李 杰 楊利峰 趙德明 周向梅

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院國家動物海綿狀腦病實驗室,北京 100193)

皮膚由表皮及其附屬結(jié)構(gòu)——毛發(fā)、皮脂腺和特化的皮脂腺、大汗腺和特化的大汗腺、蹄甲以及由真皮和血管壁支撐的外分泌腺等組成。黑色素細(xì)胞存在于表皮基底細(xì)胞和毛囊球部的儲備細(xì)胞之間[1]。其中,正常的毛囊分為三部分:從表皮延伸到皮脂腺導(dǎo)管的漏斗區(qū);從皮脂腺導(dǎo)管到立毛肌的峽部;以及從立毛肌到球根的下段。外根鞘(ERS)與表皮相連,在漏斗區(qū)不能與表皮區(qū)分。在峽部和毛囊的下段,ERS的厚度不同,細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)弱嗜酸性,當(dāng)細(xì)胞向表皮表面成熟時,嗜酸性會增強(qiáng)。內(nèi)根鞘(IRS)位于ERS和毛干之間,細(xì)胞內(nèi)含有大量嗜酸性毛透明蛋白顆粒。毛囊球部由基底樣細(xì)胞和數(shù)量不等的黑色素組成,這些細(xì)胞具有有絲分裂活性[2]。

犬皮膚毛囊的腫瘤包括漏斗狀角化性棘皮瘤,外毛根鞘瘤,毛母細(xì)胞瘤,毛發(fā)上皮瘤,惡性毛發(fā)上皮瘤,毛母質(zhì)瘤,惡性毛母質(zhì)瘤[1,3-4]。通過統(tǒng)計分析實驗室2018—2019年收集到的犬皮膚毛囊腫物,共39例。分別是:1例漏斗狀角化性棘皮瘤,1例外毛根鞘瘤,28例毛母細(xì)胞瘤,4例毛發(fā)上皮瘤,1例惡性毛發(fā)上皮瘤,4例毛母質(zhì)瘤。

腫瘤是導(dǎo)致犬死亡的最主要原因之一[5]。隨著生活水平與醫(yī)療水平的提高,犬的壽命雖然延長,但腫瘤的發(fā)生率明顯增加[6-8]。對各類型犬起源于皮膚毛囊的腫瘤進(jìn)行了分類、歸納和整理,總結(jié)此類腫瘤組織病理學(xué)診斷特征,可以明確腫瘤病變性質(zhì),對腫瘤進(jìn)行分類及分級,為臨床治療提供理論依據(jù),指導(dǎo)治療方案的選擇。

1 材料與方法

1.1 組織及病例信息

共收集國家動物海綿狀腦病實驗室2018—2019年間診斷的犬皮膚毛囊的腫瘤病例39例及其詳細(xì)病例信息。

1.2 組織病理學(xué)檢查

將收集到的犬皮膚腫物進(jìn)行修塊、包埋、切片、染色等步驟制成病理組織切片,通過 OLYMPUS BX51及OLYMPUS DP72圖像采集軟件進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察,進(jìn)行組織病理學(xué)診斷。

1.3 分類

根據(jù)WHO和Tumors in Domestic Animals對犬皮膚毛囊腫瘤的分類依據(jù)進(jìn)行分類[1,3]。

2 結(jié)果

2.1 起源于皮膚毛囊的腫瘤病例

2.1.1 漏斗狀角化棘皮瘤(Infundibular keratinizing acanthoma)

共計1例:7歲雄性去勢雪納瑞犬,右前肢腫物已有幾年,最近生長較快,有破潰跡象。經(jīng)化驗(圖1),該犬患漏斗狀角化棘皮瘤。這是一種良性腫瘤,表現(xiàn)為向毛囊峽部和漏斗區(qū)的鱗狀上皮分化。犬是唯一受影響的物種,這種腫瘤在犬身上很常見,4～10歲發(fā)病率最高,沒有發(fā)現(xiàn)性別偏好。囊腔樣結(jié)構(gòu)內(nèi)襯成層的鱗狀角化上皮,胞質(zhì)內(nèi)可見明顯的角化透明顆粒。腫瘤從毛孔底部延伸到真皮和皮下。角蛋白中心聚集,常形成同心片狀。在角蛋白下方,腫瘤壁由大而淡染的角質(zhì)形成細(xì)胞組成,這些細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可能含有小的嗜堿性角質(zhì)透明顆粒。這些細(xì)胞有正常染色的細(xì)胞核,細(xì)胞邊界非常清楚,無細(xì)胞間橋。細(xì)胞間差異性不大,偶見有絲分裂象,腫物外層襯以雙層基底樣上皮細(xì)胞,胞核卵圓形,呈柵欄樣排列。纖維血管間質(zhì)包繞腫物,間質(zhì)內(nèi)偶見淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞。當(dāng)腫瘤破潰時,角蛋白釋放到周圍的真皮和皮下組織,引起化膿性肉芽腫和肉芽腫性炎癥反應(yīng)。

圖1 漏斗狀角化棘皮瘤Fig.1 In fundibular keratinizingacan thoma

2.1.2 外毛根鞘瘤(Tricholemmoma)

共計1例:9歲雄性未絕育金毛犬,皮下腫物,無包膜,無破潰,與周圍組織未粘連。經(jīng)化驗(圖2),該犬患外毛根鞘瘤。這是一種良性腫瘤,分化于毛囊外根鞘的峽部或下段。外毛根鞘瘤有兩種型:峽部型和下型。峽部型,顯示分化的峽部毛囊。通常與表皮有關(guān),腫瘤由上皮細(xì)胞呈索狀和小梁狀組成,它們在上皮細(xì)胞島之間伸展,呈中央型角化。腫瘤細(xì)胞體積小,有中等數(shù)量的淡嗜酸性細(xì)胞質(zhì)和小的嗜酸性細(xì)胞核,間質(zhì)中含有少量黏蛋白。下段型分化為毛囊下段,毛囊上皮細(xì)胞呈島狀,周圍有細(xì)小的纖維性膠原基質(zhì)。中央上皮細(xì)胞有中等數(shù)量的嗜酸性細(xì)胞質(zhì),而周圍細(xì)胞在增厚的嗜酸性基板上呈柵欄狀排列,胞質(zhì)豐富、蒼白、空泡化。這種腫瘤在臨床上容易完全切除,且復(fù)發(fā)的可能性很小,暫無有轉(zhuǎn)移病例的報道。

圖2 外毛根鞘瘤Fig.2 Tricholemmoma

2.1.3 毛母細(xì)胞瘤(Trichoblastoma)

共計28例,其中緞帶型11例,小梁型 1例,水母型1例,紡錘型1例,未分型14例。這是一種良性腫瘤,其來源于或顯示出毛囊發(fā)育中的毛囊毛芽的分化。

緞帶型(Ribbon type):2歲雄性未絕育金毛犬,生長速度快,有包膜,有破潰,無轉(zhuǎn)移。經(jīng)化驗(圖3),該犬患緞帶型毛母細(xì)胞瘤。細(xì)胞常呈柵欄狀,細(xì)胞核突出,胞質(zhì)少。細(xì)胞核可呈正常色或深色,核仁不明顯。少量細(xì)胞質(zhì)是嗜酸性,細(xì)胞邊界模糊。有絲分裂象的數(shù)目可能變化很大,一些腫瘤顯示明顯的有絲分裂活動。

圖3 緞帶型毛母細(xì)胞瘤Fig.3 Trichoblastom a-Ribbon type

小梁型(Trabecular type):雄性已絕育犬,右側(cè)肩部皮膚腫物。經(jīng)化驗(圖4),該犬患小梁型毛母細(xì)胞瘤。由多個腫瘤細(xì)胞小葉組成,周圍有小葉間膠原間質(zhì),小葉周圍的細(xì)胞呈明顯的柵欄狀,而小葉中心的細(xì)胞有卵形到伸長的細(xì)胞核和更豐富的嗜酸性細(xì)胞質(zhì)。

圖4 小梁型毛母細(xì)胞瘤Fig.4 Trichoblastom a-Trabecular type

水母型(Medusoid type):8歲雌性比熊犬,頸部背側(cè)前部偏右皮膚腫物,無游離性。經(jīng)化驗(圖5),該犬患水母型毛母細(xì)胞瘤。細(xì)胞索從細(xì)胞的中心聚集向外流動,形似水母,細(xì)胞具有更大量的嗜酸性細(xì)胞質(zhì)。

圖5 水母型毛母細(xì)胞瘤Fig.5 Trichob lastoma-M edusoid type

紡錘型(Spindle cell type):博美犬,頭部腫物。經(jīng)化驗(圖6),該犬患紡錘型毛母細(xì)胞瘤。腫瘤多分葉,小葉間質(zhì)少。腫瘤細(xì)胞的形態(tài)取決于細(xì)胞是縱向切割,呈梭形細(xì)胞形態(tài),或者是橫向切割,呈卵圓形。梭狀細(xì)胞通常相互交織。

圖6 紡錘型毛母細(xì)胞瘤Fig.6 Trichob lastom a-Spindle cell type

大多數(shù)毛母細(xì)胞瘤生長緩慢只有在手術(shù)切除不完全后才會復(fù)發(fā)。

2.1.4 毛發(fā)上皮瘤(Trichoepithelioma)

共計4例,其中1例為犬后背腫物。經(jīng)化驗(圖7),該犬患毛發(fā)上皮瘤。這是一種良性腫瘤,顯示出分化為毛囊的所有三個部分;可能存在不完全毛發(fā)生成。組織學(xué)外觀將根據(jù)與毛囊的三個區(qū)段的分化程度而變化。大多數(shù)腫瘤由基質(zhì)細(xì)胞包圍的上皮細(xì)胞島組成,膠原性的或有些黏液性的。在這些島的中心有角蛋白和影細(xì)胞的積累。外上皮細(xì)胞通常是異型性大(細(xì)胞形態(tài)不一),包括具有細(xì)胞核濃染和細(xì)胞質(zhì)很少的小細(xì)胞(類似于毛囊的未分化細(xì)胞),或具有輕度嗜酸性細(xì)胞質(zhì)和囊泡核的細(xì)胞(類似于外根鞘),或具有胞質(zhì)內(nèi)毛透明蛋白顆粒的細(xì)胞(如毛囊的內(nèi)根鞘中)。毛發(fā)上皮瘤的囊性病變可能有一個大囊腫或幾個較小的囊腫,囊腫內(nèi)充滿角質(zhì)碎片。細(xì)胞外周常有增厚的嗜酸性基底層,單層?xùn)艡跔罴?xì)胞,核深染,胞質(zhì)少。這些細(xì)胞向囊腫中心不規(guī)則排列,細(xì)胞核顏色較淡,胞質(zhì)嗜酸性適中。囊腫腔內(nèi)有影細(xì)胞、角質(zhì)物質(zhì)。較小的囊腫可從較大的中央囊腫延伸至周圍組織。毛發(fā)上皮瘤生長相對緩慢。大多數(shù)對完全的外科切除反應(yīng)良好,只有未完全切除的腫瘤才會復(fù)發(fā)。

圖7 毛發(fā)上皮瘤Fig.7 Trichoepithelioma

2.1.5 惡性毛發(fā)上皮瘤(Malignant trichoepithelioma)

共計1例:金毛犬,背部腫物,顏色呈褐色,質(zhì)地為質(zhì)中,無包膜,有破潰,無粘連,傷口一直不愈合。經(jīng)化驗(圖8),該犬患惡性毛發(fā)上皮瘤。這是一種惡性腫瘤,具有實質(zhì)和內(nèi)根鞘分化,可能轉(zhuǎn)移。這種罕見的皮膚腫瘤只在犬身上發(fā)現(xiàn)過。大多數(shù)病例發(fā)生在8～12歲,在已絕育的雌性中更為常見。腫瘤呈結(jié)節(jié)性浸潤,累及真皮及皮下組織,與其他侵襲性皮膚腫瘤難以區(qū)分。腫瘤細(xì)胞常與上覆的表皮或漏斗狀毛囊相聯(lián)系,并以嗜堿性細(xì)胞的索狀和島狀向真皮延伸。較大的腫瘤細(xì)胞島的中心是壞死的,有大量的影細(xì)胞聚集,顯示出明顯的角質(zhì)化。腫瘤細(xì)胞核深染,胞質(zhì)少呈嗜酸性?？赡艽嬖谠S多有絲分裂象,偶見細(xì)胞含有胞質(zhì)內(nèi)透明蛋白顆粒。對深層組織的侵犯通常會引起結(jié)締組織增生。腫瘤周圍可見淋巴細(xì)胞浸潤。腫瘤生長迅速,能夠轉(zhuǎn)移至局部淋巴結(jié)和肺。判斷這種轉(zhuǎn)移行為最重要的特征是血管中腫瘤細(xì)胞的存在。

圖8 惡性毛發(fā)上皮瘤Fig.8 Malignant trichoepithelioma

2.1.6 毛母質(zhì)瘤(Pilomatricoma)

共計4例,其中1例:4歲雄性未絕育比熊犬,臀部腫物。經(jīng)化驗(圖9),該犬患毛母質(zhì)瘤。為良性毛囊腫瘤,只顯示毛囊基質(zhì)的變異。該腫瘤最初被認(rèn)為是毛發(fā)間質(zhì)瘤或毛囊的上皮壞死和鈣化。小葉外周是嗜堿性細(xì)胞區(qū)域,細(xì)胞核小而濃染,且細(xì)胞質(zhì)較少,可能表現(xiàn)大量的有絲分裂活動。隨著邊緣區(qū)域嗜堿性細(xì)胞的不斷增生,原有的嗜堿性細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)含量不斷增加,細(xì)胞核消失,最后在細(xì)胞核的位置上僅有一個空白區(qū)域,周圍包裹著嗜酸性細(xì)胞質(zhì)和清晰的細(xì)胞邊界,這些細(xì)胞稱為影細(xì)胞。小葉中央的影細(xì)胞聚集并退化,并且隨著退化細(xì)胞的營養(yǎng)不良性鈣化,同時可見多核巨細(xì)胞和成纖維細(xì)胞浸潤。在腫瘤細(xì)胞質(zhì)或小葉旁基質(zhì)中的巨噬細(xì)胞內(nèi)可見黑色素。很容易通過手術(shù)切除,不易復(fù)發(fā)。

圖9 毛母質(zhì)瘤Fig.9 Pilomatricoma

2.2 毛囊腫瘤統(tǒng)計分析

從腫瘤類型來看,毛母細(xì)胞瘤發(fā)病率最高,共計28例,占比73%;其中緞帶型毛母細(xì)胞瘤共11例,占比28%,在毛母細(xì)胞瘤中較為多發(fā)。未分型的毛母細(xì)胞瘤因為鏡檢時分型特征不明顯,或者是呈現(xiàn)混合型表現(xiàn),在收集到的病例中占比也比較高,共計14例,占比36%(圖10)。從發(fā)生的腫瘤性質(zhì)來看,良性腫瘤發(fā)生率很高,良性腫瘤共計38例,占比97%;惡性腫瘤僅有1例,占比3%。

圖10 2018—2019年犬皮膚毛囊腫瘤各類型的腫瘤發(fā)生率Fig.10 Incidence of various types of tum ors in dog skin hair follicles du ring 2018—2019

對犬的年齡與皮膚毛囊的腫瘤之間關(guān)系統(tǒng)計分析,結(jié)果顯示,7歲～10歲發(fā)生此類腫瘤的犬13例,占比33%;4～6歲的犬 12例,占比31%;≥11歲的犬6例,占比15%。從表1、圖11可以看出,犬皮膚毛囊腫瘤的發(fā)病率隨著年齡的增長而有升高的趨勢,老年犬發(fā)病率較高。犬的性別與皮膚毛囊的腫瘤相關(guān)性統(tǒng)計分析結(jié)果顯示,雄性犬19例,占比49%;雌性犬15例,占比38%;沒有表現(xiàn)出明顯的性別偏好性(圖12)。

表1 2018—2019年犬年齡與皮膚毛囊腫瘤相關(guān)性統(tǒng)計Table 1 Correlation between age of dogs and skin hair follicles tum ors in 2018—2019

選取皮膚毛囊腫瘤發(fā)病排名前四的不同品種犬進(jìn)行統(tǒng)計分析,由表 2可知,前四名共 23例(23/39)。其中,金毛尋回犬(10/23)、比熊犬(7/23)、阿拉斯加犬(3/23),雪納瑞犬(3/23)發(fā)生皮膚毛囊腫瘤的概率偏高。對這四種犬做統(tǒng)計分析可知:其中,金毛尋回犬發(fā)病率最高,占比約44%;其次是比熊犬(7/39),占比約30%。

圖11 2018—2019年犬年齡與皮膚毛囊腫瘤相關(guān)性統(tǒng)計Fig.11 Cor relation between age of dogs and skin hair follicles tum ors in 2018—2019

圖12 2018—2019年犬性別與皮膚毛囊腫瘤相關(guān)性統(tǒng)計Fig.12 Cor relation between the gender of dogs and skin hair follicles tum ors in 2018—2019

表2 2018—2019年犬品種與皮膚毛囊腫瘤相關(guān)性統(tǒng)計Table 2 Correlation between breed of dogs and skin hair follicle tum ors in 2018—2019

3 討論

對從不同地方的寵物醫(yī)院收集到的犬皮膚毛囊腫瘤進(jìn)行統(tǒng)計分析,與文獻(xiàn)報道中的發(fā)現(xiàn)一致[1],良性的腫瘤更多發(fā),占起源于皮膚毛囊的腫瘤97%。其中,最常發(fā)的為毛母細(xì)胞瘤,占比73%,在犬中,最常見的為緞帶型毛母細(xì)胞瘤,占全部腫瘤28%[9]。犬皮膚毛囊的腫瘤發(fā)病率隨著年齡的增長而有升高的趨勢,老年犬發(fā)生此類腫瘤的概率較高;沒有表現(xiàn)出明顯的性別偏好性,與之前的文獻(xiàn)報道相似。各個腫瘤涉及犬品種廣泛,并未表現(xiàn)出明顯的品種偏好性,金毛尋回犬、比熊犬以及阿拉斯加犬發(fā)生此類腫瘤的概率偏高,可能與現(xiàn)代人飼養(yǎng)偏好相關(guān)。

綜上所述,通過收集到的39例腫瘤病例統(tǒng)計了犬皮膚毛囊腫瘤的組織學(xué)特征,發(fā)現(xiàn)良性腫瘤多發(fā),且臨床上切除完全是不易復(fù)發(fā)的。為今后犬皮膚毛囊的腫瘤的診斷與鑒別診斷提供參考。