彭維,郭保君,胡幼平
·綜 述·
逆灸療法與免疫系統(tǒng)的研究進展
彭維,郭保君,胡幼平
(成都中醫(yī)藥大學,成都 610075)
逆灸是中醫(yī)學“治未病”思想的一種重要療法,目前主要應用在心血管疾病、慢性疲勞綜合征、腫瘤化療后的治療及并發(fā)癥預防上?,F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)逆灸可以調(diào)節(jié)多種免疫細胞及免疫物質(zhì),該文收集近10年來國內(nèi)外關(guān)于逆灸調(diào)節(jié)免疫功能的臨床研究及實驗研究,探究逆灸對免疫細胞和免疫因子的影響,歸納逆灸對某些疾病的作用,并分析其發(fā)展狀況及研究前景。
灸法;逆灸;免疫機制;治未病;綜述
逆灸療法是未病而先施灸的方法,指在疾病發(fā)生或加重之前,用灸法激發(fā)經(jīng)絡之氣,從而達到防病治病的效果。中醫(yī)學認為,人體的正氣具有抗病能力和修復能力[1],當邪氣入侵,體內(nèi)正氣受到激發(fā),正邪交爭,正盛則安,邪盛則病,此過程與現(xiàn)代醫(yī)學中的免疫功能類似[2]。免疫系統(tǒng)是機體中重要的防御系統(tǒng),主要由淋巴器官、淋巴組織、免疫細胞和免疫活性分子構(gòu)成,并且可以通過血液循環(huán)和淋巴循環(huán)相互聯(lián)系,共同維系機體內(nèi)部的穩(wěn)定,包括免疫防御、免疫自穩(wěn)和免疫監(jiān)視三大作用[3]。近年來隨著逆灸療法在心血管疾病、慢性疲勞綜合征、胃腸道疾病、更年期免疫紊亂的防治上的廣泛應用[4-7],越來越多的研究者開始對逆灸的作用機制進行深入研究。本文收集近10年國內(nèi)外關(guān)于逆灸與免疫系統(tǒng)相關(guān)的臨床研究及實驗研究,探究逆灸參與免疫系統(tǒng)的作用機制及其研究現(xiàn)狀。
逆灸是后世醫(yī)家依據(jù)《黃帝內(nèi)經(jīng)》中“治未病”思想而創(chuàng)立的未病先灸的方法,“逆灸”一詞最早出現(xiàn)在東晉《范汪方》,雖然原書已佚,但相關(guān)條文散見于《醫(yī)心方》和《外臺秘要》中[8],文中記載“凡得霍亂,灸之或時雖未瘥,終無死憂,不可不逆灸”,表明逆灸最早用于防治疫毒。唐代孫思邈的《千金要方》亦有關(guān)于逆灸防治疫毒的記載:“凡人吳蜀地游官,體上常須三兩處灸之,勿令瘡暫瘥,則瘴疬、溫瘧、毒氣,不能著人也。”此外,在古代文獻中,逆灸療法也用于小兒的預防保健,如隋代巢元方的《諸病源候論》記載:“河洛間土地多寒,兒喜病痙,其俗,生兒三月,喜逆灸以防之……古方既傳有逆針灸之法,今人不詳南北之殊,便按方用之,多害于小兒?!碧岢瞿婢寞煼ㄒ虻赜虿煌嬖诓町?應因地因人制宜。
關(guān)于“逆”字,《說文解字》中意為“迎也”,明代高武在《針灸聚英》中將其解釋為“無病而先針灸曰逆。逆,未至而迎之也”,故“逆”表示預先,逆灸是一種與時間相關(guān)的治療手段,現(xiàn)代研究者亦將其稱為“灸法預處理”。
免疫細胞是參與免疫應答的細胞,包括淋巴細胞、單核巨噬細胞、抗原呈遞細胞等。淋巴細胞中根據(jù)形態(tài)、功能的不同,又可以分為T淋巴細胞、B淋巴細胞、NK細胞和K細胞等。目前逆灸與免疫細胞相關(guān)的研究以T淋巴細胞、NK細胞更為廣泛,表現(xiàn)為逆灸促使T細胞亞群中CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴細胞數(shù)量的改變,調(diào)節(jié)其含量穩(wěn)定,以及增加NK細胞數(shù)量和提高其活性,且逆灸對NK細胞的影響較T細胞更敏感。
2.1.1 T淋巴細胞
T淋巴細胞是細胞免疫的效應細胞,簡稱T細胞。T細胞在抗原呈遞細胞與炎性細胞因子指導下可分化為不同的亞群,主要為CD4﹢和CD8﹢兩大亞群,CD4﹢是輔助T細胞的主要表面標志,主要功能是分泌細胞因子而增強免疫反應;CD8﹢是細胞毒T細胞的表面標志,具有殺傷靶細胞的作用;兩大細胞亞群相互制約,維持機體的免疫平衡,其CD4﹢/CD8﹢比值可反映免疫系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定[9-10]。目前研究中認為,逆灸可以調(diào)節(jié)T淋巴細胞亞群數(shù)量,延緩其下降,維持CD4﹢/CD8﹢比值穩(wěn)定,降低免疫功能受損程度。相關(guān)報道主要以觀察人體或動物在逆灸前后外周血中T淋巴細胞亞群數(shù)量的變化,由此說明逆灸療法對免疫系統(tǒng)的影響。
臨床研究中,足三里化膿灸可以延緩結(jié)腸癌化療患者CD4﹢、CD8﹢T細胞水平的降低,提高患者免疫力[11]。動物實驗也發(fā)現(xiàn),免疫抑制兔的CD3﹢含量降低,CD8﹢含量升高,灸法可以使免疫抑制兔血清中CD3﹢含量回升,CD8﹢含量降低,使CD3﹢與CD8﹢水平恢復平衡[9],其結(jié)果與另一項關(guān)于癌前病變模型大鼠研究[12]的結(jié)果一致。相關(guān)逆灸報道稱[13],當機體處于疲勞狀態(tài)時,體內(nèi)的CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴細胞數(shù)量會下降,而通過逆灸干預后,CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴細胞數(shù)量下降趨勢變緩,疲勞癥狀也相應緩解。而另一項關(guān)于逆針灸與中藥結(jié)合對惡性腫瘤患者的研究中[6],則發(fā)現(xiàn)逆灸對T細胞亞群無太大影響,該研究將90例患者分為中藥+逆針灸組、中藥組和化療組,其逆針灸采取溫針灸形式,結(jié)果顯示,中藥+逆針灸組患者的CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴細胞數(shù)量未見明顯變化,但能明顯改善化療后神經(jīng)毒性反應;由于此研究采用逆灸聯(lián)合其他療法,存在干擾因素,未能說明逆灸與T細胞之間是否有影響。
2.1.2 NK細胞
NK細胞是一類具有自然殺傷能力的細胞,可以不借助抗原抗體就能殺傷腫瘤細胞,在腫瘤防治上起著重要的作用,又稱為殺傷細胞[6,14]。逆灸對NK細胞的作用主要體現(xiàn)在增加NK細胞數(shù)量和提高活性兩方面[15]。
動物研究中,癌前病變大鼠的NK細胞含量升高,直接灸和隔姜灸均可以使NK細胞含量降低[12]。原發(fā)性痛經(jīng)大鼠模型的NK細胞活性較正常組低,艾灸可使NK細胞活性升高[15]。另一項研究發(fā)現(xiàn)[13],運動過量會導致機體免疫細胞功能下降,包括NK細胞和T細胞亞群,而采取逆灸療法后,NK細胞和T細胞亞群數(shù)量下降變緩,且逆灸對NK細胞的調(diào)節(jié)作用較T細胞更為敏感。
免疫活性分子是免疫系統(tǒng)中重要的組成部分,亦稱細胞因子,是具有調(diào)節(jié)免疫應答生物活性的小分子多肽類物質(zhì),包括免疫球蛋白、補體和其他細胞因子,根據(jù)它們參與炎癥反應的不同作用,又可分為抗炎性細胞因子和炎性細胞因子兩類[16]。逆灸對免疫活性分子的調(diào)節(jié)作用主要通過抑制炎性細胞因子的釋放和增加抗炎性細胞因子,使紊亂的免疫功能恢復平衡。目前的研究報道以動物實驗為主,觀察動物模型血清中細胞因子的變化,從而驗證逆灸對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。與逆灸相關(guān)的免疫活性物質(zhì)包括白細胞介素(Interleukin, IL)、腫瘤壞死因子、干擾素、熱休克蛋白等。
2.2.1 白細胞介素
白細胞介素是由多種細胞產(chǎn)生的一類細胞因子[17-18]。逆灸對白細胞介素的影響主要表現(xiàn)為降低血清中炎性細胞因子(如IL-1、IL-1b、IL-6)的含量和促進抗炎性細胞因子(如IL-2、IL-10)含量的回升。
IL-2是Th1型細胞分泌的抗炎性細胞因子[19],疾病狀態(tài)下,IL-2水平降低[14]。李曉泓等[20]在對更年期大鼠的研究中發(fā)現(xiàn),更年期大鼠血清IL-2含量較年輕大鼠降低,逆灸可使更年期大鼠血清中的IL-2含量回升。IL-1b和IL-6在免疫應激反應中被認為與疲勞癥狀有關(guān)[21],IL-6也被認為是疲勞誘導細胞因子,而IL-1b則可以調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA軸)[22],參與調(diào)節(jié)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)。動物實驗中,慢性疲勞模型大鼠的血清IL-1b、IL-6含量較正常大鼠升高,逆灸可使慢性疲勞大鼠血清IL-1b、IL-6含量明顯降低[23]。此外,劉燕等[16]研究發(fā)現(xiàn),抑郁模型大鼠血清中的IL-1b、IL-6水平較正常大鼠升高,IL-10水平則降低,采用逆灸后,可使抑郁模型大鼠血清中的IL-1b、IL-6水平下降,IL-10水平上升,且逆灸對抑郁癥的預防作用優(yōu)于治療作用。
2.2.2 熱休克蛋白
熱休克蛋白(heat shock protein, HSP)是細胞在應激后產(chǎn)生的一類細胞伴侶蛋白,又稱應激蛋白,最早在1962年由遺傳學家Ritossa發(fā)現(xiàn),也是在逆灸的免疫機制研究最多的一類物質(zhì)。目前已發(fā)現(xiàn)的HSP有10多種,主要有HSP90、HSP70、HSP60、小分子HSP和泛素等,在炎癥、腫瘤、自身免疫疾病中研究廣泛[24]。逆灸對HSP的影響主要為增強其表達,激發(fā)機體的免疫反應,從而發(fā)揮預防作用。
譚成富等[25]發(fā)現(xiàn)逆針灸“內(nèi)關(guān)”穴可以促進心肌缺血再灌注損傷兔的HSP27、HSP70、HSP90的表達,并且在24 h時,逆灸組的HSP70表達增強優(yōu)于逆針組,其結(jié)果與王超等[26]的研究結(jié)果一致,表明逆灸對心肌缺血再灌注損傷具有預防保護作用。在李曉泓等[20]和孫志芳等[27]的研究中也證實了逆灸可以增加HSP70及HSP70mRNA的表達,HSP70能對隨后機體抵御傷害性應激原的刺激和組織器官的修復具有重要作用。這些研究結(jié)果均表明逆灸對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)不止局限于某一種細胞因子,而是作用于多種免疫活性物質(zhì),甚至能影響到基因?qū)用妗?/p>
2.2.3 腫瘤壞死因子
腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)是一種能使腫瘤發(fā)生壞死的物質(zhì),可分為TNF-a和TNF-b兩種,逆灸與腫瘤壞死因子的研究目前只有關(guān)于TNF-a的報道。TNF-a是由抗原激活的T細胞及單核巨噬細胞產(chǎn)生的,也是炎癥反應中最早出現(xiàn)的炎癥因子[14],艾灸可以抑制TNF-a的表達,從而改善炎癥狀態(tài)[28]。動物實驗[20]中,自然更年期大鼠血清TNF-a含量在12月齡組降低,說明更年早期機體免疫功能狀態(tài)低下,而其含量在16月齡組增加,提示機體在更年后期有害物質(zhì)在體內(nèi)的蓄積,刺激TNF-a的過度表達;通過逆灸關(guān)元穴后,與同月齡自然對照組相比,TNF-a含量在12月齡組升高,16月齡組則呈降低趨勢,表明逆灸對TNF-a具有雙重調(diào)節(jié)功能。
2.2.4 干擾素
干擾素是人和動物細胞受到病原刺激而產(chǎn)生的一類具有廣泛生物活性的糖蛋白,具有抗病毒、抗腫瘤以及免疫調(diào)節(jié)作用,也是第一個用于癌癥治療的細胞因子。根據(jù)干擾素傳遞信號的不同,分為Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干擾素,Ⅰ型包括IFN-a、IFN-b、IFN-k、IFN-e和IFN-w,Ⅱ型包括IFN-g,Ⅲ型包括IFN-l等[29]。逆灸對干擾素的影響主要是阻止IFN-g水平的下降。高明等[30]對摔跤運動員的大負荷訓練觀察中發(fā)現(xiàn)過度運動后可造成IFN-g下降,通過逆灸調(diào)節(jié)后,IFN-g則升高。
綜上,逆灸對免疫活性因子的影響主要包括①逆灸可以降低血清中IL-1、IL-1b、IL-6和增加IL-2、IL-10等細胞因子的含量,預防炎性反應,其中IL-1b和IL-6是抗疲勞的關(guān)鍵因子;②逆灸可增強熱休克蛋白的表達,幫助機體抵御傷害性應激原的刺激和修復組織器官,以HSP70增強更明顯;③逆灸能雙向調(diào)節(jié)TNF-a的表達,改善炎癥狀態(tài);④逆灸可阻止IFN-g水平的下降,維持免疫功能的穩(wěn)定。
逆灸在古代文獻記載中是“治未病”的常用手段,現(xiàn)多將其用于未病先防和已病防變。在與免疫機制的研究中,逆灸主要用在防治心血管疾病、胃腸道疾病、抗疲勞、抗衰老等方面。
心腦血管疾病是發(fā)生在50歲以上人群的常見病,具有高患病率、高致殘率和高死亡率等特點。近年來的研究發(fā)現(xiàn),炎癥反應是心腦血管最重要的免疫機制,當心腦血管系統(tǒng)發(fā)生炎癥時,常涉及到巨噬細胞的激活、細胞因子表達、單核細胞浸潤和自身免疫反應等過程[31]。逆灸療法與心腦血管疾病的研究較為廣泛,主要包括預防心肌缺血再灌注損傷[32]和腦缺血再灌注損傷[33]。
研究者發(fā)現(xiàn),當心肌經(jīng)過幾次反復短暫的缺血再灌注后,對再次損傷產(chǎn)生耐受性,即產(chǎn)生了缺血預適應現(xiàn)象,現(xiàn)代醫(yī)學也證明,缺血再灌注引起了心臟的強烈收縮,導致心肌細胞膜損傷,引起細胞內(nèi)釋放至胞外的成分增加,啟動了機體內(nèi)源性適應機制[5]。譚成富等[25]研究發(fā)現(xiàn),病理情況下,心肌損傷模型兔的心肌纖維紊亂,部分溶解,小血管擴張,逆灸組的肌纖維大多正常,局灶性水腫減少,線粒體豐富,同時伴有HSP27、HSP70的表達增強,而HSP90則無明顯變化,表明逆灸對心肌細胞的保護作用與HSP27、HSP70相關(guān),此與王超等[26]的研究結(jié)論一致。此外,逆灸的心肌保護作用還與抑制炎癥相關(guān)蛋白有關(guān),包括TNF-a、血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、核因子-kB (NF-kB)、血清肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)[34-35]、內(nèi)縫隙連接蛋白(CX43)[36]等。以上研究表明,逆灸對心肌缺血再灌注損傷的預防保護作用與調(diào)控體內(nèi)的HSP27、HSP70表達相關(guān),抑制炎癥相關(guān)蛋白,從而保護心肌細胞。
大腦與心肌細胞類似,也存在一個缺血預適應現(xiàn)象,逆灸對腦缺血再灌注損傷的免疫抑制主要表現(xiàn)在調(diào)控抗凋亡蛋白,下調(diào)炎性因子和拮抗氧自由基等方面[33]。鄭仕平等[37-38]通過觀察通督調(diào)神針灸預處理對腦缺血再灌注大鼠的影響,認為逆灸可通過提高皮質(zhì)區(qū)微小RNA(miRNAs)、水通道蛋白-4(AQP4)的表達,降低AQP4相對表達量,誘導腦缺血耐受以減輕腦水腫。華金雙等[39]發(fā)現(xiàn)逆灸可誘導腦缺血大鼠海馬CA1區(qū)HSP70及其mRNA的表達高峰提前,從而保護缺血、低氧腦組織。
更年期綜合征是女性在絕經(jīng)前后,由于性激素變化而出現(xiàn)的一系列軀體及精神表現(xiàn),目前與逆灸相關(guān)的免疫機制研究主要以動物實驗為主。李曉泓等[40]研究發(fā)現(xiàn),更年期大鼠隨月齡的增長, HSP70及其mRNA表達存在先升后降的趨勢,血清IL-2含量降低,TNF-a含量先降后升,這可能與更年期免疫功能紊亂有關(guān),而逆灸促進HSP70及其基因的表達,啟動機體內(nèi)源性免疫機制,從而調(diào)節(jié)血清IL-2和TNF-a的含量,改善炎癥反應。鄭玲等[41]發(fā)現(xiàn)逆灸對更年期大鼠下丘腦不同核團HSP70及其基因的表達存在調(diào)節(jié)差異,旨在降低HPA軸興奮性因素(視上核),提高HPA軸抑制性因素(弓狀核)。孫志芳等[27]發(fā)現(xiàn)逆灸“關(guān)元”穴可使自然更年期大鼠的子宮HSP70表達增加,增強子宮的抗傷害能力。以上研究表明逆灸對更年期免疫紊亂主要通過影響HSP70及其基因的表達、下調(diào)細胞因子和調(diào)節(jié)體內(nèi)應激激素,以恢復免疫功能穩(wěn)定。
炎癥性腸病是一種慢性非特異性腸道炎性反應性疾病,逆灸可通過調(diào)節(jié)免疫信號通路和調(diào)節(jié)炎癥相關(guān)蛋白來降低腸道炎癥反應。王曉梅等[28,42]在觀察逆灸對健康大鼠結(jié)腸組織的全基因組表達譜研究發(fā)現(xiàn),逆灸“天樞”穴不損傷健康大鼠的結(jié)腸組織形態(tài),但會影響結(jié)腸組織的基因表達譜,參與調(diào)節(jié)TNF-a信號通路、NOD樣受體信號傳導途徑、抗原提呈、Toll樣受體信號傳導途徑等,從而調(diào)節(jié)免疫功能。馬喆等[43]發(fā)現(xiàn)隔藥灸預處理可降低NF-kBP65蛋白、IL-1b的表達,從而降低腸道炎癥反應。
慢性疲勞綜合征指以慢性疲勞為主要表現(xiàn),持續(xù)或反復發(fā)作6個月以上,同時伴有低熱、頭痛、咽喉痛、肌痛、神經(jīng)精神癥狀等非特異性癥狀的一組癥候群。目前認為其發(fā)病與應激引起的神經(jīng)-內(nèi)分泌改變有關(guān),以及相關(guān)炎癥因子參與了應激反應。逆灸對疲勞的免疫學影響主要是抑制慢性疲勞大鼠細胞因子的釋放,調(diào)控下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA軸),調(diào)節(jié)紊亂的免疫功能,發(fā)揮抗疲勞作用。華金雙等[23,39,44]發(fā)現(xiàn),逆灸可以降低慢性疲勞大鼠血清IL-1b、IL-6含量,調(diào)控HPA軸,降低血清ACTH、CORT、CRH的含量。高明等[13,30]研究發(fā)現(xiàn),逆灸可延緩大強度負荷引起的NK細胞和CD3﹢、CD4﹢、CD8﹢T淋巴細胞數(shù)量的下降,以及IFN-g和IL-4細胞因子mRNA的表達水平,維持Th1/Th2細胞因子的動態(tài)平衡。
逆灸是具有中醫(yī)學“治未病”思想的特色療法,隨著免疫學與分子生物學的深入發(fā)展,逆灸與免疫系統(tǒng)的研究已經(jīng)從最初的免疫器官、免疫細胞,逐步深入到免疫分子及其基因?qū)用?。在目前的研究資料中,逆灸與免疫系統(tǒng)的研究主要以觀察性研究為主,集中在觀察T淋巴細胞亞群、NK細胞數(shù)量和相關(guān)免疫因子含量的變化,觀察指標較為單一,對起效的相關(guān)免疫通路及所觀察指標變化后引起的下一步反應缺乏深入研究;其次,逆灸的不同形式、介入時機、灸量是否對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響也有待進一步發(fā)掘。綜合逆灸目前的研究現(xiàn)狀,筆者認為今后可在以下幾個方面加強相關(guān)的免疫機制研究:①擴大逆灸的疾病譜,探尋逆灸對不同疾病的免疫影響差異。②探尋逆灸的不同介入時機對疾病的影響。在目前的研究資料中,不同研究的逆灸介入時機各不相同,有研究發(fā)現(xiàn)逆灸起效存在延遲效應,尋找到逆灸的最佳介入時機可能會提高逆灸的臨床療效。③探尋逆灸的不同表現(xiàn)形式對免疫系統(tǒng)的影響。逆灸本質(zhì)上屬于灸法,而灸法又可分為艾條灸、艾炷灸、隔物灸、溫針灸等,不同灸法產(chǎn)生的效應機制不盡相同,故對免疫系統(tǒng)的影響也不同。④重視穴位特異性對逆灸療法免疫機理研究的影響。眾多研究證實穴位與非穴位存在差異,不同穴位之間也存在作用差異,故而穴位特異性也應看作逆灸起效的影響因素之一。綜上所述,逆灸療法對于疾病的防治具有獨特優(yōu)勢,近年來的研究也初步揭示了逆灸療法對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用,但由于研究數(shù)量較少,具體起效機制有待完善,期待更多大樣本高質(zhì)量的研究,為逆灸療法的應用提供更多更可靠的證據(jù)。
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Research Advances in Reverse Moxibustion and Immunologic System
,-,-.
,610075,
Reverse moxibustion is an important therapy for TCM's "preventive treatment of disease". It is now used mainly for cardiovascular diseases, chronic fatigue syndrome, and post-chemotherapy treatment of tumors and prevention of complications. Modern studies have found that reverse moxibustion can regulate a variety of immunocytes and immunosubstances. This article collects recent 10 years’ clinical and experimental studies on the regulation of immune function by reverse moxibustion at home and abroad, investigates the influence of reverse moxibustion on immunocytes and immunofactors, summarizes effect of reverse moxibustion on some diseases and analyzes the state of its development and the prospect of its study.
Moxibustion; Reverse moxibustion; Immune mechanism; Preventive treatment of disease; Review
R245.8
A
10.13460/j.issn.1005-0957.2020.02.0232
1005-0957(2020)02-0232-06
2019-03-25
彭維(1994—),女,2012級7年制碩士生
胡幼平(1955—),男,教授,博士生導師,Email:hypcdutcm@yeah.net