曾 暉，林 玲，馬 馳，袁粒星，何 賢

（四川大學(xué)華西第二醫(yī)院科技部出生缺陷與相關(guān)婦兒疾病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610041）

隨著醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的快速發(fā)展，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)涉及細(xì)分的科研領(lǐng)域也更加廣泛，如新藥測(cè)試、疾病模型建立、腫瘤研究和遺傳學(xué)研究等[1-2]。為了保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和有效性，各科研單位開始廣泛使用無特定病原體SPF(Specific Pathogen Free,SPF)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，并為SPF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配置屏障設(shè)施，對(duì)人、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、飼料、飲水、墊料、空氣及其他物品都要進(jìn)行嚴(yán)格的微生物控制[3]。

然而，屏障設(shè)施內(nèi)飼養(yǎng)的SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存在被微生物污染的可能，管理者應(yīng)當(dāng)從硬件設(shè)施、實(shí)驗(yàn)人員及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面入手進(jìn)行微生物控制。我們?cè)谌粘９芾砉ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)，當(dāng)硬件設(shè)施穩(wěn)定運(yùn)行時(shí)，控制動(dòng)物中心的生物安全風(fēng)險(xiǎn)在于監(jiān)管入室動(dòng)物和規(guī)范人員操作。本文從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和人員管理兩方面入手，分析討論了微生物感染途徑，并通過實(shí)施相應(yīng)的管理措施降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染風(fēng)險(xiǎn)。

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理常見的生物安全風(fēng)險(xiǎn)

1.1 使用來源復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

由于國內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位環(huán)境條件參差不齊，即使有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證，也存在售賣實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物等級(jí)不一致的現(xiàn)象。同時(shí)，在運(yùn)輸途中如果動(dòng)物運(yùn)輸箱破損，也會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物等級(jí)不合格[4]。另外，未經(jīng)檢測(cè)直接接收從其他動(dòng)物中心轉(zhuǎn)入的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，同樣存在生物污染風(fēng)險(xiǎn)。如果屏障設(shè)施接收了這類動(dòng)物，就存在被病原微生物感染已飼養(yǎng)動(dòng)物的風(fēng)險(xiǎn)。一旦入室的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攜帶人獸共患病和烈性動(dòng)物傳染病的病原微生物，極易造成生物安全事故。

1.2 實(shí)驗(yàn)人員操作不規(guī)范

學(xué)生在屏障設(shè)施內(nèi)做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，普遍缺乏規(guī)范化操作意識(shí)，表現(xiàn)為不戴手套、不戴口罩、半敞開隔離服、攜帶未消毒的手機(jī)進(jìn)入潔凈區(qū)，以及人員和物品違規(guī)從緩沖區(qū)返回潔凈區(qū)，進(jìn)出房間沒有隨手關(guān)門導(dǎo)致房間壓差異常等。

當(dāng)實(shí)驗(yàn)人員攜帶微生物病原體時(shí)，這些違規(guī)操作行為容易導(dǎo)致病原微生物感染動(dòng)物實(shí)驗(yàn)員。

1.3 屏障設(shè)施內(nèi)檢測(cè)出病原體

按照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)控制要求，應(yīng)當(dāng)定期對(duì)哨兵鼠進(jìn)行檢疫，排除人獸共患病的病原體和烈性動(dòng)物傳染病的病原體。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物高密度規(guī)模化集中飼養(yǎng)的現(xiàn)象非常普遍，一旦外來傳染性強(qiáng)的病原微生物侵入飼養(yǎng)間，交叉感染現(xiàn)象會(huì)很快發(fā)生，動(dòng)物疫情將以極快速度暴發(fā)。

2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全問題解決對(duì)策

2.1 采取嚴(yán)格的動(dòng)物準(zhǔn)入制度

實(shí)行嚴(yán)格的準(zhǔn)入制度，拒絕接收無實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證的動(dòng)物。新購的動(dòng)物實(shí)行廠家白名單管理制度，定期送檢生產(chǎn)廠家的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并做記錄，篩選出實(shí)際微生物等級(jí)達(dá)標(biāo)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)廠家并建立白名單，拒絕接收白名單以外生產(chǎn)廠家的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物送達(dá)時(shí)，要及時(shí)檢查外包裝，尤其要嚴(yán)格查看通氣膜的完整情況，拒絕接收運(yùn)輸箱外包裝破損的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。如果準(zhǔn)備接收其他動(dòng)物中心的動(dòng)物，必須抽檢該批動(dòng)物。當(dāng)出現(xiàn)微生物等級(jí)不達(dá)標(biāo)的情況時(shí)，應(yīng)當(dāng)首先對(duì)該批動(dòng)物做凈化處理，再將凈化成功的子代轉(zhuǎn)入。

2.2 規(guī)范動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作

通過實(shí)驗(yàn)人員入室培訓(xùn)及考試，可初步建立實(shí)驗(yàn)人員基本的微生物控制規(guī)范操作意識(shí)。在培訓(xùn)中必須明確指出進(jìn)入動(dòng)物中心的實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是潛在傳染源，只有同時(shí)規(guī)范實(shí)驗(yàn)人員操作和控制實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)才能避免生物安全問題產(chǎn)生。

針對(duì)屏障系統(tǒng)內(nèi)實(shí)驗(yàn)人員出現(xiàn)違規(guī)操作，如不正確穿戴防護(hù)服、不按規(guī)定流向進(jìn)入飼養(yǎng)間以及攜帶違規(guī)物品等情況，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，立即在管理群內(nèi)通報(bào)批評(píng)，并責(zé)令違規(guī)人員整改并寫情況說明，由該課題組負(fù)責(zé)人簽字后交由動(dòng)物中心管理人員備案。嚴(yán)格執(zhí)行監(jiān)察管理制度可杜絕違規(guī)情況發(fā)生，能夠有效避免實(shí)驗(yàn)人員把病原微生物帶入飼養(yǎng)區(qū)。

2.3 已出現(xiàn)微生物污染的處理方案

當(dāng)屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)間的哨兵鼠檢測(cè)出無特定病原體動(dòng)物規(guī)定以外的病原時(shí)，首先應(yīng)當(dāng)及時(shí)對(duì)該房間隔離，并排查該房間與周圍房間的動(dòng)物進(jìn)出情況。其次是通過動(dòng)物送檢確定該病原體的感染范圍，對(duì)確定污染的房間進(jìn)行徹底消毒，并全部淘汰該房間內(nèi)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。淘汰的動(dòng)物尸體及一般廢棄物應(yīng)當(dāng)按照規(guī)范存放在專用冰箱，交由無害化處置單位進(jìn)行動(dòng)物尸體回收處理，避免造成二次污染。

3 結(jié)束語

屏障設(shè)施的新風(fēng)系統(tǒng)在正常運(yùn)行的情況下，病原感染設(shè)施內(nèi)動(dòng)物的途徑主要有兩條：一條是通過入室動(dòng)物攜帶病原進(jìn)入屏障系統(tǒng)，另一條是通過實(shí)驗(yàn)人員攜帶病原進(jìn)入屏障系統(tǒng)。通過嚴(yán)格控制這兩條傳播途徑，可以有效降低病原的傳播風(fēng)險(xiǎn)，從而保障屏障設(shè)施內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物等級(jí)。