孫俊芬，張逸飛，陳 龍

(東華大學(xué) a. 材料科學(xué)與工程學(xué)院； b. 纖維材料改性國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201620)

含磷蛋白作為蛋白質(zhì)中非常重要的一個(gè)大類，其在各個(gè)領(lǐng)域都有非常大的發(fā)展?jié)摿Γ缏亚宓鞍?、酪蛋白[1]、卵黃磷蛋白[2]等都有優(yōu)良的藥用和生物研究?jī)r(jià)值。同時(shí)蛋白質(zhì)磷酸化[3]也是當(dāng)今蛋白質(zhì)研究的重點(diǎn)之一，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)磷酸化作為真核細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的核心，在生命系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用。因此，蛋白質(zhì)磷酸化選擇性分離是蛋白質(zhì)分析中的重要任務(wù)。

固定化金屬螯合親和層析技術(shù)(immobilized metal-chelated affinity chromato-graphy，IMAC)是一種新型親和層析技術(shù)，它主要用于分離生物大分子。1975年P(guān)aroth[4]提出這項(xiàng)技術(shù)，便引起了社會(huì)的廣泛關(guān)注，IMAC技術(shù)具有很多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，不僅對(duì)蛋白質(zhì)的分離具有選擇性和特異性，以及分離得到的目標(biāo)蛋白質(zhì)純度高，而且還可以用于基因工程技術(shù)、核酸的純化與分離等生物醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域。膜分離技術(shù)作為一種新興交叉學(xué)科的高新技術(shù)，已經(jīng)在日常生活中得到廣泛的應(yīng)用，而將膜分離技術(shù)與IMAC技術(shù)相結(jié)合能夠很好地選擇性分離含磷蛋白。

近些年來(lái)，IMAC技術(shù)的螯合配基又有了許多新的嘗試，例如以磷酸基團(tuán)作為新型的金屬螯合劑。Zhou等[5]提出了磷酸基團(tuán)作為新的金屬螯合劑，同時(shí)螯合鋯(Zr)與鈦(Ti)金屬離子，對(duì)于含磷的蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的特異性吸附能力。文獻(xiàn)[6-7]研究表明，Zr與磷酸基團(tuán)特異性結(jié)合對(duì)于含磷蛋白有優(yōu)良的吸附效果。常用的固定金屬親和層析膜的改性方法即通過(guò)化學(xué)改性在膜表面接枝功能基團(tuán)，這種方法對(duì)于膜的化學(xué)和物理性能都有很大影響，所以需要選擇一種擁有更高穩(wěn)定性的層析膜來(lái)試驗(yàn)。聚偏氟乙烯(PVDF)膜擁有優(yōu)良的物理化學(xué)性能以及穩(wěn)定性，是理想的膜材料。文獻(xiàn)[8-12]通過(guò)在PVDF膜基體中添加無(wú)機(jī)粒子來(lái)制備雜化膜。利用納米粒子表面的功能基團(tuán)做進(jìn)一步氨基化、磷酸化和固定螯合金屬，可以達(dá)到分離含磷蛋白的目的[13-14]。

本文利用原位合成法和相轉(zhuǎn)化法來(lái)制膜，同時(shí)利用改性后功能化納米粒子對(duì)卵清蛋白的高吸附性和高分子膜的選擇性分離原理，制備出了聚偏氟乙烯/氨基化納米二氧化硅(PVDF/NH2-SiO2)雜化膜，最后通過(guò)磷酸化添加磷酸基團(tuán)并螯合Zr離子，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)卵清蛋白的選擇性吸附。本文所采用的制膜方法比較簡(jiǎn)單，并且對(duì)卵清蛋白的分離固定時(shí)間較短，同時(shí)也在最大程度上保持了原有蛋白質(zhì)的活性。

1 試 驗(yàn)

1.1 試驗(yàn)材料及儀器

試驗(yàn)材料：聚偏氟乙烯(PVDF，6020，蘇威(上海)有限公司)；正硅酸乙酯(TEOS，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES，高純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；N-甲基吡咯烷酮(NMP，分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；N，N-二甲基乙酰胺(DMAc，化學(xué)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；卵清蛋白(生化試劑，上海阿拉丁生化科技股份有限公司)；聚乙烯吡咯烷酮90(PVP K90，工業(yè)級(jí)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；聚乙烯吡咯烷酮30(PVP K30，工業(yè)級(jí)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

試驗(yàn)儀器：電子分析天平(CB603-N型，上海精密科學(xué)儀器儀表有限公司)；恒溫振蕩器(SHZ-05型，上海申能博彩生物科技有限公司)；電熱真空干燥箱(ZKF-035型，上海實(shí)驗(yàn)儀器廠)；紅外光譜儀(Nicolet 8700型，美國(guó)Nicolet公司)；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(UV-1800型，島津儀器蘇州有限公司)；雙穩(wěn)定時(shí)電泳儀(DYY-8C型，上海泰坦科技股份有限公司)；掃描電子顯微鏡(Quanta-250型，捷克FEI)；電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(Prodigy型，美國(guó)Leeman)；X射線多晶衍射儀(Bruker D2 PHASER型，德國(guó)布魯克AXS公司)。

1.2 磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜的制備

取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的PVDF顆粒于三口燒瓶中，然后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的PVP K90和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的PVP K30作為制孔劑，以NMP/DMAc(質(zhì)量比為9∶1)為混合溶劑，分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0、 4%、 8%、 10%的TEOS，再加入APTES(其與TEOS的質(zhì)量比為1∶13)，最后緩慢滴加幾滴0.15 mol/L的稀鹽酸作為催化劑，調(diào)節(jié)溫度為45 ℃，轉(zhuǎn)速為230 r/min，在此條件下溶脹2 h，之后溫度調(diào)節(jié)為75 ℃，轉(zhuǎn)速為280 r/min，溶解攪拌24 h。整個(gè)制備過(guò)程中分別加入不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TEOS來(lái)制膜，從而可以制備出有不同TEOS含量的PVDF/NH2-SiO2雜化膜鑄膜液。

將上述鑄膜液趁熱倒入潔凈的燒杯中，并用保鮮膜封口，防止空氣中水分的進(jìn)入，使其在室溫下靜置脫泡10 h。待完全脫泡后，將鑄膜液流延在潔凈的不銹鋼板上，用3號(hào)刮刀進(jìn)行刮膜，使鑄膜液展開(kāi)形成具有一定厚度(300 μm)的均勻薄層，然后馬上將附著有薄膜的不銹鋼板放入水中凝固，使得薄膜固化，在凝固浴中浸泡1～2 d，然后測(cè)定膜的水通量，并做掃描電子顯微鏡(SEM)、衰減全反射傅里葉變換紅外光譜(ATR-FTIR)、電感耦合等離子體(ICP)元素等分析。

磷酸化：取80 g磷酸與100 mL 二甲基甲酰胺置于400 mL燒杯中混合均勻，在100 ℃下，將所制備好的膜放入其中，進(jìn)行磷酸化1 h，再用蒸餾水浸泡沖洗干凈。

螯合固定Zr：取1.78 g ZrOCl2溶解于200 mL蒸餾水中，將磷酸化膜放入其中，浸泡8 h，再用蒸餾水浸泡沖洗干凈，烘干后進(jìn)行測(cè)試表征。磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜制備反應(yīng)流程如圖1所示。

1.3 膜的結(jié)構(gòu)表征和性能評(píng)價(jià)

1.3.1 紅外光譜測(cè)定

測(cè)試前將膜在烘箱中完全烘干，采用傅里葉變換紅外光譜儀對(duì)PVDF純膜和改性以后的PVDF/NH2-SiO2雜化膜進(jìn)行ATR-FTIR分析，波數(shù)范圍為4 000～400 cm-1，掃描次數(shù)為32次，精度為4 cm-1。

1.3.2 表觀形態(tài)表征

測(cè)試前先將膜在30 ℃真空烘箱中干燥12 h，然后將膜放在液氮中冷凍并使其脆斷，以保證其截面結(jié)構(gòu)不受損傷，最后置于離子濺射噴金儀中對(duì)其截面進(jìn)行噴金處理。在掃描電子顯微鏡下觀察PVDF純膜和磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜上表面、下表面以及膜斷面處的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

1.3.3 X射線衍射光譜測(cè)定

把磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜置于60 ℃的真空烘箱中干燥24 h，然后用X射線衍射儀分析膜的物相組成，步長(zhǎng)為0.02°，2θ測(cè)量范圍為10°～60°，掃描速度為0.1(°)/s。

1.3.4 ICP元素分析

將含不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)TEOS的PVDF/NH2-SiO2雜化膜在60 ℃的真空烘箱中烘干12 h，用ICP發(fā)射光譜儀測(cè)試樣品中硅(Si)、磷(P)、 Zr的元素組成。

1.3.5 卵清蛋白吸附性能

分別剪取若干塊1.5 cm×1.5 cm的膜，然后將它們置于真空烘箱中，設(shè)定溫度為60 ℃，在此條件下烘10 h至完全干燥，然后用分析天平準(zhǔn)確地稱取各張膜的質(zhì)量并做記錄。取一塊膜置于樣品瓶中，并用移液槍在瓶中加入事先配置的5 mL 質(zhì)量濃度為2 g/L的卵清蛋白溶液，蓋好瓶蓋，將恒溫振蕩器的溫度設(shè)定為25 ℃，調(diào)節(jié)振動(dòng)頻率，振蕩24 h，最后再用分光光度計(jì)在280 nm波長(zhǎng)處測(cè)定卵清蛋白溶液的吸光度，并計(jì)算出卵清蛋白的質(zhì)量濃度，根據(jù)式(1)計(jì)算膜吸附量q(mg/g)。

(1)

式中：c0為原液中卵清蛋白質(zhì)量濃度，mg/mL；c1為吸附后溶液中卵清蛋白質(zhì)量濃度，mg/mL；m為膜的干質(zhì)量，g；V為卵清蛋白溶液的體積，mL。

取質(zhì)量濃度為2 g/L的卵清蛋白吸附原液，在25 ℃下振蕩吸附24 h，測(cè)試吸附前后卵清蛋白溶液的吸光度，計(jì)算膜的吸附量；然后用蒸餾水沖洗雜化膜，將膜置于10%的氨水溶液中，在25 ℃下振蕩24 h，測(cè)量蛋白的解吸附率，即為第一次吸附試驗(yàn)；將雜化膜烘干后稱其質(zhì)量，重復(fù)上述步驟4次，來(lái)測(cè)定雜化膜的重復(fù)吸附率，根據(jù)式(2)計(jì)算膜的解吸附率(%)。

(2)

式中：Q1為膜的吸附量，mg/g；Q2為膜的解吸附量，mg/g。

2 結(jié)果與討論

2.1 傅里葉變換紅外光譜分析

純PVDF膜、用APTES改性的PVDF/NH2-SiO2雜化膜，以及磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜的傅里葉變換紅外光譜如圖2所示。其中，PVDF純膜的PVDF質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%，APTES改性的PVDF/NH2-SiO2雜化膜中TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%，磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜中TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%。由圖2可知：PVDF純膜在3 411 cm-1處沒(méi)有吸收峰，當(dāng)PVDF純膜中引入氨基化SiO2后，在3 411 cm-1處出現(xiàn)了強(qiáng)烈的吸收峰，該吸收峰為N—H鍵的伸縮振動(dòng)吸收峰，說(shuō)明氨基化改性以后雜化膜內(nèi)加入了NH2基團(tuán)，實(shí)現(xiàn)了SiO2粒子的氨基化；與PVDF純膜相比，改性后的PVDF/NH2-SiO2雜化膜在1 640 cm-1處出現(xiàn)了一個(gè)小的吸收峰，該吸收峰為N—H鍵的面內(nèi)彎曲振動(dòng)吸收峰，同樣也說(shuō)明了氨基化改性以后雜化膜內(nèi)加入了NH2基團(tuán)，證明實(shí)現(xiàn)了SiO2粒子的氨基化。對(duì)比曲線a和b可知，曲線c在1 076 cm-1處出現(xiàn)了一個(gè)新的吸收峰，此吸收峰為與Si和P化學(xué)鍵相關(guān)的吸收峰，說(shuō)明磷酸化處理改性的PVDF/NH2-SiO2雜化膜中加入了含有Si和P的基團(tuán)，證明PVDF/NH2-SiO2雜化膜上成功接入了磷酸基團(tuán)。而固定螯合金屬Zr的吸收峰在此FTIR譜圖中不能顯示，需用其他表征方法進(jìn)一步測(cè)定。

2.2 表觀形態(tài)分析

不同TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的PVDF/NH2-SiO2雜化膜(未經(jīng)過(guò)磷酸化和螯合金屬處理)的上表面與下表面的SEM圖如圖3所示，其放大倍數(shù)為10 000倍。從圖3可以看出：雜化膜的上表面都是比較致密的形態(tài)結(jié)構(gòu)，而下表面的孔洞比較多；隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，雜化膜表面的孔洞也越來(lái)越多，孔徑逐漸增大，且納米粒子的團(tuán)聚現(xiàn)象減少。因?yàn)門EOS經(jīng)過(guò)水解-聚合反應(yīng)形成硅氧聚合物，可以產(chǎn)生較長(zhǎng)的線型硅氧鍵，然后隨著硅氧鍵的伸展與鏈之間的相互交聯(lián)，最后形成了一種交聯(lián)的無(wú)規(guī)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，它們能夠與PVDF的大分子鏈互相纏繞，SiO2粒子穿插在PVDF溶液中，可以有效地阻礙PVDF大分子間的聚集，并且當(dāng)PVDF鑄膜液固化時(shí)，可以在無(wú)機(jī)相和有機(jī)相之間產(chǎn)生一定的空隙。

Fig.3 SEM images of top and bottom surfaces of PVDF/NH2-SiO2membranes with different TEOS mass fractions

2.3 X射線衍射光譜分析

由于PVDF分子鏈結(jié)構(gòu)上含有很多氟基團(tuán)(—F)，因而分子鏈之間會(huì)形成氫鍵，制備得到的PVDF純膜會(huì)具有相對(duì)比較高的結(jié)晶度。試驗(yàn)中采用TEOS與APTES和PVDF共混制備PVDF/NH2-SiO2雜化膜的實(shí)質(zhì)是破壞了PVDF分子鏈之間的氫鍵。PVDF純膜和不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TEOS改性的磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜的XRD測(cè)試結(jié)果如圖4所示。由圖4可知，作為一種結(jié)晶型聚合物，PVDF純膜在20°左右有一個(gè)明顯的衍射峰，用TEOS和APTES共混改性后雜化膜的衍射峰相較于PVDF純膜的衍射峰尖銳程度明顯下降，衍射峰面積也減小，且隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，PVDF雜化膜的結(jié)晶度呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)。因?yàn)門EOS和APTES的加入破壞了PVDF分子鏈之間的氫鍵，隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，PVDF的結(jié)晶結(jié)構(gòu)被破壞得越嚴(yán)重，膜的結(jié)晶度也隨之降低。

2.4 元素組成分析

不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TEOS改性制得的磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜的P、Si、Zr含量進(jìn)行ICP(inductively coupled plasma)元素分析測(cè)試，結(jié)果如表1所示。

表1 磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜的ICP元素分析結(jié)果

由表1可知，在改性后的雜化膜上測(cè)到了P、 Si、 Zr 3種元素的存在，可以說(shuō)明金屬Zr已經(jīng)成功地螯合到了PVDF/NH2-SiO2雜化膜上，并且當(dāng)TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%時(shí)，PVDF/NH2-SiO2雜化膜可以負(fù)載更多的金屬Zr。隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，雜化膜上Si的含量也增加。這是由于TEOS的增加則導(dǎo)致鑄膜液中硅氧聚合物增加，從而導(dǎo)致Si含量增加。隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，雜化膜上P和Zr的含量先升高后降低。這是由于TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低時(shí)，膜上固定的磷酸基團(tuán)較少，所能螯合的Zr離子有限，所以Zr含量較低；當(dāng)TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)繼續(xù)增加時(shí)，膜上功能基團(tuán)(如NH2等)數(shù)量增加，能與更多的磷酸基團(tuán)反應(yīng)，進(jìn)而能夠固定螯合更多的Zr離子；但當(dāng)TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)繼續(xù)增加，SiO2含量也隨之增加，會(huì)形成團(tuán)聚現(xiàn)象，從而導(dǎo)致能與硅烷偶聯(lián)劑APTES反應(yīng)脫水縮合的基團(tuán)下降，并引起磷酸化和螯合金屬的下降。

2.5 卵清蛋白吸附性能分析

2.5.1 TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)雜化膜吸附性能的影響

磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)質(zhì)量濃度為2 g/L的卵清蛋白的吸附量隨TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化如圖5所示。

從圖5可以看出，隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附量先快速上升，然后緩慢升高到最大值，再略微降低，當(dāng)TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%時(shí)，磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附量達(dá)到最大值，為150.7 mg/g。由此說(shuō)明，通過(guò)在PVDF鑄膜液中加入TEOS后能夠有效地提高PVDF膜對(duì)卵清蛋白的吸附能力，且加入不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的TEOS改性的磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)蛋白質(zhì)的吸附能力的提高程度是不同的。這是由于加入PVDF鑄膜液中的TEOS經(jīng)過(guò)水解-聚合反應(yīng)可以生成硅氧聚合物，并且產(chǎn)生了較長(zhǎng)的線性硅氧鍵，由于大分子鏈之間的相互交聯(lián)以及硅氧鍵的不斷伸展，最后便會(huì)產(chǎn)生線性交聯(lián)的三維無(wú)規(guī)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，它們能與PVDF分子鏈互相纏繞，SiO2穿插在PVDF溶液中，有效地阻止了PVDF大分子間的聚集，然后通過(guò)TEOS與APTES可以引入功能基團(tuán)，進(jìn)而與磷酸基團(tuán)反應(yīng)，由于磷酸基團(tuán)可以螯合Zr，而Zr對(duì)于含磷蛋白(如卵清蛋白)有很好的吸附效果。隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，加入的APTES濃度也在增加(APTES和TEOS的質(zhì)量比為13∶1)，由于反應(yīng)過(guò)程是TEOS水解成SiO2粒子，然后與APTES反應(yīng)，即對(duì)SiO2粒子進(jìn)行氨基化，所以在SiO2粒子上的氨基也在增加，可以引入更多的磷酸基團(tuán)以及固定螯合更多的Zr，所以磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附會(huì)隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加而增加；當(dāng)TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加到8%后，由于雜化膜表面積有限，引入的磷酸基團(tuán)和固定的Zr會(huì)達(dá)到一個(gè)最大值，這時(shí)磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附提供的吸附位點(diǎn)和吸附空間達(dá)到最大值，所以吸附量也達(dá)到最大值；繼續(xù)增加TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)，SiO2含量也增加，使得其本身發(fā)生了團(tuán)聚現(xiàn)象，從而導(dǎo)致與硅烷偶聯(lián)劑APTES脫水縮合的反應(yīng)基團(tuán)下降，P和Zr的含量也隨之下降，引起吸附效果的下降。

2.5.2 磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜的重復(fù)吸附

利用磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜吸附卵清蛋白不是本文研究的最終目的，還需通過(guò)對(duì)磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜進(jìn)行解吸附處理，從而將其所吸附的卵清蛋白釋放出來(lái)，這樣可以將釋放出的卵清蛋白另作他用，同時(shí)將磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜循環(huán)使用。磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜(TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%，磷酸化處理1 h)對(duì)卵清蛋白的重復(fù)吸附率的測(cè)試結(jié)果如表2所示。

表2 磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的重復(fù)吸附容量

試驗(yàn)中采用質(zhì)量濃度為2 g/L的卵清蛋白溶液(用pH值為5的緩沖溶液配置)進(jìn)行吸附，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的氨水溶液對(duì)雜化膜進(jìn)行解吸附處理，重復(fù)4次。由表2可知，隨著重復(fù)吸附次數(shù)的增加，磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附量和解吸附量均逐漸減少。這可能由于膜在每次使用的過(guò)程中均有一部分蛋白質(zhì)未被洗脫，從而造成了膜的污染。但是從整體上而言，試驗(yàn)中所制得的磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白具有良好的重復(fù)吸附和解吸附能力，可以循環(huán)使用。

3 結(jié) 語(yǔ)

本文成功地用APTES改性TEOS制備出氨基化的SiO2，并用原位合成法制備分散良好、性能優(yōu)異的PVDF/NH2-SiO2雜化膜，最后成功對(duì)膜進(jìn)行了磷酸化和螯合固定金屬鋯。研究結(jié)果表明，隨著TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附量先快速上升，然后升高到最大值，穩(wěn)定后再略微降低，當(dāng)TEOS質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%時(shí)，雜化膜對(duì)卵清蛋白的吸附量達(dá)到最大值，為150.7 mg/g。通過(guò)將磷酸化Zr+PVDF/NH2-SiO2雜化膜循環(huán)使用，表明該雜化膜具有良好的重復(fù)吸附和解吸附能力。