張曉冉,李欣悅,于 水,王詩雯,刁全平
(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)
在中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中,中藥配伍使用是其顯著特點(diǎn)之一,也是中藥發(fā)揮特殊療效的重要原因[1-2]。從現(xiàn)代藥物藥理角度分析,每味中藥均含有多種化學(xué)成分,多味中藥配伍使用時化學(xué)成分更多。在藥湯的熬制過程中,多種化學(xué)成分之間可能會發(fā)生多種目前尚不明確的化學(xué)變化或者物理變化,或有效成分在溶出時相互影響[3-5],不同化學(xué)成分的溶出量發(fā)生不同的變化。采用現(xiàn)代分析方法對中藥配伍使用前后不同化學(xué)成分溶出量的變化進(jìn)行研究,有利于中藥藥理的進(jìn)一步研究。
大黃是多種廖科大黃屬的多年生植物的根莖,大黃的主要活性成分為蒽醌類化合物,具有抗腫瘤、抗菌等效能,還具有利尿、利瀉、消炎等作用[6-7]。人參為多年生草本植物,能大補(bǔ)元?dú)?,益血生津,安神益智,為虛勞?nèi)傷第一要藥[8]。二藥配對,大黃瀉下通便以攻其邪,人參益氣生津以培其本,相反相成,攻補(bǔ)兼施,益氣活血,泄?jié)峤舛?。按照千金方對大黃和人參進(jìn)行配伍,HPLC法測定配伍前后化學(xué)成分的含量,為大黃與人參配伍用藥研究提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1525型高效液相色譜儀,配2996型二極管陣列檢測器(美國Waters公司),AL-204電子天平(梅特勒-托利多)。
甲醇(色譜純),磷酸為分析純,水為二次蒸餾水(自制),中藥大黃、人參購自北京同仁堂鞍山有限責(zé)任公司。
色譜柱為Kromasil C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流動相為A、B兩相混合梯度洗脫,A相為V(甲醇)∶V(0.5%磷酸水溶液)=1∶9,B相為乙腈,梯度洗脫程序:自0~10min,A相為91%,B相為9%;10~30min,A相由91%~80%,B相由9%~20%;30~50min,A相由80%~68%,B相由20%~32%;50~60min,A相由68%~55%,B相由32%~45%;60~70min,A相由55%~40%,B相由45%~60%;70~85min,A相由40%~ 10%,B相由60%~90%。流速1.0mL/min;檢測波長230nm;進(jìn)樣量為10μL。
樣品充分干燥后粉碎,過孔徑為0.425 mm篩,備用。
精密稱取大黃3.0 g、人參6.0 g,分別置于250 mL圓底燒瓶中,按照料液比1∶10加入蒸餾水,稱重。輕輕搖勻后加熱微沸,熱回流提取2 h,冷卻后稱重,補(bǔ)足水分,過濾,將兩份濾液混合得大黃與人參配伍前混合水煎液(A)。
精密稱取大黃3.0 g、人參6.0 g,混合后置于250 mL圓底燒瓶中,按照料液比1∶10加入蒸餾水,稱重。輕輕搖勻后加熱微沸,熱回流提取2 h,冷卻后稱重,補(bǔ)足水分,過濾得大黃與人參配伍后水煎液(B)。
將中藥水煎液A和B用HPLC法按照步驟1.2條件測定。
圖1 大黃與人參配伍前水煎液(A)色譜圖
圖2 大黃與人參配伍后水煎液(B)色譜圖
從色譜圖中選擇14個具有代表性的色譜峰,水煎液(A)中色譜峰的峰面積均定為1,水煎液(B)中色譜峰的峰面積大小如表1所示。
表1 大黃與人參配伍前后14種化學(xué)成分含量
由表1可見,大黃與人參配伍后14種化學(xué)成分中,11種化合物溶出量增加,3種化合物溶出量減少。由此可見,中藥配伍后化學(xué)成分的溶出量并非單位藥材各化學(xué)成分的溶出量的簡單加和,說明配伍中藥中各味中藥中的化學(xué)成分在熱水浸提過程中發(fā)生了某些化學(xué)作用或者物理作用,導(dǎo)致成分含量發(fā)生變化,甚至化學(xué)成分的種類也發(fā)生了變化,所以中藥配伍是一種較復(fù)雜的藥理體系,能夠使得配伍中藥相須、相使、相畏、相殺、相惡、相反。
中藥配伍使用在治療疾病中的過程中起到了至關(guān)重要作用,但其體系非常復(fù)雜,具體藥理機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。本文采用高效液相色譜法對大黃和人參配伍前后化學(xué)成分的變化進(jìn)行測定,為進(jìn)一步探明大黃與人參配伍后藥效及化學(xué)成分之間的關(guān)系提供一定的數(shù)據(jù)支持。