張小利，張聯(lián)眾，杜學(xué)航

（1.上海凱寶藥業(yè)股份有限公司，上海 201401；2.甘肅省白銀市平川區(qū)疾病預(yù)防控制中心，甘肅白銀 730913）

0 引言

肺炎是指終末氣道、肺泡和肺間質(zhì)的炎癥，是較為常見的呼吸道系統(tǒng)疾??；臨床治療多以抗生素和抗病毒藥物為主，但是存在耐藥、抗感染等諸多等問(wèn)題［1］。中醫(yī)認(rèn)為，肺炎臨床證型以風(fēng)溫閉肺、痰熱奎肺、痰熱結(jié)胸及氣陰兩傷為主［2］。痰熱清注射液是由黃芩、熊膽粉、山羊角、金銀花、連翹等組成，功能清熱、解毒、化痰，用于治療急性肺炎、急性支氣管炎屬風(fēng)溫肺熱病痰熱阻肺證者［3］。目前痰熱清注射液亦用于治療新型冠狀病毒性肺炎（COVID-19）［4］。為進(jìn)一步明確痰熱清注射液的安全性，觀察其毒性反應(yīng)癥狀，本實(shí)驗(yàn)就其急性及長(zhǎng)期給藥可能產(chǎn)生的毒性反應(yīng)進(jìn)行觀察，對(duì)其安全劑量范圍予以客觀評(píng)判。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)Wistar大鼠160只，雌雄各半，體質(zhì)量78.1～107.8 g，購(gòu)于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，其中40只用于急毒實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（滬）2012—0002。大鼠飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)SPF級(jí)屏障設(shè)施［SYXK（滬）2014—0008］，環(huán)境溫度20～24℃，相對(duì)濕度42%～67%，換氣次數(shù)≥15次/h。人工控制照明，晝夜交替時(shí)間為12 h/12 h。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格遵守上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)的要求。

1.2 藥品與主要試劑

痰熱清注射液，上海凱寶藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)（棕紅色澄明液體，規(guī)格：10 mL/支，含量：0.335 g/mL（生藥量/藥液），批號(hào)：1308317），臨用時(shí)用氯化鈉注射液稀釋成所需濃度的溶液；痰熱清注射液空白對(duì)照液，上海凱寶藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)（無(wú)色澄明液體，規(guī)格：10 mL/支，批號(hào)：1308317-1），臨用時(shí)氯化鈉注射液稀釋成所需濃度的溶液；氯化鈉注射液，上華裕（無(wú)錫）制藥有限公司生產(chǎn)（批號(hào)：14057402）。

血液生化檢測(cè)試劑盒（日本世諾臨床診斷制品株式會(huì)社）；離子檢測(cè)試劑盒（上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司）；血液學(xué)檢測(cè)試劑盒（德國(guó)西門子醫(yī)療診斷產(chǎn)品有限公司）；凝血指標(biāo)測(cè)定試劑盒（德國(guó)西門子醫(yī)療診斷產(chǎn)品有限公司）；異氟烷，河北九派制藥股份有限公司生產(chǎn)（批號(hào)：130101）。上述藥品均密封，避光，置陰涼干燥處保存；試劑均在4℃冰箱保存。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

BAYER ADVIA 120五分類血球儀（德國(guó)拜耳公司）；SYSMEX CA-500全自動(dòng)血凝分析儀（日本希森美康株式會(huì)社）；日立7080全自動(dòng)生化分析儀（日本日立株式會(huì)社）；XD683型電解質(zhì)分析儀（上海迅達(dá)公司）；羅氏朱麗亞II型尿液分析儀（德國(guó)羅氏診斷有限公司）；YZ11D檢眼鏡（蘇州六六視覺(jué)科技股份有限公司）；VIP-5全封閉組織脫水機(jī)（日本櫻花檢驗(yàn)儀器株式會(huì)社）；HistoStar石蠟包埋機(jī)（賽默飛世爾公司）；HM340E輪轉(zhuǎn)式組織切片機(jī)（德國(guó)美康公司）；OLYMPUSBH-2光學(xué)顯微鏡、BX51型系統(tǒng)顯微鏡（日本奧林巴斯株式會(huì)社）；BSA2201-CW精密天平（德國(guó)賽多利斯公司）；AR2130電子天平（美國(guó)奧豪斯公司）。

2 方法

2.1 急性毒性（急毒）實(shí)驗(yàn)

取檢疫合格的Wistar大鼠40只，按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為2組，即對(duì)照組及給藥組，每組20只，雌雄各半。給藥組大鼠按最大給藥容量（20 mL/kg）尾靜脈注射痰熱清原液，對(duì)照組給予等容量痰熱清注射液空白對(duì)照液，給藥1次，恢復(fù)14 d。觀察大鼠的一般體征、行為運(yùn)動(dòng)和死亡等情況，給藥后4 h內(nèi)嚴(yán)密觀察。15 d時(shí)解剖觀察心、肝、脾、肺和腎等主要臟器的顏色、形狀和大小，如有異常則采集進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

2.2 3個(gè)月長(zhǎng)期毒性（長(zhǎng)毒）實(shí)驗(yàn)

取檢疫合格的Wistar大鼠120只，按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為4組，每組30只，雌雄各半，即痰熱清注射液低劑量（1∶7稀釋，給藥容量20 mL/kg，相當(dāng)于2.50 mL/kg痰熱清注射液原液）組、中劑量（1∶4稀釋，給藥容量20 mL/kg，相當(dāng)于4.00 mL/kg痰熱清注射液原液）組、高劑量（1∶2稀釋，給藥容量20 mL/kg，相當(dāng)于6.67 mL/kg痰熱清注射液原液）及對(duì)照（1∶4稀釋，給藥容量20 mL/kg，相當(dāng)于4.00 mL/kg空白對(duì)照原液）組。采用尾靜脈注射給藥方式，連續(xù)給藥13周，停藥恢復(fù)4周。于給藥第13周和17周（恢復(fù)4周），每組分別取20只、10只大鼠進(jìn)行解剖，雌雄各半，進(jìn)行血液學(xué)、血凝、血清生化及組織病理學(xué)檢測(cè)。

2.2.1 一般癥狀

給藥期和停藥后恢復(fù)期，每天觀察1次外觀、體征、行為活動(dòng)、腺體分泌、呼吸、皮毛、糞、尿等，每周稱體質(zhì)量和攝食量1次，發(fā)現(xiàn)死亡或?yàn)l死動(dòng)物及時(shí)尸檢。

2.2.2 血液學(xué)檢測(cè)

白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞容積（HCT）、平均紅細(xì)胞容積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率（RETIC）、中性粒細(xì)胞百分率（NEUT%）、淋巴細(xì)胞百分率（LYMPH%）、單核細(xì)胞百分率（MONO%）、嗜酸細(xì)胞百分率（EOS%）、嗜堿細(xì)胞百分率（BASO%）。胸骨取骨髓涂片，甲醛固定。

2.2.3 血液生化檢測(cè)

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶（ALT，連續(xù)監(jiān)測(cè)法）、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST，連續(xù)監(jiān)測(cè)法）、總蛋白（TP，雙縮脲法）、白蛋白（ALB，溴甲酚緑法）、總膽紅素（TBIL，釩酸氧化法）、直接膽紅素（DBIL）、堿性磷酸酶（ALP，連續(xù)監(jiān)測(cè)法）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT，速率法）、血糖（GLU，葡萄糖脫氫酶法）、尿素氮（BUN，紫外法）、肌酐（CREAT，酶法）、總膽固醇（CHOLT，酶法）、甘油三脂（TG，酶法）、肌酸激酶（CK，酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)法），鈉、鉀、氯離子。

2.2.4 凝血指標(biāo)檢測(cè)

凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶時(shí)間（TT）、纖維蛋白酶原（FIB）。

2.2.5 系統(tǒng)尸檢和病理組織學(xué)檢查

取各組大鼠腦、垂體、脊髓（頸、胸、腰段）、胸腺、甲狀腺、唾液腺、食管、胃、大腸和小腸、肝、脾、腎上腺、腎、淋巴結(jié)（食管淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié))、胰腺、氣管、肺、心、主動(dòng)脈、膀胱、坐骨神經(jīng)、胸骨，雄性動(dòng)物睪丸、附睪、前列腺或雌性動(dòng)物乳腺、子宮、卵巢及尸檢時(shí)肉眼發(fā)現(xiàn)的可疑臟器，放入10%福爾馬林固定，HE染色。高劑量組和對(duì)照組的器官和組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，如果高劑量組出現(xiàn)組織病理學(xué)變化時(shí)，那么低劑量組也應(yīng)進(jìn)行組織病理學(xué)檢查以確定劑量-反應(yīng)關(guān)系。其中取材后需稱定質(zhì)量的器官：腦、心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、睪丸、附睪或子宮、卵巢。計(jì)算主要臟器臟器系數(shù)、臟腦比值（g/100 g體質(zhì)量）。

2.3 統(tǒng)計(jì)方法

本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件統(tǒng)計(jì)，所有計(jì)量數(shù)據(jù)的結(jié)果均使用平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（x±s）表示。計(jì)量資料比較采用方差分析，若方差齊，則進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA）；若有顯著性差別（P≤0.05），則各劑量組與對(duì)照組間做Dunnet檢驗(yàn)；若方差不齊，則進(jìn)行非參數(shù)檢驗(yàn)（Kruskal-Wallis檢驗(yàn)）；若K-W檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P≤0.05），則各劑量組與對(duì)照組間做Mann-Whitney U檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 急性毒性（急毒）實(shí)驗(yàn)

大鼠在給予痰熱清注射液或痰熱清注射液空白對(duì)照液后30 min內(nèi)，兩組大鼠均可見活動(dòng)減少。在隨后的觀察期內(nèi)，兩組大鼠均未見異常反應(yīng)，大鼠活動(dòng)、精神狀況良好，大、小便如常。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)動(dòng)物進(jìn)行大體解剖，肉眼觀察心臟、肺臟、腎臟、肝臟、脾臟、胃腸道等內(nèi)臟，兩組大鼠均無(wú)異常，未發(fā)現(xiàn)有出血點(diǎn)、水腫等情況。15 d內(nèi)各組大鼠無(wú)一死亡。

3.2 3個(gè)月長(zhǎng)期毒性（長(zhǎng)毒）實(shí)驗(yàn)

3.2.1 一般癥狀

大鼠給藥3個(gè)月及恢復(fù)期內(nèi)，無(wú)大鼠死亡。高劑量組1只雄性大鼠（動(dòng)物編號(hào)：4006）在給藥第56日觀察到右后肢踝關(guān)節(jié)以下部分水腫，持續(xù)6 d后恢復(fù)；對(duì)照組1只雄性大鼠（動(dòng)物編號(hào)：1010）在給藥第49日觀察到雙側(cè)后肢踝關(guān)節(jié)以下部分水腫，持續(xù)9 d后恢復(fù)；其余對(duì)照組和各給藥組大鼠精神狀態(tài)良好，行為活動(dòng)、呼吸正常，唾液腺、淚腺等腺體未見有異常分泌，皮毛光滑，糞便和尿液也未見異常。

3.2.2 體質(zhì)量和食耗量

給藥3個(gè)月及恢復(fù)期末，各給藥組體重與對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。與同期對(duì)照組比較，雄性高劑量組在第6周攝食量顯著偏低（P<0.05），下降約2.9%；雌性中劑量組分別在第6，10，13周攝食量顯著低于對(duì)照組（P<0.05），分別下降約11.2%，7.5%，10.8%；高劑量組分別在第3，6，10，12，13周攝食量顯著或極顯著低于對(duì)照組（P<0.05），分別下降約8.2%，15.0%，7.0%，6.7%，10.3%；其余大鼠攝食量均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。結(jié)果如圖1—2所示。

圖1 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月大鼠體質(zhì)量的經(jīng)時(shí)變化

圖2 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月大鼠食耗量的經(jīng)時(shí)變化

表1 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月對(duì)長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響(±s)

表1 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月對(duì)長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)大鼠血液學(xué)指標(biāo)的影響(±s)

注：1.3個(gè)月給藥期末n=10，恢復(fù)期末n=5；2.與對(duì)照組比較*P<0.05。

試驗(yàn)周期組別恢復(fù)期末3個(gè)月給藥期末對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組對(duì)照組低劑量組中劑量組高劑量組雌鼠Baso%0.1±0.1 0.1±0.1 0.1±0.1 0.1±0.1 0.1±0.0 0.1±0.1 0.1±0.0 0.1±0.0雄鼠Baso%0.2±0.1 0.1±0.1 0.1±0.1*0.1±0.0 0.0±0.0 0.1±0.0*0.0±0.1 0.0±0.0

3.2.3 眼科檢查

給藥3個(gè)月及恢復(fù)期末各組動(dòng)物眼科檢查未見與藥物相關(guān)改變。

3.2.4 血液學(xué)指標(biāo)

給藥3個(gè)月，與對(duì)照組相比，雄性大鼠Baso%中劑量組偏低（P<0.05），其余劑量組各項(xiàng)血液學(xué)檢測(cè)指標(biāo)，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）；雌性大鼠各劑量組各項(xiàng)血液學(xué)檢測(cè)指標(biāo)，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）?；謴?fù)期末，與對(duì)照組相比，雄性大鼠Baso%低劑量組偏高（P<0.05），其余劑量組各項(xiàng)血液學(xué)檢測(cè)指標(biāo)，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）；雌性大鼠各劑量組各項(xiàng)血液學(xué)檢測(cè)指標(biāo)，均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。變化指標(biāo)如表1所示。

3.2.5 血液生化指標(biāo)

給藥3個(gè)月，雄性大鼠各劑量組各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異（P>0.05）；雌性大鼠中、高劑量組的BUN偏分別升高約22.6%，16.7%，與對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.05，P<0.01），而CREA則未見明顯變化；其余各劑量組各指標(biāo)，與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）?；謴?fù)期末，雄性大鼠高劑量組的Na+，Cl-偏高，分別偏高約1.2%，0.8%，與對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.05，P<0.01）；其余各劑量組各指標(biāo)，與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）；雌性大鼠各劑量組各指標(biāo)，與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）。變化指標(biāo)如表2所示。

3.2.6 凝血指標(biāo)

給藥3個(gè)月及恢復(fù)期末，各給藥組各項(xiàng)凝血指標(biāo)與對(duì)照組比較未見明顯差異（P>0.05）。

3.2.7 臟器質(zhì)量、臟器系數(shù)及臟腦系數(shù)

給藥3個(gè)月，雄性低、中劑量組腎臟臟腦比與對(duì)照組比較偏高，有顯著性差異（P<0.05）；雌性低劑量組脾臟臟體比與對(duì)照組比較偏高，有極顯著性差異（P<0.01）；其余各給藥組的臟器絕對(duì)值、臟體比及臟腦比與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異?；謴?fù)期末，雄性低、中劑量組腎臟臟體比與對(duì)照組比較偏高，有極顯著性差異（P<0.01或P<0.05）；其余各給藥組的臟器絕對(duì)值、臟體比及臟腦比與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異。

3.2.9 大體解剖及組織病理學(xué)檢查

給藥3個(gè)月及恢復(fù)期末進(jìn)行大體解剖檢查，主要臟器組織及胸腔、腹腔未檢出肉眼可見病變。給藥3個(gè)月及恢復(fù)期末組織病理學(xué)檢查，各劑量給藥組的部分動(dòng)物腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)可見輕度或輕微的黃褐色色素沉著，而同期的對(duì)照組動(dòng)物未見同樣變化，結(jié)果如圖3所示。其余個(gè)別臟器組織病理改變無(wú)明顯劑量效應(yīng)關(guān)系，判斷為非藥物因素引起。各組動(dòng)物腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)色素沉著的程度及發(fā)生率，如表3所示。

4 討論

4.1 急性毒性(急毒)實(shí)驗(yàn)

痰熱清注射液的人臨床常用量一般為20 mL原液，重癥患者一次可用40 mL，按每人60 kg計(jì)算，則劑量約為0.33或0.67 mL/kg/d。大鼠按痰熱清注射液原液和最大給藥容量（20 mL/kg）尾靜脈注射，約相當(dāng)于人臨床常用單日劑量（mL/kg）的61倍，重癥患者的30倍。本次試驗(yàn)15 d內(nèi)無(wú)一大鼠死亡，給藥后30 min內(nèi)，給藥組和對(duì)照組大鼠均可見運(yùn)動(dòng)低下，考慮此反應(yīng)可能緣于大容量靜脈注射引起，與供試品本身無(wú)關(guān)。

表2 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月對(duì)長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)大鼠血液生化指標(biāo)的影響(±s)

表2 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月對(duì)長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)大鼠血液生化指標(biāo)的影響(±s)

注：1.3個(gè)月給藥期末n=10，恢復(fù)期末n=5；2.與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.05。

試驗(yàn)周期恢復(fù)期末組別雌鼠雄鼠3個(gè)月給藥期末對(duì)照組恢復(fù)期末中劑量組高劑量組對(duì)照組恢復(fù)期末中劑量組高劑量組BUN 8.4±1.1 8.7±1.1 10.3±1.6**9.8±1.4*8.4±1.0 9.1±1.5 10.2±2.0 9.9±0.6 Na+141.7±0.7 141.7±1.2 141.8±0.8 141.8±1.3 141.4±0.8 141.6±1.0 141.5±0.8 141.9±1.0 Cl-107.4±0.4 107.4±0.7 107.9±0.7 107.8±1.0 107.8±1.4 108.0±1.1 108.1±0.9 108.0±0.9 BUN 7.7±0.6 7.8±1.1 7.5±1.0 7.4±0.6 7.3±0.9 7.9±0.6 7.7±0.7 8.0±0.9 Na+142.7±0.6 142.4±1.0 142.2±0.7 142.0±0.8 141.3±0.9 141.4±0.4 141.8±0.7 143.0±0.8**Cl-106.9±0.3 106.6±0.8 106.9±0.4 106.7±0.5 107.5±0.8 107.6±0.4 107.8±0.4 108.4±0.3*

圖3 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月對(duì)腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)黃褐色色素沉著的影響

表3 大鼠尾靜脈注射痰熱清注射液3個(gè)月對(duì)長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)?zāi)I小管上皮細(xì)胞內(nèi)色素沉著的程度及發(fā)生率的影響

4.2 3個(gè)月長(zhǎng)期毒性（長(zhǎng)毒）實(shí)驗(yàn)

預(yù)試發(fā)現(xiàn)，大鼠尾靜脈注射1∶1稀釋的痰熱清注射液原液對(duì)血管刺激較大，而1∶2稀釋適合長(zhǎng)期給藥。于是高劑量按可操作的最大給藥濃度（1∶2稀釋）和靜脈注射最大給藥容量（20 mL/kg），相當(dāng)于原液6.67 mL/kg給藥，約為人臨床單日劑量（mL/kg）的20倍，重癥患者的10.0倍；中劑量組1∶4稀釋，相當(dāng)于給予原液4.00 mL/kg，約為人臨床單日劑量的12倍，重癥患者的6.0倍；低劑量1∶7稀釋，相當(dāng)于給予原液2.50 mL/kg，約為人臨床單日劑量（mL/kg）的7.6倍，重癥患者的3.7倍，略高于大鼠藥效學(xué)研究的起效劑量（2.00 mL原液/kg）。痰熱清注射液中含有10%的輔料丙二醇，所以對(duì)照組給予與中劑量組等量的痰熱清注射液空白對(duì)照，即4.00 mL空白對(duì)照原液/kg。

給藥期間高劑量組個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)水腫，考慮到對(duì)照組亦出現(xiàn)水腫，分析認(rèn)為高劑量組出現(xiàn)的水腫與受試藥物作用無(wú)關(guān)。血液學(xué)指標(biāo)Baso%的改變無(wú)量效關(guān)系且絕對(duì)值變化較小，故不認(rèn)為與受試藥物相關(guān)。恢復(fù)期雄性大鼠高劑量組的Na+，Cl-偏高，但均在本中心背景數(shù)據(jù)范圍之內(nèi)，分析認(rèn)為無(wú)毒理學(xué)意義。雖然個(gè)別器官出現(xiàn)臟器系數(shù)或臟腦系數(shù)的改變，但上述變化無(wú)明顯劑量關(guān)系，且組織病理學(xué)檢查未見明顯異常，綜合分析認(rèn)為無(wú)毒理學(xué)意義。

雄性大鼠高劑量組在第6周攝食量顯著低于對(duì)照組，雌性大鼠中、高劑量組的攝食量在部分周次，尤其從高劑量組從第10周開始顯著低于對(duì)照組，分析認(rèn)為高濃度大劑量靜脈注射痰熱清對(duì)大鼠攝食量有一定的抑制作用。

出現(xiàn)于給藥期末各劑量給藥組，部分動(dòng)物腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)的黃褐色色素沉著具有一定的劑量相關(guān)性，且對(duì)照組動(dòng)物未見同樣變化，考慮與供試品有關(guān)。根據(jù)這些色素的形態(tài)學(xué)特征綜合分析認(rèn)為，這種色素沉著可能系供試品的某種代謝產(chǎn)物在排泄過(guò)程中被腎小管重吸收所致，而非供試品的毒性作用。因其程度輕微，未對(duì)腎功能產(chǎn)生明顯影響?；謴?fù)期末，雖然各劑量給藥組仍有部分動(dòng)物腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)存在這種黃褐色色素，但其程度及發(fā)生率明顯下降（給藥3個(gè)月：高劑量組19+，1±，中劑量組4+，8±；恢復(fù)期：高劑量組0+，9±，中劑量0+，4±，詳見表3）。說(shuō)明停藥4周后腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)的色素沉著可以得到很大程度的恢復(fù)。

結(jié)合給藥各劑量組動(dòng)物個(gè)體數(shù)據(jù)的相關(guān)性分析，包括BUN、CREA、臟器指數(shù)、腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)的黃褐色色素沉著等，發(fā)現(xiàn)以上幾項(xiàng)變化在動(dòng)物個(gè)體中并無(wú)明顯的相關(guān)性，所以分析此現(xiàn)象認(rèn)為無(wú)明顯毒理學(xué)意義。

綜上，大鼠急毒的安全劑量為：20 mL痰熱清原液/kg；大鼠長(zhǎng)毒的安全劑量為：6.67 mL原液/kg。但對(duì)于長(zhǎng)期高劑量給藥，建議就食耗量作進(jìn)一步觀察。