王文利，張玉仙，劉明榮，李 朋，張 磊，張海濤

(1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院畜牧獸醫(yī)系，北京 房山 102442 ; 2.北京市全心全意連鎖動物醫(yī)院，北京 豐臺 100070)

腎臟疾病是犬、貓致死性的重要疾病之一，將近1/3的貓和1/10的犬正經(jīng)受慢性腎臟疾病的折磨[1]。盡管有重癥監(jiān)護治療，急性腎損傷還會有很高的死亡率，與急性腎損傷(AKI)相反，慢性腎損傷(CKI)早期癥狀不明顯，而且損傷是不可逆的[2-3]，故早期診斷是有效治療干預(yù)的前提。傳統(tǒng)評估腎功能的指標(biāo)包括尿素氮(Urea)、肌酐(Crea)，其中Crea值的升高必須在腎臟功能下降至25%或以下時才能檢測到[4-5]，無法對患腎病的動物進行早期診斷，從而延誤了治療最佳時機，故尋找動物早期腎損傷的檢測指標(biāo)迫在眉睫。

對稱性二甲基精氨酸(Symmetric dimethylarginine,SDMA)是一種新近發(fā)現(xiàn)的腎臟功能生物標(biāo)志物，SDMA是全身有核細胞的代謝產(chǎn)物，主要通過腎臟排泄來消除，因此，它是腎小球濾過率(GFR)的內(nèi)源性標(biāo)志物。國際腎臟疾病學(xué)會(Internal renal interest society，IRIS)現(xiàn)已將SDMA列入慢性腎病分級指南中，結(jié)合Crea檢測一起對腎病進行分級[6-7]。不同于Crea，SDMA不受到動物肌肉質(zhì)量的影響[8-9]。本文就SDMA與貓的急、慢性腎功能損傷相關(guān)性進行試驗，將SDMA與傳統(tǒng)指標(biāo)進行比較，為證明SDMA作為標(biāo)志物早期發(fā)現(xiàn)動物腎臟功能損傷提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 寵物貓，來源于北京地區(qū)38家動物醫(yī)院,根據(jù)病史、臨床癥狀、全血計數(shù)(CBC)、血清生化檢測、血氣檢查、尿液分析以及退行性腎臟形態(tài)改變和腎臟大小的X線檢測結(jié)果，從樣本中選取49只各項檢查指標(biāo)完全正常的樣本為健康組；選取20只各項檢查指標(biāo)符合急性腎功能衰竭(ARF)的樣本為ARF組；選取20只各項檢查指標(biāo)符合慢性腎功能衰竭(CRF)的樣本為CRF組。

1.2 主要試劑與儀器 SDMA檢測試劑盒、Urea試劑盒、Crea試劑盒，購自美國愛德士生物科技有限公司；使用IDEXX Vet Test 8008生化儀進行檢測。

1.3 主要檢測指標(biāo)和方法 (1)血清中SDMA水平檢測：對每個樣本進行靜脈采血2 mL，收集血清。采用ELISA 法測定血清中SDMA濃度。SDMA值>14 μg/dL為陽性。(2)血清中Urea、Crea檢測：對每個樣本進行靜脈采血2 mL，收集血清。采用尿素酶-谷氨酸脫氫酶法檢測血清中Urea含量；采用肌氨酸氧化酶法檢測血清中Crea含量。血清中Urea正常范圍值為5.7～12.9 mmol/L (16～36 mg/dL)；血清中Crea正常范圍值為71～212 μmol/L (0.8～2.4 mg/dL)，然后計算SDMA/ Crea比值。

1.4 數(shù)據(jù)分析 采用Prism 8軟件進行統(tǒng)計分析。統(tǒng)計分析結(jié)果以中位數(shù)和范圍值表示。采用D-Agostino 和Pearson綜合正態(tài)性檢驗分布。由于部分數(shù)據(jù)非正態(tài)分布，采用非參數(shù)檢驗進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 健康組、ARF組和CRF組病理資料統(tǒng)計情況，見表1。

表1 健康組、ARF組和CRF組樣本病理數(shù)據(jù)統(tǒng)計

從血清中Urea來看，ARF組為23.52 mmol/L(11.7～46.4 mmol/L)，CRF組為12.75 mmol/L(5.2～30.3 mmol/L)，2組相比差異顯著(P<0.05)；從SDMA濃度來看，健康組、ARF組、CRF組分別為12 μg/dL (6～19 μg/dL)、45 μg/dL(40～100 μg/dL)、37 μg/dL(32～50 μg/dL)。ARF組與健康組相比，顯著增加了275%，差異極顯著(P<0.01)；CRF組與健康組相比，顯著升高了208%，差異極顯著(P<0.01)；但是ARF組和CRF組差異不顯著(P>0.05)(見中插彩版圖1)。

圖1 健康貓、ARF組和CRF組血清中SDMA濃度注:中直線表示中位數(shù)，下同

從血清中Crea含量來看，健康組、ARF組、CRF組分別為1.37 mg/dL (0.4～1.9 mg/dL)、8.6 mg/dL (5.2～11.6 mg/dL)、3.4 mg/dL (2.9～8.6 mg/dL)。ARF組與健康組相比，顯著增加了530%，差異極顯著(P<0.01)；CRF組與健康組相比，顯著增加了150%，差異極顯著(P<0.01)；ARF組與CRF組相比差異極顯著(P<0.01)(見中插彩版圖2)。

圖2 健康貓、ARF組和CRF組血清中Crea濃度

2.2 健康組、ARF組和CRF組SDMA/Crea比值的檢測結(jié)果 見中插彩版圖3。健康組SDMA/Crea比值為8.8 μg/mg (4.1～31.2 μg/mg)、ARF組為5.5 μg/mg (4.3～9.2 μg/mg)、CRF組為10.8 μg /mg (5.8～12.6 μg/mg)。ARF組與健康組相比，顯著降低了37.5%，差異極顯著(P<0.01)；CRF組與健康組相比增加了22.7%，差異顯著(P<0.05)；ARF組與CRF組相比，差異極顯著(P<0.01)。

圖3 健康貓、ARF組和CRF組血清中SDMA/Crea的比值

3 討論

SDMA檢測的440個樣本中有128個樣本異常，檢出率為29.1%，約占樣本總量的 1/3，說明有接近1/3的貓正被不同程度的腎病折磨，這點與國外的相關(guān)報道相一致[1-3]。據(jù)國外相關(guān)資料報道相較于傳統(tǒng)的Urea、Crea檢測，SDMA的敏感性分別為傳統(tǒng)檢測指標(biāo)的2.5倍(犬)和2.2倍(貓)[9]。本試驗128個SDMA異常樣本中，有56個樣本Urea、Crea異常，SDMA檢出率是傳統(tǒng)方法的2.3倍,這點也與國外的相關(guān)報道基本相一致[10]。本試驗128個SDMA異常樣本中，有72個樣本Crea正常，但超聲檢查結(jié)果卻顯示腎臟有不同程度的結(jié)構(gòu)變化，說明這些樣本已經(jīng)存在進展性的腎損傷，腎臟損傷處于非氮質(zhì)血癥時期，同時也說明SDMA可以檢測到非氮質(zhì)血癥時期的腎損傷。非氮質(zhì)血癥時期屬于腎臟損傷的早期，不具有明顯的臨床癥狀或無臨床癥狀，不易被寵物主人和臨床醫(yī)生察覺，從而延誤最佳的早期診斷和治療時機。SDMA為慢性腎損傷的早期診斷、早期干預(yù)和更有效的腎臟疾病管理提供了機會，進而可以改善動物的生活質(zhì)量，并有助于延緩疾病的進展，可能會延長數(shù)月或更長時間。

從SDMA血清濃度來看，ARF組和CRF組的SDMA濃度與健康組相比差異極顯著(P<0.01)，說明貓發(fā)生急、慢性腎功能衰竭時SDMA一定顯著升高，SDMA一旦升高腎臟一定存在不同程度的損傷，所以SDMA可以作為評價腎功能損傷的一個指標(biāo)，但ARF組與CRF組的SDMA濃度差異不顯著(P>0.05)，而且重疊性很高，說明SDMA值不能用于區(qū)分是急性還是慢性腎功能損傷。

從SDMA/Crea比值來看，CRF組最高、其次是健康組、ARF組最低。SDMA/Crea比值對動物腎病預(yù)后評價價值尤為重要，據(jù)報道，SDMA/Crea比值>10 時，患有CRF的犬、貓預(yù)后較差，而且該比值(>10) 越大，貓的死亡風(fēng)險越大[11-12]。除GFR外，Crea血清濃度主要受肌肉總量的影響，而CRF貓的肌肉總量普遍降低，主要因為食欲下降、胃腸道紊亂、消化吸收不良、排泄增多、代謝異常引起。與ARF相比，CRF可能會導(dǎo)致更嚴重的肌肉萎縮，因此CRF組的SDMA/Crea比值最高可能是肌肉總量下降的結(jié)果。在本試驗中也得到證實，CRF組的體重明顯低于ARF組和健康組，而且在20個CRF的樣本中有2個該比值大于12，最終治療無效死亡。建議臨床用該比值對CRF動物的預(yù)后進行評估。

ARF是由于腎功能突然衰退引起，通常腎臟局部缺血或毒物造成的損傷而導(dǎo)致。ARF發(fā)病急、癥狀明顯，易于診斷。本試驗中20例患ARF的樣本中，有2例是急性中毒，占到10%，其中1例是百合花中毒；另1例是布洛芬中毒。這2例中毒病例由于發(fā)現(xiàn)得早，診斷及時，通過血液透析治療完全康復(fù)，所以ARF通過及時有效治療是可逆的。CRF時腎單位緩慢地被破壞，完整的腎單位出現(xiàn)代償性的肥大，當(dāng)肥大的腎單位不能維持足夠的腎功能才表現(xiàn)出臨床癥狀，具有病變時間久、隱蔽性強的特點,一旦出現(xiàn)氮質(zhì)血癥，腎臟的大部分功能已經(jīng)喪失，而且損傷是不可逆的。對于SDMA升高和Crea正常的動物，如果在慢性腎損傷早期就能發(fā)現(xiàn)潛在的病因，并加以干預(yù)治療或自行解決，可停止或延緩腎臟進一步的損傷，所以早期診斷尤為重要。

綜上所述，血漿SDMA濃度是一種合適的評價腎臟功能的標(biāo)志物，尤其在慢性腎損傷的非氮質(zhì)血癥時期更有臨床意義，建議將該指標(biāo)納入貓常規(guī)健康體檢項目中。