★ 陳培武 蘇楊青 李小鳳（華潤江中制藥集團(tuán)有限責(zé)任公司 南昌 330004）

冬蟲夏草Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.為麥角菌科真菌寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座和幼蟲尸體的干燥復(fù)合體，具有補(bǔ)腎益肺、止血化痰的功效［1］。我國冬蟲夏草主要分布于西藏、青海、四川、云南、甘肅等省區(qū)海拔3 600～5 200 m 的局部高山草甸地帶［2］。研究發(fā)現(xiàn)冬蟲夏草的主要成分有蟲草多糖、蟲草酸、蟲草素、脂肪、氨基酸、生物堿（腺苷、脲苷）和30 余種微量元素［3-6］。冬蟲夏草在國內(nèi)外被視為珍品，因價(jià)格昂貴，素有“黃金草”之稱。但因市場需求量巨大，野生資源匱乏，蟲草市場始終呈現(xiàn)供不應(yīng)求的現(xiàn)象，而且過度的開發(fā)也使高原地區(qū)的生態(tài)遭到嚴(yán)重破壞，加劇了野生蟲草資源萎縮的危險(xiǎn)。近年來，在政府的大力扶持下，人工繁育的冬蟲夏草品種相繼問世，而人工繁育品種與野生品種的質(zhì)量差異也備受關(guān)注。本文結(jié)合《中國藥典》中規(guī)定的冬蟲夏草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，從性狀、有效成分含量測定、重金屬及有害物質(zhì)檢查三個(gè)方面，對(duì)人工繁育的冬蟲夏草及來自青海、四川、西藏加查、西藏江達(dá)4 個(gè)產(chǎn)地的野生蟲草的質(zhì)量進(jìn)行對(duì)比研究。

1 儀器與材料

1.1 儀器 液相色譜儀（美國安捷倫公司）；A3 原子吸收分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司）；Agilent6890N，ECD 檢測器（美國安捷倫公司）。

1.2 試藥 腺苷對(duì)照品（110879-200202）、脲苷（110887-201803）對(duì)照品、重金屬、農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)品均購于中國藥品生物制品檢定院；乙腈為色譜純，水為超純水，其它試劑均為分析純；

1.3 藥材 人工繁育冬蟲夏草（西藏）來源于亳州中信中藥飲片廠，人工繁育冬蟲夏草（湖北）1和人工繁育冬蟲夏草（湖北）2 來源于江西樟樹天齊堂中藥飲片有限公司，青海冬蟲夏草購于益豐大藥房，四川冬蟲夏草購于江西省中醫(yī)院藥劑科，西藏加查和西藏江達(dá)冬蟲夏草來源于河北省安國藥材市場。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀檢查 對(duì)人工繁育及野生冬蟲夏草的性狀進(jìn)行檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：人工蟲草的直徑約0.4～0.6 cm，表面顏色呈深黃色，與來自青海的野生蟲草相比，除直徑較小、顏色略淺外，其他各項(xiàng)性狀無明顯差異。人工繁育冬蟲夏草與野生品種的性狀均符合藥典規(guī)定。

2.2 腺苷、脲苷含量的測定

2.2.1 供試品溶液的制備 分別取人工繁育冬蟲夏草、野生冬蟲夏草粉末各0.2 g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入90 %甲醇10 mL，稱定重量，加熱回流30 min，放冷，用90 %甲醇補(bǔ)重，濾過，取續(xù)濾液即得。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 稱取腺苷對(duì)照品適量，加90%甲醇制成每毫升含腺苷0.4108 mg 的溶液。另稱取脲苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每毫升含0.4202 mg 的溶液。

2.2.3 色譜條件 C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流動(dòng)相為乙腈—水（4∶96）；柱溫為35 ℃；檢測波長260 nm；流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣量20 μL。

2.2.4 測定結(jié)果 人工繁育冬蟲夏草腺苷含量與青海野生冬蟲夏草無明顯差異，略低于來自四川、西藏加查和西藏江達(dá)的野生蟲草，但所檢人工繁育品種和野生蟲草均符合藥典規(guī)定的冬蟲夏草中腺苷含量的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；而蟲草中另一種主要的生物堿成分脲苷的含量在人工繁育品種和野生品種間無明顯差異。結(jié)果見表1。

表1 腺苷、脲苷含量測定結(jié)果 %

2.3 重金屬檢測

2.3.1 檢測方法 根據(jù)《中國藥典》（2015 年版）四部通則2321 鉛、鎘、砷、汞、銅中B 法進(jìn)行樣品處理及檢測［7］。

2.3.3 檢測結(jié)果 如表2 所示，人工繁育冬蟲夏草的重金屬砷（As）含量為0.4 mg/kg，符合藥典規(guī)定，而來自青海、四川、西藏加查和西藏江達(dá)的野生冬蟲夏草As 檢測含量均超出藥典標(biāo)準(zhǔn)2.0 mg/kg；人工繁殖冬蟲夏草重金屬Pb、Cu 均低于青海野生冬蟲夏草；西藏加查草重金屬Pb、Cu 低于人工繁殖冬蟲夏草；人工繁殖冬蟲夏草重金屬Hg、Cd 與四個(gè)不同產(chǎn)地的野生蟲草無明顯差異。

表2 冬蟲夏草重金屬檢驗(yàn)結(jié)果 mg/kg

2.4 農(nóng)藥殘留檢測

2.4.1 檢測方法 根據(jù)《中國藥典》（2015 年版）四部通則2341 農(nóng)藥殘留量測定法第一法進(jìn)行9 種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量測定法樣品處理及檢測。

2.4.2 檢測結(jié)果 人工繁育冬蟲夏草和來自青海、四川、西藏加查、西藏江達(dá)的野生蟲草中均未檢出六六六、滴滴涕、五氯硝基苯，因此農(nóng)藥殘留項(xiàng)均符合藥典規(guī)定

3 討論

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，人工繁育冬蟲夏草與來自青海、四川、西藏等地的野生冬蟲夏草在外觀性狀、有效成分含量及農(nóng)藥殘留檢測方面并無明顯差異，均符合藥典規(guī)定；而人工繁育冬蟲夏草重金屬Pb 和Cu 的檢測結(jié)果明顯低于來自青海的野生蟲草，且人工蟲草重金屬As 的檢測結(jié)果更是遠(yuǎn)低于來自4 個(gè)產(chǎn)地的野生品蟲草。查閱文獻(xiàn)也有人工培育冬蟲夏草重金屬檢驗(yàn)結(jié)果優(yōu)于野生冬蟲夏草的論述［8］。

實(shí)驗(yàn)表明，人工繁育的冬蟲夏草與野生冬蟲夏草按藥典標(biāo)準(zhǔn)檢測性狀、有效成分含量和農(nóng)藥殘留無明顯質(zhì)量差異，同時(shí)人工繁育的冬蟲夏草可以更有效的控制重金屬等危害物質(zhì)的含量，提高冬蟲夏草使用的安全性。另一方面，目前野生冬蟲夏草為珍貴稀缺藥材，人工繁育品的出現(xiàn)可以補(bǔ)足市場空缺，同時(shí)避免過度采挖蟲草而造成高原生態(tài)環(huán)境的破壞。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果為使用人對(duì)冬蟲夏草購買提供參考、為冬蟲夏草有害物質(zhì)控制提供方向，同時(shí)也為進(jìn)一步對(duì)人工繁育蟲草的質(zhì)量研究做了鋪墊。由于本次實(shí)驗(yàn)樣品較少，今后還將進(jìn)一步對(duì)人工繁育冬蟲夏草進(jìn)行深入研究。