郭 飛 劉韶娜 張 斌 方 晨 趙智勇 沙 茜 趙素梅 趙彥光*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南昆明650201；2.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明650224）

我國(guó)地方豬種具有抗逆性強(qiáng)、肉質(zhì)優(yōu)良等特點(diǎn)，不同地方豬種抗逆能力也有差異，主要表現(xiàn)在耐寒、耐熱、耐粗飼、對(duì)饑餓的耐受力、抗病力等方面[1]。目前對(duì)于地方豬的抗逆能力描述多是概念性的，未見(jiàn)相應(yīng)量化研究報(bào)道。迪慶藏豬和滇南小耳豬均為云南特有的地方豬種資源，且具有較強(qiáng)抗逆能力，可作為抗逆性研究理想模型。在豬的生長(zhǎng)階段中，哺乳期因消化器官不發(fā)達(dá)、消化機(jī)能不完善、缺乏先天免疫力等因素，導(dǎo)致其體溫調(diào)節(jié)能力差，仔豬腹瀉率、死亡率明顯高于其他生理階段，抵抗疾病能力較差[2]，此階段可作為驗(yàn)證抗逆特性最好的生理階段。為探討豬的抗逆能力的品種差異，以及通過(guò)營(yíng)養(yǎng)手段進(jìn)行干預(yù)的可行性，本試驗(yàn)人為設(shè)置了一些應(yīng)激條件，通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)，測(cè)定哺乳仔豬的平均日采食量、體增重、腹瀉頻率和死亡率，初步對(duì)豬的抗逆能力進(jìn)行量化比較研究，試圖挖掘地方豬種的抗逆潛力，并探究營(yíng)養(yǎng)等手段干預(yù)豬抗逆能力的可行性，從而為豬抗逆性的相關(guān)研究提供一定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

以杜洛克為父本，滇南小耳豬和迪慶藏豬分別為母本進(jìn)行雜交，根據(jù)血緣、體重相近（0.9±0.23）kg、公母各半原則，從產(chǎn)期相近的12窩雜交F1代（滇南小耳豬和迪慶藏豬血緣各占50%，杜洛克血緣占50%，分別簡(jiǎn)稱杜滇和杜藏）發(fā)育正常且健康的初生仔豬中，每窩選取4頭，共48頭為試驗(yàn)動(dòng)物。

1.2 高能低蛋白代乳粉日糧設(shè)計(jì)

參照肉脂型地方豬5～8 kg 飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 65—2004）設(shè)計(jì)高能低蛋白代乳粉日糧配方，配方組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，采購(gòu)優(yōu)質(zhì)原料，按相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)配制代乳粉。所需添加的復(fù)合益生菌由云南畜牧獸醫(yī)科學(xué)院養(yǎng)豬與動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所提供，詳見(jiàn)表2。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用雙因素交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將仔豬分為3組，設(shè)置母乳飼喂（母乳組）和人工飼喂（代乳粉組）、益生菌組，每個(gè)處理的杜藏、杜滇仔豬各8 頭，公母各半，具體分組見(jiàn)表3。人工飼喂的仔豬采取群養(yǎng)單飼。試驗(yàn)于仔豬5 日齡斷奶后進(jìn)行分組預(yù)飼，7 日齡開(kāi)始正式試驗(yàn)，28日齡結(jié)束，試驗(yàn)期22 d。

表1 代乳粉組成和營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 益生菌組所用益生菌的添加量

表3 試驗(yàn)動(dòng)物分組情況

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)仔豬飼養(yǎng)于同一豬舍，舍內(nèi)設(shè)有保溫?zé)?，平均溫度保持?7～32 ℃之間。母乳組通過(guò)寄養(yǎng)的方式由母豬哺育（母豬哺育能力為8～10頭）。人工飼喂需要對(duì)代乳粉進(jìn)行調(diào)制。代乳粉的調(diào)制方法：將代乳粉與50～65 ℃的溫開(kāi)水按1∶6 的比例沖調(diào)配制成代乳粉液，冷卻至40 ℃左右飼喂，益生菌組在每天飼喂前添加益生菌。代乳粉組和益生菌組的仔豬5 日齡斷奶后進(jìn)行群養(yǎng)單飼，配好代乳粉，利用豬用奶瓶單頭進(jìn)行人工飼喂。5～7日齡進(jìn)行預(yù)飼和教食，少量多喂并觀察每頭仔豬的采食情況，7 日齡時(shí)試驗(yàn)正式開(kāi)始。試驗(yàn)的第1～2 d每日每頭次飼喂6次，第3～4 d飼喂5 次，第5 d 開(kāi)始每天每頭次飼喂4 次至21 日齡，21 日齡后減少至每天3 次，每次飼喂仔豬自由采食，記錄每頭仔豬代乳粉的日采食量。從21 日齡開(kāi)始，對(duì)3個(gè)組的仔豬定量補(bǔ)伺少許乳豬料。試驗(yàn)期間，除飼喂方式不同外，其余飼養(yǎng)管理方式均相同。

1.5 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.5.1 采食量

對(duì)照組因母豬哺育，無(wú)法收集母乳采食量數(shù)據(jù)。試驗(yàn)組每頭仔豬代乳粉采食量依據(jù)公式（1）計(jì)算，并按照代乳粉∶水為1∶6的配制比例折算為代乳粉采食量。

1.5.2 增重

分別在7、21、28 日齡早晨8 點(diǎn)進(jìn)行稱重，記錄每頭仔豬體重，按階段計(jì)算仔豬體重變化。

1.5.3 腹瀉指標(biāo)

每天觀察試驗(yàn)仔豬的健康情況，統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)階段的腹瀉仔豬頭次數(shù)，作為仔豬腹瀉頻率。同時(shí)記錄仔豬死亡情況，計(jì)算死淘率，具體見(jiàn)公式（2）。

1.5.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Exel 2010 統(tǒng)計(jì)，結(jié)果以”平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤“表示。所有數(shù)據(jù)利用SPSS 22.0 進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用General Linear Model進(jìn)行分析，并以LSD 進(jìn)行多重比較，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用Kruskal-Wallis 多樣本秩和檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析，P＜0.05視為差異顯著。腹瀉頻率為次數(shù)資料，利用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 品種與飼喂方式對(duì)新生仔豬平均日采食量的影響（見(jiàn)表4）

表4所示，品種對(duì)7～20日齡仔豬平均日采食量無(wú)顯著影響（P＞0.05），對(duì)21～28、7～28 日齡仔豬平均日采食量具有顯著影響（P＜0.05）；飼喂方式對(duì)7～20、21～28 日齡和7～28 日齡仔豬平均日采食量影響顯著（P＜0.05），益生菌組與代乳粉組相比，7～20、21～28日齡及7～28 日齡的仔豬平均日采食量分別提高了7.64、14.10、10.36 g；品種與飼喂方式互作對(duì)不同日齡仔豬平均日采食量均有顯著影響（P＜0.05）。

表4 品種與飼喂方式對(duì)新生仔豬平均日采食量的影響(g)

2.2 品種與飼喂方式對(duì)新生仔豬體增重的影響（見(jiàn)表5）

如表5 所示，在7～20、21～28、7～28 日齡各階段，杜藏仔豬的體增重均高于杜滇仔豬，但差異不顯著（P＞0.05）；飼喂方式顯著影響仔豬體增重（P＜0.05），母乳組仔豬體增重顯著高于代乳粉組和益生菌組（P＜0.05），代乳粉組與益生菌組7～20 日齡仔豬的體增重呈負(fù)增長(zhǎng)，但益生菌組的負(fù)增長(zhǎng)值小于代乳粉組。

表5 品種與飼喂方式對(duì)新生仔豬體增重的影響(kg)

2.3 品種與飼喂方式對(duì)新生仔豬腹瀉及死淘率的影響（見(jiàn)表6）

如表6 所示，仔豬的腹瀉頻率與品種顯著相關(guān)（P＜0.05），在7～20、21～28、7～28 日齡階段的杜滇仔豬腹瀉頻率均高于杜藏仔豬，7～20 日齡時(shí)杜滇仔豬和杜藏仔豬腹瀉最嚴(yán)重，杜滇仔豬較杜藏仔豬高13.7 個(gè)百分點(diǎn)；杜滇仔豬的死淘率為25%，杜藏仔豬無(wú)死亡。仔豬的腹瀉頻率與飼養(yǎng)方式顯著相關(guān)（P＜0.05），7～20、21～28、7～28 日齡仔豬的腹瀉頻率表現(xiàn)為代乳粉組＞益生菌組＞母乳組；代乳粉組與益生菌組的死淘率均為12.5%，母乳組無(wú)仔豬死亡。

表6 品種與飼喂方式對(duì)新生仔豬腹瀉及死淘率的影響

3 討論

3.1 品種對(duì)仔豬抗逆能力的影響

滇南小耳豬與迪慶藏豬是云南特有的地方豬種，前者主要分布在熱帶、亞熱帶低海拔地區(qū)，具有耐高溫潮濕、抗逆性強(qiáng)的種質(zhì)特性[3]；后者主要分布在寒冷、干燥、低氧的高原地區(qū)，長(zhǎng)期以來(lái)形成了四肢結(jié)實(shí)、抗逆性強(qiáng)、抗病力強(qiáng)、耐粗飼等適應(yīng)高原生態(tài)環(huán)境的種質(zhì)特性[4]。本研究發(fā)現(xiàn)，含有50%迪慶藏豬血緣的杜藏仔豬對(duì)人為設(shè)置的應(yīng)激條件的抵抗能力比具有50%滇南小耳豬血緣的杜滇仔豬強(qiáng)，不同日齡階段杜藏仔豬平均日采食量、體增重、腹瀉頻率、死淘率均優(yōu)于杜滇仔豬，表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗逆性，這可能與作為母本的迪慶藏豬、滇南小耳豬的影響息息相關(guān)。線粒體遺傳遵循嚴(yán)格的母系遺傳，當(dāng)前許多動(dòng)物對(duì)惡劣環(huán)境的適應(yīng)性研究也是從線粒體基因組角度入手[5]，線粒體微衛(wèi)星（mitochondrial microsatellite, mtMs）豐富的變異和特有結(jié)構(gòu)與動(dòng)物的長(zhǎng)期適應(yīng)性進(jìn)化有關(guān)，有研究發(fā)現(xiàn)，與多個(gè)豬種相比，藏豬的mtMs復(fù)合結(jié)構(gòu)多達(dá)8 個(gè)，且RARCRE為藏豬特有mtMs，藏豬在長(zhǎng)期進(jìn)化中可能擁有適應(yīng)高海拔和高寒環(huán)境的mtDNA 遺傳基礎(chǔ)[6]。此外，有研究表明，母體乳汁、腸道、產(chǎn)道、糞便等母源微生物會(huì)通過(guò)垂直傳遞影響新生仔豬腸道黏膜微生物的定植[7]，白浩男[8]通過(guò)藏豬盲腸內(nèi)容物的16S rDNA高通量測(cè)序發(fā)現(xiàn)，相比于其他豬種，藏豬的擬桿菌門、螺旋體門細(xì)菌物種相對(duì)豐度較高而厚壁菌門、腸桿菌科細(xì)菌較低，這一獨(dú)特的菌群結(jié)構(gòu)可能與藏豬草食、抗病、抗逆的種質(zhì)特性密切相關(guān)；李卓君[9]通過(guò)藏豬腸道菌群功能預(yù)測(cè)分析表明，藏豬群體特有的微生物或許與藏豬的抗逆、抗病和耐粗等種質(zhì)特性相關(guān)?？傊鳛槟副镜牡蠎c藏豬可能通過(guò)線粒體遺傳、母源微生物的垂直傳遞等方式影響杜藏仔豬的抗逆能力，但具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

3.2 不同飼喂方式對(duì)仔豬抗逆能力的影響

有研究指出，在日糧中添加的益生菌可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制作用、刺激宿主免疫系統(tǒng)提高宿主免疫功能，通過(guò)有機(jī)酸、多種消化酶及生物活性物質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)宿主的營(yíng)養(yǎng)消化吸收，通過(guò)改善腸道微生態(tài)環(huán)境促進(jìn)宿主的腸道健康[10]。本研究中的益生菌組仔豬日糧是在代乳粉組配方的基礎(chǔ)上添加了益生菌，在不同日齡階段，益生菌組平均日采食量顯著高于代乳粉組，腹瀉頻率較代乳粉組低，表明仔豬飼糧中添加益生菌可提高仔豬采食量，降低腹瀉頻率，改善仔豬抗逆能力。曾秀玲等[11]、陳寶劍等[12]研究也指出益生菌對(duì)仔豬的生長(zhǎng)具有顯著的益生作用。此外，本研究中人為設(shè)置的應(yīng)激因素包括兩個(gè)方面，一方面是仔豬過(guò)早斷奶產(chǎn)生的斷奶應(yīng)激，另一方面是代乳粉取代母乳的營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激。無(wú)論是斷奶應(yīng)激和營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激均會(huì)對(duì)仔豬造成諸多不利影響[13-14]。本研究發(fā)現(xiàn)，與母乳組相比，在仔豬早期階段代乳粉組和益生菌組的仔豬體增重呈負(fù)值，但益生菌組的負(fù)增長(zhǎng)值小于代乳粉組，體增重呈負(fù)值可能是由于仔豬需要適應(yīng)試驗(yàn)中人為設(shè)置的應(yīng)激因素，但益生菌的添加可減緩應(yīng)激對(duì)仔豬的影響?？傊?，添加益生菌可以改善仔豬的抗逆能力，這也意味著通過(guò)營(yíng)養(yǎng)手段可以干預(yù)豬抗逆能力。

4 結(jié)論

杜藏仔豬抗逆能力強(qiáng)于杜滇仔豬，這可能與母系的品種差異有關(guān)；添加益生菌提高了仔豬的采食量，降低了仔豬腹瀉頻率，改善了仔豬抗逆能力，表明通過(guò)營(yíng)養(yǎng)手段干預(yù)仔豬抗逆能力的可行性。