陳炬輝
(浙江大學(xué)附屬邵逸夫醫(yī)院,浙江 杭州 310015)
急性肺損傷是一種肺部病變。給患者肺臟帶來非常嚴(yán)重的影響。沒有得到及時(shí)治療的話,很可能會(huì)造成肺衰竭的出現(xiàn)。當(dāng)前臨床上其發(fā)病因素尚未明確,但不少研究表明脂多糖容易造成急性肺損傷,硫化氫在臨床上能夠有效舒張血管、對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖具有良好的調(diào)節(jié)作用以及抗炎效果。硫化氫可以通過調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞在糖尿病、心血管疾病上發(fā)揮其抗炎作用,本次研究主要對(duì)硫化氫對(duì)脂多糖造成急性肺損傷大鼠的保護(hù)作用與作用機(jī)制進(jìn)行分析,結(jié)果如下。
選擇潔凈級(jí)健康雄性大鼠27只,(由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供),大鼠的體質(zhì)量范圍在250~280 g,將這些大鼠均干凈的鼠籠內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng),充分保證籠內(nèi)的適宜溫度,一般設(shè)置到25 ℃左右即可,濕度的話設(shè)置到50% -60%,同時(shí)要給足大鼠足夠的飼料和水。通過飼養(yǎng)3~4天之后。然后按照數(shù)字隨機(jī)抽取的方式進(jìn)行平均分組,一組為A組,一組為B組,一組為C組,每組各9只。檢測(cè)試劑盒、石蠟切片機(jī)、光學(xué)顯微鏡、電子天平、低溫離心機(jī)。
給予A組大鼠0.5 mL/kg氯化鈉溶液腹腔靜脈注射,給予B組大鼠 LPS(美國Sigma公司)5 mg/kg腹腔靜脈注射,給予C組大鼠在注射LPS之前20分鐘實(shí)施NaHS(美國Sigma公司)27 μmol/k腹腔注射。將這27只大鼠建模成功5小時(shí)候進(jìn)行處死,取其個(gè)別部分左肺組織,并且利用10%的甲醛溶液進(jìn)行固定,然后進(jìn)行石蠟包埋,并通過切片,厚度在5 μm即可,然后開始實(shí)施染色,再利用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察病變組織。然后開始檢測(cè)大鼠的支氣管肺泡灌洗液(BALF)蛋白、BALF IL-10含量,通過改良酚試劑法檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液( BALF)蛋白。通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)BALF IL-10含量。所有檢測(cè)步驟均嚴(yán)格按照試劑盒的詳細(xì)說明進(jìn)行操作。肺組織ICAM-1的表達(dá)水平通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行檢驗(yàn),以細(xì)胞質(zhì)棕黃色顆粒為陽性[1]。
比較3組大鼠的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達(dá)水平。
利用SPSS 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,如果P<0.05,表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
B組大鼠的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達(dá)水平最高,其次是C組組,再來是A組,三組之間的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達(dá)水平差異比較,P<0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。
表1 比較3組大鼠的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達(dá)水平(±s)
表1 比較3組大鼠的BALF蛋白、BALF IL-10含量、肺組織ICAM-1表達(dá)水平(±s)
注:與A組相比,P<0.05,與B組相比,P<0.05
組別 只 BALF蛋白(mg/L) BALF IL-10含量(ng/L) 肺組織ICAM-1表達(dá)水平(OD 值)A組 27 33.1±8.2 20.3±2.8 0.2±0.6 B組 27 95.3±10.7 64.2±4.6 0.4±0.8 C組 27 70.2±9.4 52.4±3.7 0.3±0.7
H2S能夠參與急性肺損傷的病理過程,內(nèi)源性H2S的供體硫氨基酸主要是因?yàn)槊复俜磻?yīng)產(chǎn)生的,而NaHS是外源性H2S供體,因?yàn)榕R床上NaHS的穩(wěn)定性比較好,因此作為供體用于大鼠試驗(yàn),H2S在肺部疾病中,能夠發(fā)揮充分的調(diào)節(jié)作用,通過外源性H2S供體NaHS的作用能夠有效改善患者的肺組織損傷程度,具有極高的調(diào)節(jié)作用,因此在臨床上應(yīng)用廣泛,H2S脂多糖造成急性肺損傷大鼠具有一定的保護(hù)作用,能夠降低BALF蛋白、IL-10含量,以及減輕肺組織ICAM-1表達(dá)水平,從而減少毛細(xì)血管損傷,達(dá)到抗炎的效果,起到保護(hù)肺組織的作用,值得推廣。