林映仙，楊文靜，曹寧寧，趙利斌，裴 帥，陳宇洲，肖學(xué)鳳

逍遙散及其加減方的抗抑郁作用比較研究

林映仙?1，楊文靜?2，曹寧寧?1，趙利斌?3，裴 帥?1，陳宇洲?1*，肖學(xué)鳳?1*

1. 天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，天津 301617 2. 天士力醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，天津 300402 3. 山西振東制藥股份有限公司，山西 長治 047100

比較逍遙散及其加減方的抗抑郁作用，精簡組方、明確藥效，為抗抑郁新藥的研發(fā)提供參考。SD大鼠隨機(jī)分為對照組，模型組，氟西?。?.01 g/kg）組，加味逍遙散（16.20 g/kg）組，逍遙散（10.13 g/kg）組，逍遙散去生姜、薄荷（9.79 g/kg）組，逍遙散去生姜、茯苓、薄荷（8.10 g/kg）組。采用慢性溫和不可預(yù)知刺激（chronic unpredicted mild stress，CUMS）結(jié)合孤養(yǎng)建立大鼠抑郁模型，同時(shí)對照組和模型組ig生理鹽水，其余各組ig相應(yīng)藥物。觀察給藥后大鼠行為學(xué)指標(biāo)（體質(zhì)量、糖水消耗率、敞箱實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)得分）的變化；采用ELISA試劑盒檢測大鼠血漿中皮質(zhì)酮，皮質(zhì)和海馬中多巴胺、去甲腎上腺素（norepinphrine，NE）、5-羥色胺、神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）水平。模型組大鼠行為學(xué)指標(biāo)顯著降低（＜0.05），皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平顯著降低（＜0.05），血漿中皮質(zhì)酮水平顯著升高（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)大鼠抑郁模型建立成功；與模型組比較，各給藥組大鼠行為學(xué)指標(biāo)顯著升高（＜0.05），皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平均顯著升高（＜0.05），血漿中皮質(zhì)酮水平顯著降低（＜0.05），其中逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組療效最佳。逍遙散及其加減方具有抗抑郁作用，其中逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組抗抑郁作用最強(qiáng)，表明柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、甘草是逍遙散發(fā)揮抗抑郁作用的主要配伍藥味。

逍遙散；抗抑郁；慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激；柴胡；當(dāng)歸；白芍；白術(shù)；甘草

抑郁癥是以抑郁心境為主要特征的精神障礙疾病，具有高發(fā)病率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率的特點(diǎn)，臨床表現(xiàn)為食欲減退、情緒低落、活動(dòng)遲緩、無助感、易怒等癥狀，且重度抑郁癥患者有自殺傾向?[1-2]。目前，臨床上常用的治療抑郁癥多為基于單胺假說的藥物如嗎氯貝胺、丙咪嗪、氟西汀等；基于谷氨酸假說的藥物如美金剛、拉莫三嗪、依利羅地等；基于應(yīng)激假說的藥物如米非司酮、地昔帕明、阿米替林等?[3-4]。常用于治療抑郁癥的中藥復(fù)方有逍遙散、開心散、血府逐瘀湯等?[5]。化學(xué)藥物雖然在臨床上被廣泛應(yīng)用，但其安全性、耐受性一直飽受爭議?[6-7]。中藥復(fù)方因不良反應(yīng)小、安全性高、具增效減毒等優(yōu)勢，越來越受到人們的關(guān)注?[8-11]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為抑郁癥是一種情志疾病，屬于“郁證”“百合病”等范疇，病位涉及五臟，主要為肝，并以情志所傷、氣機(jī)郁滯、五臟氣血失調(diào)為病機(jī)[12-13]。肝主疏泄和藏血、運(yùn)行氣血、情志調(diào)暢。逍遙散源自《太平惠民和劑局方》，全方由柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、生姜、薄荷、甘草8味藥組成，具有疏肝解郁、健脾養(yǎng)血之功效[14]。方中柴胡為疏肝解郁之要藥，白芍、當(dāng)歸為補(bǔ)血活血之圣藥，血和則肝和，血充則肝柔，三者均歸于肝經(jīng)，抗抑郁作用較強(qiáng)；木郁不達(dá)而致脾虛不運(yùn)，脾為后天之本，營血生化之源在于脾，脾失健運(yùn)則反侮于肝，故佐以白術(shù)、甘草健脾益氣，使?fàn)I血生化有源，實(shí)土以御木侮，以助柴胡疏肝解郁[15]。茯苓利水滲濕，生姜溫中止嘔，薄荷疏散風(fēng)熱，三者均歸于肺經(jīng)，疏肝解郁作用相對較弱[16-19]。本研究從中醫(yī)角度出發(fā)依據(jù)中藥配伍和歸經(jīng)特點(diǎn)將逍遙散加減方拆方為加味逍遙散組，逍遙散去生姜、薄荷組和逍遙散去茯苓、生姜、薄荷組，比較逍遙散及其加減方的抗抑郁作用，揭示逍遙散中發(fā)揮抗抑郁的主要藥味，使其組方精簡、藥效明確，為研發(fā)療效更佳的抗抑郁新藥奠定基礎(chǔ)。

本研究采用慢性不可預(yù)知溫和刺激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）結(jié)合孤養(yǎng)建立大鼠抑郁模型，考察大鼠行為學(xué)指標(biāo)（體質(zhì)量、糖水消耗率、敞箱實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)得分），血漿中皮質(zhì)酮水平，皮質(zhì)和海馬中多巴胺、去甲腎上腺素（norepinphrine，NE）、5-羥色胺、神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）水平的變化，比較逍遙散及其加減方抗抑郁療效差異，為抗抑郁的新藥研發(fā)提供依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)雄性SD大鼠100只，7～8周齡，體質(zhì)量180～200 g，購于中國食品藥品檢定研究院，許可證號(hào)SCXK（京）2017-0005，飼養(yǎng)于天津中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，溫度（22±2）℃，濕度（50±10）%，自然光照，大鼠自由攝食和飲水。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵循天津中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和使用的規(guī)定，均符合3R原則。

1.2 藥品與試劑

逍遙散（由柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、茯苓、生姜、薄荷、甘草組成，批號(hào)20190307），加味逍遙散（由逍遙散加牡丹皮、梔子組成，批號(hào)20190306），逍遙散去生姜、薄荷（批號(hào)20190310），逍遙散去生姜、茯苓、薄荷（批號(hào)20190308），以上浸膏均由天士力醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司提供，各組方主要藥味生藥量相當(dāng)，且主要化學(xué)成分柴胡皂苷B2質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞0.001 8%，芍藥苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞0.045%。鹽酸氟西汀膠囊（批號(hào)8784A，規(guī)格20 mg/粒）購于禮來蘇州制藥有限公司；皮質(zhì)酮、BDNF、5-羥色胺、多巴胺、NE ELISA試劑盒均購自美國R&D Systems公司；生理鹽水購自石家莊四藥有限公司。

1.3 儀器

LTD0114子彈頭警燈（浙江安華安全設(shè)備有限公司）；G6805-1治療儀（青島鑫升實(shí)業(yè)有限公司）；TD21001電子天平（天津市天馬儀器廠）；IKAT18型超聲組織破碎儀（寧波新芝生物科技有限公司）；3K15型冷凍高速離心機(jī)（美國Sigma公司）；Infinite M200 Pro型多功能酶標(biāo)儀（瑞士Tecan公司）；?80 ℃低溫冰箱（美國Thermo Fisher Scientific公司）；大鼠敞箱實(shí)驗(yàn)行為測試箱（自制，100 cm×100 cm×50 cm，內(nèi)部四壁及底面涂成黑色，底部用白線劃出100個(gè)邊長為10 cm的正方形小格）。

2 方法

2.1 動(dòng)物分組及給藥

SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，在安靜環(huán)境下進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，根據(jù)水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)得分相近的原則剔除得分過高或過低的大鼠。根據(jù)體表面積折算，大鼠給藥劑量為人臨床等效劑量的15倍。

將篩選出大鼠隨機(jī)分成對照組，模型組，氟西?。?.01 g/kg）組，加味逍遙散（16.20 g/kg）組，逍遙散（10.13 g/kg）組，逍遙散去生姜、薄荷（9.79 g/kg）組，逍遙散去生姜、茯苓、薄荷（8.10 g/kg）組，每組12只。對照組大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，4只/籠，自由進(jìn)食飲水，其余各組大鼠采用CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造模，持續(xù)9周。造模同時(shí)各給藥組ig相應(yīng)藥物（10 mL/kg），對照組和模型組ig等體積生理鹽水。

2.2 CUMS結(jié)合孤養(yǎng)大鼠抑郁模型的建立

參考文獻(xiàn)方法?[20]并結(jié)合課題組前期實(shí)驗(yàn)方法造模，大鼠單籠飼養(yǎng)，每天隨機(jī)接受以下2種不同應(yīng)激刺激且相同刺激不可連續(xù)出現(xiàn)，從而使大鼠不能預(yù)料何種刺激，避免其產(chǎn)生適應(yīng)性。CUMS刺激因子包括：束縛2 h；冰水高臺(tái)2 h；噪音刺激（110 dB，30 min）；足底電擊（電流4 mA，50次，每次間隔5 s）；光照刺激（100 000 lx，30 min）；晝夜顛倒24 h；潮濕墊料12 h；夾尾（距離大鼠尾尖1 cm左右，2 min）。持續(xù)造模9周，每周測量各組大鼠體質(zhì)量、糖水消耗量、敞箱實(shí)驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)與垂直運(yùn)動(dòng)得分。

2.3 逍遙散及其加減方對大鼠行為學(xué)的影響

2.3.1 體質(zhì)量變化 實(shí)驗(yàn)第0、7、14、21、28、35、42、49、56、63天分別測定大鼠體質(zhì)量，計(jì)算各組大鼠體質(zhì)量增長量。

體質(zhì)量增長量＝(第63天體質(zhì)量－第0天體質(zhì)量)/第0天體質(zhì)量

2.3.2 糖水消耗實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)第0、7、14、21、28、35、42、49、56、63天對大鼠進(jìn)行糖水消耗實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前3 d進(jìn)行糖水適應(yīng)，在籠子上放置2瓶1%蔗糖溶液24 h，然后放置1%蔗糖溶液1瓶、純水1瓶24 h，上下午調(diào)換水瓶位置，第3天禁食禁水24 h。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，籠子上分別放置1%蔗糖溶液1瓶、純水1瓶，上下午調(diào)換水瓶位置，記錄24 h內(nèi)糖水消耗量和純水消耗量，計(jì)算糖水消耗率。

糖水消耗率＝糖水消耗量/(糖水消耗量＋純水消耗量)

2.3.3 敞箱實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)第0、7、14、21、28、35、42、49、56、63天對大鼠進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)。將大鼠放在中心固定的方格內(nèi)，排除人為干擾，記錄大鼠3 min內(nèi)活動(dòng)路線。以大鼠穿越底面小方格的數(shù)量為水平運(yùn)動(dòng)得分，大鼠每穿越1格（3爪以上跨入）均計(jì)為水平運(yùn)動(dòng)1分，若實(shí)驗(yàn)大鼠沿直線行走，則以每10厘米計(jì)為1分。以大鼠直立次數(shù)為垂直運(yùn)動(dòng)得分，大鼠雙前肢離開敞箱底面為標(biāo)志，以大鼠放下雙前肢計(jì)為垂直運(yùn)動(dòng)1分。每只大鼠測試完畢后，清理敞箱，進(jìn)行下一只大鼠的測試。記錄每只大鼠的水平運(yùn)動(dòng)得分及垂直運(yùn)動(dòng)得分。

2.4 逍遙散及其加減方對大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平的影響

行為學(xué)實(shí)驗(yàn)后，大鼠眼眶取血1.5 mL于肝素浸潤的離心管中，4 ℃、8000 r/min離心10 min，取上清液，于?80 ℃低溫冰箱保存?zhèn)溆?，按ELISA試劑盒說明書測定大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平。

2.5 逍遙散及其加減方對大鼠海馬和皮質(zhì)中BDNF、5-羥色胺、多巴胺、NE水平的影響

大鼠眼眶取血后，脫頸椎處死，迅速剝離皮質(zhì)和海馬組織，稱定質(zhì)量，于液氮迅速冷凍，然后轉(zhuǎn)至?80 ℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩７謩e取皮質(zhì)、海馬組織適量，剪碎并稱定質(zhì)量，加入10倍量生理鹽水，用組織破碎儀低溫勻漿，4 ℃、8000 r/min離心10 min，取上清液，按ELISA試劑盒說明書測定大鼠皮質(zhì)和海馬組織中BDNF、5-羥色胺、多巴胺、NE水平。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

3 結(jié)果

3.1 逍遙散及其加減方對大鼠行為學(xué)的影響

3.1.1 體質(zhì)量變化 如表1所示，與對照組比較，模型組大鼠體質(zhì)量增長量顯著下降（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造模影響大鼠食欲，導(dǎo)致大鼠體質(zhì)量增長緩慢，模擬了抑郁癥患者食欲減退、體質(zhì)量減輕癥狀。與模型組相比，各給藥組大鼠體質(zhì)量增長量顯著升高（＜0.05），表明各給藥組均可改善抑郁模型大鼠食欲減退、體質(zhì)量減輕癥狀。

各給藥組大鼠體質(zhì)量增長量大小順序依次為氟西汀組＞逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，氟西汀與逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組，逍遙散組與加味逍遙散組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組療效與氟西汀組相當(dāng)，且加味逍遙散組效果最弱。

表1 逍遙散及其加減方對大鼠體質(zhì)量增長量的影響()

與對照組比較?：▼＜0.05；與模型組比較：?#＜0.05；與逍遙散組比較：■＜0.05；與逍遙散去生姜、薄荷組比較：□＜0.05；與逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組比較：▽＜0.05；與氟西汀組比較：?◆＜0.05，下表同

▼< 0.05control group;?#< 0.05model group;■< 0.05Xiaoyao Powder group;□< 0.05Xiaoyao Powder group without ginger and mint group;▽< 0.05Xiaoyao Powder group without ginger, tuckahoe and mint group; ?◆< 0.05fluoxetine group, same as below tables

3.1.2 糖水消耗量變化 如表2所示，與對照組比較，模型組大鼠糖水消耗率顯著下降（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造模降低大鼠糖水消耗率，模擬了抑郁癥患者興趣缺失癥狀。與模型組比較，各給藥組大鼠糖水消耗率顯著升高（＜0.05），表明各給藥組均可改善抑郁模型大鼠的興趣缺失癥狀。各給藥組大鼠糖水消耗率大小順序依次為氟西汀組＞逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，氟西汀與逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組療效與氟西汀組相當(dāng)，且加味逍遙散組效果最弱。

表2 逍遙散及其加減方對大鼠糖水消耗率的影響()

3.1.3 敞箱實(shí)驗(yàn) 如表3所示，與對照組比較，模型組大鼠敞箱水平運(yùn)動(dòng)得分顯著下降（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造?？娠@著降低大鼠的情緒和自主活動(dòng)能力，模擬了抑郁癥患者的自主活動(dòng)能力低下癥狀。與模型組比較，各給藥組大鼠敞箱水平運(yùn)動(dòng)得分顯著升高（＜0.05），表明各給藥組均可有效改善抑郁模型大鼠的自主活動(dòng)能力低下癥狀。各給藥組大鼠水平運(yùn)動(dòng)得分大小順序依次為氟西汀組＞逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，氟西汀與逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組療效與氟西汀組相當(dāng)，且加味逍遙散組療效最弱。

如表4所示，與對照組比較，模型組大鼠敞箱垂直運(yùn)動(dòng)得分顯著下降（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造?？娠@著降低大鼠的空間探索能力，模擬了抑郁癥患者對新鮮環(huán)境好奇程度降低癥狀。與模型組比較，各給藥組大鼠敞箱垂直運(yùn)動(dòng)得分顯著升高（＜0.05），表明各給藥組均可改善抑郁模型大鼠對新鮮環(huán)境好奇程度降低癥狀。各給藥組大鼠垂直運(yùn)動(dòng)得分大小順序依次為氟西汀組＞逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，且各組間大鼠垂直運(yùn)動(dòng)得分均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組療效與氟西汀組相當(dāng)，加味逍遙散組療效最弱。

3.2 逍遙散及其加減方對大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平的影響

如表5所示，與對照組比較，模型組大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平顯著升高（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造模顯著升高大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平，造成下丘腦-垂體-腎上腺（hypothalamic-pituitary- adrenal，HPA）軸功能亢進(jìn)，從而造成大鼠抑郁。與模型組比較，各給藥組大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平顯著下降（＜0.05），表明各給藥組均可改善模型抑郁大鼠HPA軸功能亢進(jìn)，從而發(fā)揮抗抑郁作用。各給藥組大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平高低順序依次為氟西汀組＞逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，且各組間血漿中皮質(zhì)酮水平均有顯著差異（＜0.05），逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組療效與氟西汀組接近，加味逍遙散組療效最弱。

表3 逍遙散及其加減方對大鼠敞箱實(shí)驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)得分的影響()

表4 逍遙散及其加減方對大鼠敞箱實(shí)驗(yàn)垂直運(yùn)動(dòng)得分的影響()

表5 逍遙散及其加減方對大鼠血漿中皮質(zhì)酮水平的影響()

3.3 逍遙散及其加減方對大鼠皮質(zhì)和海馬中BDNF、5-羥色胺、多巴胺、NE水平的影響

如表6、7所示，與對照組比較，模型組大鼠皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平顯著降低（＜0.05），表明CUMS結(jié)合孤養(yǎng)造模顯著降低大鼠皮質(zhì)和海馬中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺、NE、5-羥色胺及腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF水平，從而造成大鼠抑郁。與模型組比較，各給藥組大鼠皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平顯著上升（＜0.05），表明各給藥組均可提高抑郁模型大鼠皮質(zhì)和海馬中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平，且通過上調(diào)皮質(zhì)和海馬中BDNF水平，促進(jìn)神經(jīng)元的修復(fù)與再生，從而發(fā)揮抗抑郁作用。各給藥組大鼠皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平高低順序依次為氟西汀組＞逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，氟西汀組與逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組與氟西汀組療效相當(dāng)，且加味逍遙散組療效最弱。

表6 逍遙散及其加減方對大鼠皮質(zhì)中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平的影響()

表7 逍遙散及其加減方對大鼠海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平的影響()

綜上，逍遙散及其加減方抗抑郁作用為逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，其中逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組抗抑郁作用最強(qiáng)，加味逍遙散組抗抑郁作用最弱，表明逍遙散中柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、甘草對抗抑郁作用影響較顯著，其余藥味對抗抑郁作用影響較弱。

4 討論

逍遙散具有疏肝解郁、養(yǎng)血健脾之功效，是主治肝郁、血虛、脾弱等證的經(jīng)典方劑，臨床應(yīng)用歷史悠久，方中君藥柴胡疏肝解郁，使肝氣調(diào)達(dá)；當(dāng)歸養(yǎng)血和血，白芍養(yǎng)血斂陰、柔肝緩急，共為臣藥。白術(shù)、炙甘草益氣健脾，緩肝之急，茯苓利水消腫，為佐藥；薄荷疏散風(fēng)熱，生姜溫胃和中，為使藥[21]。本方配伍立法于“調(diào)和”之中，調(diào)和肝脾，以“肝”為重。全方共奏疏肝調(diào)肝養(yǎng)肝、益氣健脾之效[22]。本研究結(jié)果顯示，逍遙散及其加減方抗抑郁作用依次為逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組＞逍遙散去生姜、薄荷組＞逍遙散組＞加味逍遙散組，其中逍遙散去生姜、茯苓、薄荷組抗抑郁作用最強(qiáng)，表明逍遙丸抗抑郁作用的主要藥味為柴胡、白芍、當(dāng)歸、白術(shù)、甘草。研究表明，逍遙散的抗抑郁成分柴胡皂苷A、柴胡皂苷D、芍藥苷、阿魏酸、甘草苷、甘草酸、白術(shù)內(nèi)酯主要來源于柴胡、白術(shù)、當(dāng)歸、白芍、甘草5味藥材?[23-24]，與本研究結(jié)果一致，從中醫(yī)配伍、歸經(jīng)和活性成分角度闡明了柴胡、白術(shù)、當(dāng)歸、白芍、甘草5味藥材為主要抗抑郁藥味。

抑郁癥又稱抑郁障礙，是一種以持久性心境低落、興趣缺失、自主意志活動(dòng)減退、無快感體驗(yàn)、睡眠障礙為主的軀體癥狀綜合征?[25]。抑郁癥形成原因復(fù)雜，其中競爭壓力、不合理的生活習(xí)慣、對社會(huì)環(huán)境較弱的適應(yīng)能力等原因尤為突出，其臨床主要表現(xiàn)為情緒低落、食欲不振、興趣缺失、自主意志活動(dòng)減退等?[26]。CUMS結(jié)合孤養(yǎng)抑郁大鼠模型是與臨床抑郁癥最接近的動(dòng)物模型，在造模過程中將大鼠暴露于持續(xù)溫和不可預(yù)見的刺激條件之下，充分模擬了抑郁癥患者社會(huì)生活環(huán)境，誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生與抑郁癥患者類似的行為學(xué)異常癥狀，如大鼠體質(zhì)量降低模擬了抑郁癥患者食欲不振、體質(zhì)量減輕癥狀，糖水消耗率降低模擬了抑郁癥患者興趣缺失癥狀，敞箱運(yùn)動(dòng)得分減少模擬了抑郁癥患者的自主活動(dòng)能力低下癥狀等?[27-29]。本研究采用CUMS結(jié)合孤養(yǎng)抑郁大鼠模型，通過行為學(xué)指標(biāo)分析，探究逍遙散及其加減方的抗抑郁作用。結(jié)果顯示，模型組大鼠行為學(xué)指標(biāo)顯著降低，表明抑郁模型大鼠造模成功；逍遙散及其加減方組大鼠行為學(xué)指標(biāo)顯著升高，表明逍遙散及其加減方具有抗抑郁作用。

抑郁癥發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前被廣泛認(rèn)可且研究較深入的假說包括單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、HPA軸功能亢進(jìn)、神經(jīng)可塑性?[30]。其中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)為抑郁癥最經(jīng)典的一種假說，認(rèn)為抑郁癥的發(fā)生與大腦中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)如5-羥色胺、多巴胺、NE等缺乏密切相關(guān)，是臨床大部分抗抑郁藥物的作用靶點(diǎn)?[31]；HPA軸功能亢進(jìn)假說認(rèn)為HPA軸功能亢進(jìn)可導(dǎo)致機(jī)體皮質(zhì)酮水平異常升高，高濃度的皮質(zhì)酮與其受體結(jié)合后產(chǎn)生神經(jīng)毒性，造成海馬區(qū)神經(jīng)元損傷，從而引起抑郁?[32]；神經(jīng)可塑性假說認(rèn)為BDNF參與調(diào)控神經(jīng)細(xì)胞的生存、生長、分化和凋亡，可對抗應(yīng)激狀態(tài)下神經(jīng)元的損傷，促進(jìn)神經(jīng)元的修復(fù)與再生，提高神經(jīng)元的可塑性，其水平下降可導(dǎo)致抑郁癥的發(fā)生?[33-34]?；谥兴帍?fù)方多途徑、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)?[35]，本研究以HPA軸功能亢進(jìn)假說中血漿皮質(zhì)酮，單胺類神經(jīng)遞質(zhì)假說中多巴胺、NE、5-羥色胺和神經(jīng)可塑性假說中BDNF水平為考察指標(biāo)，探究逍遙散及其加減方抗抑郁的作用機(jī)制。結(jié)果顯示，模型組大鼠皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF水平顯著降低，血漿中皮質(zhì)酮水平顯著升高；各給藥組大鼠皮質(zhì)和海馬中多巴胺、NE、5-羥色胺、BDNF顯著升高，血漿中皮質(zhì)酮水平顯著降低，表明逍遙散及其加減方可能是通過抵抗HPA軸功能亢進(jìn)、提高單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量、提高神經(jīng)元可塑性協(xié)同發(fā)揮抗抑郁作用，充分體現(xiàn)了中藥復(fù)方多途徑、多靶點(diǎn)、協(xié)同增效的作用特點(diǎn)。

綜上所述，逍遙散及其加減方可能通過影響單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、HPA軸功能亢進(jìn)、神經(jīng)可塑性發(fā)揮抗抑郁作用，柴胡、當(dāng)歸、白芍、白術(shù)、甘草是逍遙散發(fā)揮抗抑郁作用的主要藥味。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Comparison on antidepressant effects of modified Xiaoyao Powder

LIN Ying-xian?1, YANG Wen-jing?2, CAO Ning-ning?1, ZHAO Li-bin?3, PEI Shuai?1, CHEN Yu-zhou?1, XIAO Xue-feng?1

1. School of Chinese Materia Medica, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin301617, China 2. Tianjin Tasly Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin 300402, China 3. Shanxi Zhendong Pharmaceutical Co., Ltd., Changzhi 047100, China

Antidepressant effect of Xiaoyao Powder (逍遙散) and its added and reduced formula were compared to simplify composition and clarify efficacy, with view to providing reference for the research and development of new antidepressant drugs.SD rats were randomly divided into control group, model group, fluoxetine (0.01 g/kg) group, Jiawei Xiaoyao Powder (16.20 g/kg) group, Xiaoyao Powder (10.13 g/kg) group, Xiaoyao Powder without ginger and mint (8.10 g/kg) group, Xiaoyao Powder without ginger, tuckahoe and mint (9.79 g/kg) group. Rats were given social isolation and chronic unpredictable mild stress to establish depression model. Concurrently, rats in control group and model group were ig normal saline, rats in the other group were ig corresponding drugs. Body weights, sugar preference rate, and opening behavior were observed after administration. Levels of corticosterone in plasma, dopamine, norepinephrine (NE), 5-hydroxytryptamine, brain derived neurotrophic factor (BDNF) in cortex and hippocampus were detected by ELISA.Behavioral of rats were significantly decreased (< 0.05), levels of dopamine, NE, 5-hydroxytryptamine and BDNF were significantly reduced (< 0.05), level of corticosterone was significantly increased in model group (< 0.05). Compared with model group, behavioral of rats were significantly increased (< 0.05), levels of dopamine, NE, 5-hydroxytryptamine and BDNF were significantly increased (< 0.05), level of corticosterone was significantly decreased in the administration groups (< 0.05), Xiaoyao Powder without ginger, tuckahoe and mint group had the best effect.Xiaoyao Powder and its added and reduced formula improve the symptoms of depression, Xiaoyao Powder without ginger, tuckahoe and mint has the strongest antidepressant effect.,,,, andetare the main compatibility of Xiaoyao Powder determining the effect of antidepressant.

Xiaoyao Powder; antidepression; chronic unpredicted mild stress;;;;;et

R285.5

A

0253 - 2670(2021)01 - 0137 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.01.017

2020-06-01

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81973557）；國家科技重大專項(xiàng)（2018ZX09303-024）；國家科技重大專項(xiàng)（2018ZX09737-019）

林映仙（1992—），女，碩士，從事中藥新藥和藥動(dòng)學(xué)研究。Tel: 15202201879 E-mail: llinluoluo@163.com

肖學(xué)鳳（1966—），女，教授，博士生導(dǎo)師，從事中藥新藥和藥動(dòng)學(xué)研究。Tel: (022)59596237 E-mail: kai1219@163.com

[責(zé)任編輯 李亞楠]