鄒冬梅 林向東 林君君

【摘 要】 目的：檢測2015年～2018年建卡孕婦ABO血型及Rh血型，做好母嬰血型不合孕婦的保健指導(dǎo)工作。方法：微柱凝膠法檢測血型。結(jié)果：2567例孕婦：A+型765例，A-型1例;B+型715例，B.型4例;O+型824例，O-型4例;AB+型252例，AB-型2例;A型、B型、O型、AB型各占29.84%、28.01%、32.26%、9.89%。孕婦A型、B型、O型三種血型的分布率明顯高于AB型（χ2=6.63，P<0.01）;孕婦A型、B型、O型三種血型分布率無顯著差異（χ2=3.85，P>0.05）。孕婦Rh陽性血型檢出率明顯高于Rh陰性檢出率（χ2=6.63，P<0.01）。結(jié)論：根據(jù)血型檢測結(jié)果進(jìn)行分析，及時(shí)地對孕婦進(jìn)行血型知識的普及、健康教育和個(gè)體化指導(dǎo)，能夠有效減少新生兒溶血癥的發(fā)生率，保證母嬰安全。

【關(guān)鍵詞】

血型;新生兒溶血?。℉DN）;血清IgG抗體;微柱凝膠法

為了進(jìn)一步做好母嬰血型不合的孕婦保健指導(dǎo)工作，做到早期預(yù)測新生兒溶血病（HDN）發(fā)生的可能性，對2015～2018年2567例建卡孕婦進(jìn)行了ABO血型及Rh血型檢查。

1 資料與方法

1.1 一般資料

使用EDTA抗凝管采集2015年～2018年2567例早孕建卡的孕婦靜脈血2.0mL，年齡21～45歲。標(biāo)本要求無血液稀釋、細(xì)菌污染、離心后無溶血及明顯乳糜。

1.2 儀器與試劑

卡式血型離心機(jī)（Dianafuge）：由北京佰利申科貿(mào)有限公司提供。

ABO.Rh血型檢測卡：由Diagnostic Grifols，S.A.提供，有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

微柱凝膠法[1]。微柱凝膠法結(jié)果敏感、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，肉眼觀察清晰明確，易于客觀判定，可避免因經(jīng)驗(yàn)不足對結(jié)果判定的影響。可拍照保留試驗(yàn)結(jié)果圖像，較試管法保存時(shí)間更長。適用于大量標(biāo)本檢測，可單份標(biāo)本多項(xiàng)指標(biāo)一次離心檢測，配套儀器將整個(gè)過程自動化標(biāo)準(zhǔn)化。微柱凝膠技術(shù)用于孕婦產(chǎn)前檢測，操作方便簡單，可為新生兒溶血疾病的提早預(yù)防提供更多理論依據(jù)[2.4]。

1.3.1 檢驗(yàn)原理 紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠介質(zhì)中發(fā)生肉眼可見的凝集。將特定配比的葡萄糖凝膠顆粒分散裝到特制的凝膠微柱中，制備成微柱凝膠卡。凝膠柱的上層為“反應(yīng)池”（抗體抗原反應(yīng)區(qū)），柱的下層為“分離池”。其原理是利用凝膠顆粒與凝膠顆粒之間的間隙形成的分子篩作用，在微柱凝膠介質(zhì)中紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體結(jié)合，經(jīng)過低速離心，凝集成塊的紅細(xì)胞由于體積大被凝膠阻滯不能通過凝膠層，留在凝膠介質(zhì)的上層或中間，即陽性反應(yīng);未凝集游離紅細(xì)胞由于體積小而通過凝膠之間的間隙沉積在微柱凝膠檢測管底部（管底尖部），形成細(xì)胞扣，即陰性反應(yīng)。

1.3.2 操作 1）配制紅細(xì)胞懸液：一次性試管中加入0.5mL 0.9%的氯化鈉溶液;吸取全血25μL加入至有0.5mL 0.9%的氯化鈉溶液的一次性試管中，配制為2%～3%的RBC混懸液，混勻后待用。2）標(biāo)記、加紅細(xì)胞懸液：用標(biāo)記筆在微柱血型卡上標(biāo)記標(biāo)本號;按照試劑卡說明書要求，用微量加樣器于標(biāo)簽為抗A、抗B的微柱反應(yīng)孔中央加定量待檢的紅細(xì)胞懸液（正定型），在標(biāo)簽為A、B紅細(xì)胞的微柱反應(yīng)孔中央分別加定量的A1、B型紅細(xì)胞懸液試劑（反定型），在質(zhì)控管中加定量待檢的紅細(xì)胞懸液。3）加血漿、離心：按照試劑卡說明書要求，在標(biāo)簽為A、B紅細(xì)胞的微柱反應(yīng)孔中央加一定量的待檢的血漿（反定型），按照試劑卡說明書要求在專用離心機(jī)上水平離心。4）觀察結(jié)果：取出凝膠微柱卡，用肉眼觀察。陽性：對照管的細(xì)胞沉淀在管底，檢測管的凝集塊在膠上或膠中;陰性：質(zhì)控管和檢測管的紅細(xì)胞均沉淀在管底。5）判讀結(jié)果見表1。準(zhǔn)確報(bào)告后登記完善。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以%表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2015年～2018年2567例孕婦ABO血型分布情況見表2。

2015年～2018年2567例孕婦Rh血型分布情況見表3。

3 討論

奧地利維也納大學(xué)的Landsteiner在1900年發(fā)現(xiàn)了人類第一個(gè)血型系統(tǒng)，即ABO血型系統(tǒng)。1924年Bernstein提出，ABO血型遺傳的基因座上，有A、B、O三個(gè)等位基因，是常染色體顯性遺傳，每個(gè)子代均可從親代各得到一個(gè)單倍體，子代從父母雙方各獲得一種基因，可有六種基因組合，有A型、B型、O型及AB型四種表現(xiàn)型[5]。1940年，Landsteiner和Wiener用恒河猴的紅細(xì)胞免疫豚鼠和家兔，發(fā)現(xiàn)恒河猴和多數(shù)人體內(nèi)的紅細(xì)胞上存在一種同樣的Rh血型抗原物質(zhì)，就以恒河猴（Rhesus monkeys）外文名稱的頭兩個(gè)字母Rh命名。Rh基因位于第1號染色體上由RHD和RHCE兩個(gè)緊密連鎖的基因構(gòu)成。Rh血型共有五種抗原，即C、c、D、E、e，其中以D抗原的抗原性最強(qiáng)。由于D抗原最早被發(fā)現(xiàn)，故臨床上凡是紅細(xì)胞上D抗原陽性者稱為Rh陽性，紅細(xì)胞上無D抗原者稱為Rh陰性。這樣就使已發(fā)現(xiàn)的紅細(xì)胞A、B、O及AB四種主要血型的人，又都分別一分為二地被劃分為Rh陽性和Rh陰性兩種。

由表2可知，2015年～2018年2567例孕婦血型分布A型、B型、O型、AB型各占29.84%、28.01%、32.26%、9.89%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，孕婦A型、B型、O型三種血型的分布率均明顯高于AB型（χ2=6.63，P<0.01）。孕婦A型、B型、O型三種血型分布率無差異（χ2=3.85，P>0.05）。由表3可知，2015年～2018年2567例孕婦Rh血型檢查結(jié)果，Rh陽性血型檢出率明顯高于Rh陰性血型檢出率，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，χ2=6.63，P<0.01。11例Rh陰性血型：1例A-、4例B-、4例O-和2例AB-。

新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newborn，HDN）一般是指母嬰血型不合而引起胎兒免疫性溶血性貧血。其中ABO和Rh血型系統(tǒng)引起的新生兒溶血病最常見[6]。O型血孕婦懷有的A型或B型胎兒，其母親體內(nèi)的抗-A、抗-B抗體為IgG類，能夠通過胎盤屏障引起胎兒溶血，會造成新生兒溶血性黃疸、貧血、水腫、膽紅素腦病、肝脾腫大，嚴(yán)重危害患兒健康及智力[7.8]，直接威脅新生兒安全[9]。

O型母親血清中IgG抗A（B）效價(jià)較A型血清中的抗B和B型血清中的抗A為高，辛磊等[10]認(rèn)為：O型血母親抗A（B）抗體效價(jià)與ABO新生兒溶血檢出率呈正相關(guān)，一定程度上可以對新生兒溶血率進(jìn)行預(yù)測。符小玲等[11]認(rèn)為：O型血孕婦HDN的發(fā)生率較高，與丈夫ABO血型和新生兒性別均無關(guān)，與孕婦產(chǎn)前血清IgG抗.A（B）效價(jià)有關(guān)，隨抗體效價(jià)增高而升高。O型血孕婦抗體效價(jià)與新生兒溶血發(fā)病率之間存在明顯聯(lián)系[12]，因此，密切監(jiān)測O型血孕婦抗體效價(jià)，可幫助預(yù)測新生兒溶血病發(fā)生率，并選擇有效預(yù)防和治療措施，降低新生兒溶血風(fēng)險(xiǎn)[13]。又因?yàn)樘杭t細(xì)胞上的A位點(diǎn)（抗原決定簇）較B位點(diǎn)為多，故發(fā)生ABO溶血病以A型嬰兒比B型嬰兒為多[14]。但是馮素芳等[15]認(rèn)為：ABO.HDN中，A型HDN的發(fā)病率與B型HDN的發(fā)病率差異無顯著性;紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)最敏感;IgG血型抗體效價(jià)與HDN的發(fā)病率呈正相關(guān)，隨著IgG血型抗體效價(jià)的升高，HDN的發(fā)病率也隨著升高。因AB血型物質(zhì)廣泛存在于自然界某些植物、寄生蟲及細(xì)菌中，O型母親通常在第一胎前即可受到自然界具有A、B血型物質(zhì)的刺激而產(chǎn)生抗A、抗B抗體（IgG），故40%～50% ABO溶血病發(fā)生在第一胎。夫婦血型不合時(shí)，監(jiān)測O型血孕母血清中IgG抗體效價(jià)，可預(yù)測新生兒溶血病發(fā)生的可能性，但不能判定新生兒溶血癥的發(fā)生時(shí)間及嚴(yán)重程度[16.17]。

本文資料，2015年～2018年824例O+型血孕婦及其丈夫接受了詳細(xì)的ABO血型知識普及和健康指導(dǎo)。O型孕婦ABO血型特殊抗體檢測，抗體滴度越高，其發(fā)生新生兒溶血反應(yīng)概率越大，且O型孕婦開展ABO血型特殊抗體檢測對新生兒發(fā)生溶血反應(yīng)有較高預(yù)測價(jià)值[18]。王宣力等[19.21]認(rèn)為：孕婦分娩前IgG抗.A（B）抗體滴度的升高可顯著增加新生兒溶血的發(fā)病率，對于夫妻ABO血型不合的孕婦應(yīng)加強(qiáng)其IgG抗.A（B）抗體的檢測。ABO溶血病的發(fā)病率隨著孕婦血清抗體效價(jià)的增高而增加，O型孕婦產(chǎn)前抗體效價(jià)的檢測對預(yù)防新生兒溶血病、降低患病風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義[22]。對產(chǎn)前保健孕婦開展ABO血型抗體效價(jià)檢測，并對探查到的異常情況開展及時(shí)有效的治療，可使母嬰血型不合導(dǎo)致的新生兒溶血癥的發(fā)生得以有效減少[23]。孕母O型血清中IgG抗（A）B抗體效價(jià)與ABO.HDN高度相關(guān)，動態(tài)監(jiān)測孕母O型血清中IgG抗（A）B抗體效價(jià)，對預(yù)防和治療新生兒溶血疾病具有非常重要的臨床價(jià)值[24]。當(dāng)孕婦IgG抗體A（B）效價(jià)≥64，新生兒就有可能出現(xiàn)HDN[25];如果抗體滴度達(dá)到1∶512則高度懷疑胎兒溶血。但孕婦抗A或抗B滴度的高低并非都與胎兒溶血成正比，需要結(jié)合其他檢測方法綜合判斷。

Rh血型抗體主要是IgG，且多數(shù)是IgG亞類，其能夠通過胎盤，從而導(dǎo)致新生兒溶血病。其中引起新生兒溶血病的最主要和最常見的Rh血型抗體是抗D。通常發(fā)生于第二次或多次妊娠的孕婦，而且隨著妊娠次數(shù)的增加，發(fā)生新生兒溶血病的機(jī)會也隨之增多，Rh血型抗體引起的新生兒溶血病比ABO血型引起的溶血病要嚴(yán)重。本文11例Rh陰性孕婦及其丈夫在第一時(shí)間接受了有關(guān)Rh血型知識的健康教育和個(gè)體化指導(dǎo)。根據(jù)有關(guān)要求及孕婦本人的意愿轉(zhuǎn)診Rh陰性孕婦至上級婦產(chǎn)醫(yī)院并在妊娠16周時(shí)檢測Rh血型抗體作為基礎(chǔ)值，以后每2～4周檢測1次。定期監(jiān)測RhD陰性孕婦的血型不規(guī)則抗體，對抗體陽性且效價(jià)較高者進(jìn)行必要的產(chǎn)前治療。加強(qiáng)對尚未生育過的Rh陰性年輕女性的血型知識宣教是預(yù)防HDN的重要措施[26]。Rh血型不合中，抗D抗體滴度自1∶2開始即有意義?？笵滴度達(dá)到1∶16時(shí)胎兒溶血情況加重。Rh母兒血型不合與ABO血型不合不同，抗體滴度與胎兒溶血程度成正比。因此對于IgG效價(jià)高的孕婦在產(chǎn)前進(jìn)行效價(jià)的控制，對于降低新生兒溶血病的發(fā)病率具有重要的臨床意義[27]。文藝[28]認(rèn)為：溶血疾病的診療時(shí)間與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)性，就診時(shí)間越遲，疾病程度越嚴(yán)重。診斷方法也不能僅局限于單純的溶血疾病本身，應(yīng)對其潛在或正伴有的并發(fā)癥進(jìn)行聯(lián)合治療。而在治療方法中，應(yīng)注意光療、補(bǔ)堿及給與丙種球蛋白等方法的綜合應(yīng)用。對孕婦進(jìn)行產(chǎn)前的中藥預(yù)防，可顯著降低新生兒溶血疾病的發(fā)生率。新生兒溶血者在以丙種球蛋白、間斷光療治療期間給予護(hù)理，患兒T.BIL水平明顯降低，黃疸癥狀改善良好，患兒恢復(fù)快[29]。劉巧英等[30]認(rèn)為：通過應(yīng)用抗D免疫球蛋白治療針對Rh血型不合孕婦來說，具有預(yù)防死產(chǎn)及孕婦死亡的價(jià)值;并且可以有力的減輕及減少新生兒溶血病的發(fā)生。

經(jīng)隨訪：2015年～2018年建卡孕婦824例O+型血孕婦：血清中IgG抗A（B）效價(jià)≥64、分娩后的新生兒為A型或B型者及11例Rh陰性孕婦分別在不同的二級及以上醫(yī)院根據(jù)出生后癥狀對因?qū)ΠY處理的均母子健康。

母胎血型不合溶血性疾病是一種與血型有關(guān)的同種免疫性疾病，主要影響胎兒，病變也可延續(xù)至早期新生兒。母胎血型不合時(shí)，進(jìn)入母體血液循環(huán)的胎兒紅細(xì)胞可誘導(dǎo)母體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體，抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)系統(tǒng)，結(jié)合、破壞胎兒紅細(xì)胞，導(dǎo)致胎兒和新生兒溶血性疾病。本研究中2015年～2018年先后接受了血型檢測和血型知識的普及、健康教育及個(gè)體化細(xì)心指導(dǎo)后的孕婦在分娩后無1例新生兒溶血性疾病發(fā)生死亡，說明基層?jì)D幼保健衛(wèi)生機(jī)構(gòu)做好一級預(yù)防工作非常重要，在妊娠期對母子血型不合孕婦進(jìn)行指導(dǎo)干預(yù)，能夠有效減少新生兒溶血癥的發(fā)生率，保證母嬰安全。

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