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血型鑒定與交叉配血錯誤干擾及避免方法

2020-12-23 16:01戰(zhàn)振宇李曉陽
關(guān)鍵詞:懸液血型抗原

戰(zhàn)振宇,李曉陽

(吉林通化市第二人民醫(yī)院 檢驗科,吉林 通化)

0 引言

在臨床上,許多疾病的救治過程中,有一部分患者可能出現(xiàn)失血過多而發(fā)生休克的現(xiàn)象,出現(xiàn)這種現(xiàn)象的患者,往往需要進(jìn)行輸血治療[1]。在患者的輸血臨床治療中,血型鑒定和交叉配血都是十分重要的步驟,實驗進(jìn)行的情況會對進(jìn)行輸血治療患者的生命安全造成直接影響[2]。如,在受患者自身冷凝集素增加的影響,會對患者的ABO血型抗體的鑒定以及Rh血型抗體的鑒定產(chǎn)生影響,還有相關(guān)研究表明,患者體內(nèi)冷凝集素的增加會對血型鑒定與交叉配血實驗的結(jié)果造成較大的影響[3]??傊R床上對血型鑒定與交叉配血的干擾因素較多,應(yīng)采取對應(yīng)的措施避免干擾的發(fā)生,為患者的治療提供更加安全可靠的保障。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院檢查的受血者或供血者652例進(jìn)行分析,其中男性 304例,女性 348例,年齡為 20~82歲,平均(46.27±1.68)歲。本次實驗的所有參與者均無嚴(yán)重的心、腎等重要器質(zhì)病變,均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 試劑

ABO、RhO血型定性檢測卡(長春博迅生物試劑有限公司);抗人球蛋白檢測卡(長春博迅生物試劑有限公司)。

1.2.2 血型鑒定

血型的鑒定主要就是鑒定ABO血型,即為ABH血型抗原檢測。是根據(jù)各血型中所含抗原的不同進(jìn)行區(qū)分的,所謂的A型血則是指紅細(xì)胞中含有A抗原,B型則含有B抗原,而同時含有A抗原與B抗原的即為AB血型,若在血液紅細(xì)胞中這兩種抗原都未檢測出,而含H抗原,則血型為O型血。進(jìn)行血型鑒定主要是為臨床的輸血工作做準(zhǔn)備。在為患者進(jìn)行輸血前,應(yīng)當(dāng)選擇相同血型作為患者的供血者,在進(jìn)行交叉配血實驗證實后,才能為患者開展輸血操作,血型鑒定方法如下。

(1)將微柱凝膠試劑卡的六支凝膠管標(biāo)號;(2)將待檢者0.5%~0.8%紅細(xì)胞懸液分別加入第一至第四支微管中,每管50 μL;(3)將待檢者血清分別加入第五和第六支微管中,每管50 μL;(4)將已知A型和B型紅細(xì)胞0.5%~0.8%濃度懸液分別加入第五和第六微管中,每管50 μL;(5)即刻使用專用離心機(jī)離心 5 min,900 rpm 2 min,1500 rpm 3 min,取出用肉眼判定結(jié)果。

1.2.3 交叉配血

交叉配血是臨床輸血過程中的重要依據(jù)之一,在兩側(cè)血液不凝集的情況下即可為患者開展輸血工作。交叉配血實驗即將受血者的紅細(xì)胞與血清、供血者的血清及紅細(xì)胞進(jìn)行混合后,對兩組血液的混合進(jìn)行觀察,是否發(fā)生凝集反應(yīng)。若發(fā)生凝集現(xiàn)象,則不能為患者進(jìn)行輸血,若出現(xiàn)次側(cè)凝集現(xiàn)象,若患者需要立即進(jìn)行輸血,可以給予患者少量輸血。交叉配血實驗是以血型鑒定為基礎(chǔ),進(jìn)行交叉配血實驗,確認(rèn)受血者與供血者間的血型無不合抗原-抗體反應(yīng)的存在,為患者的輸血安全性提供重要保障。由于輸血會直接影響患者的生命安全,因此,只能在確認(rèn)受血者與供血者的血型一致后才可進(jìn)行交叉配血。此外,進(jìn)行交叉配血實驗不能僅僅采用鹽水介質(zhì)進(jìn)行配血,即使實驗室的條件較差也需在進(jìn)行膠體介質(zhì)配血后才能使不完全抗體存在的危害有所減少,以最大化地減少由輸血導(dǎo)致的不良反應(yīng)。交叉配血實驗的方式如下。

(1)將受血者與供血者的紅細(xì)胞和血清(或血漿)分離。(2)生理鹽水分別將受血者血清和供血者紅細(xì)胞配成0.5%~0.8%紅細(xì)胞懸液。(3)將供血者的紅細(xì)胞懸液50 μL與受血者血清(或血漿)50 μL加入主側(cè)凝膠中。受血者紅細(xì)胞懸液50 μL與供血者血清(或血漿)50 μL加入次側(cè)凝膠管中。(4)將檢測卡置于37 ℃孵育器中15 min。即刻使用專用離心機(jī)離心 5 min(900 rpm 2 min,1500 rpm 3 min),取出,肉眼判定結(jié)果。

2 結(jié)果

對參與本次研究的所有調(diào)查者進(jìn)行交叉配血及血型鑒定,僅出現(xiàn)了2例干擾事件,對出現(xiàn)的這2例錯誤干擾問題進(jìn)行分析探討,并針對這種情況,提出了相應(yīng)的對策。發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致錯誤干擾的主要因素包括了假陰性反應(yīng)、自身抗體免疫增高、假陽性反應(yīng)、冷自身抗體增高及責(zé)任性錯誤等方面。

3 討論

3.1 假陽性反應(yīng)

①形成緡錢狀。當(dāng)血清在37 ℃的室溫下進(jìn)行水浴時,可能導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集情況發(fā)生,常見于巨球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤等常規(guī)病理血清中??赏ㄟ^洗滌紅細(xì)胞的方式來克服這種情況。在完成洗滌后,滴入1滴混合,應(yīng)用高倍鏡觀察結(jié)果[4]。②低溫凝集。這種情況是對冷凝集素效價過高導(dǎo)致的,可通過采用溫度為37 ℃的生理鹽水將紅細(xì)胞洗滌的方式排除該干擾因素[5]。③類B抗原。若患者本身受到了革蘭氏陰性桿菌的感染,就會引發(fā)抗紅細(xì)胞發(fā)生凝集??赏ㄟ^采用標(biāo)準(zhǔn)的紅細(xì)胞標(biāo)本對血清中的抗體、唾液型物質(zhì)進(jìn)行測量。④T凝集。這種凝集反應(yīng)是血清中抗體受到細(xì)菌污染而導(dǎo)致的,針對這種情況應(yīng)當(dāng)對標(biāo)準(zhǔn)血清中的T冷凝特異性感染進(jìn)行定期檢查,檢查紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象及污染情況,避免標(biāo)準(zhǔn)血清受到污染。解決措施如下:選擇AB血型的血清樣本與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞樣本進(jìn)行凝集試驗,對凝集現(xiàn)象進(jìn)行證實[6]。采用標(biāo)準(zhǔn)的紅細(xì)胞抗體血清,為患者開展唾液吸收抑制試驗或紅細(xì)胞的吸收釋放試驗,最后在為患者輸血時,將O型血輸入。⑤患者抗體因素。在本身患有免疫性疾病的患者血清及紅細(xì)胞中,有著自身抗體的存在,直接對患者紅細(xì)胞產(chǎn)生影響,導(dǎo)致凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)??刹捎脺厮礈旒t血細(xì)胞的方式克服這種情況,做抗球蛋白血[7]。

3.2 假陰性

假陰性是應(yīng)當(dāng)發(fā)生凝集現(xiàn)象而未發(fā)生的情況。①弱抗原性。在老年人或新生兒的紅細(xì)胞、標(biāo)本放置時間過長容易導(dǎo)致該種情況的發(fā)生。困擾通過堅持正反定型的方式避免差錯的發(fā)生。②血清效價標(biāo)準(zhǔn)過低,可能是采集的標(biāo)本時間過長或儲存方式不當(dāng)。應(yīng)采用有效價格血清,將正反定型流程進(jìn)行完善。③缺乏合適的紅細(xì)胞懸液濃度。應(yīng)在配置懸液時注意生理鹽水與標(biāo)本的比例,直至調(diào)配至標(biāo)準(zhǔn)濃度。④混合物不符標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)將實驗流程進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)范[8]。

3.3 操作者因素

導(dǎo)致錯誤干擾情況發(fā)生的主要原因之一即為操作者缺乏較強的責(zé)任心。如在操作過程中忘記加入血清或抗體、離心速度掌握不合適、試劑選擇錯誤等。根據(jù)這種情況,應(yīng)當(dāng)加強對相關(guān)操作者綜合素質(zhì)的培養(yǎng),提升其責(zé)任心,嚴(yán)格規(guī)范其操作標(biāo)準(zhǔn),以提升患者輸血的安全性。

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