■文 敏 孫弟芬 黃 巧 孔 潔 潘舒蕾 葉臍濂 張 鵬 舒 剛

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，四川成都611130）

鵪鶉產(chǎn)業(yè)是世界第三大養(yǎng)禽業(yè)，近年來在我國迅速發(fā)展[1-2]。鵪鶉的產(chǎn)蛋能力強(qiáng)，但產(chǎn)蛋高峰后，鵪鶉產(chǎn)蛋率雖可保持在80%左右，但死淘率和料蛋比增加，鵪鶉蛋破損率高。第11個產(chǎn)蛋月后不僅產(chǎn)蛋率下降、次蛋率的比例明顯升高（有時可達(dá)20%），而且種鵪鶉的受精率、受精蛋的孵化率和健雛率均明顯下降，嚴(yán)重影響了飼養(yǎng)期間的經(jīng)濟(jì)效益[3]。因此，改善老年鵪鶉的產(chǎn)蛋性能，提高鵪鶉的蛋品質(zhì)，成為提高經(jīng)濟(jì)效益的一種有利的方式。中藥添加劑具有天然活性、毒副作用小和無抗藥性等優(yōu)點，不僅能提高動物的生產(chǎn)性能, 而且能改善其產(chǎn)品品質(zhì)。因此，關(guān)于中藥添加劑作為抗生素替代品的研究已受到越來越多研究者的關(guān)注[4]。中藥口服液是當(dāng)前中藥生產(chǎn)中新興的中藥添加劑，由中藥湯劑為基礎(chǔ)發(fā)展而來的熱門劑型，具有起效快，作用明顯，方便攜帶，便于保存等優(yōu)點[5]。

試驗以益母草、黃精和丹參三味中藥制備益母黃丹口服液，并通過在鵪鶉產(chǎn)蛋后期飲水中添加不同劑量的益母黃丹口服液，研究其對鵪鶉產(chǎn)蛋后期的產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)和蛋黃膽固醇的影響，為益母黃丹口服液作為復(fù)方中藥添加劑在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供試驗依據(jù)。

1 材料方法

1.1 試驗材料

益母黃丹口服液（益母草∶黃精∶丹參=3∶2∶1，相當(dāng)于生藥濃度1 g/ml，自制）；歸芪益母口服液（購自某公司，批號20190521）；益母草、黃精、丹參（均購自四川省成都市金牛區(qū)荷花池中藥材專業(yè)市場，由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)系鑒定為正品藥材）。

UV1100 型紫外可見分光光度計(上海天美科學(xué)儀器有限公司)、XC-110A型超聲波清洗器（濟(jì)寧鑫欣超聲電子設(shè)備有限公司）、PWC184電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）、恒溫水浴鍋（余姚市亞星儀器儀表有限公司）、BP211S 型電子分析天平(北京Sartorius 天平有限公司)、離心機(jī)（上海賽默生物科技發(fā)展有限公司）。

1.2 益母黃丹口服液的制備

將益母草、黃精、丹參三味藥材按照比例共計6 kg放置于敞口鍋中，加一定量的蒸餾水浸泡30 min后，進(jìn)行煎煮3次，每次30 min，趁熱用8層紗布濾過，合并濾液并濃縮，將濃縮后的藥液放涼后，加入乙醇后，含乙醇量達(dá)到50%。將通過醇沉后的藥液攪拌均勻后靜置于4 ℃冰箱24 h，隨后置于離心機(jī)以3 000 r/min離心10 min，取出上層濾液，棄去殘渣。加一定量蒸餾水置于濾液中，使藥液中原生藥含量達(dá)到1 g/ml，共得6 L。向藥液中加入2.4 g 的苯甲酸鈉和2.4 g 苯甲酸，攪拌均勻，用0.2%NaOH 調(diào)pH值，使藥液pH值在5～7之間；將所制藥液進(jìn)行分裝，滅菌即可[6]。

1.3 試驗動物及試驗設(shè)計

試驗選取640只狀態(tài)良好、體重均勻的10月齡老年黃羽產(chǎn)蛋鵪鶉（四川省成都市邛崍市羊安鎮(zhèn)鵪鶉養(yǎng)殖場提供），隨機(jī)分為4個組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)40 只。Ⅰ組為空白對照組，飲用自來水；Ⅱ組為低劑量組，在飲水中按照每只3 ml/l 劑量添加益母黃丹口服液；Ⅲ組為高劑量組，在飲用水中按照每只鵪鶉6 ml/l劑量添加益母黃丹口服液；Ⅳ組為陽性組，在飲用水中按照每只鵪鶉4 ml/l 劑量添加歸芪益母口服液，試驗為期14 d。記錄鵪鶉的采食量和產(chǎn)蛋量，并在第14 d每組隨機(jī)采集12枚鵪鶉蛋，每個重復(fù)3枚測定蛋品質(zhì)。

1.4 試驗日糧

基礎(chǔ)日糧的組成和營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平（以風(fēng)干計）

1.5 飼養(yǎng)管理

試驗鵪鶉養(yǎng)殖舍內(nèi)采用自然通風(fēng)加風(fēng)機(jī)抽風(fēng)換氣。飼養(yǎng)方式采用4層疊層式籠養(yǎng)，每組對應(yīng)重復(fù)在同一高度水平，每籠飼喂40 只鵪鶉。白天為自然光照，早晚輔以紅光人工照明，按常規(guī)清掃和消毒鵪鶉舍。鵪鶉自由采食飼料、自由飲水（乳頭式飲水器供水），每日8：00和17：00飼喂，9：00撿蛋，保持安靜，盡量防止應(yīng)激而導(dǎo)致鵪鶉驚群，其他按正常飼養(yǎng)管理進(jìn)行。

1.6 測定指標(biāo)及方法

1.6.1 產(chǎn)蛋性能測定

試驗期間準(zhǔn)確記錄每個重復(fù)的采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、破蛋數(shù)、軟殼蛋數(shù)及沙殼蛋數(shù)，準(zhǔn)確稱量各組蛋的重量，計算平均蛋重、產(chǎn)蛋率、平均日采食量及料蛋比。

平均蛋重（g）=總蛋重/總蛋數(shù)

產(chǎn)蛋率(%)=[總產(chǎn)蛋數(shù)/(鵪鶉數(shù)×試驗期天數(shù))]×100

平均日采食量（g）=（每籠飼喂量-剩余料量）/鵪鶉只數(shù)

料蛋比=平均采食量/平均蛋重

1.6.2 蛋品質(zhì)指標(biāo)測定

在試驗第14 d，每重復(fù)隨機(jī)選取3 枚，每組共12 枚。使用國家標(biāo)準(zhǔn)測定方法測定蛋殼強(qiáng)度、蛋白高度和蛋黃色度。計算蛋形指數(shù)、哈氏單位、蛋殼率和蛋黃率。

蛋形指數(shù)=雞蛋縱徑/橫徑

哈氏單位=100×lg(H-1.7W0.37+7.57)

式中：H——濃蛋白高度（mm）；

W——每枚蛋重（g）。

蛋殼率(%)=蛋殼重/蛋重×100

蛋黃率(%)=蛋黃重/蛋重×100

1.6.3 蛋黃膽固醇含量測定

隨機(jī)選取每重復(fù)3枚蛋，使用硫酸鐵銨法測定蛋黃重的膽固醇含量。具體操作如下：準(zhǔn)確稱取充分混勻的蛋黃約0.10 g 于15 ml 離心管中，加入2.0 mol/l的KOH-乙醇溶液2.5 ml，振蕩混勻，置于65 ℃水浴中皂化30 min (每隔5 min 振蕩1 次)后取出，經(jīng)流水冷卻，加入飽和氯化鈉溶液1.0 ml 后再加人石油醚10.0 ml，漩渦混勻后離心分離，吸取上清液1.0 ml 于15 ml 具塞比色管中，再于65 ℃水浴中氨氣吹干，加入2.0 ml 冰醋酸溶解殘渣，加1.0 ml 硫酸鐵銨顯色劑，混勻，10 min 后在分光光度計560 nm波長處比色測定。按測得的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的膽固醇含量。以吸光度A 對其質(zhì)量m（mg）得膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線為：A=6.13m+0.003，r=0.999 3。根據(jù)m=[(A-0.003)/6.13]計算出每組中的蛋黃膽固醇含量[7]。

1.7 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)利用SPSS20.0 進(jìn)行方差分析，Duncan's法進(jìn)行多重比較顯著性水平，P＜0.05 為差異顯著，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 益母黃丹口服液對鵪鶉日常行為的影響

試驗過程中空白組有一只鵪鶉死亡，死亡率為0.63%（見表2），其余組鵪鶉未出現(xiàn)死亡或食欲不振、精神萎靡等異常情況，采食和飲水、產(chǎn)蛋、糞便情況正常。

2.2 益母黃丹口服液對鵪鶉產(chǎn)蛋性能的影響(見表2)

由表2 可知，與空白組相比，低劑量組、高劑量組、陽性對照組的平均蛋重、產(chǎn)蛋率和平均采食量均有所提高，平均蛋重分別提高11.69%、10.75%、7.96%，且差異顯著（P＜0.05）；產(chǎn)蛋率分別提高9.39%、12.34%、8.27%，均差異顯著（P＜0.05）；平均采食量分別提高6.01%、7.02%、8.19%，均差異顯著（P＜0.05）；低劑量組、高劑量、陽性對照組間的平均蛋重、產(chǎn)蛋率和平均采食量差異不顯著（P＞0.05）；與空白組相比，各組沙殼蛋數(shù)、破蛋數(shù)差異均不顯著（P＞0.05），但各試驗組優(yōu)于空白組。以上結(jié)果表明益母黃丹口服液與歸芪益母口服液都能提高鵪鶉產(chǎn)蛋性能。

2.3 益母黃丹口服液對鵪鶉蛋品質(zhì)的影響(見表3)

表3 益母黃丹口服液對蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，與空白組相比，低、高劑量組和陽性組的蛋殼強(qiáng)度增強(qiáng)且差異顯著（P＜0.05）；與空白組相比，高劑量組和陽性對照組的蛋殼厚度增厚，差異顯著（P＜0.05），低劑量組稍有增加但不顯著。與空白組相比，低劑量組和陽性對照組的蛋殼率有所增加，分別提高15.58%、10.65%，且差異顯著（P＜0.05），但高劑量組與空白對照組間差異不顯著（P＞0.05）。與空白組對比，各組蛋黃率差異不顯著（P＞0.05），但低劑量組平均蛋黃率較空白組蛋黃率提高了20.50%。與空白組相比，陽性對照組的蛋黃色度提高了15.63%，且差異顯著（P＜0.05），低、高劑量組雖差異不顯著，但蛋黃色度有所上升。與空白組相比，各組蛋形指數(shù)、哈氏單位均差異不顯著（P＞0.05）。與空白對照組相比，低劑量組、高劑量組、陽性對照組的蛋黃膽固醇含量均顯著降低（P＜0.05），分別降低了18.05%、41.66%、43.93%。

3 討論

3.1 益母黃丹口服液對鵪鶉產(chǎn)蛋性能的影響

鵪鶉產(chǎn)蛋數(shù)量的多少直接決定了經(jīng)濟(jì)效益的高低，鵪鶉的生產(chǎn)性能提高則會直接增加經(jīng)濟(jì)效益。試驗結(jié)果表明，在鵪鶉飲水中添加0.3 ml/l和0.6 ml/l劑量的益母黃丹口服液均能提高鵪鶉蛋蛋重、產(chǎn)蛋率。其中0.3 ml/l 劑量對蛋重的提升效果更顯著，0.6 ml/l劑量對產(chǎn)蛋率的提升效果更為顯著，但對減少軟蛋、沙殼蛋、破蛋的作用不明顯。張雪等[8]指出益母草中主要活性物質(zhì)與活血化瘀相關(guān)，其藥理作用與改變血液流變學(xué)，改善微循環(huán)和心肌缺血以及抗血栓等有關(guān)。益母草堿有利于新陳代謝與畜禽增重，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌具有明顯抑制作用，減少腸道感染，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)更易吸收[9]。劉培培等[10]證實，產(chǎn)蛋雞日糧中添加益母草提取物可以顯著提高產(chǎn)蛋率、降低料蛋比。韋陽朔等[11]的研究表明益母草復(fù)合添加劑在三黃種雞養(yǎng)殖中應(yīng)用能夠很好地提升產(chǎn)蛋率、降低死亡淘汰數(shù)量，顯著提高養(yǎng)殖效益。劉家國等[12]研究表明，以調(diào)整氣血為主要藥理作用的中藥組方能夠提高血液運(yùn)氧能力，從而提高蛋雞的生產(chǎn)性能。有研究表明在飼料中添加19.5%丹參可以使雞、鴨產(chǎn)蛋率提高10%～15%[13]。本試驗結(jié)果與上述研究一致。益母黃丹口服液中的益母草可能通過促進(jìn)子宮和卵巢的發(fā)育，增加成熟卵泡和疏通輸卵管內(nèi)淤血，興奮下丘腦垂體性腺軸，促進(jìn)性腺激素分泌，從而改善鵪鶉的生產(chǎn)性能的。益母草中含有鋅、銅、錳、鐵等多種微量元素，這些物質(zhì)還能夠補(bǔ)充動物的生理需求，進(jìn)一步提高動物的生產(chǎn)性能。黃精中主要含有黃精多糖，黃精具有調(diào)節(jié)氣血，增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力等生理功能，調(diào)節(jié)激素的分泌和代謝，影響神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)，也可以提供鵪鶉的生產(chǎn)性能。丹參能夠?qū)π笄輽C(jī)體起到活血化瘀，改善畜禽機(jī)體的血液微循環(huán)的作用[14]。丹參含有多種有效成分，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛，可以促進(jìn)血液循環(huán)，消除炎癥等作用，使鵪鶉機(jī)能改善從而提高生產(chǎn)性能?？诜褐幸婺覆?、黃精和丹參配伍發(fā)揮活血化瘀和補(bǔ)益氣血等作用使鵪鶉生理機(jī)能得到提高，促使其產(chǎn)蛋性能增加。

3.2 益母黃丹口服液對鵪鶉蛋品質(zhì)的影響

蛋品質(zhì)的優(yōu)劣與鵪鶉蛋的經(jīng)濟(jì)效益息息相關(guān)，蛋殼強(qiáng)度是評價蛋殼質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，蛋殼強(qiáng)度提高能降低雞蛋保存與運(yùn)輸過程中的經(jīng)濟(jì)損失。蛋制品因營養(yǎng)物質(zhì)豐富受到消費者的喜愛，所以蛋品質(zhì)的提高會帶來更多的經(jīng)濟(jì)效益。隨著產(chǎn)蛋家禽日齡的增加，家禽自身的消化代謝水平逐漸降低，影響其對鈣的吸收代謝，從而導(dǎo)致蛋殼質(zhì)量下降，蛋殼變薄。益母草、黃精等中藥中含有多種能促進(jìn)營養(yǎng)的吸收和消化的生物活性物質(zhì)，可以促進(jìn)鵪鶉對飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝[15]。芪草提取物使蛋殼質(zhì)量顯著提高，可能是因為黃芪、益母草改善了機(jī)體的鈣磷代謝，使蛋殼中鈣含量增加，提高了蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度，進(jìn)而改善了蛋品質(zhì)[16]。劉培培等[10]證實益母草因含有黃酮類物質(zhì)影響禽類對鈣、磷的代謝，從而增強(qiáng)蛋殼強(qiáng)度，增厚蛋殼厚度，蛋殼率得到提高，進(jìn)而改善了蛋品質(zhì)。鵪鶉蛋蛋殼強(qiáng)度增強(qiáng)和蛋殼厚度的增加另一方面可能是由于益母黃丹口服液中含有豐富的糖類、氨基酸、微量元素、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)[17]。本試驗在鵪鶉飲水中添加3 ml/l和6 ml/l劑量的益母黃丹口服液能增加蛋殼厚度和蛋殼強(qiáng)度，其中6 ml/l 劑量的效果更佳。

蛋黃顏色是色素在卵形成的過程中沉積到蛋黃中的, 雞自身不能合成色素，多從飼料中攝取。在本試驗中，與空白對照組相比，高劑量組的蛋黃色度顯著升高（P＜0.05），但其他組與其相比差異不顯著。李霞輝等[18]研究發(fā)現(xiàn)添加0.4%黃精多糖鵪鶉蛋的蛋黃色度明顯提高。本試驗在飲水中添加黃精后，高劑量組的蛋黃色度明顯改善，與孫曉蛟等[19]、劉培培等[10]的研究結(jié)果一致。可能是由于高劑量組的益母黃丹口服液促進(jìn)了鵪鶉對飼料中的色素的攝取。哈氏單位是蛋白質(zhì)量的計量單位，蛋越新鮮，哈氏單位的數(shù)值就越高。本試驗添加益母黃丹口服液后哈氏單位無顯著變化，可能是試驗期時長不夠?qū)е碌?。蛋形指?shù)與鵪鶉本身有關(guān)，因此本試驗添加益母黃丹口服液后, 蛋形指數(shù)并無顯著改變。綜合分析試驗結(jié)果中蛋品質(zhì)各項指標(biāo)可得，益母黃丹口服液對提升鵪鶉蛋的蛋品質(zhì)有一定作用。

蛋黃富含豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，但其中還含有可引起心血管疾病的膽固醇。因此，研究低膽固醇蛋制品具有一定的必要性。雞、鵪鶉、鴨三種禽蛋中蛋黃膽固醇含量均顯著高于蛋清，蛋黃是蛋制品膽固醇含量最高的部分[20]。徐國銀[21]在蛋雞飼糧中添加大豆黃酮，顯著降低了雞蛋的蛋黃膽固醇含量，并且時間越久作用效果越明顯。劉培培等[10]在蛋雞飼糧中加入益母草等提取物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清中的膽固醇、甘油三酯(TG)含量顯著降低。陳楊超等[22]研究表明益母草和女貞子超微粉能顯著提高產(chǎn)蛋后期蛋雞的生產(chǎn)性能并改善其蛋品質(zhì)。金娜等[16]研究發(fā)現(xiàn)在蛋雞的飼糧中加入芪草提取物后，隨著試驗時間的延長，蛋黃膽固醇含量逐漸降低，在第12 周時顯著下降。黃精是良好的降血脂和膽固醇的中藥，很早以前就有人類臨床試驗證明其功效[23]。丹參的提取物，對調(diào)節(jié)膽固醇代謝十分重要，它可抑制內(nèi)源性膽固醇的合成和增加膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸[24]。益母草中富含生物堿活性物質(zhì)，可以和膽固醇部分結(jié)合，減少了腸道對膽固醇的吸收，從而降低了膽固醇的含量[25]。本試驗結(jié)果與前人研究基本一致，益母黃丹口服液顯著降低了鵪鶉蛋黃膽固醇的含量，主要原因可能是益母草、黃精和丹參的配伍減少了外源性膽固醇的吸收，抑制內(nèi)源性膽固醇的合成，增多了膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸的活性物質(zhì)。

4 結(jié)論

本次試驗結(jié)果表明在產(chǎn)蛋后期鵪鶉的飲水中添加益母黃丹口服液，可以改善鵪鶉的產(chǎn)蛋性能，提高蛋品質(zhì)，降低蛋黃膽固醇含量。同時，從經(jīng)濟(jì)角度出發(fā)，飲水中添加3 ml/l的劑量可取得較好效果。