付可登 李松華 胡媛媛 陳蒙恩

[摘要] 目的 探討高頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激（HF-rTMS）對重度抑郁患者血清微小RNA-124（mir-124）、微小RNA-214（mir-214）及炎性因子白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平的影響。 方法 選取2017年6月～2019年6月本院精神科收治的重度抑郁患者70例，按照隨機數(shù)字表法將其分為對照組35例和研究組35例。兩組均在口服鹽酸度洛西汀腸溶膠囊基礎(chǔ)上，對照組接受偽HF-rTMS治療，研究組接受真HF-rTMS治療，每周治療5 d;兩組均連續(xù)治療8周。分別于治療前后評估漢密爾頓抑郁量表24項（HAMD-24）評分及臨床總體印象量表（CGI）評分，測定血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平，并記錄不良反應(yīng)情況。采用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測血清mir-124、mir-214水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清IL-6、TNF-α水平。 結(jié)果 治療后兩組HAMD-24、CGI評分均顯著低于治療前（P<0.05），且研究組明顯低于對照組（P<0.05）。治療后兩組血清mir-124、mir-214水平均顯著低于治療前（P<0.05），且研究組明顯低于對照組（P<0.05）。治療后兩組血清IL-6、TNF-α水平均顯著低于治療前（P<0.05），且研究組明顯低于對照組（P<0.05）。兩組不良反應(yīng)發(fā)生率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 應(yīng)用HF-rTMS可顯著改善重度抑郁患者精神狀況，降低血清mir-124、mir-214水平，減輕炎癥反應(yīng)。

[關(guān)鍵詞] 抑郁癥;經(jīng)顱磁刺激;度洛西汀;微小RNA-124;微小RNA-214;炎性因子

[中圖分類號] R743.3? ? ? ? ? [文獻標(biāo)識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2020）16-0103-04

Effects of high-frequency repetitive transcranial magnetic stimulation on serum levels of mir-124， mir-214 and inflammatory factors in patients with severe depression

FU Kedeng? ?LI Songhua? ?HU Yuanyuan? ?CHEN Meng'en

Department of Psychiatry， Ningbo Psychiatric Hospital， Ningbo? ?315032， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of high frequency repetitive transcranial magnetic stimulation（HF-rTMS） on serum microRNA-124 （mir-124）， microRNA-214 （mir-214） and inflammatory factor interleukin- 6 （IL-6）， tumor necrosis factor-α （TNF-α） levels. Methods A total of 70 patients with severe depression treated in our psychiatry department from June 2017 to June 2019 were selected and divided into the control group and the study group by the random number table method，with 35 cases in each group.On the basis of oral duloxetine hydrochloride enteric-coated capsules in both groups， the control group received pseudo-HF-rTMS treatment，and the study group received true HF-rTMS treatment. The treatment was carried out for 5 days per week， and both groups were treated continuously for 8 weeks.The Hamilton Depression Scale （HAMD-24） score and the Clinical Global Impression Scale（CGI） score were evaluated before and after treatment; serum mir-124， mir-214 and IL-6， TNF-α levels were measured， and adverse reactions were documented. Real-time fluorescence quantitative PCR （qRT-PCR） was used to detect serum mir-124 and mir-214 levels， and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to determine serum IL-6 and TNF-α level. Results The HAMD-24 and CGI scores of the two groups after treatment were significantly lower than those before treatment（P<0.05）， and the study group was significantly lower than the control group（P<0.05）.The levels of serum mir-124 and mir-214 in the two groups after treatment were significantly lower than those before treatment（P<0.05）， and the study group was significantly lower than the control group（P<0.05）. The levels of serum IL-6 and TNF-α in the two groups after treatment were significantly lower than those before treatment（P<0.05）， and the study group was significantly lower than that in the control group（P<0.05）. There was no significant difference in the incidence of adverse reactions between the two groups（P>0.05）. Conclusion The application of HF-rTMS can significantly improve the mental status of patients with severe depression，decrease serum levels of mir-124 and mir-214，and relieve inflammation.

[Key words] Depression; Transcranial magnetic stimulation; Duloxetine; microRNA-124; MicroRNA-214; Inflammatory factors

抑郁癥是一種常見的情感障礙或心境障礙，發(fā)病原因復(fù)雜，臨床主要表現(xiàn)為情緒低落，重度抑郁患者可出現(xiàn)自殺念頭或行為。高頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激（high frequency repetitive transcranial magnetic stimulation，HF-rTMS）是一種無痛、安全可靠的抗抑郁治療手段[1]。研究發(fā)現(xiàn)HF-rTMS治療可能使西酞普蘭、帕羅西汀等抗抑郁藥物更快發(fā)揮作用，明顯改善患者臨床癥狀[2]。且有研究報道[3]，HF-rTMS治療重度抑郁發(fā)作急性期患者效果顯著，可顯著降低漢密爾頓抑郁量表17項（hamilton depression scale-17 items，HAMD-17）評分。但HF-rTMS治療對重度抑郁患者血清微小RNA-124（microRNA-124，mir-124）、微小RNA-214（microRNA-214，mir-214）及炎性因子水平的影響尚不清楚。鑒于此，本研究通過檢測治療前后重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平，分析HF-rTMS治療對重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及炎性因子水平的作用，以期為臨床治療提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年6月～2019年6月本院精神科收治的重度抑郁患者70例作為研究對象，其中男31例，女39例;年齡18～55歲，平均（33.56±7.88）歲;病程2～7個月，平均（5.04±1.37）個月。納入標(biāo)準(zhǔn)[4]：（1）均符合重度抑郁相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];（2）近期未接受抗抑郁藥治療;（3）臨床資料完整;（4）自愿參與研究。排除標(biāo)準(zhǔn)[3]：（1）合并其他精神疾病者;（2）服用度洛西汀過敏者;（3）近2周內(nèi)有炎癥、發(fā)熱史者;（4）伴有嚴(yán)重軀體疾病者;（5）妊娠、哺乳期女性。按照隨機數(shù)字表法將70例重度抑郁患者分為對照組35例和研究組35例。對照組中，男17例，女18例;年齡18～55歲，平均（33.74±7.95）歲;病程2～7個月，平均（4.96±1.28）個月。研究組中，男14例，女21例;年齡18～54歲，平均（34.01±7.82）歲;病程2～7個月，平均（5.11±1.40）個月。本研究符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會標(biāo)準(zhǔn)，患者均簽署《知情同意書》，且對照組和研究組臨床資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

兩組患者均口服鹽酸度洛西汀腸溶膠囊（上海上藥中西制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20061263，規(guī)格：20 mg）治療，2次/d，20 mg/次。

1.2.1 研究組? 研究組在基礎(chǔ)治療上接受真HF-rTMS治療，使用Rapid2 rTMS治療儀（購自英國Magstim公司）進行治療，直徑為70 mm風(fēng)冷“8”字型線圈，通過“標(biāo)準(zhǔn)5 cm法”確定左側(cè)背外側(cè)前額葉位置，以確定刺激靶點;刺激頻率為10 Hz，刺激強度為100%運動閾值，每次治療3000個刺激脈沖，1次/d，30 min/次，每周治療5 d。

1.2.2 對照組? 對照組在基礎(chǔ)治療上接受偽HF-rTMS治療，將治療儀線圈旋轉(zhuǎn)90°與刺激靶點相切，作為偽刺激治療;研究組患者的線圈中心平行于刺激靶點頭皮切線，并緊貼在頭皮上，作為HF-rTMS治療。兩組患者均連續(xù)治療8周。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 評估漢密爾頓抑郁量表24項（Hamilton depression scale-24 items，HAMD-24）評分及臨床總體印象量表（Clinical general impression scale，CGI）評分[6]? 采用HAMD-24評分評估患者精神狀況，<9分為正常，≥9分且<20分為可能抑郁，≥20分且<35分為抑郁，≥35分為嚴(yán)重抑郁癥。采用CGI評分評估患者病情嚴(yán)重程度，評分越高病情越嚴(yán)重。

1.3.2 血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平測定? 分別于治療前后清晨收集患者空腹靜脈血，各4 mL，離心（3000 r/min，半徑6 cm）15 min，提取血清，保存于-70℃冰箱備用。采用實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）檢測血清mir-124、mir-214水平，以U6為內(nèi)參，反應(yīng)條件為95℃、2 min，95℃、5 s，56℃、5 s，72℃、35 s，反復(fù)進行35個循環(huán);運用2-ΔΔCt計算mir-124、mir-214相對表達(dá)量。采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定血清IL-6、TNF-α水平，試劑盒均購自上海瑞番生物科技有限公司。

1.3.3 不良反應(yīng)情況? 治療過程中不良反應(yīng)主要有頭痛、惡心、耳鳴、嗜睡、便秘及食欲減退，對癥處理后明顯好轉(zhuǎn)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS18.0軟件分析數(shù)據(jù)。計數(shù)資料用百分率（%）描述，行χ2檢驗;計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）描述，行t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后HAMD-24、CGI評分比較

治療前兩組患者HAMD-24、CGI評分相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后兩組患者HAMD-24、CGI評分均明顯低于治療前（P<0.05），且研究組顯著低于對照組（P<0.05）。見表1。

2.2 兩組患者治療前后血清mir-124、mir-214水平比較

治療前兩組患者血清mir-124、mir-214水平相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后兩組患者血清mir-124、mir-214水平均明顯低于治療前（P<0.05），且研究組顯著低于對照組（P<0.05）。見表2。

2.3 兩組患者治療前后血清IL-6、TNF-α水平比較

治療前兩組患者血清IL-6、TNF-α水平相比，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療后兩組患者血清IL-6、TNF-α水平均明顯低于治療前（P<0.05），且研究組顯著低于對照組（P<0.05）。見表3。

2.4 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表4。

3 討論

HF-rTMS是一種利用磁場產(chǎn)生電流治療抑郁癥的有效措施，具有無創(chuàng)、操作簡便等優(yōu)勢[7]。研究發(fā)現(xiàn)HF-rTMS可通過提高人皮質(zhì)興奮性，使血清腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子水平明顯升高，以影響大腦皮質(zhì)代謝，這可能是HF-rTMS治療抑郁患者的基礎(chǔ)[8]。另有研究認(rèn)為，抑郁患者通常左側(cè)背外側(cè)前額葉功能異常減弱，因而理論上可利用HF-rTMS刺激左側(cè)背外側(cè)前額葉位置治療抑郁癥[9]。胡希文等[10]研究報道，抑郁發(fā)作患者HF-rTMS治療后HAMD評分明顯降低，且可使抗抑郁藥物加速起效。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療后兩組患者HAMD-24、CGI評分均遠(yuǎn)低于治療前，且研究組遠(yuǎn)低于對照組，與胡希文等[10]研究類似，提示HF-rTMS的應(yīng)用可明顯改善重度抑郁患者精神狀況和病情嚴(yán)重程度。

研究發(fā)現(xiàn)微小RNA（microRNA，miRNA）的異常表達(dá)可能參與抑郁癥的發(fā)生、發(fā)展[11，12]。mir-124是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量最多的一種miRNA，在發(fā)育及成熟的神經(jīng)系統(tǒng)中均有表達(dá)，其中大腦皮質(zhì)中含量最高[13]。袁梅菊等[14]研究報道，首發(fā)抑郁癥患者外周血mir-124水平異常升高，其水平變化可有效反映患者治療效果，檢測外周血mir-124水平有利于診斷抑郁癥及評估患者預(yù)后。趙勇等[15]研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者外周血mir-124表達(dá)水平遠(yuǎn)高于健康對照組，其水平異常升高可作為臨床診斷抑郁癥的有效指標(biāo)。而mir-214是miRNA中一員，位于人染色體1q24.3，在心血管疾病伴抑郁癥患者發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。陳勁松等[16]研究報道，老年急性心肌梗死患者血清mir-214表達(dá)水平明顯高于健康人群，其水平升高參與急性心肌梗死發(fā)生。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療后兩組患者血清mir-124、mir-214水平均遠(yuǎn)低于治療前，且研究組患者血清mir-124、mir-214水平遠(yuǎn)低于對照組，與袁梅菊等[14]、趙勇等[15]、陳勁松等[16]研究結(jié)果相似，提示HF-rTMS治療可顯著降低重度抑郁患者血清mir-124、mir-214水平，考慮可能與HF-rTMS的應(yīng)用能加速抗抑郁藥物起效有關(guān)。

相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[17]，miRNA可通過抑制IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子，抑制機體炎癥反應(yīng)，參與抑郁癥發(fā)生、發(fā)展。抑郁癥患者常伴有免疫功能下降，使促炎細(xì)胞因子水平明顯升高，從而影響患者神經(jīng)內(nèi)分泌功能[18]。IL-6是一種單鏈糖蛋白，可在應(yīng)激反應(yīng)下參與多種生物學(xué)功能[19]。劉梅等[20]研究發(fā)現(xiàn)，低頻重復(fù)經(jīng)顱磁刺激治療后，腦卒中所致抑郁癥患者血清IL-6水平顯著低于治療前，可明顯改善腦卒中抑郁癥狀。而TNF-α由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可通過促進中性粒細(xì)胞黏附刺激機體炎癥反應(yīng)的發(fā)生，參與多種疾病的病理、生理過程。陸梅娟等[21]研究報道，抑郁癥患者血清TNF-α水平異常升高，且經(jīng)帕羅西汀治療后其水平明顯降低，其水平變化可用于評估抑郁癥的嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與治療前相比，治療后兩組患者血清IL-6、TNF-α水平均顯著降低，且治療后研究組患者血清IL-6、TNF-α水平遠(yuǎn)低于對照組，與劉梅等[20]、陸梅娟等[21]研究相似，提示在口服鹽酸度洛西汀腸溶膠囊基礎(chǔ)上使用HF-rTMS治療，對降低重度抑郁患者血清炎性因子IL-6、TNF-α水平具有積極作用。此外，重度抑郁患者在口服鹽酸度洛西汀腸溶膠囊基礎(chǔ)上應(yīng)用HF-rTMS治療，并不會明顯增加治療過程中不良反應(yīng)，提示聯(lián)合應(yīng)用HF-rTMS安全性較高。

綜上所述，重度抑郁患者使用HF-rTMS治療效果好，可明顯改善患者精神狀態(tài)，治療效果可能與患者血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平降低有關(guān)。本研究僅初步證實HF-rTMS治療對重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平的作用，其具體作用機制應(yīng)擴大樣本繼續(xù)研究。

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（收稿日期：2020-01-13）