薛焱 王同智
【摘 要】 目的:研究蒙藥阿給水提取物的鎮(zhèn)痛作用。方法: 將50只小鼠隨機分為5組,即模型對照組、阿司匹林組(0.04g/kg)、阿給水提取物高、中、低劑量組(生藥60.0、30.0、15.0g/kg),灌胃給藥1次/d,連續(xù)給藥7 d,采用乙酸扭體法記錄各組小鼠出現(xiàn)扭體反應的潛伏期及15、 內(nèi)各小鼠扭體次數(shù);另取50只雌性小鼠,同法分組、給藥采用熱板法測定小鼠給藥前及給藥30、45、60、90 min后的痛閾值。結(jié)果:與模型組相比,阿給提取物可顯著減少小鼠15 min內(nèi)扭體次數(shù),延長給藥15、30、60和90 min后的小鼠痛閾值(P<0.05)。結(jié)論:阿給水提取物具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。
【關鍵詞】 蒙藥;冷蒿;提取物;鎮(zhèn)痛
【中圖分類號】R285.5 ? 【文獻標志碼】 A ? ?【文章編號】1007-8517(2020)7-0020-03
Abstract:Objective To investigate the analgesic effects of mongolian medicine Agi water extract.Methods Fifty mice were randomly divided into model group(water),positive control group(aspirin,0.04 g/kg),high -dose,medium-dose and low-dose groups(60.0,30.0,15.0g / kg) of water extract from Artemisia frigida.They were given relevant medicine intragastrically,once a day,for consecutive 7 d.The latency of writhing response and the number of writhing in each group were recorded by acetic acid stretching experiment.The pain threshold of mice before administration and 15,30,60,90 min after administration was measured by hot plate method.Result Compared with the model group, Agi water extract decreased the number of writhing in mice within 15 min,and extended pain thresholds of mice 15,30,60,90 min after medication(P<0.05).Conclusion Agi water extract had obvious analgesic effect.
Keywords:Mongolian Medicine;Artemisia Frigida;Extract;Analgesic Effects
蒙藥材阿給,即菊科蒿屬多年生小半灌木冷蒿(Artemisia frigida Willd.),又名小白蒿、菟毛蒿,在中國集中分布在內(nèi)蒙古[1]。阿給全草入蒙藥,味苦,性涼、澀、燥、有止血、祛風、消腫的功效,主治各種出血、關節(jié)腫脹、腎熱、月經(jīng)不調(diào)、瘡癰[2]。冷蒿也可全草入中藥,主要治療治黃疸型肝炎、膽囊炎、小便不利、皮膚瘙癢、濕疹、蛔蟲病和蟯蟲病。然而,文獻中沒有記載阿給的鎮(zhèn)痛作用,其機制尚不清楚,為更科學地開發(fā)冷蒿的藥用價值,本實驗對阿給水提取濃縮后,得到阿給提取物,然后采用乙酸致小鼠扭體反應和電熱板法急性疼痛模型對提取物進行鎮(zhèn)痛作用的研究。
1 材料
1.1 試驗藥物、試劑 蒙藥材阿給采自內(nèi)蒙古烏蘭察布市四子王旗(地理位置為41°52′39″N,111°07′25″E,海拔1370m)。地上部分采回后于室外曬干,室溫下貯藏備用。
阿司匹林片(石藥集團歐意藥業(yè)有限公司,批號:017150275)。乙酸為分析純。
1.2 動物 健康昆明種小白鼠,體重(18±2)g,由內(nèi)蒙古大學實驗動物研究中心提供,清潔級,許可證號:SCXK(蒙)2002-0001。
1.3 儀器 電子天平(精密科學儀器有限公司),智能熱板儀(成都泰盟軟件公司)。
2 試驗方法
2.1 阿給提取物的制備 將冷蒿的地上部分粉碎成粗粉。稱取粗粉10.0g,置于250mL量瓶中,加入100mL蒸餾水,煎煮1.5h,共2次,趁熱抽濾并用蒸餾水清洗濾渣及容器2~3次,合并濾液,減壓濃縮至約5mL,用蒸餾水轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中并定容至刻度,得1∶ 1藥液,濃度為1g生藥/mL(即100g/kg)的阿給水提物供試品。
2.2 小鼠乙酸扭體實驗 實驗小鼠50只,隨機分為5組,分別為模型對照組、阿司匹林組(0.04g/kg)、阿給水提取物高、中、低劑量組(生藥60.0、30.0、15.0g/kg)。灌胃給藥1次/d,連續(xù)給藥7 d,末次給藥后30 min,腹腔注射0.6%冰乙酸溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用)0.2 mL/只致痛,觀察并記錄各組小鼠出現(xiàn)扭體反應的潛伏期及15 min 內(nèi)各小鼠扭體(扭體表現(xiàn)為腹部收縮內(nèi)凹,同時伴有軀干扭曲、臀部抬高和后肢伸展等特征)的次數(shù),計算鎮(zhèn)痛率。
鎮(zhèn)痛率(%)=(模型組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù))/模型組平均扭體次數(shù)×100%
2.3 小鼠電熱板法實驗 用智能熱板儀[(溫度55±0.5)℃]篩選兩次痛閥平均值大于5s而低于30s的雌性小鼠50只,分組、給藥同2.2,每天灌胃給藥1次,連續(xù)7次。于末次給藥后第15、30、60、90min記錄其被放入熱板至出現(xiàn)舔后足的反應時間(s)作為痛閾值,觀察各組間藥物對動物痛閾值的影響。
2.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS24.0 統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析,所有數(shù)據(jù)以(x±s)表示,組間比較采用t檢驗,P<0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。
3 結(jié)果
3.1 阿給水提取物對乙酸致小鼠扭體反應的影響 腹腔注射乙酸后,小鼠呈現(xiàn)較明顯的扭體反應,阿司匹林組痛組與模型對照組比較,扭體潛伏期延長、扭體次數(shù)降低,差異顯著(P<0.01);阿給水提取物組對扭體潛伏期也體現(xiàn)出良好的延長作用,扭體次數(shù)明顯下降,且具有一定的量效關系,與模型對照組比較小鼠15 min內(nèi)扭體次數(shù)差異顯著(P<0.05、P<0.01);扭體抑制率高、中劑量組較高。見表1。
3.2 阿給水提取物對小鼠電熱板刺激的鎮(zhèn)痛作用 給藥前,各組小鼠的痛閾值差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。與正常對照組比較,陽性藥物阿司匹林組給藥后能明顯延長小鼠的痛閾值,差異顯著(P<0.01)。阿給水提取物低、中、高劑量組在給藥后均能不同程度地延長小鼠對熱板刺激的疼痛反應潛伏期閾值。給藥15、30 min后,各組小鼠痛閾值均明顯延長,且高、中劑量阿給水提取物作用更明顯(P<0.01);給藥60、90 min后,高、中劑量阿給水提取物能顯著延長小鼠的痛閾值(P<0.05)。見表2。
4 討論
疼痛是機體受到環(huán)境刺激后發(fā)生的一種病理、生理過程,其既是一種防御性反應也是多種疾病的表現(xiàn)癥狀之一。阿司匹林是經(jīng)典的非甾體抗炎藥,也是目前世界上應用最廣泛的鎮(zhèn)痛藥,通常認為它是一種外周鎮(zhèn)痛藥[3-4],也可作用于下視丘而產(chǎn)生中樞鎮(zhèn)痛作用[5],故在考察阿給水提取物的鎮(zhèn)痛作用時以其作為陽性對照藥。
本研究在鎮(zhèn)痛實驗中選用物理刺激的熱板法和化學刺激的扭體法。乙酸扭體實驗是經(jīng)典的鎮(zhèn)痛實驗模型,是篩選弱鎮(zhèn)痛藥的一種敏感、簡便、重復性好的方法,是評價和篩選鎮(zhèn)痛藥的常用模型[6]。小鼠在乙酸刺激下,腹痛過程扭體明顯,容易觀察,從實驗計算所得抑制率顯示鎮(zhèn)痛作用明顯,阿給水提取物低、中、高3 種劑量均表明阿給水提取物良好的鎮(zhèn)痛效果。熱板法致痛是由于熱刺激足部的感覺神經(jīng)末梢而使機體產(chǎn)生痛覺,類似于急性銳痛[7]。本實驗結(jié)果表明, 阿給水提取物減少扭體反應次數(shù),能延長醋酸所致小鼠扭體反應的潛伏期,阿給水提取物低、中、高劑量組在給藥后均能不同程度地延長小鼠對熱板刺激的痛閾值,說明其具有良好的鎮(zhèn)痛作用,而其更深入的鎮(zhèn)痛機理有待進一步研究。參考文獻
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(收稿日期: 編輯:程鵬飛)