任怡桐 劉光焱

摘要：目的：本文主要使用益生菌裂解物：雙歧桿菌提取液（BL），通過(guò)雙盲、安慰劑體外試驗(yàn)對(duì)含有活性提取物的外用乳膏進(jìn)行試驗(yàn)。使用含細(xì)菌提取物的乳膏的志愿者在治療結(jié)束時(shí)皮膚敏感性顯著降低。此外，與使用對(duì)照霜的志愿者組相比，該治療提高了皮膚抵抗物理和化學(xué)攻擊的能力。值得注意的是，使用活性面霜治療的志愿者，破壞皮膚屏障功能所需的脫衣次數(shù)顯著增加。結(jié)果證明，這種應(yīng)用于皮膚的非復(fù)制細(xì)菌形式能夠改善敏感皮膚。

關(guān)鍵詞：長(zhǎng)雙歧桿菌;益生菌;皮膚敏感

腸道微生物即指在腸道生存的各種微生物的總和，它是人體內(nèi)高度復(fù)雜的微生物共生系統(tǒng)。與機(jī)體相互依存并對(duì)機(jī)體生理代謝和免疫功能產(chǎn)生重要影響。每個(gè)個(gè)體的腸道都如同一個(gè)營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基，含有多達(dá)數(shù)百種的的腸道細(xì)菌，有著大量的細(xì)菌群落。[1]作為“新型虛擬代謝器官”，腸道菌群在生產(chǎn)維生素、營(yíng)養(yǎng)和能量吸收、代謝功能等方面作用顯著。而益生菌則是腸道的天然居民，人和動(dòng)物中最常使用的益生菌屬是腸球菌，乳桿菌和雙歧桿菌。益生菌主要被定義為“活微生物，應(yīng)適當(dāng)攝入，可對(duì)寄主產(chǎn)生健康影響”。一些證據(jù)表明，除了能夠積極影響腸道微生物群的組成外，一些益生菌還可以在局部和全身水平調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，從而改善免疫防御機(jī)制或下調(diào)免疫紊亂，如過(guò)敏和腸道炎癥。最近的臨床試驗(yàn)被廣泛認(rèn)為在異位性皮炎的管理和干性皮膚補(bǔ)充益生菌可能是有用的。[2]

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

敏感性皮膚對(duì)物理（熱、冷、風(fēng)）或化學(xué)（局部應(yīng)用產(chǎn)品）刺激具有明顯的不適，并且皮膚屏障修復(fù)自身的能力較弱。[3]對(duì)敏感皮膚、身體皮膚干燥和臉部粗糙進(jìn)行隨機(jī)調(diào)查問(wèn)卷，從結(jié)果中選取78名反應(yīng)性皮膚的女性志愿者，旨在研究含有細(xì)菌提取物的藥膏在調(diào)節(jié)健康女性的皮膚敏感性和干燥程度方面的作用。

1.2 試驗(yàn)方法

長(zhǎng)雙歧桿菌裂解液（BL）是水性介質(zhì)中的超聲滅活懸浮液。活性形式占總懸浮液的5%。

將該實(shí)驗(yàn)設(shè)置為雙盲及安慰劑對(duì)照試驗(yàn)，向76名志愿者隨機(jī)分配對(duì)照霜和測(cè)試霜。為了防止志愿者之前使用的其他外用乳膏產(chǎn)生干擾及偏見(jiàn)，在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)治療2個(gè)月之前，可先執(zhí)行約1周的清除期。

將含10%細(xì)菌提取物的測(cè)試乳膏（n=36）或?qū)φ杖楦?安慰劑（n=36）涂在面部、手臂和腿部皮膚上，每天2次，試驗(yàn)周期為60天。

選擇實(shí)驗(yàn)第1天、第20天、第40天、第60天進(jìn)行評(píng)估。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 皮膚敏感性

敏感性皮膚是一種不易評(píng)估的疾病癥狀，該實(shí)驗(yàn)主要使用乳酸刺激方法來(lái)對(duì)敏感皮膚進(jìn)行評(píng)估。具體方法為：將乳酸溶液涂于鼻唇溝、手腕外側(cè)及腳踝內(nèi)側(cè)位置，因?yàn)檫@些位置的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)相對(duì)密集，毛囊和汗腺發(fā)達(dá)，有助于乳膏的吸收。通過(guò)比較固定時(shí)間內(nèi)受試者的刺痛感判斷皮膚敏感性的變化。

1.3.2 皮膚屏障功能

在皮膚屏障功能恢復(fù)能力的方面，該實(shí)驗(yàn)采用平庫(kù)斯膠帶剝離法，該方法僅去除角質(zhì)層而不會(huì)對(duì)活的角質(zhì)形成細(xì)胞損害或深層次的炎癥反應(yīng)。具體方法為：在受試者前臂內(nèi)側(cè)的皮膚上重復(fù)使用皮膚膠帶，并進(jìn)行表皮水分流失情況（TEWL）的測(cè)定，直到達(dá)到20g/cm2/h的TEWL水平。

1.3.3 皮膚補(bǔ)水

判斷皮膚干燥程度的標(biāo)志物為天然保濕因子（NMF），這種存在于人體表皮層的蛋白質(zhì)對(duì)皮膚保濕具有重要作用。NMF主要由氨基酸、乳酸鹽和尿素等多種成分所組成，該實(shí)驗(yàn)選取尿素作為生化評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。[4]

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用線性混合模型處理縱向數(shù)據(jù)的定量刺痛測(cè)試數(shù)據(jù)。

使用SAS或SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。雙面顯著性閾值設(shè)置為5%。

圖形顯示的平均值具有95%的置信區(qū)間，在 P<0.01時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。2 結(jié)果

使用含10%BL細(xì)菌提取物的乳膏治療2個(gè)月以后，受試者的皮膚敏感性出現(xiàn)顯著降低（P =0.0026）。

使用含10%BL細(xì)菌提取物的乳膏進(jìn)行治療的受試者對(duì)于破壞皮膚屏障功能（20g/cm2/h）所需的膠帶剝離次數(shù)（P=0.0042）明顯增加，說(shuō)明與安慰劑組相比，BL測(cè)試乳膏的可以增加皮膚屏障對(duì)于外部攻擊的抵抗力。

通過(guò)測(cè)定角質(zhì)層中尿素的濃度，可以發(fā)現(xiàn)使用安慰劑的一組角質(zhì)層尿素濃度顯著下降（P=0.021），而測(cè)試乳膏組則未見(jiàn)明顯下降。使用含10%BL細(xì)菌提取物的乳膏的受試者面部皮膚粗糙度和身體皮膚干燥度顯著降低。

2 討論

通過(guò)以上進(jìn)行的皮膚外用研究可以初步得出結(jié)論，即局部應(yīng)用這種細(xì)菌提取物在降低皮膚敏感性，增強(qiáng)皮膚屏障抵抗力及皮膚補(bǔ)水能力有益處。而使用對(duì)照乳霜的受試者在同樣時(shí)期也表現(xiàn)出皮膚狀態(tài)對(duì)于季節(jié)及溫度變化的隨機(jī)變化，而使用BL乳霜的受試者在實(shí)驗(yàn)D60的評(píng)估結(jié)果中很接近非敏感皮膚受試者的正常數(shù)值，也可表明BL乳霜也有助于增強(qiáng)皮膚的動(dòng)態(tài)平衡能力，改善皮膚對(duì)外界傷害的抵抗力。

而且益生菌調(diào)節(jié)劑作為一類(lèi)維持體內(nèi)菌群平衡的藥，見(jiàn)效雖慢，但可以對(duì)機(jī)體作出良好的調(diào)整，對(duì)各類(lèi)疾病都有一定的治療效果，所以具有很大的開(kāi)發(fā)潛力。[5]

參考文獻(xiàn)：

[1]段云峰，金鋒.腸道微生物與皮膚疾病——腸-腦-皮軸研究進(jìn)展[J].科學(xué)通報(bào)，2017，62（5）：360-371.

[2]趙惠娟，姜薇.人類(lèi)腸道微生物群和皮膚疾病[J].臨床皮膚科雜志，2016，45（05）：397-399

[3]Audrey G，Philippe B，Marc O J E A.Bifidobacterium longum lysate，a new ingredient for reactive skin，2010[J].Exp Dermatol，2010，19：e1-e8.

[4]A S G.special method of investigating the streptococcal and acidophilus intestinal flora：With results in fifty-three mental patients.Brit J Psychiatr[J].1930，76：56-65.

[5]Eckburg PB，Bik EM，Bernstein CN，et al.Diversity of the human intestinal microbial flora.Science[J].Science，2005，308（5728）：1635-1638.

通訊作者：劉光焱