李生濤，孫勝利，曾 曉，杜 軍，李夢媛，馬 卓，劉耀東，胡 云，魏 沛

（1.河南省南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，473000；2.河南省南陽市畜牧行業(yè)協(xié)會，473000）

豬腹瀉病是生豬養(yǎng)殖中最常見的疾病之一。主要原因是病原微生物的感染。引起病毒性腹瀉的病毒包括豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PoRV）等，也包括近年剛剛發(fā)現(xiàn)的德爾塔冠狀病毒（PDCoV），以及流行較久的偽狂犬病毒（PRV）、豬瘟病毒、腺病毒、皰疹病毒等。PEDV 仍是導(dǎo)致仔豬發(fā)生病毒性腹瀉最主要的原因。

近年來，隨著對PEDV 發(fā)病機(jī)理研究的深入，大量的文獻(xiàn)指出PED 的防控主要依賴于機(jī)體黏膜免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的特異性sIgA。如何有效刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性sIgA 成為了豬流行性腹瀉疫苗研發(fā)的核心問題。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)豬場

唐河縣豬場1（1000 頭母豬）、唐河縣豬場2（1200 頭母豬）、湯陰縣某豬場（3000 頭母豬）、上蔡縣豬場1（400 頭母豬）、上蔡縣豬場2（400 頭母豬）、西平縣某豬場（500 頭母豬）。

1.2 疫苗

胃腸炎- 流行性腹瀉二聯(lián)苗（商品名“海瀉安”，四川海林格生物制藥有限公司生產(chǎn)）。

2 方法

2.1 生物安全

對于豬場設(shè)施尤其是定位欄和產(chǎn)床要及時(shí)消毒滅菌，發(fā)現(xiàn)有腹瀉糞便及時(shí)清理；母豬下產(chǎn)床后在條件允許的情況下進(jìn)行空欄3～7d，并徹底消毒。

2.2 免疫方案探究

2.2.1 簡單實(shí)用免疫方案：母豬普免+跟胎免疫

表1 “簡單實(shí)用”免疫方案

2.2.2 三打兩噴免疫方案：黏膜免疫＋系統(tǒng)免疫

三打：肌肉注射“海瀉安”控制并降低母豬體內(nèi)病毒與外排病毒；兩噴：噴鼻通過激活鼻腔黏膜，進(jìn)而激活機(jī)體黏膜免疫系統(tǒng)，刺激母豬乳汁中產(chǎn)生高水平的sIgA，使仔豬獲得強(qiáng)力保護(hù)。肌注型每頭份4ml，分別于母豬產(chǎn)前4 周、3 周各注射1 頭份，目的：凈化母豬帶毒，降低仔豬感染率和發(fā)病率；黏膜免疫型（噴鼻型）適用于臨產(chǎn)母豬和初生仔豬。母豬在產(chǎn)前2～7d 保定后每個(gè)鼻孔各噴1ml，隔8～24 小時(shí)后再各噴鼻1ml；仔豬出生當(dāng)天（越早越好，最好在出生后10 小時(shí)內(nèi)），每個(gè)鼻孔各噴0.5ml。

黏膜免疫可促使乳腺黏膜產(chǎn)生sIgA，該類型抗體隨乳汁進(jìn)入到仔豬腸道而不被吸收，停留在腸道表面直接中和外來病毒；母豬系統(tǒng)免疫后產(chǎn)生的免疫球蛋白和免疫因子會隨乳汁被仔豬吸收入血液促進(jìn)仔豬的系統(tǒng)免疫，有了雙重保護(hù)仔豬的發(fā)病率才會降低或不發(fā)病。

2.3 降低豬場排毒

2.3.1 進(jìn)行后備母豬的馴化，使后備母豬盡早自然感染該病毒，以免后期引起群體性的“排毒風(fēng)暴”導(dǎo)致大面積腹瀉發(fā)生。

2.3.2 進(jìn)行跟胎免疫注射，使母豬免疫系統(tǒng)保持較為強(qiáng)烈的免疫記憶。

3 結(jié)果與分析

“簡單實(shí)用” 免疫方案效果：95%以上的豬場都取得了不錯(cuò)的效果，即便在氣溫突然大幅度降低時(shí)，也只是零星出現(xiàn)腹瀉，且死亡率一般僅為5%左右；由于簡便易行，疫苗成本很低，所以該方案推廣兩年來，得到了近50 家規(guī)?；i場的認(rèn)可和使用。

“三打兩噴” 免疫方案效果：95%的病原通過消化道、呼吸道和生殖道黏膜進(jìn)入動物體內(nèi)，如果能切斷這些傳播途徑，就能有效控制這些傳染病的發(fā)生。黏膜免疫就是通過消化道、呼吸道和生殖道等黏膜處建立起堅(jiān)強(qiáng)的免疫力來抵抗病原微生物的入侵。黏膜免疫相比注射免疫操作方便，飲水或噴霧免疫更適合集約化生產(chǎn)，還可以避免注射刺激引起的應(yīng)激和生產(chǎn)力下降，節(jié)省人力物力成本。而且不受母源抗體影響，吸收快，誘導(dǎo)免疫反應(yīng)迅速。而且共同黏膜免疫網(wǎng)絡(luò)可以使一個(gè)部位黏膜反應(yīng)（誘導(dǎo)位點(diǎn)）擴(kuò)散到其他黏膜部位（效應(yīng)位點(diǎn)），比如鼻腔免疫，消化道、生殖道和乳腺都能產(chǎn)生抗體。“三打兩噴”免疫方案，綜合肌注和黏膜免疫的優(yōu)勢，把它們有機(jī)結(jié)合起來，效果顯著。

4 討論與小結(jié)

4.1 疫苗的選擇

首先，選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)的疫苗，絕不使用“三無”產(chǎn)品，因其疫苗制備工藝簡單、含量不確定且易攜帶其他病原體，存在極大的風(fēng)險(xiǎn)。其次，選擇適合豬場實(shí)際情況的疫苗，一般而言，死苗安全性高，免疫效果差于活苗，一般需要多次免疫達(dá)到保護(hù)的作用；活苗，可引起動物機(jī)體的持續(xù)感染，免疫效果好，但是因?yàn)镻EDV 是一種RNA 病毒，變異程度大，速度快，因此安全性方面有待考慮。近來，通過佐劑的研發(fā)，部分滅活疫苗的免疫效果有了顯著的提升。因此，對于未發(fā)生過流行性腹瀉或者腹瀉癥狀平穩(wěn)的豬場，建議選擇具有激發(fā)高免疫應(yīng)答能力的滅活疫苗。

4.2 疫苗的使用

4.2.1 使用效果確實(shí)的疫苗，并且不隨意更換

豬流行性腹瀉疫苗種類較多，品牌多，養(yǎng)殖戶的選擇也多。但是對于一個(gè)豬場而言，一定要選擇效果確實(shí)的疫苗。一旦穩(wěn)定使用后，就不要隨意更換。一方面，即使是同一種類不同品牌的腹瀉苗，在生產(chǎn)工藝等方面的差異也會導(dǎo)致產(chǎn)品的效果和免疫程序的不一致。頻繁的更換會導(dǎo)致豬場免疫程序的混亂，出現(xiàn)免疫的空窗期。另一方面，PEDV 是一個(gè)極易發(fā)生變異的病毒，不同種類的活疫苗在同一個(gè)豬場使用也會增大毒株變異重組的概率，從而威脅豬場的腹瀉防控。

4.2.2 做好全年免疫

從目前的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果來看，豬流行性腹瀉的季節(jié)性特點(diǎn)在逐步減弱，腹瀉疫病在5～9月份也呈常態(tài)化發(fā)病，因此對PED 的防控應(yīng)該做好全年免疫，而不僅僅只是在冬春兩季。

4.2.3 重視母豬、育肥豬的免疫

母豬、育肥豬等大齡豬對PEDV 的敏感性較弱，感染后常不表現(xiàn)出典型的臨床癥狀，而呈現(xiàn)隱形帶毒的狀態(tài)，是PEDV 重要的傳染源。因此，在實(shí)際的PED 防控工作中，不能僅根據(jù)母豬、育肥豬的狀態(tài)來判斷豬場PED 的流行情況，錯(cuò)誤的認(rèn)為豬場不存在PEDV 的感染，而需重視母豬和育肥豬的免疫防控，減少其對外排毒的可能，降低環(huán)境中野毒，減少仔豬感染野毒的壓力。

4.2.4 不隨意更改合理的免疫程序

疫苗使用效果的好壞不僅僅取決于疫苗本身，還與它的免疫程序息息相關(guān)。對于PEDV 而言，其自上世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)以來僅僅40 多年歷史，其致病機(jī)理、疫苗防控等仍處于研究階段。因此，對PED 疫苗的使用更要遵循適合豬場的免疫程序或者已經(jīng)驗(yàn)證確實(shí)可行的免疫程序。本課題已驗(yàn)證的“簡單實(shí)用”免疫方案和“三打兩噴”免疫方案，都有很強(qiáng)的可操作性和推廣性。