魯佳琦?吳晨陽?吳秋婷?徐宇彤?張文

摘 要：蜂農(nóng)在養(yǎng)殖蜜蜂的過程中往往直接飼喂或者在蜂巢中噴灑獸藥，而硝基呋喃類作為常見的抗菌藥物廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)，長期食用硝基呋喃殘留量過高的食品對人體有一定的危害。本文對蜂蜜中硝基呋喃的檢測方法進(jìn)行綜述，并對發(fā)展前景進(jìn)行分析。

關(guān)鍵詞：蜂蜜;硝基呋喃;檢測;進(jìn)展

硝基呋喃類藥物是一種重要的廣譜抗菌藥物，曾廣泛用于畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。在蜂農(nóng)養(yǎng)殖蜜蜂過程中，蜜蜂易受到微生物和螨蟲的污染而引起病害影響產(chǎn)量[1]。為有效防控疾病，蜂農(nóng)往往直接飼喂或者在蜂巢中噴灑獸藥，導(dǎo)致獸藥殘留問題屢屢出現(xiàn)，對消費(fèi)者身體健康造成潛在威脅。相關(guān)規(guī)定要求飼養(yǎng)過程中禁止使用硝基呋喃類藥物且在動(dòng)物性食品中不得檢出。因此，對于蜂蜜中硝基呋喃類藥物及其代謝物的檢測具有重要意義。

1 蜂蜜中硝基呋喃類藥物殘留檢測方法

硝基呋喃類抗生素對光敏感，在動(dòng)物體內(nèi)的半衰期不過數(shù)小時(shí)，較難檢出原藥殘留。因此，一般常檢測硝基呋喃的4種代謝物：呋喃它酮（AMOZ）、呋喃西林（SEM）、呋喃妥因（AHD）和呋喃唑酮（AOZ）。目前報(bào)道的用于檢測蜂蜜中硝基呋喃類抗生素代謝物殘留的方法主要有以下方法。

1.1 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是利用化合物之間質(zhì)荷比的差別的原理進(jìn)行高靈敏度檢測[2]。該方法采用微量化樣品前處理技術(shù)，建立蜂蜜中硝基吠喃類抗生素代謝物的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法，并對衍生反應(yīng)時(shí)間、液相色譜流動(dòng)相梯度洗脫程序、質(zhì)譜條件等進(jìn)行優(yōu)化。相比傳統(tǒng)分析方法，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法具有簡單快速、靈敏、準(zhǔn)確與成本低等特點(diǎn)。

1.2 高效液相色譜-電噴霧多級質(zhì)譜（LCM/Sn）

高效液相色譜-電噴霧多級質(zhì)譜是利用電噴霧離子化系統(tǒng)對需要檢測的獸藥化合物的分子離子和裂片離子進(jìn)行質(zhì)量分析。提取蜂蜜中硝基呋喃類抗生素，并且對其液相系統(tǒng)條件、質(zhì)譜系統(tǒng)條件進(jìn)行掃描分析，得出4種衍生化后的硝基呋喃類代謝物二級質(zhì)譜圖。再通過流動(dòng)注射分析發(fā)現(xiàn)4種硝基呋喃類代謝物衍生物二級質(zhì)譜各存在的兩個(gè)主要離子碎片進(jìn)行效率檢測以及水平測試[3]。相比傳統(tǒng)分析方法，高效液相色譜-電噴霧多級質(zhì)譜（LCM/Sn）法更加簡單快速、靈敏且定性定量準(zhǔn)確。

1.3 酶聯(lián)免疫法（ELISA）

ELISA法是根據(jù)競爭免疫分析原理，對一個(gè)樣本中的多個(gè)硝基呋喃類藥物及代謝產(chǎn)物進(jìn)行檢測，具有比傳統(tǒng)分析方法更高效、操作簡單、靈敏與速度快等特點(diǎn)。經(jīng)過前處理的蜂蜜樣品用芯片檢測，將顯色后的芯片放入芯片分析儀中獲取結(jié)果圖像，啟用默認(rèn)的芯片和專用軟件進(jìn)行自動(dòng)化分析，檢測出蜂蜜中硝基呋喃類的4種代謝物濃度[4]。

1.4 同位素稀釋質(zhì)譜法

同位素質(zhì)譜法采用同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜，與液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜定量分析中采用的其他內(nèi)標(biāo)技術(shù)相比，由于化合物與帶有其同位素標(biāo)記的化合物的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)相似，可以最大限度降低系統(tǒng)誤差，提高檢測的穩(wěn)定性和定性定量分析的準(zhǔn)確性。

1.5 其他方法

國內(nèi)外常見的檢測蜂蜜中硝基呋喃的方法還有液相色譜法、常規(guī)理化檢測法、毛細(xì)管電泳法與分子印跡技術(shù)等方法。

2 蜂蜜中硝基呋喃代謝物殘留檢測方法的發(fā)展前景

蜂蜜是我國的傳統(tǒng)食品，雖然有對蜂蜜中硝基呋喃代謝物殘留的研究，但是研究過程中操作復(fù)雜、樣品回收率低、樣品難以提取和利用、靈敏度不高且干擾因素多。因此未來蜂蜜中硝基呋喃代謝物殘留檢測技術(shù)必將向微量、快速、便捷、多維且全面的方向發(fā)展，或?qū)F(xiàn)有檢測技術(shù)聯(lián)用，應(yīng)用新興技術(shù)來實(shí)現(xiàn)檢測方法的創(chuàng)新與改進(jìn)，達(dá)到低成本、高效率的目的，并獲得更加準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

[1]DELAPLANE KS. Honey bees and beekeeping. University of GeorgiaCooperative Extension Bulletin[EB/OL]（.2010-02-22）[2017-10-15].http：//www.i4at.org/lib2/bees.htm.

[2]高洋洋，劉鑫，陳廣全.蜂蜜中硝基呋喃代謝物的超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定法[J].職業(yè)與健康，2018，7（34）：1764.

[3]蔣原，丁濤，沈崇鈺，陳惠蘭.液相色譜-電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用檢測蜂蜜中四種硝基呋喃類代謝物[J].畜牧與獸醫(yī)，2005（03）：12-15.

[4]許月明，潘言方，李慧慧.ELISA可視化微陣列芯片法檢測蜂蜜中硝基呋喃類藥物的殘留量[J]科技文苑，2018，113（18）：147-150.

基金項(xiàng)目：西南科技大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新基金項(xiàng)目（編號：JZ-067）。

作者簡介：魯佳琦（1999—），女，漢族，吉林白城人，本科。研究方向：食品安全檢測。

通訊作者：張文（1988—），男，漢族，四川德陽人，博士，副教授。研究方向：食品品質(zhì)與安全檢測。