì)量，精確到0.01 g。試驗(yàn)期間每天記錄攝食與死亡情況。體質(zhì)量采用電子天平進(jìn)行稱重，對測量結(jié)果利用SPSS16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同飼料對棘胸蛙蝌蚪規(guī)格的影響

A、B、C 3 種飼料營養(yǎng)配方對棘胸蛙蝌蚪體長與體質(zhì)量的影響見表2。其中A 組飼料（自配，總蛋白含量39%）具有最好的生長速率，70 d 時，體長（7.80±0.19）cm 與體質(zhì)量（1.92±0.12）g 顯著高于B組（總蛋白含量47%）和C 組（購買商品飼料，總蛋白含量48%），說明在蝌蚪生長過程中，并非蛋白含量越高越好，更加需要氨基酸及微量元素平衡，同時A 組飼料中添加了蟲酵蛋白（13.8%）和黃粉蟲砂（2%）可能對蝌蚪生長具有重要意義。

表2 不同飼料配方對棘胸蛙蝌蚪苗種規(guī)格的影響

2.2 不同飼料對蝌蚪變態(tài)成活率的影響

A、B、C 3 種飼料對飼喂的棘胸蛙蝌蚪變態(tài)成活率也有明顯影響，結(jié)果見表3。其中A 組變態(tài)成活率最高，100 d 時達(dá)到95%的變態(tài)成活率，顯著高于B 組和C 組，同時A 組在飼養(yǎng)70 d 時，出現(xiàn)較為規(guī)整的變態(tài)率（90%），便于養(yǎng)殖管理與后續(xù)幼蛙分池，因此我們認(rèn)為A 組配合飼料具有最好的養(yǎng)殖效果。

表3 不同飼料配方飼養(yǎng)蝌蚪變態(tài)率統(tǒng)計(jì)

2.3 不同投喂頻率對蝌蚪生長的影響

根據(jù)前期結(jié)果，作者選用A 組飼料進(jìn)行投喂頻率試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果見表4，投喂2 次/d、3 次/d、4 次/d、5 次/d 蝌蚪體質(zhì)量增長差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中投喂4 次/d 和5 次/d 蝌蚪體質(zhì)量略有增加，且70 d 變態(tài)率也有提高，但是綜合考慮投入成本，建議以投喂2 次/d 為最優(yōu)，可以達(dá)到最大投入產(chǎn)出比。

在20—30 d 階段，蝌蚪體長增長相對較慢，30 d 后體長增長明顯加快，直到開始長出后腿為止。有研究報(bào)道，蝌蚪在生長過程中有生長停滯的現(xiàn)象，認(rèn)為是蝌蚪在儲藏能量，為變態(tài)作準(zhǔn)備。該試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)類似的現(xiàn)象，即在20—30 d 階段，蝌蚪的體長增長幾乎停滯或者生長緩慢，然而體質(zhì)量增長并沒有減慢（見圖1），說明在該階段蝌蚪主要是體質(zhì)量增長。

表4 不同投喂頻率下，棘胸蛙蝌蚪體長體質(zhì)量增長情況

2.4 棘胸蛙蝌蚪生長曲線

以A 組飼料為標(biāo)準(zhǔn)飼料，以投喂頻率為2 次/d，每隔10 d 每個池隨機(jī)選取30 尾蝌蚪，測量體長和體質(zhì)量。構(gòu)建棘胸蛙蝌蚪的生長曲線，見圖2，得到體質(zhì)量（Y）與體長（X）的關(guān)系滿足：Y=0.0054 X0.3131（R2=0.97），通過該關(guān)系式可知蝌蚪的生長屬于等速生長。利用該關(guān)系式可以用來預(yù)測和檢驗(yàn)人工養(yǎng)殖棘胸蛙蝌蚪的生長。例如蝌蚪營養(yǎng)不良，測量數(shù)據(jù)會偏離預(yù)測值。

3 討論

3.1 不同營養(yǎng)水平對棘胸蛙蝌蚪生長的影響

在規(guī)模化養(yǎng)殖生產(chǎn)中，為了促進(jìn)蝌蚪苗的快速生長發(fā)育，就必須保證飼料當(dāng)中蛋白質(zhì)的適宜含量。不少研究認(rèn)為蝌蚪飼料中，蛋白含量高，會促進(jìn)生長[15-16]，李新紅等[4]研究不同營養(yǎng)結(jié)構(gòu)的飼料對中國林蛙生長發(fā)育的影響，認(rèn)為動物性飼料比例大，蛋白含量高，蝌蚪發(fā)育會加快，完成變態(tài)所需時間短，而在植物性飼料中添加一定的動物性飼料，會使蝌蚪變態(tài)后的幼蛙個體較大, 體質(zhì)健壯。肖調(diào)義等[8]在研究棘胸蛙蝌蚪的變態(tài)發(fā)育過程中，也認(rèn)為動物性餌料能加速蝌蚪的變態(tài)發(fā)育, 植物性餌料則能延緩蝌蚪的變態(tài)[17-18]。然而并不是動物性蛋白含量越高越好[19]，一方面需要考慮養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益，另一方面蝌蚪的生長速度及代謝機(jī)能也是有限的，倘若蛋白水平太高，不但不能促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育，反而影響機(jī)體的正常代謝，飼養(yǎng)效率降低，嚴(yán)重時甚至導(dǎo)致動物中毒，再加上飼料原料成本較高，致使整個養(yǎng)殖生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益降低。在該試驗(yàn)中，A 組飼料蛋白含量（39%）和動物蛋白比例（60%）均低于B組，其70 d 時生長性能（體長、體質(zhì)量）均顯著高于B 組，且變態(tài)成活率也高于B 組和C 組，且變態(tài)更加規(guī)整，便于管理，因此我們認(rèn)為棘胸蛙蝌蚪生長不僅僅與蛋白含量（動物蛋白比例）相關(guān)，更大程度上取決于氨基酸以及微量元素的平衡。

3.2 不同投喂頻率對棘胸蛙蝌蚪生長的影響

在水產(chǎn)動物的人工養(yǎng)殖過程中，確定適宜的投喂頻率對于提高養(yǎng)殖品種的生長速度、存活率[20]以及減少飼料浪費(fèi)，提高養(yǎng)殖個體規(guī)格規(guī)整度[21]具有重要意義。然而最適的投喂頻率因養(yǎng)殖品種差異而不同。Andrews 等[22]發(fā)現(xiàn)每天投喂2 次，斑點(diǎn)叉尾的生長率和飼料轉(zhuǎn)化率最好。Eglal 和Gunther[23]發(fā)現(xiàn)鏡鯉最適飼喂頻率為4～6 次/d。目前主要有兩種理論：一是隨著投飼頻率增加，水產(chǎn)動物飼料轉(zhuǎn)化效率與蛋白保留率均上升；二是水產(chǎn)動物生長率主要受攝食率的影響。謝全森等[24]研究泥鰍投喂頻率時，發(fā)現(xiàn)投喂頻率從2 次/d 到4 次/d，泥鰍的增重率顯著提高，從4 次/d 到6 次/d，泥鰍的增重率有所提高但沒有特別大的差異。周歧存研究南美白對蝦時，提高投喂頻率，對蝦的生長反而出現(xiàn)下降的勢頭。姜建湖等[25]研究青魚幼魚投喂頻率從1 次/d到3 次/d 時，青魚生長率顯著增加，進(jìn)一步提高投喂頻率，生長差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，因此確定青魚最適投喂頻率是3 次/d。在該研究中，隨著投喂頻率從2 次/d 增加到5 次/d，生長率和變態(tài)成活率有所提高，但是沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異，考慮飼料和人工成本，我們推薦2 次/d 為最佳投喂頻率。