覃小珊,張彩靈,黃贊松

覃小珊,黃贊松,右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科 廣西壯族自治區(qū)百色市 533000

覃小珊,張彩靈,右江民族醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院 廣西壯族自治區(qū)百色市533000

黃贊松,廣西肝膽疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心 廣西壯族自治區(qū)百色市533000

0 引言

原發(fā)性肝癌素有“癌中之王”的稱號(hào),病程短、手術(shù)率低、治療棘手[1],是我國(guó)主要的常見(jiàn)惡性腫瘤[2].2018年全球癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,肝癌在惡性腫瘤致死病因中位居第3位,這其中75%-85%的病例來(lái)源于肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC),嚴(yán)重威脅著人類的生命健康[3].HCC是一種高度血管化且血管高度異質(zhì)性的腫瘤,其中增殖性HCC通常分化差,而新發(fā)現(xiàn)的增殖性HCC亞型(巨梁團(tuán)塊型HCC)更與血管生成激活有關(guān)[4].腫瘤血管的形成不僅為腫瘤生長(zhǎng)提供必須的氧氣和營(yíng)養(yǎng),還為遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移提供途徑.大量研究[5-10]發(fā)現(xiàn)HCC的血管生成是一種模式多樣,并受到多種因素調(diào)節(jié)的復(fù)雜過(guò)程.腫瘤微環(huán)境(tumor microenvironment,TME)是由腫瘤細(xì)胞、多種基質(zhì)細(xì)胞和非細(xì)胞成分構(gòu)成,這些成分通過(guò)不同機(jī)制所形成的復(fù)雜理化網(wǎng)絡(luò)促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展[11].研究表明,TME中的各個(gè)成分可通過(guò)多種方式促進(jìn)HCC血管形成.本文就HCC的血管生成模式、TME對(duì)HCC血管形成調(diào)控的研究進(jìn)展予以綜述.

1 HCC的血管生成模式

在正常組織中,大多數(shù)血管常處于靜止?fàn)顟B(tài).血管生成模式主要包括： 出芽式血管生成、分裂式血管生成和循環(huán)血管生成.腫瘤的血管生成過(guò)程主要是腫瘤本身引發(fā)的復(fù)雜過(guò)程(圖1),這其中還包含血管共選擇、套疊式微血管生長(zhǎng)、血管生成擬態(tài)、成血管細(xì)胞募集、腎小球樣血管生長(zhǎng)等模式[12].HCC的血管生成也涉及多種血管生成模式.

1.1 出芽式血管生成 出芽式血管生成(sprouting angiogenesis,SA)是指先前存在的宿主毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells,ECs)以出芽的方式形成新的腫瘤毛細(xì)血管.它是由多種因素共同參與的有序復(fù)雜過(guò)程,在促血管生成信號(hào)刺激下血管ECs歷經(jīng)增殖、分化、遷移及管狀血管結(jié)構(gòu)形成[13].當(dāng)然這種模式也在HCC血管生成中廣泛存在,參與其中的腫瘤相關(guān)血管ECs因其獨(dú)特的細(xì)胞表型而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展.例如趨化因子受體CXCR4可以在多種細(xì)胞中表達(dá),而CXCR4+的腫瘤相關(guān)血管ECs具有尖端細(xì)胞特征并有助于血管發(fā)芽[5].

1.2 血管共選擇 血管共選擇是腫瘤細(xì)胞利用周?chē)菒盒越M織現(xiàn)存的脈管系統(tǒng)來(lái)支持腫瘤存活、生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的非血管新生模式.這一模式普遍存在黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、乳腺癌等多種體內(nèi)外腫瘤模型中[14].Kuczynski等[6]研究發(fā)現(xiàn),在原位人類HCC模型經(jīng)過(guò)索拉非尼治療出現(xiàn)耐藥跡象后,腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出高度侵襲性,卻未見(jiàn)新血管生成,耐藥組中血管共選擇達(dá)到腫瘤所有血管的75%±10.9%,遠(yuǎn)高于未經(jīng)治療的對(duì)照組.但在停止治療后腫瘤細(xì)胞侵襲表現(xiàn)減少轉(zhuǎn)而依賴血管生成.HCC中血管共選擇的存在也說(shuō)明了HCC抗血管治療的復(fù)雜性.臨床抗血管生成治療主要針對(duì)的是腫瘤新生血管,而血管共選擇有可能是部分HCC患者臨床治療耐藥的原因.

1.3 套疊式微血管形成 套疊式微血管形成(intussusceptive microvascular growth,IMG)是依靠ECs重塑形成的間質(zhì)柱狀結(jié)構(gòu)分裂原有存在的血管腔,同時(shí)募集周細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等覆蓋間隙壁,最終形成兩個(gè)獨(dú)立血管的過(guò)程.這種模式最初在肺血管的研究中被發(fā)現(xiàn),但隨后的多項(xiàng)研究表明IMG支持腫瘤血管形成[15].蔡靚羽等[7]應(yīng)用mTOR抑制劑西羅莫司處理荷肝癌大鼠后發(fā)現(xiàn)其腫瘤組織的血管主要以IMG的方式生長(zhǎng),而血管出芽生長(zhǎng)被抑制.由此,我們可以認(rèn)為HCC的血管生成模式可以多種形式同時(shí)存在,腫瘤能選擇有利模式促進(jìn)血管生成以適應(yīng)環(huán)境變化.

圖1 與腫瘤血管生成有關(guān)的機(jī)制[13].A:出芽式血管生成; B:成血管細(xì)胞募集; C:血管生成擬態(tài); D:套疊式微血管形成.圖片由Zuazo-Gaztelu I和Casanovas O根據(jù)Creative Commons Attribution 3.0 Unported License guidelines 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by/3.0/)使用Servier Medical Art創(chuàng)建.對(duì)原始圖片進(jìn)行了簡(jiǎn)化和顏色編輯.

1.4 血管生成擬態(tài) 血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry,VM)是一種有別于傳統(tǒng)血管生成的新模式,極具侵襲性的腫瘤細(xì)胞可以模擬ECs形成功能性血管通道為腫瘤提供血液供給.主要分為管狀型VM和基質(zhì)型VM 2種類型,前者是由模擬正常ECs形成血供通道的腫瘤細(xì)胞組成,后者是由富含纖維連接蛋白、膠原蛋白、層粘連蛋白的基底膜包繞腫瘤細(xì)胞構(gòu)成[16].越來(lái)越多的證據(jù)表明HCC組織中有VM的存在,而且以上2種類型都可以在HCC中出現(xiàn)[8,17].不同的VM類型可能促使HCC獲得不同的生物學(xué)行為,這就需要更深的研究來(lái)論證.

1.5 成血管細(xì)胞募集 腫瘤血管的ECs主要有3個(gè)來(lái)源： 鄰近已有血管的ECs; VM中的腫瘤細(xì)胞; 骨髓源性的內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)[18].腫瘤組織分泌相關(guān)促血管生成因子誘導(dǎo)骨髓源性的EPCs遷移至腫瘤組織分化為ECs參與血管形成的過(guò)程即為成血管細(xì)胞募集[19].Wang等[9]和Sun等[20]在不同的肝癌模型中證實(shí)EPCs可以遷移到HCC組織中促進(jìn)血管生成.

1.6 包裹腫瘤簇的血管 包裹腫瘤簇的血管(vessels encapsulating tumor clusters,VETC)是在HCC細(xì)胞來(lái)源的血管生成素2誘導(dǎo)下由CD34+ECs、壁細(xì)胞、基底膜所形成的血管,血管內(nèi)皮可以完全包裹腫瘤簇并形成蜘蛛網(wǎng)狀網(wǎng)絡(luò).它是由Fang等[10]在HCC臨床樣品和小鼠異種移植模型的研究中首次發(fā)現(xiàn).他們的研究也明確了VETC模式是HCC血源性轉(zhuǎn)移的新機(jī)制,而且這個(gè)機(jī)制是不依賴上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)換(epithelial-mesenchymal transition,EMT)進(jìn)行的.同時(shí),Renne等[21]進(jìn)行的一項(xiàng)多機(jī)構(gòu)隊(duì)列研究發(fā)現(xiàn)VETC不但與HCC多種臨床及病理學(xué)表征相關(guān),而且影響著HCC的生物學(xué)行為.

2 影響HCC血管生成的因素

腫瘤血管生成始終貫穿腫瘤發(fā)生發(fā)展整個(gè)過(guò)程.大量證據(jù)表明腫瘤血管生成是一個(gè)由腫瘤細(xì)胞與多種腫瘤相關(guān)基質(zhì)細(xì)胞及其生物活性產(chǎn)物共同參與的過(guò)程(圖2)[22].腫瘤血管生成有賴于腫瘤血管生成促進(jìn)因子與抑制因子之間的不平衡,而且HCC的血管生成不是以單一的特定模式進(jìn)行,由此,許多學(xué)者從各個(gè)角度研究TME對(duì)HCC血管生成的影響.

2.1 理化因素

2.1.1 缺氧： 缺氧不僅是TME的一個(gè)特征,也是腫瘤發(fā)生發(fā)展的一個(gè)適應(yīng)性機(jī)制,缺氧會(huì)促使不同癌細(xì)胞和各種基質(zhì)成分之間出現(xiàn)復(fù)雜反應(yīng)[23].腫瘤組織的生長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致微環(huán)境越來(lái)越缺氧,那么就更依賴血管生成來(lái)增強(qiáng)血供,所以,它也是影響血管生成的關(guān)鍵因素之一.缺氧可直接調(diào)節(jié)各種非編碼RNA的表達(dá)、外泌體的釋放等來(lái)影響血管形成.在缺氧條件下,源自HCC細(xì)胞內(nèi)含高水平miR-155的外泌體增強(qiáng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的血管形成能力[24].缺氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor,HIF)是由HIF-1α或HIF-2α和HIF-1β/ARNT亞基組成的異二聚體轉(zhuǎn)錄因子,HIF激活是腫瘤細(xì)胞在缺氧條件下調(diào)控腫瘤生物學(xué)行為的關(guān)鍵步驟[25,26].Wang等[27]發(fā)現(xiàn)HIF-1α上調(diào)HCC細(xì)胞中LOXL2的表達(dá),并誘導(dǎo)EMT和管型VM出現(xiàn).在缺氧條件下,HIF調(diào)控的下游基因大多參與腫瘤細(xì)胞遷移及侵襲、組織血管生成等過(guò)程.Wen等[28]研究表明HIF-1α活化能激活VEGFA、TGF-β、EPO等下游血管生成相關(guān)基因表達(dá)上調(diào),促進(jìn)HCC細(xì)胞條件培養(yǎng)基所培養(yǎng)的HUVEC形成毛細(xì)血管.但在裸鼠原位植入的HCC模型中,腫瘤組織中HIF-1α、SDF-1和VEGF表達(dá)上調(diào)可能導(dǎo)致EPCs向HCC的定向歸巢,進(jìn)而增強(qiáng)腫瘤血管生成[29].

圖2 腫瘤微環(huán)境中構(gòu)成腫瘤血管生成景觀的細(xì)胞和分子成分[13].圖片由 Zuazo-Gaztelu I和Casanovas O根據(jù)Creative Commons Attribution 3.0 Unported License guidelines 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by/3.0/)使用Servier Medical Art創(chuàng)建.對(duì)原始圖片進(jìn)行了簡(jiǎn)化和顏色編輯.

2.1.2 低pH： 低pH是TME的另一個(gè)顯著特征.腫瘤生長(zhǎng)可以伴隨產(chǎn)生大量酸性代謝產(chǎn)物,通過(guò)瓦伯格效應(yīng)或有氧糖酵解的新陳代謝程序而形成典型的酸性微環(huán)境,同時(shí)酸性微環(huán)境也更有助于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[30,31].許多體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)腫瘤酸性微環(huán)境堿化可以緩解細(xì)胞缺氧進(jìn)而遏制腫瘤血運(yùn).在兔肝癌模型中給予經(jīng)動(dòng)脈化學(xué)栓塞術(shù)(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治療的區(qū)域HIF-1α、糖酵解的組織病理學(xué)標(biāo)志物GLUT-1、慢性酸中毒指標(biāo)LAMP-2表達(dá)降低[32].另外,在臨床一項(xiàng)非隨機(jī)對(duì)照研究中,Chao等[33]發(fā)現(xiàn)碳酸氫鹽可顯著增強(qiáng)TACE的抗癌活性.

2.1.3 細(xì)胞外基質(zhì)重塑： 細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)是TME主要的結(jié)構(gòu)成分,由纖維蛋白、糖蛋白、蛋白多糖、多糖等不同要素組成.失衡的ECM重塑促進(jìn)不可逆的蛋白水解和交聯(lián)使腫瘤組織變得更堅(jiān)硬.ECM降解誘發(fā)大量細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子的釋放導(dǎo)致細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)異常、微環(huán)境特征改變、血管生成紊亂等[34].膠原蛋白是ECM中最豐富的成分,LOXL2作為賴氨酰氧化酶(LOX)家族的一員,主要作用是催化ECM中膠原蛋白和彈性蛋白的共價(jià)交聯(lián),HCC中的LOXL2過(guò)表達(dá)可促進(jìn)VM的形成[27].另外,Shuai等[35]研究發(fā)現(xiàn)高密度的ECM能夠誘導(dǎo)HCC細(xì)胞(Bel7402細(xì)胞)的VM形成.透明質(zhì)酸(hyaluronan,HA)作為ECM中一種重要多糖,主要是提供松散基質(zhì)而利于癌細(xì)胞遷移及粘附.Ghose等[36]研究證實(shí)HA介導(dǎo)細(xì)胞骨架重組,經(jīng)HA處理的小鼠肝臟ECs中促血管生成因子表達(dá)升高,并出現(xiàn)更多數(shù)量的血管芽.綜上,HCC進(jìn)展過(guò)程中不同剛性的基質(zhì)變化、細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)異?？梢源偈共煌难苌煞绞匠霈F(xiàn).

2.2 非免疫細(xì)胞及其衍生分子因素

2.2.1 腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞： 腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是TME中比重最大的基質(zhì)細(xì)胞,可能來(lái)源于正常成纖維細(xì)胞、ECs、肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells,HSCs)、骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞等,有著獨(dú)特的細(xì)胞表型,不僅分泌TGF-β、FGF、VEGF、PDGF、IL等多種因子,還能衍生ECM相關(guān)蛋白質(zhì)、ECM相關(guān)酶等[37].但是,目前CAFs參與血管生成的確切機(jī)制仍不完全清楚.Zhou等[38]研究發(fā)現(xiàn)來(lái)源HCC細(xì)胞外泌體的miRNA-21通過(guò)激活PDK1/AKT信號(hào)通路將HSCs轉(zhuǎn)化為CAFs,CAFs分泌VEGF、MMP2、MMP9、bFGF、TGF-β增加促進(jìn)血管生成.VASH 1介導(dǎo)血管內(nèi)皮的負(fù)反饋,而CAFs可以通過(guò)分泌VEGF調(diào)節(jié)EZH2/VASH1途徑促進(jìn)HCC的血管生成[39].另外,有臨床數(shù)據(jù)[40]表明CAFs的富集度與人HCC樣品中的腫瘤大小呈正相關(guān).那么,在HCC的發(fā)展進(jìn)程中,CAFs對(duì)腫瘤血管生成的作用可能會(huì)隨著腫瘤體積的增大而增強(qiáng).

2.2.2 ECs： ECs是血管生成的核心參與者,可在血管發(fā)芽期間從靜止?fàn)顟B(tài)快速轉(zhuǎn)變?yōu)楦叨冗w移和增殖狀態(tài).在腫瘤組織中,ECs通常處于激活狀態(tài),細(xì)胞表型會(huì)隨細(xì)胞的不同分子水平而改變,其分泌的多種因子不僅利于血管形成,而且也促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)[41].VEGF是參與ECs依賴性腫瘤血管生成的主要活化因子,但當(dāng)以ECs為導(dǎo)向的SA方式減弱時(shí),HCC則利用更少依賴ECs的血管套疊生長(zhǎng)模式[7].另一方面,應(yīng)用抑制腫瘤血管形成和破壞現(xiàn)存腫瘤相關(guān)血管的抗血管生成療法能夠促進(jìn)腫瘤相關(guān)ECs的自噬,但其釋放富含VEGF的外泌體反而促進(jìn)腫瘤組織VM形成[42].Géraud等[43]在分析小鼠肝癌AST模型和人類HCC樣品的肝竇內(nèi)皮細(xì)胞特異標(biāo)記物中發(fā)現(xiàn),HCC在不同發(fā)展時(shí)期會(huì)由于ECs的轉(zhuǎn)分化而選擇不同血管生成方式,早期傾向于血管共選擇和IMG,而后期似乎以SA為主.由此可見(jiàn),HCC在不同時(shí)期不同階段可以轉(zhuǎn)換相對(duì)利于自身生長(zhǎng)的血管生成方式來(lái)改善腫瘤供血,那么臨床上抗肝癌血管生成治療方案應(yīng)該動(dòng)態(tài)改變,但具體治療時(shí)機(jī)的調(diào)整仍需進(jìn)一步深究.

2.2.3 HSCs： HSCs是位于肝竇和門(mén)脈區(qū)域的肝特異性間充質(zhì)細(xì)胞,HSCs參與多種細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、MMP等的產(chǎn)生,活化的HSC (aHSC)是ECM中膠原蛋白和蛋白多糖的主要來(lái)源.通過(guò)與HCC細(xì)胞、其他基質(zhì)細(xì)胞之間相互串?dāng)_影響HCC的發(fā)展[44].血管生成素Ang-1是除VEGF及其受體外重要的血管生成因子.Lin等[45]研究表明aHSC通過(guò)分泌Ang-1促進(jìn)HCC血管生成.而且在小鼠原位肝癌模型(小鼠肝癌細(xì)胞H22與BALB/c小鼠肝臟中分離得到的HSC共移植)中能檢測(cè)出密度更高的CD31+血管[46].當(dāng)然,HSCs在許多信號(hào)通路中也有著重要作用.Hh-Gli信號(hào)通路是關(guān)鍵的致癌路徑,Li等[47]研究發(fā)現(xiàn)旁分泌Hh信號(hào)誘導(dǎo)的HSC激活分泌VEGF、Ang-1不僅促進(jìn)血管生成,還有助于VM增強(qiáng).

2.3 免疫細(xì)胞及其衍生分子因素

2.3.1 肝巨噬細(xì)胞： 肝臟是人體最大的免疫器官,肝巨噬細(xì)胞是由常駐肝臟的庫(kù)普弗細(xì)胞(kupffer cells,KCs)和不同部位募集到肝臟的巨噬細(xì)胞構(gòu)成.起源于骨髓循環(huán)單核細(xì)胞的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophages,TAMs)也屬于肝巨噬細(xì)胞范疇.肝巨噬細(xì)胞雖有不同的細(xì)胞標(biāo)記,但大量研究發(fā)現(xiàn)它們除了可以分泌VEGF、PDGF、腫瘤壞死因子TNF-α、IL等因子,還通過(guò)細(xì)胞間接接觸及修剪原始血管等方式參與HCC血管生成[48].目前研究發(fā)現(xiàn),不同的巨噬細(xì)胞子集通過(guò)不同機(jī)制參與HCC的血管形成,并且導(dǎo)致不同子集間的細(xì)胞表型改變.Miura等[49]研究發(fā)現(xiàn)高脂飲食增加肝細(xì)胞特異性磷酸酶和張力蛋白同源(Pten)缺陷[hepatocytespecific phosphatase and tensin homolog (Pten)-deficient,Pten△hep]小鼠HCC發(fā)生,Pten△hep小鼠腫瘤區(qū)域CD31+ECs增多,雙重免疫熒光染色結(jié)果顯示KCs是高脂飲食下VEGF的主要來(lái)源.Notch和Wnt信號(hào)通路的相互調(diào)節(jié)參與血細(xì)胞生長(zhǎng)等多個(gè)發(fā)育過(guò)程,有研究結(jié)果[50]表明Notch-Wnt信號(hào)支配著表現(xiàn)KCs樣特性的TAMs在HCC中增殖.

2.3.2 骨髓來(lái)源抑制細(xì)胞： 骨髓來(lái)源抑制細(xì)胞(myeloidderived suppressor cells,MDSCs)是未成熟髓樣細(xì)胞的異質(zhì)群體,在不同的條件下分化為巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等,目前MDSCs的細(xì)胞表型仍難確定.它們參與腫瘤血管新生的方式有直接分泌生長(zhǎng)因子(如VEGF、bFGF、Bv8、PDGF)來(lái)促進(jìn)新血管生成,分泌MMPs重塑細(xì)胞外環(huán)境,激活其他末端分化細(xì)胞為腫瘤促進(jìn)表型(如Tregs、Tie2+TAMs、TANs)進(jìn)而分泌能夠促進(jìn)血管生成的細(xì)胞生長(zhǎng)因子等[51].有研究[52]證實(shí)CD11b+Ly6G+MDSCs亞群[粒細(xì)胞-MDSC(granulocyte-MDSC,G-MDSCs)]在肝損傷后的再生肝臟中富集,G-MDSCs主要通過(guò)VEGF、IL-6、IL-10等信號(hào)傳導(dǎo)參與血管生成和肝細(xì)胞增殖.同時(shí),MDSCs通過(guò)不同機(jī)制募集到腫瘤組織促進(jìn)血管生成,使得HCC治療變得更加棘手.Lin等[53]發(fā)現(xiàn)在小鼠原位HCC模型中,腫瘤細(xì)胞分泌的粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和腫瘤相關(guān)ECs分泌的IL-6誘導(dǎo)MDSCs和TAMs在腫瘤中的浸潤(rùn)來(lái)促進(jìn)腫瘤血管生成.組織缺氧是基質(zhì)細(xì)胞募集的關(guān)鍵因素,Chiu等[54]研究表明缺氧通過(guò)HIF/趨化因子(CC基序)配體26誘導(dǎo)表達(dá)趨化因子(C-X3-C基序)受體1的MDSC募集到HCC中.

2.3.3 腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞： 腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞(tumor-associated neutrophils,TANs)主要通過(guò)細(xì)胞因子和趨化因子作用而進(jìn)入TME影響腫瘤發(fā)生發(fā)展.根據(jù)功能不同可將TANs分為抗腫瘤型(N1型)和促腫瘤型(N2型),在TGF-β等作用下出現(xiàn)細(xì)胞表型極化[55].MYC原癌基因是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,在多種人類癌癥中過(guò)表達(dá),有研究[56]表明Myc誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生過(guò)程中增強(qiáng)中性粒細(xì)胞在肝臟中浸潤(rùn),表現(xiàn)為腫瘤中炎癥相關(guān)基因(如TNF-α、IL-1b、MMP9等)的表達(dá)上調(diào),但應(yīng)用血管生成抑制劑后中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)被抑制.Huo等[57]在Kras誘導(dǎo)的斑馬魚(yú)肝癌發(fā)生模型中分離出TANs,并對(duì)不同組別的TANs進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)所有組別的VEGFA、IL-1b、MMP14、MMP9等促血管生成基因都明顯上調(diào).在多種HCC動(dòng)物模型中,TANs表現(xiàn)強(qiáng)烈的促血管生成作用,這也和一些臨床HCC樣本的研究結(jié)果基本一致.Gao等[58]研究發(fā)現(xiàn)240例臨床HCC組織中微血管密度(microvessel density,MVD)與腫瘤浸潤(rùn)的CD66b+中性粒細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān),而CD66b+中性粒細(xì)胞與CXCR6相關(guān).當(dāng)CXCR6在小鼠HCC模型中表達(dá)下調(diào)時(shí),腫瘤炎性浸潤(rùn)及血管生成均被抑制.MVD被認(rèn)為是評(píng)估腫瘤血管生成的金標(biāo)準(zhǔn),這表明腫瘤中的TANs數(shù)量有可能成為衡量HCC血管生成程度的指標(biāo)之一.

2.3.4 腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞： 腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞(tumorinfiltrating lymphocytes,TILs)主要包括T細(xì)胞(如細(xì)胞毒性T細(xì)胞、Tregs、Th1細(xì)胞、Th2細(xì)胞、Th17細(xì)胞、γδ T細(xì)胞等)、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞等.在TME中除了發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的作用,部分TILs還能夠通過(guò)各種途徑介導(dǎo)腫瘤血管生成[59].有研究[60]表明IL-17A可以刺激肝癌細(xì)胞分泌血管生成的CXC趨化因子,可能將CXCR2依賴性的ECs募集到腫瘤中.Th17細(xì)胞、γδ T細(xì)胞、NK細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞等TILs都可以分泌IL-17A[61],那么當(dāng)這些細(xì)胞分泌IL-17A增多時(shí),HCC可能更多選擇依賴ECs的血管生成模式形成腫瘤相關(guān)血管.而組織缺氧可以誘導(dǎo)基質(zhì)細(xì)胞趨化,Ren等[62]研究發(fā)現(xiàn)HCC通過(guò)上調(diào)趨化因子(CC基序)配體28表達(dá)來(lái)募集Tregs以在缺氧條件下促進(jìn)血管生成.

3 結(jié)論

隨著研究的深入,已發(fā)現(xiàn)TME的各種成分涉及多種腫瘤血管生成機(jī)制.腫瘤生長(zhǎng)依賴血管新生,HCC作為一種高度血管化的異質(zhì)性惡性疾病,各種微環(huán)境組分通過(guò)廣泛串?dāng)_介導(dǎo)腫瘤血管生成促進(jìn)肝癌發(fā)生發(fā)展.每一個(gè)腫瘤基質(zhì)細(xì)胞及其衍生物都有可能成為潛在的肝癌分子治療的靶標(biāo),雖然一些靶向藥物已經(jīng)應(yīng)用于臨床,但由于HCC血管形成模式及機(jī)制復(fù)雜多樣,針對(duì)性的拮抗血管生成分子靶向治療仍是一個(gè)棘手問(wèn)題[63,64].雖然在某些具體作用及作用機(jī)制上仍存在爭(zhēng)議,但抗HCC血管形成仍是一個(gè)新的、重要的研究領(lǐng)域.